自体脾移植术后T细胞亚群、sIL-2R、TNF变化研究
作者：王浩炜 刘根寿 吴浩荣 李军成 蒋国勤 庄志祥
单位：苏州医学院附属二院普外科，苏州，215004
关键词：自体脾移植；T细胞亚群；可溶性白细胞介素-2受体；肿瘤坏死因子
苏州医学院学报991120 摘要 目的：探讨自体脾移植术对免疫学指标的影响。方法：将40例外伤性脾破裂分为脾移植术和全脾切除术组，各20例。对照组10例。结果：术后1周，全脾切除术组和自体脾移植组，与对照组相比，CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8降低，sIL-2R、TNF皆升高(P<0.05)。术后3个月，自体脾移植组CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8升高，sIL-2R、TNF降低(P>0.05)。而脾切除组，术后CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8持续下降，sIL-2R、TNF持续升高(P<0.05)。结论：自体脾移植对维持机体的T细胞水平和增强机体的抗感染能力有益。
, 百拇医药
中图法分类 R392.4
The Variation of the Subclasses of T Cells、sIL-2R、TNF
after Splenic Autotransplantation
Wang Haowei, Liu Genshou, Wu Haorong, et al
(Department of General Surgery, the Second Hospital Affiliated to Suzhou Medicl College, Suzhou, 215007)
Abstract Objective To study the immunological effects of splenic autotransplantation by clinical research. Method Forty patients with splenic trauma werte divided into two groups equally. One group underwent splenic autotransplantation and another splenectomy. The control group included tien cases. Result Splenic autotransplantation group and splenectomy group were compared with the control group. In the group of splenic autotransplantation,CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8 dropped and sIL-2R、TNF rised a week postoperatively. Then CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8 rised and sIL-2R、TNF dropped three months postoperatively. In the group of splenectomy, CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8 dropped persistently and sIL-2R、TNF rised postoperatively. Conclusion Splenic autotransplantation can help body to maintain T cells level and to improve the anti-infection ability.
, 百拇医药
Key words autotransplantation; T cells; sIL-2R
自1952年King和Schumacker[1]发现脾切除术后凶险性感染后，保留性脾手术在外科得到重视。在无法保留脾情况下，自体脾脏移植也应用于临床[2]。研究[3～6]表明，脾脏具有重要的免疫功能，脾切除术后可产生一系列免疫功能障碍。本文探讨脾切除术后自体脾移植，T细胞亚群及slL-2R、TNF的变化特点及对免疫功能的影响。
1 临床资料
1.1 病例：外伤性脾破裂40例中，男30例，女10例。年龄18～60岁。皆因外伤，均行急诊手术。自体脾组织大网膜内移植术(以下简称脾移植术)组和全脾切除术组各20例，术后随访1周10例，3个月5例。对照组10例，男6例，女4例。年龄20～62岁。其中合并胆囊炎、胆石症6例，十二指肠球部溃疡4例，均行相应的手术治疗。作相应时间的随访。
, 百拇医药
1.2 手术方法：全脾切除术按常规术式。脾片移植术按文献[7]方法。
1.3 实验室检查方法：外周血T细胞亚群检测采用间接免疫荧光法(ⅡFA)、血清sIL-2R检测采用常规的酶联免疫法(ELISA)法。血清TNF检测采用酶联免疫(ELISA)法。
1.4 结果
1.4.1 T细胞亚群的变化：术后1周、3个月3组CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8变化，见表1。
表1 术后1周T细胞亚群的变化(%，
±s)
, 百拇医药
n
CD+3
CD+4
CD+8
CD+4/CD+8
术后1周
对照组
10
63.53±5.48
37.41±1.53
, 百拇医药
23.63±2.02
1.71±0.08
脾切组
10
47.34±4.39**
29.58±1.21**
17.73±2.01**
1.61±0.35*
移植组
10
49.25±7.12**
, 百拇医药
30.25±1.31**
18.77±1.68**
1.61±0.35*
术后3个月
对照组
5
63.48±5.27
37.38±1.61
23.61±2.02
1.71±0.08
脾切组
, 百拇医药
5
53.37±4.18*
33.71±1.41*
21.07±1.87*
1.60±0.25*
移植组
5
62.23±3.16
36.80±13.67
21.52±1.01
1.70±0.12
, 百拇医药
与对照组相比，*P<0.05，**P<0.01
1.4.2 术后1周、3个月3组sIL-2R、TNF的变化：见表2。
表2 术后3组sIL-2R、TNF的变化(±s)
n
sIL-2R(U/ml)
TNF(pmol/L)
术后1周
对照组
10
86.72±5.43
, 百拇医药
10.51±3.21
脾切组
10
152.00±5.21
27.16±2.71
移植组
10
150.00±3.48
25.59±2.01
术后3个月
对照组
5
, 百拇医药 86.31±4.87
10.23±1.09
脾切组
5
132.71±8.34
25.67±3.02
移植组
5
87.58±2.36
10.34±2.15
2 讨论
机体正常的免疫应答有赖于T淋巴细胞的调节作用，尤其是辅助性(TH)和抑制性(TS)T细胞的相互制约作用和平衡有关。TH细胞有诱导和增强免疫应答作用。而TS细胞则起免疫调节的负反馈作用。本文资料表明，脾切除后导致机体细胞免疫功能的紊乱，表现为CD+3、CD+4、CD+8均减少，由于CD+4的减少较CD+8更明显，因而致使CD+4/CD+8比例下降，与文献[8]报道相符。自体脾移植术后对机体细胞免疫功能也有影响。术后病人血CD+3、CD+4、CD+8及CD+4/CD+8均显著下降。至术后3个月渐渐地接近正常，CD4/CD8比值亦接近正常，与文献[6]报道相符。脾移植术后，T细胞亚群浓度近期降低，远期恢复近于正常的变化规律，反映了移植再生脾的功能要经历3个月以上的代偿时间才逐渐近于正常。
, http://www.100md.com
sIL-2R参与机体的免疫应答与免疫调节。sIL-2R浓度是外周血循环中单核细胞活性敏感的定量指标，也能反映其它组织或间隙中体液的免疫活性。本研究结果显示，脾切除后外周血sIL-2R水平持续升高；而脾移植组外周血sIL-2R水平在术后早期升高，术后远期逐渐下降接近正常。脾切除后外周血CD+3、CD+4、CD+8及CD+4/CD+8比值下降而血清sIL-2R水平明显升高，提示CD+3、CD+4、CD+8的减少可能与sIL-2R本身在免疫调节中的作用相关。有实验证实[9]，在含高水平sIL-2R的白血病患者血清中有一免疫抑制物质，可以抑制T淋巴细胞的增殖反应，这种抑制作用可被抗Tac抗体所阻断。当患者血清中sIL-2R水平下降时，则出现T细胞增殖反应增强。因此可以认为，脾切除后外周血CD+3、CD+4、CD+8及CD+4/CD+8的下降与血清sIL-2R水平升高有一定关系。
, http://www.100md.com
sIL-2R水平升高与体内淋巴细胞处于高激活状态有关[10]。由于sIL-2R大量释放，封闭IL-2的作用，同时mIL-2R(膜白细胞介素-2受体)不断脱落，使激活淋巴细胞功能处于休止状态，以致IL-2产生能力下降。IL-2主要由CD+4细胞产生CD+4百分率、CD+4/CD+8比值下降，也使IL-2水平下降。脾切后免疫调节功能紊乱不仅表现在T细胞亚群及功能失调，还存在IL-2/IL-2R系统紊乱。
TNF是一种多功能细胞因子，主要由巨噬细胞和活化的T细胞产生，参与机体的炎症和免疫应答调节，具有广泛的生物学活性。其生物学活性与机体的免疫机能有关。脾切除后血清TNF水平持续升高，是由于机体在免疫功能紊乱时过度释放所致。TNF是内毒素诱导的休克和组织损伤的关键介质。TNF的升高可能导致机体对内毒素敏感性显著增高，TNF过度释放可能是脾切除术后凶险感染发病机理之一。
, 百拇医药
本文全脾切除术和脾移植术后血清T细胞亚群、sIL-2R、TNF水平变化说明，脾移植术的保留脾脏继续产生T细胞的功能方面明显优于全脾切除术。因此，在外伤性脾破裂时，若其它保脾手术不能实施，脾切除后仍应力争行自体脾组织移植术，这对维持机体的T细胞水平和增强机体的抗感染能力是有益的。 参考文献
1 King H, et al. Splenic studies:susceptibility to infection after splenectomy performed in infancy. Ann Sug, 1952,136∶239
2 Moore EE, et al. Organ injury scaling: spleen, liver and kindy. J Trauma, 1989,29∶1664
3 夏穗生，主编.现代脾脏外科学.南京：江苏科学技术出版社，1990∶21
, http://www.100md.com
4 Llende M, et al. Immunobiogical consequences of splenectocy:a review. J Surg Res, 1986,40(1)∶85
5 Barron PT, et al. Immunodeficiency following splenectomy in the early postimmunization period. Br J Surg,1990,77(3)∶316
6 Durig M, et al. Lymphpcytic subsets in human perpheral blood after splenectomy and autotransplantation of splenic tissue. J Lab Clin Med, 1984,104(1) ∶110
7 夏穗生，主编.现代脾脏外科学.南京：江苏科学技术出版社，1990∶112
, 百拇医药
8 葛海燕.不同脾切对T淋巴细胞亚群的实验观察.中国免疫杂志，1995，11∶82
9 Semenzato G, et al. Suppresseve function of sIL-2R on lymphocyte proliferation in leukemia. Blood, 1987,70∶396
10 Diamantstein T, et al. Regulation of interleukin-2 receptor expression and release. Mol Immunol,1986,23∶1165
(1999年6月15日收稿), 百拇医药
单位：苏州医学院附属二院普外科，苏州，215004
关键词：自体脾移植；T细胞亚群；可溶性白细胞介素-2受体；肿瘤坏死因子
苏州医学院学报991120 摘要 目的：探讨自体脾移植术对免疫学指标的影响。方法：将40例外伤性脾破裂分为脾移植术和全脾切除术组，各20例。对照组10例。结果：术后1周，全脾切除术组和自体脾移植组，与对照组相比，CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8降低，sIL-2R、TNF皆升高(P<0.05)。术后3个月，自体脾移植组CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8升高，sIL-2R、TNF降低(P>0.05)。而脾切除组，术后CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8持续下降，sIL-2R、TNF持续升高(P<0.05)。结论：自体脾移植对维持机体的T细胞水平和增强机体的抗感染能力有益。
, 百拇医药
中图法分类 R392.4
The Variation of the Subclasses of T Cells、sIL-2R、TNF
after Splenic Autotransplantation
Wang Haowei, Liu Genshou, Wu Haorong, et al
(Department of General Surgery, the Second Hospital Affiliated to Suzhou Medicl College, Suzhou, 215007)
Abstract Objective To study the immunological effects of splenic autotransplantation by clinical research. Method Forty patients with splenic trauma werte divided into two groups equally. One group underwent splenic autotransplantation and another splenectomy. The control group included tien cases. Result Splenic autotransplantation group and splenectomy group were compared with the control group. In the group of splenic autotransplantation,CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8 dropped and sIL-2R、TNF rised a week postoperatively. Then CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8 rised and sIL-2R、TNF dropped three months postoperatively. In the group of splenectomy, CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8 dropped persistently and sIL-2R、TNF rised postoperatively. Conclusion Splenic autotransplantation can help body to maintain T cells level and to improve the anti-infection ability.
, 百拇医药
Key words autotransplantation; T cells; sIL-2R
自1952年King和Schumacker[1]发现脾切除术后凶险性感染后，保留性脾手术在外科得到重视。在无法保留脾情况下，自体脾脏移植也应用于临床[2]。研究[3～6]表明，脾脏具有重要的免疫功能，脾切除术后可产生一系列免疫功能障碍。本文探讨脾切除术后自体脾移植，T细胞亚群及slL-2R、TNF的变化特点及对免疫功能的影响。
1 临床资料
1.1 病例：外伤性脾破裂40例中，男30例，女10例。年龄18～60岁。皆因外伤，均行急诊手术。自体脾组织大网膜内移植术(以下简称脾移植术)组和全脾切除术组各20例，术后随访1周10例，3个月5例。对照组10例，男6例，女4例。年龄20～62岁。其中合并胆囊炎、胆石症6例，十二指肠球部溃疡4例，均行相应的手术治疗。作相应时间的随访。
, 百拇医药
1.2 手术方法：全脾切除术按常规术式。脾片移植术按文献[7]方法。
1.3 实验室检查方法：外周血T细胞亚群检测采用间接免疫荧光法(ⅡFA)、血清sIL-2R检测采用常规的酶联免疫法(ELISA)法。血清TNF检测采用酶联免疫(ELISA)法。
1.4 结果
1.4.1 T细胞亚群的变化：术后1周、3个月3组CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8变化，见表1。
表1 术后1周T细胞亚群的变化(%，
±s), 百拇医药
n
CD+3
CD+4
CD+8
CD+4/CD+8
术后1周
对照组
10
63.53±5.48
37.41±1.53
, 百拇医药
23.63±2.02
1.71±0.08
脾切组
10
47.34±4.39**
29.58±1.21**
17.73±2.01**
1.61±0.35*
移植组
10
49.25±7.12**
, 百拇医药
30.25±1.31**
18.77±1.68**
1.61±0.35*
术后3个月
对照组
5
63.48±5.27
37.38±1.61
23.61±2.02
1.71±0.08
脾切组
, 百拇医药
5
53.37±4.18*
33.71±1.41*
21.07±1.87*
1.60±0.25*
移植组
5
62.23±3.16
36.80±13.67
21.52±1.01
1.70±0.12
, 百拇医药
与对照组相比，*P<0.05，**P<0.01
1.4.2 术后1周、3个月3组sIL-2R、TNF的变化：见表2。
表2 术后3组sIL-2R、TNF的变化(
±s)n
sIL-2R(U/ml)
TNF(pmol/L)
术后1周
对照组
10
86.72±5.43
, 百拇医药
10.51±3.21
脾切组
10
152.00±5.21
27.16±2.71
移植组
10
150.00±3.48
25.59±2.01
术后3个月
对照组
5
, 百拇医药 86.31±4.87
10.23±1.09
脾切组
5
132.71±8.34
25.67±3.02
移植组
5
87.58±2.36
10.34±2.15
2 讨论
机体正常的免疫应答有赖于T淋巴细胞的调节作用，尤其是辅助性(TH)和抑制性(TS)T细胞的相互制约作用和平衡有关。TH细胞有诱导和增强免疫应答作用。而TS细胞则起免疫调节的负反馈作用。本文资料表明，脾切除后导致机体细胞免疫功能的紊乱，表现为CD+3、CD+4、CD+8均减少，由于CD+4的减少较CD+8更明显，因而致使CD+4/CD+8比例下降，与文献[8]报道相符。自体脾移植术后对机体细胞免疫功能也有影响。术后病人血CD+3、CD+4、CD+8及CD+4/CD+8均显著下降。至术后3个月渐渐地接近正常，CD4/CD8比值亦接近正常，与文献[6]报道相符。脾移植术后，T细胞亚群浓度近期降低，远期恢复近于正常的变化规律，反映了移植再生脾的功能要经历3个月以上的代偿时间才逐渐近于正常。
, http://www.100md.com
sIL-2R参与机体的免疫应答与免疫调节。sIL-2R浓度是外周血循环中单核细胞活性敏感的定量指标，也能反映其它组织或间隙中体液的免疫活性。本研究结果显示，脾切除后外周血sIL-2R水平持续升高；而脾移植组外周血sIL-2R水平在术后早期升高，术后远期逐渐下降接近正常。脾切除后外周血CD+3、CD+4、CD+8及CD+4/CD+8比值下降而血清sIL-2R水平明显升高，提示CD+3、CD+4、CD+8的减少可能与sIL-2R本身在免疫调节中的作用相关。有实验证实[9]，在含高水平sIL-2R的白血病患者血清中有一免疫抑制物质，可以抑制T淋巴细胞的增殖反应，这种抑制作用可被抗Tac抗体所阻断。当患者血清中sIL-2R水平下降时，则出现T细胞增殖反应增强。因此可以认为，脾切除后外周血CD+3、CD+4、CD+8及CD+4/CD+8的下降与血清sIL-2R水平升高有一定关系。
, http://www.100md.com
sIL-2R水平升高与体内淋巴细胞处于高激活状态有关[10]。由于sIL-2R大量释放，封闭IL-2的作用，同时mIL-2R(膜白细胞介素-2受体)不断脱落，使激活淋巴细胞功能处于休止状态，以致IL-2产生能力下降。IL-2主要由CD+4细胞产生CD+4百分率、CD+4/CD+8比值下降，也使IL-2水平下降。脾切后免疫调节功能紊乱不仅表现在T细胞亚群及功能失调，还存在IL-2/IL-2R系统紊乱。
TNF是一种多功能细胞因子，主要由巨噬细胞和活化的T细胞产生，参与机体的炎症和免疫应答调节，具有广泛的生物学活性。其生物学活性与机体的免疫机能有关。脾切除后血清TNF水平持续升高，是由于机体在免疫功能紊乱时过度释放所致。TNF是内毒素诱导的休克和组织损伤的关键介质。TNF的升高可能导致机体对内毒素敏感性显著增高，TNF过度释放可能是脾切除术后凶险感染发病机理之一。
, 百拇医药
本文全脾切除术和脾移植术后血清T细胞亚群、sIL-2R、TNF水平变化说明，脾移植术的保留脾脏继续产生T细胞的功能方面明显优于全脾切除术。因此，在外伤性脾破裂时，若其它保脾手术不能实施，脾切除后仍应力争行自体脾组织移植术，这对维持机体的T细胞水平和增强机体的抗感染能力是有益的。 参考文献
1 King H, et al. Splenic studies:susceptibility to infection after splenectomy performed in infancy. Ann Sug, 1952,136∶239
2 Moore EE, et al. Organ injury scaling: spleen, liver and kindy. J Trauma, 1989,29∶1664
3 夏穗生，主编.现代脾脏外科学.南京：江苏科学技术出版社，1990∶21
, http://www.100md.com
4 Llende M, et al. Immunobiogical consequences of splenectocy:a review. J Surg Res, 1986,40(1)∶85
5 Barron PT, et al. Immunodeficiency following splenectomy in the early postimmunization period. Br J Surg,1990,77(3)∶316
6 Durig M, et al. Lymphpcytic subsets in human perpheral blood after splenectomy and autotransplantation of splenic tissue. J Lab Clin Med, 1984,104(1) ∶110
7 夏穗生，主编.现代脾脏外科学.南京：江苏科学技术出版社，1990∶112
, 百拇医药
8 葛海燕.不同脾切对T淋巴细胞亚群的实验观察.中国免疫杂志，1995，11∶82
9 Semenzato G, et al. Suppresseve function of sIL-2R on lymphocyte proliferation in leukemia. Blood, 1987,70∶396
10 Diamantstein T, et al. Regulation of interleukin-2 receptor expression and release. Mol Immunol,1986,23∶1165
(1999年6月15日收稿), 百拇医药