P16蛋白和PCNA在肝细胞性肝癌中的表达及意义
作者：卢昕 熊永炎 刘志苏
单位：卢昕(湖北省大冶有色金属公司职工医院，黄石 437500)；熊永炎(湖北医科大学附属第二医院病理科，武汉 430060)；刘志苏(湖北医科大学附属第二医院外科，武汉 430071)
关键词：肝细胞性肝癌；P16蛋白；PCNA；表达；免疫组织化学
咸宁医学院学报000209 摘 要 目的：探讨肝细胞性肝癌(HCC)中抑癌基因P16蛋白及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达、相关性及其与肿瘤临床病理的关系。方法：采用免疫组化SP法检测45例HCC及癌旁肝组织中P16蛋白及PCNA。结果：①P16蛋白及PCNA在HCC中的阳性表达率分别明显低于、高于癌旁肝组织(P<0.05)。②高分化、中分化HCC中P16蛋白的阳性表达率明显高于低分化HCC(P<0.05)；高分化HCC中PCNA的阳性表达率明显低于中分化及低分化HCC(P<0.05)。③P16蛋白与PCNA在未转移组HCC中的阳性表达率分别明显高于、低于转移组HCC(P<0.05)。④临床Ⅰ期与Ⅲ期HCC比较，P16蛋白的阳性表达率及PCNA的阳性表达率均有显著性差异(P<0.01)。⑤P16蛋白及PCNA在HCC中的表达与肿瘤直径无关。⑥HCC中P16蛋白与PCNA的表达间存在明显负相关关系(r=-0.57,P<0.05)。结论：P16基因及PCNA的表达与HCC的增殖、分化、转移状态及临床分期有关，且存在明显负相关关系，其表达状况可以作为判断HCC 恶性程度及预后的有用指标。
, http://www.100md.com
中图分类号 R735.7 文献标识码 A
文章编号 1008-0635(2000)02-0103-04
Expressions and Significances of P16 Protein and Proliferationg
Cell Nuclear Antigen in Hepatocellular Carcinoma
LU Xin
(Worker′s Hospital of Daye Colored Metal Company,Hubei 435000)
XIONG Yongyan
, http://www.100md.com
(The 1st Affiliated Hospital of Hubei Medical University,Wuhan 430060)
LIU Zhishu
(The 2nd Affiliated Hospital of Hubei Medical University,Wuhan 430071)
ABSTRACT Objective To investigate the expression，relativity and their clinicopathological significance of P16 protein and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in hepatocellular carcinoma(HCC).Methods P16protein and PCNA in HCC and their neighboring regions from 45 patients were studied by using immunohistochemical S-P method.Results The positive expression of P16 protein and PCNA in HCC was significantly lower or higher than in their neighboring regions.P16 protein expression in well and moderately differetiated HCC was more obvious than in poorly differentiated one (P<0.05),while PCNA expression in highly differentiated HCC was obviously lower than in moderately and poorly differentiated HCC.The positive rate of P16 protein and PCNA in the carcinoma with metastasis was obviously higher or lower than that in the samples without metastasis.About the positive rate of P16 protein and PCNA,there was a statistically significant difference (P<0.05) between the cases in clinical stage Ⅰ and Ⅲ.There was no relationship between the size of tumor and the expression of P16 gene and PCNA.In the cases of HCC investigated，there was obvious negative correlation between the expression of P16 protein and PCNA (r=0.57,P<0.05).Conclusions The expressions of P16 protein and PCNA are closely relating to the proliferation,differenation,metastasis and clinical stage of HCC and there is an obvious negative correlation between the two indexes.Their expression′s states can be regarded as an useful index determining the malignancy degree and prognosis of HCC.
, http://www.100md.com
KEY WORDS Hepatocellular Carcinoma；P16protein；PCNA；Expression；Immunohistochemistry
肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界性常见恶性肿瘤，探讨HCC发生发展的机制并寻找有效的早期诊断及早期治疗方法十分重要。近年来，人们发现癌基因(如ras、C-myc、C-fos等)的激活与抑癌基因(如P53及Rb等)的失活参与了HCC的发生发展[1]。P16基因是一种参与细胞周期调控的抑癌基因,该基因在多种原发性肿瘤和细胞系中均发生变异。增殖细胞核抗原(PCNA)是细胞周期G/S期合成的细胞核蛋白，与细胞增殖活性有关。研究发现，PCNA在HCC中的表达有病理和临床意义。本文采用免疫组化方法对45例HCC及其癌旁肝组织中P16基因及PCNA的表达进行观察，借以探讨它们在HCC发生过程中的可能作用。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1材料
45例标本为湖北医科大学附属第二医院病理科1995～1998 年间存档病例，均为手术切除并经病理诊断为HCC，按中国常见恶性肿瘤诊治规范的组织学诊断标准[2]。每例均含有癌旁肝组织。其中男性38例，女性7例，年龄24～68岁，平均47.5岁。其中高分化11例，中分化20例，低分化14例。45例中已转移者25例，未转移者20例。肿瘤直径<5cm 20例，5～10cm 16例，>10cm 9例。按UICC的TNM分期标准，Ⅰ期17例，Ⅱ期13 例，Ⅲ期15例。标本均经10%中性福尔马林溶液固定，常规取材，石蜡包埋，连续切片3张(5μm)，分别做HE染色及P16和PCNA免疫组化染色。
1.2 主要试剂
鼠抗人P16基因单克隆抗体、鼠抗人PCNA单克隆抗体及S-P超敏试剂盒均购自福州迈新生物技术开发公司。
, http://www.100md.com
1.3 方法
采用链霉菌抗生物素蛋白—过氧化物酶法(SP法)。按操作书说明进行操作，光镜下观察。以PBS代替-抗作阴性对照， 用已知阳性切片作阳性对照。
1.4 结果判断
采用半定量法，胞浆和/或胞核呈棕黄色者为染色阳性。根据阳性细胞所占百分率分为四个等级:“+”低表达，阳性细胞占11%～25%。“”中等表达，阳性细胞占26%～50%，“+++”高表达，阳性细胞数>50%，“-”无阳性反应或阳性细胞数<10%。
1.5 数据处理
采用χ2检验。
2 结 果
2.1P16蛋白和PCNA在HCC及癌旁肝组织中的表达见表1
, http://www.100md.com
2.2 P16蛋白和PCNA表达与HCC分化的关系见表2
2.3 P16蛋白和PCNA表达与HCC转移的关系见表3
2.4 P16蛋白和PCNA表达与HCC临床分期的关系见表4
2.5 肿瘤直径与P16蛋白及PCNA表达的关系见表5
表1 P16蛋白和PCNA在HCC及癌旁组织中的表达比较
例数
P16阳性表达
%
, 百拇医药
PCNA阳性表达
%
+
++
+++
合计
+
++
+++
合计
HCC
45
3
8
, 百拇医药
7
18
40.00
5
12
12
29
64.44
癌旁组织
45
6
9
23
38
, http://www.100md.com
84.44*
4
2
7
13
28.89*
与HCC组比较*P<0.05表2 P16蛋白和PNCA在不同分化程度HCC中的表达 HCC
例数
P16阳性表达
%
PCNA阳性表达
, 百拇医药
%
+
++
+++
合计
+
++
+++
合计
高分化
11
2
3
2
, http://www.100md.com
7
63.64*
2
1
1
4
36.36*
中分化
20
2
4
3
9
, 百拇医药
45.00*
4
3
6
13
65.00*
低分化
14
1
1
0
2
14.29
, http://www.100md.com
2
5
5
12
85.71
与低分化组比较*P<0.05表3 P16蛋白和PNCA在不同转移状态HCC中的表达 HCC
例数
P16阳性表达
%
PCNA阳性表达
%
+
, 百拇医药
++
+++
合计
+
++
+++
合计
未转移组
20
1
6
6
13
65.00
, http://www.100md.com
2
4
2
8
40.00
转移组
25
2
2
1
5
20.00**
8
, http://www.100md.com
4
9
21
84.00**
与未转移组比较**P<0.01表4 不同临床分期HCC中P16蛋白和PNCA的表达 HCC
例数
P16阳性表达
%
PCNA阳性表达
%
+
++
, http://www.100md.com
+++
合计
+
++
+++
合计
Ⅰ期
17
2
4
4
10
58.82
2
, 百拇医药
3
2
7
41.18
Ⅱ期
13
1
2
2
5
38.46
4
3
3
, 百拇医药
10
76.92
Ⅲ期
15
1
2
0
3
20.00*
3
7
2
12
, 百拇医药
80.00*
与Ⅰ期比较*P<0.05表5 P16蛋白和PNCA在不同大小HCC中的表达 HCC
例数
P16阳性表达
%
PCNA阳性表达
%
+
++
+++
合计
, 百拇医药 +
++
+++
合计
<5cm
20
4
2
3
9
45.00
4
3
3
, http://www.100md.com
10
50.00
5～10cm
16
2
2
2
6
37.50
4
4
3
11
68.75
, 百拇医药
>10cm
9
1
2
1
4
44.44
2
3
0
5
55.56
2.6 HCC中P16蛋白及PCNA表达间的相互关系
, 百拇医药
P16蛋白表达阳性18例中，PCNA有8例表达阳性(44.44%)；而P16蛋白表达阴性的27例中，PCNA有21例表达阳性(77.78%)。P16和PCNA的表达间存在负相关关系(r＝-0.57，P<0.05)。
3 讨 论
3.1P16基因的表达与HCC
P16基因位于人类9号染色体短臂的2区1带，全长8.5kb，由3个外显子和2个内含子组成。P16蛋白通过抑制细胞周期中CyclinD/CDK4活性参与并调节细胞从G0期进入G1期，因此P16基因是一个参与细胞周期调控的抑癌基因。P16蛋白与CDK4结合时，可阻止细胞从G1期进入S期，从而影响细胞周期的进程[3]。研究证实，P16基因突变或缺失存在于多种肿瘤组织和细胞系中。1996年，Hui等[4]曾对32例原发HCC和6个HCC细胞系中P16基因的进行观察，发现50%HCC细胞系及34%原发性HCC中P16蛋白缺如，但癌旁肝组织中表达P16蛋白。但Biden等[5]的研究结果则相反，他们检测23例原发HCC和4个HCC细胞系，结果均未发现P16基因的畸变。本研究结果显示：P16基因的表达在肝癌组织和癌旁肝组织中的阳性率存在显著差异，表明P16基因的失活可能参与了HCC的发生过程。另外，HCC分化越低，甚至出现转移，其P16蛋白的表达愈低，表明P16基因的表达还与肿瘤的进展有关。Ito等[6]研究发现，临床Ⅰ期或Ⅱ期肿瘤组织中P16蛋白的表达显著高于Ⅲ期或Ⅳ期。国内孙丽萍等的研究亦有似类结果。本研究结果提示，P16蛋白的阳性表达率随组织学分级、临床分期的升高而降低，而且在转移组中的表达明显低于非转移组，说明P16蛋白的表达状态与HCC的分化、临床分期和转移状态有关，可作为判定HCC的生物学行为及预后的标志。
, http://www.100md.com
3.2 PCNA的表达与HCC
PCNA的表达可反映细胞的增殖活性。Suehiro等[7]研究发现，PCNA的表达与HCC分化、体积、门脉侵袭和复发有关。国内王东等的研究结果表明，PCNA LI与肝癌大小、组织学分级、核分裂数和转移密切相关，提示PCNA可能是反映癌侵袭能力的一项重要指标，对肝癌转移和预后的判断具有重要意义。本研究结果说明，PCNA不仅可反映肝癌细胞的增殖活性，还与肝癌的组织学、临床分期及预后密切相关，不失为判断肿瘤恶性和生物学行为及预后的一个良好的指标。
3.3 P16蛋白和PCNA在HCC中的表达关系
Sagusa等[8]对40例HCC中P53基因进行研究，并与PCNA活性进行比较后发现，P53基因及PCNA在HCC中的表达均随肿瘤恶性程度的增加而增加，二者存在正相关关系，这提示P53基因突变及PCNA活性增加可能是HCC获得更强侵袭性的重要机制之一。国内李锦波等亦有类似报道。我们的研究结果显示，P16和PCNA 二者在肝癌组织中的表达呈明显负相关关系，即P16基因的低表达和PCNA 的高表达存在一定关系。我们认为，P16基因功能的丧失，PCNA活性的增强，也可能是HCC细胞获得更强侵袭性的另一重要机制。
, 百拇医药
参考文献
1,Tabor E,Allen SY,Nguyen DT,et al.Tumor suppressor genes,growth factors and oncogenes in hepatitis B virus-assosiated hepatocellular carcinoma.Hepatology,1997；25(3):593
2，中华人共和国医政司编.中国常见恶性肿瘤诊治规范(原发性肝癌).第2分册.北京:人民卫生出版社,1993:14～20
3，Marx J.New tumor suppressor may rival P53.Science,1994；264(3):344
4，Hui AM,Sakamoto M,Kanai Y,et al.Inactination of P16 in Hepatocellular carcinoma.Hepatology,1996；24(3):875
, 百拇医药
5，Biden K,Young J,Buttenshaw R,et al.Frequency of mutationand deletion of the tumor suppresser gene CDKN2A in hepatecellular carcinoma from an Australian population.Hepatology,1997;25(7):893
6，Ito Yasuhiro,Ariaki M,Masato S,et al.Expressionand prognostic roles of the G1-S modulators in hepatocellular carcinoma:P27 in dependantly predicts the recurrence.Hepatology,1997；25(1):90
7，Suehiro T,Matsumata T.Clinicopathologic features andprognosis of lesected hepatocellar carcinoma of varied sizeswith special reference to proliferating cell nuclear antigen.Hepatology,1995;23(2):112
8，Sagusa,Keizo D,Morito M,et al.Proliferating cellnuclear antigen and P53、c-myc gene in HCC.Gastroenteral Hepatol,1996；11(7):752
收稿2000-03-22
, http://www.100md.com
单位：卢昕(湖北省大冶有色金属公司职工医院，黄石 437500)；熊永炎(湖北医科大学附属第二医院病理科，武汉 430060)；刘志苏(湖北医科大学附属第二医院外科，武汉 430071)
关键词：肝细胞性肝癌；P16蛋白；PCNA；表达；免疫组织化学
咸宁医学院学报000209 摘 要 目的：探讨肝细胞性肝癌(HCC)中抑癌基因P16蛋白及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达、相关性及其与肿瘤临床病理的关系。方法：采用免疫组化SP法检测45例HCC及癌旁肝组织中P16蛋白及PCNA。结果：①P16蛋白及PCNA在HCC中的阳性表达率分别明显低于、高于癌旁肝组织(P<0.05)。②高分化、中分化HCC中P16蛋白的阳性表达率明显高于低分化HCC(P<0.05)；高分化HCC中PCNA的阳性表达率明显低于中分化及低分化HCC(P<0.05)。③P16蛋白与PCNA在未转移组HCC中的阳性表达率分别明显高于、低于转移组HCC(P<0.05)。④临床Ⅰ期与Ⅲ期HCC比较，P16蛋白的阳性表达率及PCNA的阳性表达率均有显著性差异(P<0.01)。⑤P16蛋白及PCNA在HCC中的表达与肿瘤直径无关。⑥HCC中P16蛋白与PCNA的表达间存在明显负相关关系(r=-0.57,P<0.05)。结论：P16基因及PCNA的表达与HCC的增殖、分化、转移状态及临床分期有关，且存在明显负相关关系，其表达状况可以作为判断HCC 恶性程度及预后的有用指标。
, http://www.100md.com
中图分类号 R735.7 文献标识码 A
文章编号 1008-0635(2000)02-0103-04
Expressions and Significances of P16 Protein and Proliferationg
Cell Nuclear Antigen in Hepatocellular Carcinoma
LU Xin
(Worker′s Hospital of Daye Colored Metal Company,Hubei 435000)
XIONG Yongyan
, http://www.100md.com
(The 1st Affiliated Hospital of Hubei Medical University,Wuhan 430060)
LIU Zhishu
(The 2nd Affiliated Hospital of Hubei Medical University,Wuhan 430071)
ABSTRACT Objective To investigate the expression，relativity and their clinicopathological significance of P16 protein and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in hepatocellular carcinoma(HCC).Methods P16protein and PCNA in HCC and their neighboring regions from 45 patients were studied by using immunohistochemical S-P method.Results The positive expression of P16 protein and PCNA in HCC was significantly lower or higher than in their neighboring regions.P16 protein expression in well and moderately differetiated HCC was more obvious than in poorly differentiated one (P<0.05),while PCNA expression in highly differentiated HCC was obviously lower than in moderately and poorly differentiated HCC.The positive rate of P16 protein and PCNA in the carcinoma with metastasis was obviously higher or lower than that in the samples without metastasis.About the positive rate of P16 protein and PCNA,there was a statistically significant difference (P<0.05) between the cases in clinical stage Ⅰ and Ⅲ.There was no relationship between the size of tumor and the expression of P16 gene and PCNA.In the cases of HCC investigated，there was obvious negative correlation between the expression of P16 protein and PCNA (r=0.57,P<0.05).Conclusions The expressions of P16 protein and PCNA are closely relating to the proliferation,differenation,metastasis and clinical stage of HCC and there is an obvious negative correlation between the two indexes.Their expression′s states can be regarded as an useful index determining the malignancy degree and prognosis of HCC.
, http://www.100md.com
KEY WORDS Hepatocellular Carcinoma；P16protein；PCNA；Expression；Immunohistochemistry
肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界性常见恶性肿瘤，探讨HCC发生发展的机制并寻找有效的早期诊断及早期治疗方法十分重要。近年来，人们发现癌基因(如ras、C-myc、C-fos等)的激活与抑癌基因(如P53及Rb等)的失活参与了HCC的发生发展[1]。P16基因是一种参与细胞周期调控的抑癌基因,该基因在多种原发性肿瘤和细胞系中均发生变异。增殖细胞核抗原(PCNA)是细胞周期G/S期合成的细胞核蛋白，与细胞增殖活性有关。研究发现，PCNA在HCC中的表达有病理和临床意义。本文采用免疫组化方法对45例HCC及其癌旁肝组织中P16基因及PCNA的表达进行观察，借以探讨它们在HCC发生过程中的可能作用。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1材料
45例标本为湖北医科大学附属第二医院病理科1995～1998 年间存档病例，均为手术切除并经病理诊断为HCC，按中国常见恶性肿瘤诊治规范的组织学诊断标准[2]。每例均含有癌旁肝组织。其中男性38例，女性7例，年龄24～68岁，平均47.5岁。其中高分化11例，中分化20例，低分化14例。45例中已转移者25例，未转移者20例。肿瘤直径<5cm 20例，5～10cm 16例，>10cm 9例。按UICC的TNM分期标准，Ⅰ期17例，Ⅱ期13 例，Ⅲ期15例。标本均经10%中性福尔马林溶液固定，常规取材，石蜡包埋，连续切片3张(5μm)，分别做HE染色及P16和PCNA免疫组化染色。
1.2 主要试剂
鼠抗人P16基因单克隆抗体、鼠抗人PCNA单克隆抗体及S-P超敏试剂盒均购自福州迈新生物技术开发公司。
, http://www.100md.com
1.3 方法
采用链霉菌抗生物素蛋白—过氧化物酶法(SP法)。按操作书说明进行操作，光镜下观察。以PBS代替-抗作阴性对照， 用已知阳性切片作阳性对照。
1.4 结果判断
采用半定量法，胞浆和/或胞核呈棕黄色者为染色阳性。根据阳性细胞所占百分率分为四个等级:“+”低表达，阳性细胞占11%～25%。“”中等表达，阳性细胞占26%～50%，“+++”高表达，阳性细胞数>50%，“-”无阳性反应或阳性细胞数<10%。
1.5 数据处理
采用χ2检验。
2 结 果
2.1P16蛋白和PCNA在HCC及癌旁肝组织中的表达见表1
, http://www.100md.com
2.2 P16蛋白和PCNA表达与HCC分化的关系见表2
2.3 P16蛋白和PCNA表达与HCC转移的关系见表3
2.4 P16蛋白和PCNA表达与HCC临床分期的关系见表4
2.5 肿瘤直径与P16蛋白及PCNA表达的关系见表5
表1 P16蛋白和PCNA在HCC及癌旁组织中的表达比较
例数
P16阳性表达
%
, 百拇医药
PCNA阳性表达
%
+
++
+++
合计
+
++
+++
合计
HCC
45
3
8
, 百拇医药
7
18
40.00
5
12
12
29
64.44
癌旁组织
45
6
9
23
38
, http://www.100md.com
84.44*
4
2
7
13
28.89*
与HCC组比较*P<0.05表2 P16蛋白和PNCA在不同分化程度HCC中的表达 HCC
例数
P16阳性表达
%
PCNA阳性表达
, 百拇医药
%
+
++
+++
合计
+
++
+++
合计
高分化
11
2
3
2
, http://www.100md.com
7
63.64*
2
1
1
4
36.36*
中分化
20
2
4
3
9
, 百拇医药
45.00*
4
3
6
13
65.00*
低分化
14
1
1
0
2
14.29
, http://www.100md.com
2
5
5
12
85.71
与低分化组比较*P<0.05表3 P16蛋白和PNCA在不同转移状态HCC中的表达 HCC
例数
P16阳性表达
%
PCNA阳性表达
%
+
, 百拇医药
++
+++
合计
+
++
+++
合计
未转移组
20
1
6
6
13
65.00
, http://www.100md.com
2
4
2
8
40.00
转移组
25
2
2
1
5
20.00**
8
, http://www.100md.com
4
9
21
84.00**
与未转移组比较**P<0.01表4 不同临床分期HCC中P16蛋白和PNCA的表达 HCC
例数
P16阳性表达
%
PCNA阳性表达
%
+
++
, http://www.100md.com
+++
合计
+
++
+++
合计
Ⅰ期
17
2
4
4
10
58.82
2
, 百拇医药
3
2
7
41.18
Ⅱ期
13
1
2
2
5
38.46
4
3
3
, 百拇医药
10
76.92
Ⅲ期
15
1
2
0
3
20.00*
3
7
2
12
, 百拇医药
80.00*
与Ⅰ期比较*P<0.05表5 P16蛋白和PNCA在不同大小HCC中的表达 HCC
例数
P16阳性表达
%
PCNA阳性表达
%
+
++
+++
合计
, 百拇医药 +
++
+++
合计
<5cm
20
4
2
3
9
45.00
4
3
3
, http://www.100md.com
10
50.00
5～10cm
16
2
2
2
6
37.50
4
4
3
11
68.75
, 百拇医药
>10cm
9
1
2
1
4
44.44
2
3
0
5
55.56
2.6 HCC中P16蛋白及PCNA表达间的相互关系
, 百拇医药
P16蛋白表达阳性18例中，PCNA有8例表达阳性(44.44%)；而P16蛋白表达阴性的27例中，PCNA有21例表达阳性(77.78%)。P16和PCNA的表达间存在负相关关系(r＝-0.57，P<0.05)。
3 讨 论
3.1P16基因的表达与HCC
P16基因位于人类9号染色体短臂的2区1带，全长8.5kb，由3个外显子和2个内含子组成。P16蛋白通过抑制细胞周期中CyclinD/CDK4活性参与并调节细胞从G0期进入G1期，因此P16基因是一个参与细胞周期调控的抑癌基因。P16蛋白与CDK4结合时，可阻止细胞从G1期进入S期，从而影响细胞周期的进程[3]。研究证实，P16基因突变或缺失存在于多种肿瘤组织和细胞系中。1996年，Hui等[4]曾对32例原发HCC和6个HCC细胞系中P16基因的进行观察，发现50%HCC细胞系及34%原发性HCC中P16蛋白缺如，但癌旁肝组织中表达P16蛋白。但Biden等[5]的研究结果则相反，他们检测23例原发HCC和4个HCC细胞系，结果均未发现P16基因的畸变。本研究结果显示：P16基因的表达在肝癌组织和癌旁肝组织中的阳性率存在显著差异，表明P16基因的失活可能参与了HCC的发生过程。另外，HCC分化越低，甚至出现转移，其P16蛋白的表达愈低，表明P16基因的表达还与肿瘤的进展有关。Ito等[6]研究发现，临床Ⅰ期或Ⅱ期肿瘤组织中P16蛋白的表达显著高于Ⅲ期或Ⅳ期。国内孙丽萍等的研究亦有似类结果。本研究结果提示，P16蛋白的阳性表达率随组织学分级、临床分期的升高而降低，而且在转移组中的表达明显低于非转移组，说明P16蛋白的表达状态与HCC的分化、临床分期和转移状态有关，可作为判定HCC的生物学行为及预后的标志。
, http://www.100md.com
3.2 PCNA的表达与HCC
PCNA的表达可反映细胞的增殖活性。Suehiro等[7]研究发现，PCNA的表达与HCC分化、体积、门脉侵袭和复发有关。国内王东等的研究结果表明，PCNA LI与肝癌大小、组织学分级、核分裂数和转移密切相关，提示PCNA可能是反映癌侵袭能力的一项重要指标，对肝癌转移和预后的判断具有重要意义。本研究结果说明，PCNA不仅可反映肝癌细胞的增殖活性，还与肝癌的组织学、临床分期及预后密切相关，不失为判断肿瘤恶性和生物学行为及预后的一个良好的指标。
3.3 P16蛋白和PCNA在HCC中的表达关系
Sagusa等[8]对40例HCC中P53基因进行研究，并与PCNA活性进行比较后发现，P53基因及PCNA在HCC中的表达均随肿瘤恶性程度的增加而增加，二者存在正相关关系，这提示P53基因突变及PCNA活性增加可能是HCC获得更强侵袭性的重要机制之一。国内李锦波等亦有类似报道。我们的研究结果显示，P16和PCNA 二者在肝癌组织中的表达呈明显负相关关系，即P16基因的低表达和PCNA 的高表达存在一定关系。我们认为，P16基因功能的丧失，PCNA活性的增强，也可能是HCC细胞获得更强侵袭性的另一重要机制。
, 百拇医药
参考文献
1,Tabor E,Allen SY,Nguyen DT,et al.Tumor suppressor genes,growth factors and oncogenes in hepatitis B virus-assosiated hepatocellular carcinoma.Hepatology,1997；25(3):593
2，中华人共和国医政司编.中国常见恶性肿瘤诊治规范(原发性肝癌).第2分册.北京:人民卫生出版社,1993:14～20
3，Marx J.New tumor suppressor may rival P53.Science,1994；264(3):344
4，Hui AM,Sakamoto M,Kanai Y,et al.Inactination of P16 in Hepatocellular carcinoma.Hepatology,1996；24(3):875
, 百拇医药
5，Biden K,Young J,Buttenshaw R,et al.Frequency of mutationand deletion of the tumor suppresser gene CDKN2A in hepatecellular carcinoma from an Australian population.Hepatology,1997;25(7):893
6，Ito Yasuhiro,Ariaki M,Masato S,et al.Expressionand prognostic roles of the G1-S modulators in hepatocellular carcinoma:P27 in dependantly predicts the recurrence.Hepatology,1997；25(1):90
7，Suehiro T,Matsumata T.Clinicopathologic features andprognosis of lesected hepatocellar carcinoma of varied sizeswith special reference to proliferating cell nuclear antigen.Hepatology,1995;23(2):112
8，Sagusa,Keizo D,Morito M,et al.Proliferating cellnuclear antigen and P53、c-myc gene in HCC.Gastroenteral Hepatol,1996；11(7):752
收稿2000-03-22
, http://www.100md.com