鹿茸醇提物对环磷酰胺所致小鼠遗传物质损伤的影响
作者：陈书明 聂向庭 刘广金
单位：陈书明(山西农业大学动物医学系 太谷 030801)；聂向庭(山西农业大学动物医学系 太谷 030801)；刘广金(山西医科大学98级研究生)
关键词：鹿茸；环磷酰胺；微核率；小鼠
山西医科大学学报000110 摘要： 用鹿茸醇提物对昆明系小鼠进行灌胃，剂量为 1.0 g/(kg.d)，连续进行 10 d；然后，测定由环磷酰胺诱导的该小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率；以探讨鹿茸醇提物对环磷酰胺所致小鼠遗传物质损伤是否具有保护作用。结果表明，鹿茸醇提物组(实验组)小鼠骨髓嗜多染红细胞的微核率为 15.82±0.22，而对照组为 24.23±0.18，两组比较，差异非常显著(P<0.01)。提示，鹿茸醇提物对环磷酰胺所致小鼠遗传物质损伤具有一定的保护作用。
中图分类号： R394.6 文献标识码： A
, 百拇医药
文章编号： 1007-6611(2000)01-0024-02
Effect of alcohol extract of cornu cervi pantotrichum on the mouse genetic material lesion induced by cyclophosphamide
Chen Shuming, Nie Xiangting, Liu Guangjin
(Shanxi Agricultural University, Taigu 030801)
Abstract： Mice were given orally alcohol extract of cornu cervi pantotrichum(CCP) at the dose 1.0 g/(kg.d). Ten days later, the effect of CCP on micronucleus rate of the mice bone marrow cells induced by cyclophosphamide was studied. It was found that the micronucleus rates were 15.82±0.22 in CCP group and 24.23±0.18 in control group, and there was a significant difference between the two groups (P<0.01),suggesting that CCP is of a significant protective effect on the mouse gentic material lesion induced by cyclophosphamide.
, 百拇医药
Key words: cornu cervi pantotrichum; cyclophosphamide; rate of micronucleus; mice
鹿茸是我国传统的名贵动物药材之一，盛誉国内外，引起学者们的高度重视。鹿茸的化学成分比较复杂，据国内外报道的分析资料表明，鹿茸含下列 5 大类物质：①骨质，胶质，磷酸钙；②蛋白质，多肽，氨基酸；③卵磷脂，脑磷脂，亚油酸等脂类物质；④RNA，DNA，ATP 等核酸及其降解产物；⑤钙、磷、铁、锌等二十多种矿物元素[1]。关于鹿茸的药用价值，历代《本草》均有记载，如《本草纲目》记载：鹿茸“生精补髓，养血益阳，强筋健骨，治一切虚损……。”现代中医临床实践证明，鹿茸具有强壮机体、增强机体免疫、抗衰老、改善性功能、加速创伤和溃疡愈合、增强中枢神经系统和心血管系统功能等作用[2]。最近有报道，用 70% 乙醇作为溶剂提取鹿茸，提出的有效成分多，并经实验证实该鹿茸醇提物对与衰老有关的机体的单胺氧化酶的抑制作用最强[3]。而该鹿茸醇提物对机体其他方面的作用未见报道。鉴于此，我们用该鹿茸醇提物对小鼠进行灌胃实验，然后测定由环磷酰胺诱导的该小鼠的骨髓嗜多染红细胞的微核率，以期探讨鹿茸醇提物对环磷酰胺所致小鼠遗传物质损伤的影响。
, http://www.100md.com
1 材料与方法
1.1 材料、药品与试剂 鹿茸：购自山西省中药厂，经山西农业大学王建寿教授鉴定认为所购鹿茸为梅花鹿茸。鹿茸醇提物：用 70% 的乙醇浸泡梅花鹿茸，然后回馏提取，将提取液用蒸馏的方法回收乙醇，干燥，即得鹿茸醇提物。环磷酰胺：上海花联制药有限公司生产，批号990103。试剂：皆为国产分析纯。
1.2 主要仪器 Olympus 显微镜
1.3 动物 昆明系小鼠，雌雄各半，体重 23～26 g，山西医科大学实验动物中心提供。
1.4 实验方法
1.4.1 实验过程 取 20 只小鼠，在实验室饲养 3 d 以适应新的饲养环境。然后将小鼠随机分成两组：对照组与实验组。实验组小鼠用鹿茸醇提物灌胃 1.0 g/(kg.d)，对照组则用等量蒸馏水灌胃，其他饲养管理条件相同； 10 d 时，测定由环磷酰胺诱导的两组小鼠的骨髓嗜多染红细胞的微核率，微核率以千分率表示。实验结果以平均数±标准误(
)表示，组间差异用 t 检验。
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1.4.2 小鼠的骨髓嗜多染红细胞微核率的测定方法 实验进行到第 9 d 时，两组小鼠皆腹腔注射环磷酰胺 40 mg/(kg.bw)，24 h 后，以相同的剂量重复注射一次。于未次给药后 6 h，按常规迅速取小鼠股骨骨髓涂片、固定、染色，于油镜下观察并统计两组小鼠骨髓嗜多染红细胞的微核率。
2 结果与讨论
实验结果如下，对照组与实验组小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率分别为 24.23±0.18 和 15.82±0.22，两组比较，差异非常显著(P<0.01)。
环磷酰胺为氮芥的环状磷酸胺酯，是化学诱变剂的一种，为抗肿瘤的药物。但环磷酰胺有较大的副作用，因为环磷酰胺进入机体内，在肝微粒体酶(包括磷酸胺酶和磷酸脂酶)的作用下分解出烷化作用很强的氯乙基磷酰胺(也称作磷酰胺氮芥)，并与细胞内 DNA 交联，致使 DNA 单链或双链断裂，或链间交联，破坏 DNA 结构，从而干扰 DNA 复制、转录及蛋白质的生物合成，抑制细胞增殖。在临床上，环磷酰胺的副作用主要表现为骨髓抑制、白细胞减少、免疫功能下降等[4]。微核是骨髓内未成熟红细胞受环磷酰胺作用而发生遗传物质损伤的一种表现。红细胞未排核时，其核内的染色体经环磷酰胺作用而发生断裂，并有部分断片在有丝分裂后期不移向两极，在有丝分裂未期不进入分裂细胞核而存在于细胞质中，红细胞排核成为成熟红细胞时不排出而存留于红细胞内而形成一个或几个杏仁状结构，并存留一定时间，由于此结构比细胞核小，所以称微核，因此，微核率的高低反映了细胞内遗传物质受损伤程度的大小。本实验结果表明，实验组小鼠由环磷酰胺所致骨髓嗜多染红细胞微核率非常显著低于对照组，可见，鹿茸醇提物对环磷酰胺所致小鼠遗传物质损伤具有一定的保护作用。其机制有待进一步研究。
, 百拇医药
作者简介： 陈书明，男，1967年4月生，硕士，讲师
参考文献：
[1] 林元藻，王风山，王转花，等.生化制药学[M]. 北京：人民卫生出版社，1998.337.
[2] 杨璐璐，迟程，秦飞，等.鹿茸的化学成分及药理作用[J].云南中医学院学报，1995，18 (4)： 19～23.
[3] 杨秀伟，花鹿茸.马鹿茸碱基成分的 HPLC 定量分析和其 MAO 活性抑制作用[J].中草药， 1995， 26 (1)： 17～19.
[4] 贾博琦，鲁云兰.现代临床实用药物手册[M]. 北京：北京医科大学，中国协和医科大学联合出版社， 1996. 563.
[收稿日期： 1999-10-04], http://www.100md.com
单位：陈书明(山西农业大学动物医学系 太谷 030801)；聂向庭(山西农业大学动物医学系 太谷 030801)；刘广金(山西医科大学98级研究生)
关键词：鹿茸；环磷酰胺；微核率；小鼠
山西医科大学学报000110 摘要： 用鹿茸醇提物对昆明系小鼠进行灌胃，剂量为 1.0 g/(kg.d)，连续进行 10 d；然后，测定由环磷酰胺诱导的该小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率；以探讨鹿茸醇提物对环磷酰胺所致小鼠遗传物质损伤是否具有保护作用。结果表明，鹿茸醇提物组(实验组)小鼠骨髓嗜多染红细胞的微核率为 15.82±0.22，而对照组为 24.23±0.18，两组比较，差异非常显著(P<0.01)。提示，鹿茸醇提物对环磷酰胺所致小鼠遗传物质损伤具有一定的保护作用。
中图分类号： R394.6 文献标识码： A
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文章编号： 1007-6611(2000)01-0024-02
Effect of alcohol extract of cornu cervi pantotrichum on the mouse genetic material lesion induced by cyclophosphamide
Chen Shuming, Nie Xiangting, Liu Guangjin
(Shanxi Agricultural University, Taigu 030801)
Abstract： Mice were given orally alcohol extract of cornu cervi pantotrichum(CCP) at the dose 1.0 g/(kg.d). Ten days later, the effect of CCP on micronucleus rate of the mice bone marrow cells induced by cyclophosphamide was studied. It was found that the micronucleus rates were 15.82±0.22 in CCP group and 24.23±0.18 in control group, and there was a significant difference between the two groups (P<0.01),suggesting that CCP is of a significant protective effect on the mouse gentic material lesion induced by cyclophosphamide.
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Key words: cornu cervi pantotrichum; cyclophosphamide; rate of micronucleus; mice
鹿茸是我国传统的名贵动物药材之一，盛誉国内外，引起学者们的高度重视。鹿茸的化学成分比较复杂，据国内外报道的分析资料表明，鹿茸含下列 5 大类物质：①骨质，胶质，磷酸钙；②蛋白质，多肽，氨基酸；③卵磷脂，脑磷脂，亚油酸等脂类物质；④RNA，DNA，ATP 等核酸及其降解产物；⑤钙、磷、铁、锌等二十多种矿物元素[1]。关于鹿茸的药用价值，历代《本草》均有记载，如《本草纲目》记载：鹿茸“生精补髓，养血益阳，强筋健骨，治一切虚损……。”现代中医临床实践证明，鹿茸具有强壮机体、增强机体免疫、抗衰老、改善性功能、加速创伤和溃疡愈合、增强中枢神经系统和心血管系统功能等作用[2]。最近有报道，用 70% 乙醇作为溶剂提取鹿茸，提出的有效成分多，并经实验证实该鹿茸醇提物对与衰老有关的机体的单胺氧化酶的抑制作用最强[3]。而该鹿茸醇提物对机体其他方面的作用未见报道。鉴于此，我们用该鹿茸醇提物对小鼠进行灌胃实验，然后测定由环磷酰胺诱导的该小鼠的骨髓嗜多染红细胞的微核率，以期探讨鹿茸醇提物对环磷酰胺所致小鼠遗传物质损伤的影响。
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1 材料与方法
1.1 材料、药品与试剂 鹿茸：购自山西省中药厂，经山西农业大学王建寿教授鉴定认为所购鹿茸为梅花鹿茸。鹿茸醇提物：用 70% 的乙醇浸泡梅花鹿茸，然后回馏提取，将提取液用蒸馏的方法回收乙醇，干燥，即得鹿茸醇提物。环磷酰胺：上海花联制药有限公司生产，批号990103。试剂：皆为国产分析纯。
1.2 主要仪器 Olympus 显微镜
1.3 动物 昆明系小鼠，雌雄各半，体重 23～26 g，山西医科大学实验动物中心提供。
1.4 实验方法
1.4.1 实验过程 取 20 只小鼠，在实验室饲养 3 d 以适应新的饲养环境。然后将小鼠随机分成两组：对照组与实验组。实验组小鼠用鹿茸醇提物灌胃 1.0 g/(kg.d)，对照组则用等量蒸馏水灌胃，其他饲养管理条件相同； 10 d 时，测定由环磷酰胺诱导的两组小鼠的骨髓嗜多染红细胞的微核率，微核率以千分率表示。实验结果以平均数±标准误(
)表示，组间差异用 t 检验。, 百拇医药
1.4.2 小鼠的骨髓嗜多染红细胞微核率的测定方法 实验进行到第 9 d 时，两组小鼠皆腹腔注射环磷酰胺 40 mg/(kg.bw)，24 h 后，以相同的剂量重复注射一次。于未次给药后 6 h，按常规迅速取小鼠股骨骨髓涂片、固定、染色，于油镜下观察并统计两组小鼠骨髓嗜多染红细胞的微核率。
2 结果与讨论
实验结果如下，对照组与实验组小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率分别为 24.23±0.18 和 15.82±0.22，两组比较，差异非常显著(P<0.01)。
环磷酰胺为氮芥的环状磷酸胺酯，是化学诱变剂的一种，为抗肿瘤的药物。但环磷酰胺有较大的副作用，因为环磷酰胺进入机体内，在肝微粒体酶(包括磷酸胺酶和磷酸脂酶)的作用下分解出烷化作用很强的氯乙基磷酰胺(也称作磷酰胺氮芥)，并与细胞内 DNA 交联，致使 DNA 单链或双链断裂，或链间交联，破坏 DNA 结构，从而干扰 DNA 复制、转录及蛋白质的生物合成，抑制细胞增殖。在临床上，环磷酰胺的副作用主要表现为骨髓抑制、白细胞减少、免疫功能下降等[4]。微核是骨髓内未成熟红细胞受环磷酰胺作用而发生遗传物质损伤的一种表现。红细胞未排核时，其核内的染色体经环磷酰胺作用而发生断裂，并有部分断片在有丝分裂后期不移向两极，在有丝分裂未期不进入分裂细胞核而存在于细胞质中，红细胞排核成为成熟红细胞时不排出而存留于红细胞内而形成一个或几个杏仁状结构，并存留一定时间，由于此结构比细胞核小，所以称微核，因此，微核率的高低反映了细胞内遗传物质受损伤程度的大小。本实验结果表明，实验组小鼠由环磷酰胺所致骨髓嗜多染红细胞微核率非常显著低于对照组，可见，鹿茸醇提物对环磷酰胺所致小鼠遗传物质损伤具有一定的保护作用。其机制有待进一步研究。
, 百拇医药
作者简介： 陈书明，男，1967年4月生，硕士，讲师
参考文献：
[1] 林元藻，王风山，王转花，等.生化制药学[M]. 北京：人民卫生出版社，1998.337.
[2] 杨璐璐，迟程，秦飞，等.鹿茸的化学成分及药理作用[J].云南中医学院学报，1995，18 (4)： 19～23.
[3] 杨秀伟，花鹿茸.马鹿茸碱基成分的 HPLC 定量分析和其 MAO 活性抑制作用[J].中草药， 1995， 26 (1)： 17～19.
[4] 贾博琦，鲁云兰.现代临床实用药物手册[M]. 北京：北京医科大学，中国协和医科大学联合出版社， 1996. 563.
[收稿日期： 1999-10-04], http://www.100md.com