用HPLC法测定皮尔复溶液中尿囊素与甲硝唑含量
作者：郝丽晓 窦爱兰 钟化人
单位：郝丽晓(山西省药品检验所仪器室 太原 030001)；窦爱兰(山西省药品检验所仪器室 太原 030001)；钟化人(山西省药品检验所仪器室 太原 030001)
关键词：尿囊素；甲硝唑；甲地海因；色谱法，高压液相
山西医科大学学报000119 摘要： 采用反相高效液相色谱法测定皮尔复溶液中尿囊素与甲硝唑的含量，以磷酸二氢钾(0.005 mol/L)-甲醇(75∶25)为流动相，检测波长217 nm，二者在2.0～8.0 μg的浓度范围内，线性关系良好，相关系数(r)分别为0.999 8，0.999 9(n＝6)，平均回收率分别为99.61%(Rs=0.46%，n＝6)；99.96%(Rs=0.29%，n＝6)。
中图分类号： R927.11 文献标识码： A
, 百拇医药
文章编号： 1007-6611(2000)01-0041-02
本品是由多种成分组成的灭菌水溶液，其中成分尿囊素有促进组织细胞生长，溃疡及伤口愈合作用，甲硝唑为抗菌药物，地塞米松磷酸钠为抗炎药物。由于稳定性原因，分为分液(为尿囊素、甲硝唑等的灭菌水溶液)与B液(为地塞米松磷酸钠灭菌水溶液)，用前混合。对A液中主成份尿囊素与甲硝唑的含量测定，文献报道有容量法[1]，与紫外分光光度法[2]等，本文采用高效液相色谱法对其进行了方法考察。
1 仪器与试剂
岛津LC-4A高效液相色谱仪，SPD-2AS紫外检测器，CR-3A数据处理机；磷酸二氢钾(分析纯，北京化工厂)；甲醇(优级纯，北京化工厂)；对照品尿囊素、甲硝唑(皮尔复研究所提供)，皮尔复溶液(皮尔复研究所提供)。
2 色谱条件
, 百拇医药
色谱柱为天津Irregulea-H C18柱，(10 μm,4.6 mm×250 mm)；流动相为0.005 mol/L磷酸二氢钾-甲醇(75∶25)，流速为0.8 ml/min，检测波长 217 nm，AuFs=0.04，ATTEN=2，纸速 2 mm/min，室温 25 ℃操作。
3 实验方法
3.1 对照品溶液的制备，取经105 ℃ 干燥 2 h 的对照品尿囊素与甲硝唑各约 0.1 g，分别精密称定，置同一个 50 ml量瓶中，加水适量，超声5 min使溶解，再加水至刻度，摇匀。精密量取 10 ml置 100 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。
3.2 供试品溶液的制备 精密量取皮尔复溶液10 ml，置100 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。
4 实验条件考察
, http://www.100md.com
4.1 线性关系考察 取尿囊素与甲硝唑对照品配制成不同浓度的溶液，分别进样20 μl，测得峰面积，再将进样量(μg)与峰面积 A 计算回归方程分别为：A尿囊素＝1 235+1 7651 C (r=0.999 8，n＝6)
A甲硝唑＝1 317+35 774 C (r＝0.999 9，n＝6)
说明尿囊素与甲硝进样量为2.0～8.0 μg时，均线性良好。
4.2 稳定性考察 精密量取对照品溶液 20 μl，分别在0，0.5，1.0，2.0，5.0，6.0，7.0，8.0 h注入色谱仪，记录峰面积，计算尿囊素与甲硝唑的Rs分别为0.61%(n=8)，0.21%(n=8)，表明在 8 h 内结果稳定。
4.3 重现性考察 精密量取同一份供试品溶液，重复进样 6 次，记录峰面积，计算尿囊素与甲硝唑Rs分别为0.28%(n=6)，0.20%(n=6)，说明重现性良好。
, 百拇医药
5 回收率试验
按处方模拟配制样品 6 份，依法测定，记录峰面积，计算尿囊素与甲硝回收率，见表1。
6 样品测定结果
精密量取四批样品，依法测定，分离色谱图中，尿囊素RT=3.3 min，n＝1 500；甲硝唑RT=6.3 min，n=3 500，二者分离度为4.0，其他成分不干扰检出。含量结果见表2。 表1 尿囊素与甲硝唑回收率测得结果
编号
尿囊素
甲硝唑
加入量
(g/100 ml)
, 百拇医药
测得量
(g/100 ml)
回收率
(%)
加入量
(g/100 ml)
测得量
(g/100 ml)
回收率
(%)
1
0.160 78
0.159 83
, http://www.100md.com
99.41
0.161 22
0.160 78
99.73
2
0.160 58
0.158 83
98.91
0.160 86
0.160 36
99.69
3
, 百拇医药 0.200 17
0.199 03
99.43
0.201 37
0.201 15
99.89
4
0.200 18
0.200 44
100.13
0.201 17
0.201 51
, 百拇医药
100.17
5
0.240 04
0.240 26
100.09
0.240 98
0.242 02
100.43
6
0.240 23
0.239 46
99.68
, http://www.100md.com
0.241 37
0.241 01
99.85
平均回收率
99.61
99.96
Rs(%)
0.46
0.29
表2 皮尔复溶液中尿囊素与甲硝唑含量测定结果(n=3) 批号
尿囊素含量(%)
Rs(%)
, 百拇医药
甲硝唑含量(%)
Rs(%)
01
93.93
0.55
102.50
0.19
02
94.54
0.52
102.50
0.05
03
, http://www.100md.com
92.69
0.28
102.50
0.10
04
94.46
0.50
97.90
0.11
7 讨论
在A液中，尿囊素仅有末端吸收，甲硝唑在230 nm，320 nm波长处均有最大吸收，现选择尿囊素末端吸收的217 nm作为检测波长，该波长处与甲硝唑吸收度差异不是很大，分离二者较为合适。
作者简介： 郝丽晓，女，1957年7月生，大专，主管药师
参考文献：
[1] 中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准二部.第 3 册[M]. 1994.30.
[2] 中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典二部.1995版[M].北京：化工工业出版社，1995.153.
[收稿日期： 1999-08-02], 百拇医药
单位：郝丽晓(山西省药品检验所仪器室 太原 030001)；窦爱兰(山西省药品检验所仪器室 太原 030001)；钟化人(山西省药品检验所仪器室 太原 030001)
关键词：尿囊素；甲硝唑；甲地海因；色谱法，高压液相
山西医科大学学报000119 摘要： 采用反相高效液相色谱法测定皮尔复溶液中尿囊素与甲硝唑的含量，以磷酸二氢钾(0.005 mol/L)-甲醇(75∶25)为流动相，检测波长217 nm，二者在2.0～8.0 μg的浓度范围内，线性关系良好，相关系数(r)分别为0.999 8，0.999 9(n＝6)，平均回收率分别为99.61%(Rs=0.46%，n＝6)；99.96%(Rs=0.29%，n＝6)。
中图分类号： R927.11 文献标识码： A
, 百拇医药
文章编号： 1007-6611(2000)01-0041-02
本品是由多种成分组成的灭菌水溶液，其中成分尿囊素有促进组织细胞生长，溃疡及伤口愈合作用，甲硝唑为抗菌药物，地塞米松磷酸钠为抗炎药物。由于稳定性原因，分为分液(为尿囊素、甲硝唑等的灭菌水溶液)与B液(为地塞米松磷酸钠灭菌水溶液)，用前混合。对A液中主成份尿囊素与甲硝唑的含量测定，文献报道有容量法[1]，与紫外分光光度法[2]等，本文采用高效液相色谱法对其进行了方法考察。
1 仪器与试剂
岛津LC-4A高效液相色谱仪，SPD-2AS紫外检测器，CR-3A数据处理机；磷酸二氢钾(分析纯，北京化工厂)；甲醇(优级纯，北京化工厂)；对照品尿囊素、甲硝唑(皮尔复研究所提供)，皮尔复溶液(皮尔复研究所提供)。
2 色谱条件
, 百拇医药
色谱柱为天津Irregulea-H C18柱，(10 μm,4.6 mm×250 mm)；流动相为0.005 mol/L磷酸二氢钾-甲醇(75∶25)，流速为0.8 ml/min，检测波长 217 nm，AuFs=0.04，ATTEN=2，纸速 2 mm/min，室温 25 ℃操作。
3 实验方法
3.1 对照品溶液的制备，取经105 ℃ 干燥 2 h 的对照品尿囊素与甲硝唑各约 0.1 g，分别精密称定，置同一个 50 ml量瓶中，加水适量，超声5 min使溶解，再加水至刻度，摇匀。精密量取 10 ml置 100 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。
3.2 供试品溶液的制备 精密量取皮尔复溶液10 ml，置100 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。
4 实验条件考察
, http://www.100md.com
4.1 线性关系考察 取尿囊素与甲硝唑对照品配制成不同浓度的溶液，分别进样20 μl，测得峰面积，再将进样量(μg)与峰面积 A 计算回归方程分别为：A尿囊素＝1 235+1 7651 C (r=0.999 8，n＝6)
A甲硝唑＝1 317+35 774 C (r＝0.999 9，n＝6)
说明尿囊素与甲硝进样量为2.0～8.0 μg时，均线性良好。
4.2 稳定性考察 精密量取对照品溶液 20 μl，分别在0，0.5，1.0，2.0，5.0，6.0，7.0，8.0 h注入色谱仪，记录峰面积，计算尿囊素与甲硝唑的Rs分别为0.61%(n=8)，0.21%(n=8)，表明在 8 h 内结果稳定。
4.3 重现性考察 精密量取同一份供试品溶液，重复进样 6 次，记录峰面积，计算尿囊素与甲硝唑Rs分别为0.28%(n=6)，0.20%(n=6)，说明重现性良好。
, 百拇医药
5 回收率试验
按处方模拟配制样品 6 份，依法测定，记录峰面积，计算尿囊素与甲硝回收率，见表1。
6 样品测定结果
精密量取四批样品，依法测定，分离色谱图中，尿囊素RT=3.3 min，n＝1 500；甲硝唑RT=6.3 min，n=3 500，二者分离度为4.0，其他成分不干扰检出。含量结果见表2。 表1 尿囊素与甲硝唑回收率测得结果
编号
尿囊素
甲硝唑
加入量
(g/100 ml)
, 百拇医药
测得量
(g/100 ml)
回收率
(%)
加入量
(g/100 ml)
测得量
(g/100 ml)
回收率
(%)
1
0.160 78
0.159 83
, http://www.100md.com
99.41
0.161 22
0.160 78
99.73
2
0.160 58
0.158 83
98.91
0.160 86
0.160 36
99.69
3
, 百拇医药 0.200 17
0.199 03
99.43
0.201 37
0.201 15
99.89
4
0.200 18
0.200 44
100.13
0.201 17
0.201 51
, 百拇医药
100.17
5
0.240 04
0.240 26
100.09
0.240 98
0.242 02
100.43
6
0.240 23
0.239 46
99.68
, http://www.100md.com
0.241 37
0.241 01
99.85
平均回收率
99.61
99.96
Rs(%)
0.46
0.29
表2 皮尔复溶液中尿囊素与甲硝唑含量测定结果(n=3) 批号
尿囊素含量(%)
Rs(%)
, 百拇医药
甲硝唑含量(%)
Rs(%)
01
93.93
0.55
102.50
0.19
02
94.54
0.52
102.50
0.05
03
, http://www.100md.com
92.69
0.28
102.50
0.10
04
94.46
0.50
97.90
0.11
7 讨论
在A液中，尿囊素仅有末端吸收，甲硝唑在230 nm，320 nm波长处均有最大吸收，现选择尿囊素末端吸收的217 nm作为检测波长，该波长处与甲硝唑吸收度差异不是很大，分离二者较为合适。
作者简介： 郝丽晓，女，1957年7月生，大专，主管药师
参考文献：
[1] 中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准二部.第 3 册[M]. 1994.30.
[2] 中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典二部.1995版[M].北京：化工工业出版社，1995.153.
[收稿日期： 1999-08-02], 百拇医药