喉角化症中EGFR的表达及与恶变的关系
作者：王军 杨庆文 王植平
单位：王军(首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉-头颈外科 北京，100730)；杨庆文(首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉-头颈外科 北京，100730)；王植平(首都医科大学附属北京同仁医院病理科 北京，100730)
关键词：喉角化症；表皮生长因子受体；喉肿瘤；癌前状态
临床耳鼻咽喉科杂志000302 摘 要：目的：观察表皮生长因子受体(EGFR)在喉角化症中的表达，探讨喉角化症的转归和预后。方法：利用免疫组化ABC法检测32例喉角化症患者组织中EGFR的表达情况。结果：在轻、中、重度非典型增生中，EGFR表达分别为12.5%、22.5%和47.8%。重度非典型增生的EGFR表达与轻、中度非典型增生比较有显著性差异(P<0.05)。结论：EGFR在喉角化症的转归和预后方面是一个有价值的指标。
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Expression of EGFR in keratosis of laryngeal and
the correlation with malignant phenotype
WANG Jun YANG Qing-wen
(Department of Otolaryngology-Head and Neck Surgery,Beijing Tongren Hospital,Beijing 100730)
WANG Zhi-ping
(Department of Pathology,Beijing Tongren Hospital)
Abstract：Objective：To evaluate the roles of EGFR expression in laryngeal keratosis.Method：The ABC immunohistochemical method was performed to investigate the expression of EGFR in 32 cases of laryngeal keratosis tissue.Result：The EGFR indices in light、moderate and serious non-typical hyperplasis were 12.5%,22.5% and 47.8% respectively.There were significant differences between heavy with light and middle non-typical hyperplasis (P<0.05).Conclusion：The EGFR might play some role in the process of carcinogenesis of laryngeal keratosis,and be as an useful marker for the assessment of the behavior and prognosis in the laryngeal peremalignant lesions keratosis.
, 百拇医药
Key words：Laryngeal keratosis Epidermal growth factor receptor Laryngeal neoplasms Precancerous conditions▲
喉角化症又称喉白斑，是一种具有恶变趋势的喉部疾患，在病理学上主要表现为上皮非典型增生。研究表明：喉角化症的癌变率在3%～5%左右，本文试探讨表皮生长因子受体(EGFR)在喉角化症中的表达及其与癌变的关系，以期提高喉癌的早期诊断和治疗水平。
1 材料与方法
1.1 材料选择
收集我院病理科1993年5月～1996年10月的喉角化症标本32例。男27例，女5例；年龄38～76岁，平均57.4岁。在随访中，有2例先后发生了恶变。所有标本用10%甲醛固定后常规石蜡包埋，制成4 μm厚的切片用于常规HE染色和免疫组化(ABC)检测。
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1.2 检测方法
EGFR免疫组化染色法及结果判定：EGFR单克隆抗体为北京中山生物技术公司产品，用时按1∶200稀释。ABC试剂盒及二抗、三抗为VECTOR公司产品。标本切片经脱蜡脱水，常规ABC方法染色；DAB显色，甲基绿复染；树脂封片，光镜观察。用已知EGFR高表达喉癌切片作阳性对照；空白对照不加一抗，无阳性信号；阴性对照用已知无EGFR表达的声带息肉切片。结果判定：①每例随机观察10个高倍镜下视野，每个视野计数100个细胞中阳性细胞数(EGFR为胞浆及核膜有棕黄色颗粒)，取EGFR平均值分为4级：Ⅰ级：<5%；Ⅱ级：5%～33%；Ⅲ级：>33%～66%；Ⅳ级：>66%；②胞浆及核膜无棕黄色颗粒为“-”。
1.3 统计学方法
各组间行t检验及方差分析。
2 结果
, 百拇医药
喉角化症EGFR阳性表达率为31.25%(10/32)，其中Ⅰ、Ⅱ级表达6例，占60.0%，Ⅲ、Ⅳ级表达4例，占40.0%。轻、中、重度非典型增生EGFR阳性表达率分别为12.5%(1/8)、22.2%(2/9)、46.7(7/15)。EGFR阳性表达见图1～3。经统计学检验，重度非典型增生与轻、中度非典型增生差异有显著性(P<0.05)。
图1 示轻度非典型增生上皮，EGFR阳性表达
图2 示中度非典型增生上皮，EGFR阳性表达
图3 示重度非典型增生上皮，EGFR阳性表达
, 百拇医药
3 讨论
3.1 EGFR的表达
表皮生长因子(EGF)是分子量为6045 D，由53个氨基酸组成的多肽类生长因子，EGF通过EGFR起作用，刺激哺乳动物的上皮组织及细胞的生长、分化，EGFR的表达与肿瘤的生物学行为有密切关系，EGFR阳性表达率高，表示肿瘤细胞分化程度低，易转移，预后不良〔1〕。EGF广泛存在于机体的各种体液中，如血液、脑脊液、乳汁、唾液等，具有促进细胞分裂繁殖、伤口愈合等功能。在肿瘤的发生发展过程中，癌基因的激活和抑癌基因的失活起重要的作用。EGFR基因是癌基因的类型之一，对于EGFR的研究不仅有助于了解EGF作用时受体如何传递信号，更重要的是证明生长因子和癌基因是紧密联系在一起的。当EGF与EGFR相结合时，刺激哺乳动物的上皮组织及细胞的生长与分化。由于EGFR的跨膜区和细胞内蛋白区与V-erbB癌基因产物的结构相似，因此，可以认为EGFR与恶性肿瘤有密切关系〔2〕。研究表明，EGFR的过度表达在细胞的恶性转化和恶性增殖方面发挥重要的作用，可以通过EGFR的表达程度推测喉癌前病变的预后。
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3.2 喉角化症的恶变
本研究发现，在重度非典型增生中，EGFR的阳性细胞较多，染色重，表达率达47.8%，明显高于轻、中度非典型增生的病变，经统计学检验差异有显著性意义(P<0.05)。重度非典型增生在EGFR的表达和细胞染色上与癌变组织有明显的相似之处，预示病变组织已进入早期癌变阶段。有学者也提出一种假说，即喉癌的发生过程中存在一种机制，当EGFR过度表达时，EGF可能在癌变过程中发挥重要作用〔3〕。
3.3 喉癌前病变的处理原则
喉癌前病变是由多种临床表现不同而组织病理学形态和生物学特征类似的疾病组成的实体，癌变的发生是内源性和外源性多种致病因素共同参与的过程，例如机体免疫功能下降、病毒持续感染或周围环境中物理、化学性致癌因素的长期协同作用，使细胞分化调节失控，最终导致癌症发生。这个过程往往需要比较漫长的时间，因此，对喉癌前病变依病变程度建立完整的随访监测资料是十分必要的。同时，要在喉癌前病变的治疗中积极消除协同作用的致病因素，如避免各种慢性刺激及提高机体的免疫力等。利用EGFR检测病变，评估病变的程度和预后，对于有明显恶变趋势的病变如重度非典型增生应采取积极的治疗方案，阻断其向恶性发展。
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参考文献：
[1]Scambia G,Panici P B,Battaglia F,et al.Receptors for epidermal growth factor and steroid hormones in primary laryngeal tumers.Cancer,1991,67:1347～1351
[2]Wen Q H,Nishimura T,Miwa T,et al.Expression of EGF,EGFR and PCNA in laryngeal lesions.J Laryngol Otol,1995,109:630～636
[3]Chritensen M E,Therkildsen M H,Poulsen S S,et al.Transforming growth factor alpha and epidermal growth factor in laryngeal carcinomas demonstrated by immunohistochemistry.Acta Otolaryngol,1993,113:563～567
收稿日期：1999-06-16, http://www.100md.com
单位：王军(首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉-头颈外科 北京，100730)；杨庆文(首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉-头颈外科 北京，100730)；王植平(首都医科大学附属北京同仁医院病理科 北京，100730)
关键词：喉角化症；表皮生长因子受体；喉肿瘤；癌前状态
临床耳鼻咽喉科杂志000302 摘 要：目的：观察表皮生长因子受体(EGFR)在喉角化症中的表达，探讨喉角化症的转归和预后。方法：利用免疫组化ABC法检测32例喉角化症患者组织中EGFR的表达情况。结果：在轻、中、重度非典型增生中，EGFR表达分别为12.5%、22.5%和47.8%。重度非典型增生的EGFR表达与轻、中度非典型增生比较有显著性差异(P<0.05)。结论：EGFR在喉角化症的转归和预后方面是一个有价值的指标。
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Expression of EGFR in keratosis of laryngeal and
the correlation with malignant phenotype
WANG Jun YANG Qing-wen
(Department of Otolaryngology-Head and Neck Surgery,Beijing Tongren Hospital,Beijing 100730)
WANG Zhi-ping
(Department of Pathology,Beijing Tongren Hospital)
Abstract：Objective：To evaluate the roles of EGFR expression in laryngeal keratosis.Method：The ABC immunohistochemical method was performed to investigate the expression of EGFR in 32 cases of laryngeal keratosis tissue.Result：The EGFR indices in light、moderate and serious non-typical hyperplasis were 12.5%,22.5% and 47.8% respectively.There were significant differences between heavy with light and middle non-typical hyperplasis (P<0.05).Conclusion：The EGFR might play some role in the process of carcinogenesis of laryngeal keratosis,and be as an useful marker for the assessment of the behavior and prognosis in the laryngeal peremalignant lesions keratosis.
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Key words：Laryngeal keratosis Epidermal growth factor receptor Laryngeal neoplasms Precancerous conditions▲
喉角化症又称喉白斑，是一种具有恶变趋势的喉部疾患，在病理学上主要表现为上皮非典型增生。研究表明：喉角化症的癌变率在3%～5%左右，本文试探讨表皮生长因子受体(EGFR)在喉角化症中的表达及其与癌变的关系，以期提高喉癌的早期诊断和治疗水平。
1 材料与方法
1.1 材料选择
收集我院病理科1993年5月～1996年10月的喉角化症标本32例。男27例，女5例；年龄38～76岁，平均57.4岁。在随访中，有2例先后发生了恶变。所有标本用10%甲醛固定后常规石蜡包埋，制成4 μm厚的切片用于常规HE染色和免疫组化(ABC)检测。
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1.2 检测方法
EGFR免疫组化染色法及结果判定：EGFR单克隆抗体为北京中山生物技术公司产品，用时按1∶200稀释。ABC试剂盒及二抗、三抗为VECTOR公司产品。标本切片经脱蜡脱水，常规ABC方法染色；DAB显色，甲基绿复染；树脂封片，光镜观察。用已知EGFR高表达喉癌切片作阳性对照；空白对照不加一抗，无阳性信号；阴性对照用已知无EGFR表达的声带息肉切片。结果判定：①每例随机观察10个高倍镜下视野，每个视野计数100个细胞中阳性细胞数(EGFR为胞浆及核膜有棕黄色颗粒)，取EGFR平均值分为4级：Ⅰ级：<5%；Ⅱ级：5%～33%；Ⅲ级：>33%～66%；Ⅳ级：>66%；②胞浆及核膜无棕黄色颗粒为“-”。
1.3 统计学方法
各组间行t检验及方差分析。
2 结果
, 百拇医药
喉角化症EGFR阳性表达率为31.25%(10/32)，其中Ⅰ、Ⅱ级表达6例，占60.0%，Ⅲ、Ⅳ级表达4例，占40.0%。轻、中、重度非典型增生EGFR阳性表达率分别为12.5%(1/8)、22.2%(2/9)、46.7(7/15)。EGFR阳性表达见图1～3。经统计学检验，重度非典型增生与轻、中度非典型增生差异有显著性(P<0.05)。
图1 示轻度非典型增生上皮，EGFR阳性表达
图2 示中度非典型增生上皮，EGFR阳性表达
图3 示重度非典型增生上皮，EGFR阳性表达
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3 讨论
3.1 EGFR的表达
表皮生长因子(EGF)是分子量为6045 D，由53个氨基酸组成的多肽类生长因子，EGF通过EGFR起作用，刺激哺乳动物的上皮组织及细胞的生长、分化，EGFR的表达与肿瘤的生物学行为有密切关系，EGFR阳性表达率高，表示肿瘤细胞分化程度低，易转移，预后不良〔1〕。EGF广泛存在于机体的各种体液中，如血液、脑脊液、乳汁、唾液等，具有促进细胞分裂繁殖、伤口愈合等功能。在肿瘤的发生发展过程中，癌基因的激活和抑癌基因的失活起重要的作用。EGFR基因是癌基因的类型之一，对于EGFR的研究不仅有助于了解EGF作用时受体如何传递信号，更重要的是证明生长因子和癌基因是紧密联系在一起的。当EGF与EGFR相结合时，刺激哺乳动物的上皮组织及细胞的生长与分化。由于EGFR的跨膜区和细胞内蛋白区与V-erbB癌基因产物的结构相似，因此，可以认为EGFR与恶性肿瘤有密切关系〔2〕。研究表明，EGFR的过度表达在细胞的恶性转化和恶性增殖方面发挥重要的作用，可以通过EGFR的表达程度推测喉癌前病变的预后。
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3.2 喉角化症的恶变
本研究发现，在重度非典型增生中，EGFR的阳性细胞较多，染色重，表达率达47.8%，明显高于轻、中度非典型增生的病变，经统计学检验差异有显著性意义(P<0.05)。重度非典型增生在EGFR的表达和细胞染色上与癌变组织有明显的相似之处，预示病变组织已进入早期癌变阶段。有学者也提出一种假说，即喉癌的发生过程中存在一种机制，当EGFR过度表达时，EGF可能在癌变过程中发挥重要作用〔3〕。
3.3 喉癌前病变的处理原则
喉癌前病变是由多种临床表现不同而组织病理学形态和生物学特征类似的疾病组成的实体，癌变的发生是内源性和外源性多种致病因素共同参与的过程，例如机体免疫功能下降、病毒持续感染或周围环境中物理、化学性致癌因素的长期协同作用，使细胞分化调节失控，最终导致癌症发生。这个过程往往需要比较漫长的时间，因此，对喉癌前病变依病变程度建立完整的随访监测资料是十分必要的。同时，要在喉癌前病变的治疗中积极消除协同作用的致病因素，如避免各种慢性刺激及提高机体的免疫力等。利用EGFR检测病变，评估病变的程度和预后，对于有明显恶变趋势的病变如重度非典型增生应采取积极的治疗方案，阻断其向恶性发展。
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参考文献：
[1]Scambia G,Panici P B,Battaglia F,et al.Receptors for epidermal growth factor and steroid hormones in primary laryngeal tumers.Cancer,1991,67:1347～1351
[2]Wen Q H,Nishimura T,Miwa T,et al.Expression of EGF,EGFR and PCNA in laryngeal lesions.J Laryngol Otol,1995,109:630～636
[3]Chritensen M E,Therkildsen M H,Poulsen S S,et al.Transforming growth factor alpha and epidermal growth factor in laryngeal carcinomas demonstrated by immunohistochemistry.Acta Otolaryngol,1993,113:563～567
收稿日期：1999-06-16, http://www.100md.com