66例血液病患者血小板输注效果与HLA关联的研究
作者：陈澍英 邹小立 林伟 佘妙容 林惠群 黄小莹 黄梓伦 肖露露 叶欣 马琳雅
单位：陈澍英 邹小立 林伟 佘妙容 林惠群 黄小莹 黄梓伦 广东省人民医院血液内科(510080)；肖露露 叶欣 马琳雅 广州中心血站器官移植配型中心(510095)
关键词：血小板输注；淋巴细胞毒试验；人类组织相容性系统；血小板校正增加值
广东医学990704 【摘要】 目的 探讨血液病患者血小板输注的治疗效果与人类组织相容性系统(HLA)之间的相关性。方法 采用淋巴细胞毒试验(lymphocyte cytotoxicity test, LCT)和HLA-Ⅰ类分型，研究了66例接受血小板输注的住院病人。血小板校正增加值(corrected count increment, CCI)与LCT的关系。结果 血小板输注无效与LCT阳性率、LCT强度之间呈强关联(P均<0.01)。结论 研究提示，LCT阳性是造成病人血小板输注无效的主要的免疫性因素。输注前检测LCT可预测病人输注效果。用HLA配合的血小板输注可改善血小板输注的疗效。
, http://www.100md.com
The relationship between the effects of platelet transfusions and HLA in 66 cases of hematology malignance
Chen Shuying, Zou Xiaoli, Lin Wei, et al.
Department of Hematology, Guangdong Provincial People's Hospital, Guangzhou 510080.
【Abstract】 Objective To explore the relationship between the therapeutic effects of platelet transfusion and human histocompatibility antigen system (HLA). Methods The relationship between the corrected count increment (CCI) of platelet with lymphocytotoxicity test (LCT) were studied by using lymphocytotoxicity test and human histocompatibility antigen system-Ⅰ subtype (HLA-Ⅰ) in 66 cases of hospitalized patients who were treated with platelet transfusion. Results Ineffective platelet transfusion was strongly related to LCT positive and LCT intensity (P<0.01). Conclusion It is suggested that LCT positive is mainly immune factor for ineffective platelet transfusion. Effects of transfusion may be predicted if LCT is measured before transfusion. Effects of platelet transfusion may be improved by using the HLA-matched platelet.
, 百拇医药
【Key words】 Platelet transfusion Lymphocytotoxicity test Human histocompatibility antigen system Corrected count increment of platelet
随着血小板输注量的逐年增长，相继产生的同种免疫性反应，使血小板输注无效，已成为国内外临床极为棘手的问题。我们在1996年2月～1998年2月对66例长期输注血小板的血液病患者，进行了血小板输注效果和HLA相关联的研究。
1 材料与方法
1.1 病例选择 66例血液病患者中急性白血病(AL)30例，再生障碍性贫血(AA)15例，非霍奇金淋巴瘤(NHL)5例，慢性粒细胞白血病急性变(CML-BC)4例，骨髓增生异常综合征(MDS)4例，多发性骨髓瘤(MM)2例，恶性组织细胞病(MH)3例，溶血性贫血3例。男性41例，女性25例，年龄14～74岁，既往均反复输血，但未输过浓缩白细胞。
, http://www.100md.com
1.2 排除非免疫因素所致血小板消耗的标准 参照文献[1]，根据临床表现、体征和实验室检查确认败血症、急慢性溶血、弥散性血管内凝血(DIC)和脾大等造成血小板减少的因素。
1.3 血小板输注效果 自动血细胞分离机单采血小板悬液每袋含血小板2.5×1011，每例患者每次输一袋。采用血小板计数进行输注后CCI测算，CCI=输后血小板增加值×体表面积(m2)/输注血小板总数×1011，若输后CCI 1 h>10×109/L， 24 h>7.5×109/L为有效[2]。所有研究病例平均接受血小板输注次数5次(3～9次)，每次血小板输注后均做CCI测算。
1.4 淋巴细胞毒试验(LCT)和HLA-Ⅰ类分型 按照文献[3]的方法，所有病例每次血小板输注前、后各一次LCT检测。
, 百拇医药
1.5 统计处理 采用电子计算机回归分析软件进行数据处理分析。
2 结果
2.1 CCI有效率 66例患者CCI有效23例，CCI无效43例。无效患者中因非免疫因素所致为18例(败血症6例，溶血3例，DIC 9例)，排除非免疫因素后实际研究病例为48名患者。48例中CCI有效23例(47.9%)，CCI无效25例(52.1%)。CCI有效患者中LCT阳性3例(13.0%)，CCI无效患者中LCT阳性19例(76.0%)，前者的LCT强度为(9.4±5.0)%，后者的LCT强度为(41.8±25.5)%；CCI有效组与无效组之间的LCT阳性率和强度均呈显著差异(P<0.01)。
2.2 LCT阳性率 48例患者中血小板输注前LCT均为阴性，输注血小板后LCT阳性22例(45.8%)。男性占41.4%(12/29)，女性占52.6%(10/19)。其中白血病LCT阳性率57.7%(15/26)，非白血病LCT阳性率31.8%(7/22)。22例LCT阳性患者中CCI无效19例(86.4%)，26例LCT阴性患者中CCI无效6例(23.1%)，二者呈显著差异(P<0.01)。LCT阳性者1 h CCI值(7.3±5.7)×109/L，24 h CCI值(7.4±6.0)×109/L；LCT阴性者CCI值1 h (15.0±11.5)×109/L，24 h CCI值(15.6±12.3)×109/L，两者间呈显著差异(P<0.01)。
, 百拇医药
此外，AL患者LCT阳性率为45.8%(11/24)，CCI无效58.3%(14/24)；AA患者LCT阳性率为16.7%(2/12)，CCI无效50%(6/12)。
2.3 HLA-Ⅰ类抗原 随机选择20例血小板输注的患者作HLA分型，CCI无效11例中，有HLA-2基因表达占10例(90.9%)，其中LCT阳性8例(80.0%)，CCI有效的9例中有HLA-A2基因表达仅1例(11.1%)，其中LCT阳性2例(22.2%)，两者间均有显著差异(P<0.01)。
3 讨论
血小板输注是现代医学治疗的一种有效措施，然而大量反复输注血小板易产生血小板同种免疫，导致患者输注血小板后CCI低值，即血小板输注无效。本文CCI无效率为52.1%，与文献报道血液病患者治疗过程中血小板输注无效发生率40%～50%[4]接近，高于Chow等报道的35%[5]。但是，在不同疾病的调查中，本文AL组和AA组CCI无效率分别为58.3%和50%，与Schiffer报道AL为24%，AA为80%不相同[6]。文献报道输注血小板后免疫抗体阳性率为8%～100%[6]，本文LCT阳性率为45.8%，与Dutcher等[7]报道50%～70%接近，本文调查白血病和非白血病中LCT阳性率各自为57.7%和31.8%，与Linn等报道的各自为69%和85%有差别[8]。
, http://www.100md.com
文献报道，造成同种免疫反应物质主要是HLA抗体，占92%，其次为血小板特异性抗体，占8%[1]。本文25例血小板输注无效中LCT阳性占76%，与Freedman报道75%一致[9]。22例LCT阳性者输注无效占86.4%与26例LCT阴性者的23.1%之间差异显著；LCT阳性者1 h和24 h CCI(
)<7.5×109/L，均显著低于LCT阴性者的CCI>15×109/L；CCI无效组LCT强度41.8%明显高于CCI有效组的9.4%；上述4组数据证明，LCT强度与CCI值呈负相关，HLA抗体是导致血小板输注无效的重要因素。因此，输注有效组LCT强度较低，输注无效组则高；即HLA抗体强度指数越高发生输注无效的可能性越大，反之发生输注无效的可能性较小。
LCT阳性患者中男女性占41.4%∶52.6%，可能是由于女性既往妊娠接触过HLA抗原刺激，输注血小板时再次遭遇相应的抗原迅速引起回忆性反应，所以免疫反应发生率比男性高。
, http://www.100md.com
本文发现输注无效者中表达HLA-A2基因为90.9%，LCT阳性率为80%；输注有效者中表达HLA-A2基因为11.1%，LCT阳性率为22.2%，这种显著差异反映血小板输注无效与HLA-A2基因有关，并且可为同种免疫性抗体的产生机理及适合性血小板输血等预防方法的开展提供依据。
本课题为广东省科委重点攻关项目(粤科计号1997-114-19)
参考文献
1 Mcfarland JG, Anderson AJ, Slichtern SI. Factors influencing the transfusion response to HLA-selected apheresis donor platelets in patients refractory to random plateletes in patients refractory to random platelet concentrates. Br J Haematol,1989,73:380
, http://www.100md.com
2 Hogge DE, Dutcher JP, Aisner J, et al. Lymphocytotoric antibody is a predictor of response to random donor platelet transfusion. Am J Hematol,1983,14:363
3 Pamphlion DH, Farrell DH, Donaldson C, et al. Develepment of lymphcytoxin and platelet reactive antibodies: a prospective study in patients with acute leukemia. Vox Sang,1989,57:177
4 陈澍英，肖露露，黄梓伦，等.血小板输注与HLA同种免疫相关的研究概况.实用医学杂志，1997，13(9)：618
, http://www.100md.com 5 Chow MP, Hu Hy, Lyou Jy, et al. Red cells HLA and platelet antibody formation in patients with multiple transfusion. Taiwan Acta Haematol,1994,92(2):57
6 Schiffer CA. Pervention of alloimmunization platelet transfusion recipients. Plateletd Immunobiology,1988,48：454
7 Dutcher JP, Schiffer CA, Aisner J, et al, Alloimmunization following plateket transfusion: the absence of a dose-response relationship. Blood,1981,57(3):395
8 Linn Yc, Prakash P, Ong Yw. A study of platelet alloantibody in multiply transfused haematology patients Singapore. Ann Acad Med Singapore,1995,24(2):305
9 Freedman J. Random donor platelet crosmatching currect study. Hematol Blood Transfusion,1986,52:65, http://www.100md.com
单位：陈澍英 邹小立 林伟 佘妙容 林惠群 黄小莹 黄梓伦 广东省人民医院血液内科(510080)；肖露露 叶欣 马琳雅 广州中心血站器官移植配型中心(510095)
关键词：血小板输注；淋巴细胞毒试验；人类组织相容性系统；血小板校正增加值
广东医学990704 【摘要】 目的 探讨血液病患者血小板输注的治疗效果与人类组织相容性系统(HLA)之间的相关性。方法 采用淋巴细胞毒试验(lymphocyte cytotoxicity test, LCT)和HLA-Ⅰ类分型，研究了66例接受血小板输注的住院病人。血小板校正增加值(corrected count increment, CCI)与LCT的关系。结果 血小板输注无效与LCT阳性率、LCT强度之间呈强关联(P均<0.01)。结论 研究提示，LCT阳性是造成病人血小板输注无效的主要的免疫性因素。输注前检测LCT可预测病人输注效果。用HLA配合的血小板输注可改善血小板输注的疗效。
, http://www.100md.com
The relationship between the effects of platelet transfusions and HLA in 66 cases of hematology malignance
Chen Shuying, Zou Xiaoli, Lin Wei, et al.
Department of Hematology, Guangdong Provincial People's Hospital, Guangzhou 510080.
【Abstract】 Objective To explore the relationship between the therapeutic effects of platelet transfusion and human histocompatibility antigen system (HLA). Methods The relationship between the corrected count increment (CCI) of platelet with lymphocytotoxicity test (LCT) were studied by using lymphocytotoxicity test and human histocompatibility antigen system-Ⅰ subtype (HLA-Ⅰ) in 66 cases of hospitalized patients who were treated with platelet transfusion. Results Ineffective platelet transfusion was strongly related to LCT positive and LCT intensity (P<0.01). Conclusion It is suggested that LCT positive is mainly immune factor for ineffective platelet transfusion. Effects of transfusion may be predicted if LCT is measured before transfusion. Effects of platelet transfusion may be improved by using the HLA-matched platelet.
, 百拇医药
【Key words】 Platelet transfusion Lymphocytotoxicity test Human histocompatibility antigen system Corrected count increment of platelet
随着血小板输注量的逐年增长，相继产生的同种免疫性反应，使血小板输注无效，已成为国内外临床极为棘手的问题。我们在1996年2月～1998年2月对66例长期输注血小板的血液病患者，进行了血小板输注效果和HLA相关联的研究。
1 材料与方法
1.1 病例选择 66例血液病患者中急性白血病(AL)30例，再生障碍性贫血(AA)15例，非霍奇金淋巴瘤(NHL)5例，慢性粒细胞白血病急性变(CML-BC)4例，骨髓增生异常综合征(MDS)4例，多发性骨髓瘤(MM)2例，恶性组织细胞病(MH)3例，溶血性贫血3例。男性41例，女性25例，年龄14～74岁，既往均反复输血，但未输过浓缩白细胞。
, http://www.100md.com
1.2 排除非免疫因素所致血小板消耗的标准 参照文献[1]，根据临床表现、体征和实验室检查确认败血症、急慢性溶血、弥散性血管内凝血(DIC)和脾大等造成血小板减少的因素。
1.3 血小板输注效果 自动血细胞分离机单采血小板悬液每袋含血小板2.5×1011，每例患者每次输一袋。采用血小板计数进行输注后CCI测算，CCI=输后血小板增加值×体表面积(m2)/输注血小板总数×1011，若输后CCI 1 h>10×109/L， 24 h>7.5×109/L为有效[2]。所有研究病例平均接受血小板输注次数5次(3～9次)，每次血小板输注后均做CCI测算。
1.4 淋巴细胞毒试验(LCT)和HLA-Ⅰ类分型 按照文献[3]的方法，所有病例每次血小板输注前、后各一次LCT检测。
, 百拇医药
1.5 统计处理 采用电子计算机回归分析软件进行数据处理分析。
2 结果
2.1 CCI有效率 66例患者CCI有效23例，CCI无效43例。无效患者中因非免疫因素所致为18例(败血症6例，溶血3例，DIC 9例)，排除非免疫因素后实际研究病例为48名患者。48例中CCI有效23例(47.9%)，CCI无效25例(52.1%)。CCI有效患者中LCT阳性3例(13.0%)，CCI无效患者中LCT阳性19例(76.0%)，前者的LCT强度为(9.4±5.0)%，后者的LCT强度为(41.8±25.5)%；CCI有效组与无效组之间的LCT阳性率和强度均呈显著差异(P<0.01)。
2.2 LCT阳性率 48例患者中血小板输注前LCT均为阴性，输注血小板后LCT阳性22例(45.8%)。男性占41.4%(12/29)，女性占52.6%(10/19)。其中白血病LCT阳性率57.7%(15/26)，非白血病LCT阳性率31.8%(7/22)。22例LCT阳性患者中CCI无效19例(86.4%)，26例LCT阴性患者中CCI无效6例(23.1%)，二者呈显著差异(P<0.01)。LCT阳性者1 h CCI值(7.3±5.7)×109/L，24 h CCI值(7.4±6.0)×109/L；LCT阴性者CCI值1 h (15.0±11.5)×109/L，24 h CCI值(15.6±12.3)×109/L，两者间呈显著差异(P<0.01)。
, 百拇医药
此外，AL患者LCT阳性率为45.8%(11/24)，CCI无效58.3%(14/24)；AA患者LCT阳性率为16.7%(2/12)，CCI无效50%(6/12)。
2.3 HLA-Ⅰ类抗原 随机选择20例血小板输注的患者作HLA分型，CCI无效11例中，有HLA-2基因表达占10例(90.9%)，其中LCT阳性8例(80.0%)，CCI有效的9例中有HLA-A2基因表达仅1例(11.1%)，其中LCT阳性2例(22.2%)，两者间均有显著差异(P<0.01)。
3 讨论
血小板输注是现代医学治疗的一种有效措施，然而大量反复输注血小板易产生血小板同种免疫，导致患者输注血小板后CCI低值，即血小板输注无效。本文CCI无效率为52.1%，与文献报道血液病患者治疗过程中血小板输注无效发生率40%～50%[4]接近，高于Chow等报道的35%[5]。但是，在不同疾病的调查中，本文AL组和AA组CCI无效率分别为58.3%和50%，与Schiffer报道AL为24%，AA为80%不相同[6]。文献报道输注血小板后免疫抗体阳性率为8%～100%[6]，本文LCT阳性率为45.8%，与Dutcher等[7]报道50%～70%接近，本文调查白血病和非白血病中LCT阳性率各自为57.7%和31.8%，与Linn等报道的各自为69%和85%有差别[8]。
, http://www.100md.com
文献报道，造成同种免疫反应物质主要是HLA抗体，占92%，其次为血小板特异性抗体，占8%[1]。本文25例血小板输注无效中LCT阳性占76%，与Freedman报道75%一致[9]。22例LCT阳性者输注无效占86.4%与26例LCT阴性者的23.1%之间差异显著；LCT阳性者1 h和24 h CCI(
)<7.5×109/L，均显著低于LCT阴性者的CCI>15×109/L；CCI无效组LCT强度41.8%明显高于CCI有效组的9.4%；上述4组数据证明，LCT强度与CCI值呈负相关，HLA抗体是导致血小板输注无效的重要因素。因此，输注有效组LCT强度较低，输注无效组则高；即HLA抗体强度指数越高发生输注无效的可能性越大，反之发生输注无效的可能性较小。LCT阳性患者中男女性占41.4%∶52.6%，可能是由于女性既往妊娠接触过HLA抗原刺激，输注血小板时再次遭遇相应的抗原迅速引起回忆性反应，所以免疫反应发生率比男性高。
, http://www.100md.com
本文发现输注无效者中表达HLA-A2基因为90.9%，LCT阳性率为80%；输注有效者中表达HLA-A2基因为11.1%，LCT阳性率为22.2%，这种显著差异反映血小板输注无效与HLA-A2基因有关，并且可为同种免疫性抗体的产生机理及适合性血小板输血等预防方法的开展提供依据。
本课题为广东省科委重点攻关项目(粤科计号1997-114-19)
参考文献
1 Mcfarland JG, Anderson AJ, Slichtern SI. Factors influencing the transfusion response to HLA-selected apheresis donor platelets in patients refractory to random plateletes in patients refractory to random platelet concentrates. Br J Haematol,1989,73:380
, http://www.100md.com
2 Hogge DE, Dutcher JP, Aisner J, et al. Lymphocytotoric antibody is a predictor of response to random donor platelet transfusion. Am J Hematol,1983,14:363
3 Pamphlion DH, Farrell DH, Donaldson C, et al. Develepment of lymphcytoxin and platelet reactive antibodies: a prospective study in patients with acute leukemia. Vox Sang,1989,57:177
4 陈澍英，肖露露，黄梓伦，等.血小板输注与HLA同种免疫相关的研究概况.实用医学杂志，1997，13(9)：618
, http://www.100md.com 5 Chow MP, Hu Hy, Lyou Jy, et al. Red cells HLA and platelet antibody formation in patients with multiple transfusion. Taiwan Acta Haematol,1994,92(2):57
6 Schiffer CA. Pervention of alloimmunization platelet transfusion recipients. Plateletd Immunobiology,1988,48：454
7 Dutcher JP, Schiffer CA, Aisner J, et al, Alloimmunization following plateket transfusion: the absence of a dose-response relationship. Blood,1981,57(3):395
8 Linn Yc, Prakash P, Ong Yw. A study of platelet alloantibody in multiply transfused haematology patients Singapore. Ann Acad Med Singapore,1995,24(2):305
9 Freedman J. Random donor platelet crosmatching currect study. Hematol Blood Transfusion,1986,52:65, http://www.100md.com