外周去甲肾上腺素对大鼠血浆唾液酸水平的影响
作者：陈 蕾 陈文芳 李荣娟 周颖斌 吕秀文 陈家津
单位：青岛医学院(青岛 266021)；陈 蕾 陈文芳 李荣娟 周颖斌 陈家津 生理学教研室；吕秀文 附属医院检验科
关键词：唾液酸；去甲肾上腺素；血浆；大鼠
青岛医学院学报990118 【摘要】 ①目的 探讨静脉注射去甲肾上腺素对血浆唾液酸水平的影响及其可能机制。②方法 采用紫外分光光度法测定血浆唾液酸水平。③结果 外周血液中去甲肾上腺素浓度增加可明显提高血浆唾液酸水平，此效应可被预先注射的α受体阻断剂酚妥拉明所阻断，但不能被β受体阻断剂心得安阻断。④结论 去甲肾上腺素提高血浆唾液酸水平的作用可能是通过兴奋α受体而实现的。
中国图书资料分类法分类号 R338.7
EFFECT OF PERIPHERAL NORADRENALINE ON PLASMA SIALIC ACID LEVEL IN RATS
, 百拇医药
Chen Lei, Chen Wenfang, Li Rongjuan, et al
Department of Physiology, Qingdao Medical College, Qingdao 266021
【ABSTRACT】 Objective To study the effect of intravenously injected noradrenaline on plasma sialic acid(SA) level and the possible mechanism. Methods Ultraviolet spectrophotometry was used to measure the level of plasma SA. Results The plasma SA level was significantly increased by the injection of noradrenaline. The effect of noradrenaline was completely blocked by preinjection of phentolamine(α-adrenergic receptor antagonist). But propanolol (β-adrenergic receptor antagonist) could not affect the increase of SA caused by noradrenaline. Conclusion The results suggested that the effect of noradrenaline on plasma SA might be related with the activation of α-adrenergic receptors.
, http://www.100md.com
【KEY WORDS】 sialic acid; noradrenaline; plasma; rat
唾液酸(SA)是一种糖类物质,主要以结合的形式存在于组织细胞膜表面。近年来国内外就SA进行了大量研究。已证明SA是细胞膜糖蛋白和糖脂的重要结构和功能成分，是细胞膜上负电荷的来源, 并且参与细胞的转变及免疫调控等功能〔1～3〕。目前,血液或组织中SA水平的检测,已成为临床上恶性肿瘤早期诊断及预后判定的重要指标。但是有关血液中SA水平改变的机制尚不清楚。文献报道血浆SA水平的变化与机体的功能状态密切相关,神经系统可能在调节SA浓度的变化上起重要作用〔4,5〕。去甲肾上腺素(NA)作为外周体液中一种重要的神经递质，参与应激等多种机体功能活动。本实验旨在探讨外周体液中NA水平对血浆SA含量的影响及其可能的机制。
1 材料和方法
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1.1 动物分组和手术方法
实验选用体质量210～240g雄性Wistar大鼠40只,随机分为静脉注射NA组(8只),静脉注射酚妥拉明及NA组(8只),静脉注射心得安及NA组(8只)以及对照组(16只)。大鼠以200g/L乌拉坦(1g/kg体质量)腹腔注射麻醉后,仰卧位固定,颈部正中切口,分离右侧颈静脉,将聚乙烯管插入右心房,药物经颈静脉均匀注入。注药前及注药后5，10，20min分别取血0.5mL.整个实验过程中,大鼠直肠温度应维持在(37.0±0.5)℃.
1.2 实验用药品及仪器
实验用NA,酚妥拉明及心得安均系美国Sigma公司生产的纯标准品;F8836试剂由成都军区总医院提供,系测定SA的专用试剂。SA测定采用日本产UV-260型紫外分光光度计。
1.3 血浆中SA含量的测定
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采用紫外分光光度法:取静脉血0.5mL,立即置肝素抗凝管中,以3 000 r/min离心30min,取血浆0.1mL及F8836试剂4mL置于15mm×10mm玻璃试管中,混匀后,置沸水浴中准确加热10min,立即置冷水浴2min,以3 000r/min离心10min,取上清液,以UV-260 型紫外分光光度计进行比色,波长560nm,试剂调零,结果以吸光度(A)表示。
1.4 统计学处理
实验所得数据以
表示,数据间的比较采用t检验。
2 结 果
2.1 静脉注射NA对血浆SA水平的影响
对照组静脉注射生理盐水0.1mL,实验组静脉注射1∶10 000(V∶V) NA 0.1mL,分别于注射前和注射后5,10,20min取血测血浆SA含量。结果注射NA后，血浆SA水平较对照组明显升高，差异有显著性(t=2.65～13.58,P均<0.01)。见表1.
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表1 注射NA后血浆SA水平变化(A,) 组别
n
时间(t/min)
5
10
20
对照组
8
-0.0029±0.0009
-0.0018±0.0007
-0.0020±0.0005
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NA组
8
0.0108±0.0026*
0.0108±0.0036*
0.0024±0.0005*
与对照组比较,* t=2.65～13.58,P<0.01
2.2 酚妥拉明对NA升高SA水平的影响
对照组大鼠静脉注射生理盐水及1∶10 000(V∶V)NA各0.1mL,实验组静脉注射酚妥拉明及NA各0.1mL,结果表明,注射后5,10,20min,实验组血浆SA水平较对照组明显降低，差异有显著性(t＝3.42～4.61,P均<0.01)。见表2.
, 百拇医药
表2 静脉注射酚妥拉明+NA及心得安+NA前后血浆SA吸光度的变化(A,) 组别
n
时间(t/min)
5
10
20
注射生理
盐水+NA组
8
0.0115±0.0032
0.0105±0.0042
, 百拇医药
0.0032±0.0015
注射酚妥
拉明+NA组
8
0.0053±0.0020*
0.0034±0.0011*
0.0014±0.0009*
注射心得安
+NA组
8
0.0113±0.0022
, 百拇医药
0.0101±0.0038
0.0030±0.0010
与注射生理盐水+NA组比较*t=3.42～4.61,P<0.01
2.3 心得安对NA升高SA水平的影响
实验组静脉注射心得安及NA各0.1mL,分别于注射前及注射后5，10，20min取血,测定血浆SA水平。结果实验组与对照组比较,差异无显著意义(t=0.18～0.20,P均>0.05)。见表2.
3 讨 论
SA作为细胞膜糖蛋白和糖脂的重要成分,在细胞的分化、识别、稳定性、癌的转移、扩散、肿瘤的抗原性等许多细胞生物学现象中发挥重要作用。血液SA水平的测定已广泛应用于临床, 特别是对恶性肿瘤的早期诊断和预后判定, 具有重要的价值。但是,有关血液中SA水平变化的机制,目前尚不十分清楚。文献报道4种肿瘤细胞于体外培养的条件下,培养前后培养液中未见SA水平提高。机体处于麻醉状态下,其血浆SA水平明显低于清醒状态〔4,5〕。我们以往工作也揭示,中枢多巴胺等神经递质参与血浆SA水平的调节〔6,7〕。由此可见,机体神经体液因素的改变可调节血浆SA的水平。除肿瘤病人血浆SA水平升高外, 在某些感染或严重创伤产生应激反应时,血浆SA水平也升高。NA作为外周体液中一种重要的神经递质,当机体处于畏惧、严重焦虑、剧痛、脱水等应激状态下可大量释放入血液循环以调整机体各种功能。为此本实验目的在于探讨血液中NA对SA水平的影响及其可能机制。
, 百拇医药
本实验采用静脉注射NA的方法以提高外周血液中NA含量,结果显示NA可使血浆SA水平明显升高,以注药后10min内升高最明显,而注入等量生理盐水对血浆SA水平无明显影响。NA在外周体液中主要与肾上腺素能α及β受体结合,为进一步探讨NA提高血浆SA含量的可能机制,本实验在注射NA前分别注射α受体阻断剂酚妥拉明及β受体阻断剂心得安,结果表明酚妥拉明注入体内阻断α受体后,使NA升高血浆SA的作用被明显阻断;而注入心得安阻断β受体后,对NA升高血浆SA含量的作用无明显影响。上述结果提示,外周血液中NA升高SA水平可能是通过兴奋α受体发挥作用的。
参考文献
1 Alhadeff JA, Holzinger RT. Sialy transferase, sialic acid and sialoglycoconjugates in metastatic tumor and human liver tissue. Int J Biochem,1982,14(1):119
, 百拇医药
2 Black PH. Shedding from the cell surface of normal and cancer cells. Adv Cancer Res,1980,32:75
3 周柔丽.肿瘤细胞表面复合糖类的变化及其意义. 细胞生物学杂志, 1989, 11(1):18
4 Erbil KM, Jones JD, Klee GG. Use and liminations of serum total and lipid-bound sialic acid concentrations as markers for colorectal cancer. Cancer,1985,55:404
5 沈延希,任光国,李 力,等. 唾液酸神经体液调节机理的探讨. 四川省卫生管理干部学院学报,1992,2(11):50
6 陈文芳,陈家津,陈 蕾. 兴奋下丘脑弓状核神经元降低大鼠血浆唾液酸水平的作用. 生理学报,1995,47(6):597
7 梁福波,陈家津,陈文芳,等.侧脑室注射β-内啡肽对大鼠血浆唾液酸水平的影响及其机制探讨.动物学报,1997,43(4):361
(1998-08-08收稿 1998-12-05修回), 百拇医药
单位：青岛医学院(青岛 266021)；陈 蕾 陈文芳 李荣娟 周颖斌 陈家津 生理学教研室；吕秀文 附属医院检验科
关键词：唾液酸；去甲肾上腺素；血浆；大鼠
青岛医学院学报990118 【摘要】 ①目的 探讨静脉注射去甲肾上腺素对血浆唾液酸水平的影响及其可能机制。②方法 采用紫外分光光度法测定血浆唾液酸水平。③结果 外周血液中去甲肾上腺素浓度增加可明显提高血浆唾液酸水平，此效应可被预先注射的α受体阻断剂酚妥拉明所阻断，但不能被β受体阻断剂心得安阻断。④结论 去甲肾上腺素提高血浆唾液酸水平的作用可能是通过兴奋α受体而实现的。
中国图书资料分类法分类号 R338.7
EFFECT OF PERIPHERAL NORADRENALINE ON PLASMA SIALIC ACID LEVEL IN RATS
, 百拇医药
Chen Lei, Chen Wenfang, Li Rongjuan, et al
Department of Physiology, Qingdao Medical College, Qingdao 266021
【ABSTRACT】 Objective To study the effect of intravenously injected noradrenaline on plasma sialic acid(SA) level and the possible mechanism. Methods Ultraviolet spectrophotometry was used to measure the level of plasma SA. Results The plasma SA level was significantly increased by the injection of noradrenaline. The effect of noradrenaline was completely blocked by preinjection of phentolamine(α-adrenergic receptor antagonist). But propanolol (β-adrenergic receptor antagonist) could not affect the increase of SA caused by noradrenaline. Conclusion The results suggested that the effect of noradrenaline on plasma SA might be related with the activation of α-adrenergic receptors.
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【KEY WORDS】 sialic acid; noradrenaline; plasma; rat
唾液酸(SA)是一种糖类物质,主要以结合的形式存在于组织细胞膜表面。近年来国内外就SA进行了大量研究。已证明SA是细胞膜糖蛋白和糖脂的重要结构和功能成分，是细胞膜上负电荷的来源, 并且参与细胞的转变及免疫调控等功能〔1～3〕。目前,血液或组织中SA水平的检测,已成为临床上恶性肿瘤早期诊断及预后判定的重要指标。但是有关血液中SA水平改变的机制尚不清楚。文献报道血浆SA水平的变化与机体的功能状态密切相关,神经系统可能在调节SA浓度的变化上起重要作用〔4,5〕。去甲肾上腺素(NA)作为外周体液中一种重要的神经递质，参与应激等多种机体功能活动。本实验旨在探讨外周体液中NA水平对血浆SA含量的影响及其可能的机制。
1 材料和方法
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1.1 动物分组和手术方法
实验选用体质量210～240g雄性Wistar大鼠40只,随机分为静脉注射NA组(8只),静脉注射酚妥拉明及NA组(8只),静脉注射心得安及NA组(8只)以及对照组(16只)。大鼠以200g/L乌拉坦(1g/kg体质量)腹腔注射麻醉后,仰卧位固定,颈部正中切口,分离右侧颈静脉,将聚乙烯管插入右心房,药物经颈静脉均匀注入。注药前及注药后5，10，20min分别取血0.5mL.整个实验过程中,大鼠直肠温度应维持在(37.0±0.5)℃.
1.2 实验用药品及仪器
实验用NA,酚妥拉明及心得安均系美国Sigma公司生产的纯标准品;F8836试剂由成都军区总医院提供,系测定SA的专用试剂。SA测定采用日本产UV-260型紫外分光光度计。
1.3 血浆中SA含量的测定
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采用紫外分光光度法:取静脉血0.5mL,立即置肝素抗凝管中,以3 000 r/min离心30min,取血浆0.1mL及F8836试剂4mL置于15mm×10mm玻璃试管中,混匀后,置沸水浴中准确加热10min,立即置冷水浴2min,以3 000r/min离心10min,取上清液,以UV-260 型紫外分光光度计进行比色,波长560nm,试剂调零,结果以吸光度(A)表示。
1.4 统计学处理
实验所得数据以
表示,数据间的比较采用t检验。2 结 果
2.1 静脉注射NA对血浆SA水平的影响
对照组静脉注射生理盐水0.1mL,实验组静脉注射1∶10 000(V∶V) NA 0.1mL,分别于注射前和注射后5,10,20min取血测血浆SA含量。结果注射NA后，血浆SA水平较对照组明显升高，差异有显著性(t=2.65～13.58,P均<0.01)。见表1.
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表1 注射NA后血浆SA水平变化(A,
) 组别n
时间(t/min)
5
10
20
对照组
8
-0.0029±0.0009
-0.0018±0.0007
-0.0020±0.0005
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NA组
8
0.0108±0.0026*
0.0108±0.0036*
0.0024±0.0005*
与对照组比较,* t=2.65～13.58,P<0.01
2.2 酚妥拉明对NA升高SA水平的影响
对照组大鼠静脉注射生理盐水及1∶10 000(V∶V)NA各0.1mL,实验组静脉注射酚妥拉明及NA各0.1mL,结果表明,注射后5,10,20min,实验组血浆SA水平较对照组明显降低，差异有显著性(t＝3.42～4.61,P均<0.01)。见表2.
, 百拇医药
表2 静脉注射酚妥拉明+NA及心得安+NA前后血浆SA吸光度的变化(A,
) 组别n
时间(t/min)
5
10
20
注射生理
盐水+NA组
8
0.0115±0.0032
0.0105±0.0042
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0.0032±0.0015
注射酚妥
拉明+NA组
8
0.0053±0.0020*
0.0034±0.0011*
0.0014±0.0009*
注射心得安
+NA组
8
0.0113±0.0022
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0.0101±0.0038
0.0030±0.0010
与注射生理盐水+NA组比较*t=3.42～4.61,P<0.01
2.3 心得安对NA升高SA水平的影响
实验组静脉注射心得安及NA各0.1mL,分别于注射前及注射后5，10，20min取血,测定血浆SA水平。结果实验组与对照组比较,差异无显著意义(t=0.18～0.20,P均>0.05)。见表2.
3 讨 论
SA作为细胞膜糖蛋白和糖脂的重要成分,在细胞的分化、识别、稳定性、癌的转移、扩散、肿瘤的抗原性等许多细胞生物学现象中发挥重要作用。血液SA水平的测定已广泛应用于临床, 特别是对恶性肿瘤的早期诊断和预后判定, 具有重要的价值。但是,有关血液中SA水平变化的机制,目前尚不十分清楚。文献报道4种肿瘤细胞于体外培养的条件下,培养前后培养液中未见SA水平提高。机体处于麻醉状态下,其血浆SA水平明显低于清醒状态〔4,5〕。我们以往工作也揭示,中枢多巴胺等神经递质参与血浆SA水平的调节〔6,7〕。由此可见,机体神经体液因素的改变可调节血浆SA的水平。除肿瘤病人血浆SA水平升高外, 在某些感染或严重创伤产生应激反应时,血浆SA水平也升高。NA作为外周体液中一种重要的神经递质,当机体处于畏惧、严重焦虑、剧痛、脱水等应激状态下可大量释放入血液循环以调整机体各种功能。为此本实验目的在于探讨血液中NA对SA水平的影响及其可能机制。
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本实验采用静脉注射NA的方法以提高外周血液中NA含量,结果显示NA可使血浆SA水平明显升高,以注药后10min内升高最明显,而注入等量生理盐水对血浆SA水平无明显影响。NA在外周体液中主要与肾上腺素能α及β受体结合,为进一步探讨NA提高血浆SA含量的可能机制,本实验在注射NA前分别注射α受体阻断剂酚妥拉明及β受体阻断剂心得安,结果表明酚妥拉明注入体内阻断α受体后,使NA升高血浆SA的作用被明显阻断;而注入心得安阻断β受体后,对NA升高血浆SA含量的作用无明显影响。上述结果提示,外周血液中NA升高SA水平可能是通过兴奋α受体发挥作用的。
参考文献
1 Alhadeff JA, Holzinger RT. Sialy transferase, sialic acid and sialoglycoconjugates in metastatic tumor and human liver tissue. Int J Biochem,1982,14(1):119
, 百拇医药
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6 陈文芳,陈家津,陈 蕾. 兴奋下丘脑弓状核神经元降低大鼠血浆唾液酸水平的作用. 生理学报,1995,47(6):597
7 梁福波,陈家津,陈文芳,等.侧脑室注射β-内啡肽对大鼠血浆唾液酸水平的影响及其机制探讨.动物学报,1997,43(4):361
(1998-08-08收稿 1998-12-05修回), 百拇医药