内折香茶菜乙素抗肿瘤作用的实验研究
作者：叶启霞 李继成 杨丽嘉 刘兰琦 魏育今
单位：叶启霞(河南省医学科学研究所 郑州 450052)；李继成 杨丽嘉 刘兰琦(河南医科大学医学实验中心 郑州 450052)；魏育今(河南医科大学第一附属医院耳鼻咽喉科 郑州 450052)
关键词：内折香茶菜乙素；艾氏腹水癌；肉瘤180；肝肿瘤；Lewis肺肿瘤；药物作用
河南医科大学学报000213摘 要：目的：研究内折香茶菜乙素(以下简称内折乙素)对动物移植性肿瘤的作用以及对机体免疫状态的影响。方法：以动物移植性肿瘤艾氏腹水癌(ECA)、肉瘤180(S180)、肝癌(HCA)、Lewis肺癌为模型，以5-Fu为阳性对照组，以生理盐水为阴性对照组，观察12.5 mg/kg和25mg/kg内折乙素的抗肿瘤作用，并采用小鼠溶血素实验和小鼠迟发性变态反应实验观察内折乙素对机体免疫状态的影响。结果：内折乙素与阴性对照组相比在体外对ECA肿瘤细胞有较强的杀伤力，在体内对S180实体型和腹水型肿瘤，HCA实体型和腹水型肿瘤以及Lewis肺癌实体型肿瘤均有较强的抑瘤作用，与阳性对照组相比，对机体免疫状态无明显影响。结论：内折乙素具有较强的抗肿瘤作用，且对机体免疫状态无明显影响。
, 百拇医药
分类号：R284.2
Study on the antitumor effect of Rabdosia Inflexusin B(Thundkundo)
YE Qixia
(Henan Medical Institute, Zhengzhou 450052)
LI Jicheng,YANG Lijia,LIU Lanqi
(Laboratory Center of Medical Research,Henan Medical University,Zhengzhou 450052)
WIE Yujin
, 百拇医药 (Department of Otolaryngology,the First Affiliated Hospital,Henan Medical University,Zhengzhou 450052)
Abstract：Aim：To study the effects of Rabdosia Inflexusin B on transplanted tumors and the immunological influence in mice.Methods:The antitumor effects of Inflexusin B in 12.5 mg/kg and 25 mg/kg dosage on Ehrlich ascites carcinoma(ECA),Sarcoma180(S180),hepatoma carcinoma (HCA),and Lewis lung carcinoma(Lewis)were investigated by using the inplanted tumor animal models.The immunological effects were observed by using hemolysin and delayed hypersensitive tests in mice.The 5-Fu was used as positive control and the normal saline as blank control.Results:It showed that Inflexusin B had significant cytotoxicity against ECA cell in vitro and had high antitumor activity against S180 solid and ascites,HCA solid and ascites and Lewis solid in vivo when compared with the blank control.There was no prominent influence of Inflexusin on immunological state of the animals when compared with 5-Fu.Conclusion:Infexusin B has relative high potent antitumor effect and no obvious influence on immunological state of the animals.
, 百拇医药
Key words：Inflexusin B;Ehrlich awcites carcinoma;sarcoma180;hepatoma carcinoma;Lewis lung carcinoma;drug effect▲
内折香茶菜(Rabdosia inflesus(Thundkundo))是冬凌草(Rabdusia rubencens)同科同属植物，广泛分布于河南、江苏、四川、安徽、山东等地。本课题组对内折香茶菜粗制剂进行了药理作用的前期研究，结果表明，其对体内和体外的艾氏腹水癌(Ehrlich ascites carcinoma,ECA)肿瘤细胞有明显的抑制作用。从内折香茶菜中提取的单体——内折香茶菜乙素(简称内折乙素)属于新的二萜类化合物[1]，经鉴定其纯度为99%。作者采用多种动物移植性肿瘤模型，观察内折乙素对动物肿瘤的抑制作用，并对动物溶血素水平和迟发性超敏反应进行了检测，观察内折乙素对机体免疫功能的影响。
1 材料与方法
, 百拇医药
1.1 材料 内折乙素由河南医科大学医学实验中心新药研究室提供，实验时用生理盐水稀释到所需含量备用。由河南医科大学实验动物中心提供昆明种小白鼠128只，C57纯系小鼠32只，体重为(20±2)g，雌雄兼用。实验室温度为22～25 ℃，常规饲料喂养，饮水量不限。瘤株包括ECA、肉瘤180(S180)实体型及腹水型，肝癌(HCA)实体型及腹水型、Lewis肺癌实体型，各瘤株均由河南省医学科学研究所药理室保种，按常规方法传代接种。
1.2 方法
1.2.1 内折乙素对体外培养的ECA瘤细胞生长的影响：无菌条件下，抽取荷ECA肿瘤小鼠腹水，混悬于RPMI 1640完全培养液中，调细胞浓度为5×105 ml-1，接种于培养瓶中，每瓶接种细胞悬液1.9 ml，按拟定剂量加入内折乙素药液0.1 ml，总体积2 ml，置体积分数为5% CO2培养箱中37 ℃培养24 h后取出，采用台盼兰拒染法测定细胞杀伤率[2]。
, 百拇医药
1.2.2 内折乙素体内的抗肿瘤作用：抗S180和抗HCA实验组动物均为昆明种小白鼠，抗Lewis肺癌实验组动物为C57纯系小鼠，各实验组均分为4组：阴性对照组，生理盐水10 ml/kg；阳性对照组，5-Fu 20 mg/kg；内折乙素低剂量组，12.5 mg/kg；内折乙素高剂量组，25 mg/kg；每组8只动物。实验按常规方法接种，接种后次日按拟定剂量腹腔注射(ip)给药，1次/d，连续10 d。腹水型肿瘤以生命延长率为疗效指标，停药后继续观察60 d，死亡动物以实际存活时间为生存时间，长期存活动物以60 d为生存时间计算。实体型肿瘤以瘤重抑制率作为疗效指标，于停药次日将肿瘤剖出精确称重。实验结果的统计学方法用t检验。
1.2.3 对机体免疫功能的影响[3]：采用小鼠溶血素实验，测定本品对小鼠体液免疫状态的影响，本实验分组同1.2.2，用昆明种小鼠进行实验。以体积分数20%绵羊红细胞对小鼠致敏，0.5 ml/鼠，于致敏后第2 d给药，连用5 d，于致敏后第5 d进行免疫实验，取灭活的小鼠眼眶血清2 ml，以2倍稀释法加入每一试管，每试管加入体积分数0.03%绵羊红细胞0.2 ml及体积分数为20%豚鼠血清0.2 ml，充分摇匀，于37 ℃培养30 min,观察其最大溶血稀释度。采用小鼠迟发性超敏反应实验，测定本品对小鼠细胞免疫状态的影响，实验分组同前，各用药组动物按拟定剂量连续用药10 d，实验的第5 d于小鼠腹部用新鲜配制的10 g/L 2,4-二硝基氯苯(DNCB)丙酮、麻油溶液50 μl致敏(丙酮麻油体积之比为1∶1)，第11 d再以新鲜配制的10 g/L DNCB丙酮、麻油10 μl涂于小鼠右耳进行攻击，24 h处死动物，剪下小鼠左右两耳壳，用打孔器打下直径为8 mm的耳片精确称重，以左右两耳重量之差为肿胀度，同时取其胸腺、脾脏精确称重。计算其脾指数和胸腺指数，实验结果用
表示，组间比较用t检验。
, 百拇医药
2 结果
2.1 内折乙素对体外培养的ECA瘤细胞生长的影响 见表1。
表1 内折乙素对体外培养的ECA瘤细胞生长的影响 组 别
ρ(内折乙素)/(mg.L-1)
兰染率/%
对照组
生理盐水0.1 ml
0～5
用药组1
2.000
, 百拇医药
100
用药组2
1.000
100
用药组3
0.500
87
用药组4
0.250
64
用药组5
0.125
48
, 百拇医药
由表1可以看出，内折乙素剂量为2 mg/L时，细胞杀伤率为100%，当减小到0.125 mg/L时则为48%，作用明显减弱，表明该化合物在体外对ECA肿瘤细胞有较强的细胞毒作用，且随剂量增大而作用增强。
2.2 内折乙素体内抗肿瘤作用 见表2～6。
表2 内折乙素对小鼠实体型Lewis肺癌的作用 组别组
n
体重/g
瘤重/g
抑瘤率/%
始
末
始
, 百拇医药
末
阴性对照组
8
8
18.88±0.83
23.50±1.28
3.07±0.34
-
阳性对照组
8
8
19.00±0.93
19.69±0.75
, http://www.100md.com
1.18±0.78*
62.79
低剂量
内折乙素组
8
8
18.88±0.89
20.88±0.69
1.69±0.58*
44.95
高剂量
内折乙素组
, 百拇医药
8
8
18.80±0.89
21.13±1.03
1.48±0.68*
51.50
*与阴性对照组比较P<0.05
表3 内折乙素对小鼠实体型S180的作用 组 别
n
体重/g
瘤重/g
抑瘤率/%
, http://www.100md.com
始
末
始
末
阴性对照组
8
8
20.00±0.93
23.06±1.29
2.55±0.65
-
阳性对照组
8
, 百拇医药
8
20.00±0.46
22.88±1.25
1.21±0.19*
52.7
低剂量
内折乙素组
8
8
19.63±0.74
22.00±2.28
2.08±0.72*
, 百拇医药
18.4
高剂量
内折乙素组
8
8
19.37±1.06
23.13±1.38
1.48±0.73*
45.1
*与阴性对照组比较P<0.05
表4 内折乙素对小鼠实体型HCA的作用 组 别
n
, 百拇医药
体重/g
瘤重/g
抑瘤率/%
始
末
始
末
阴性对照组
8
8
19.13±0.64
24.88±1.46
3.36±0.41
, 百拇医药
-
阳性对照组
8
8
19.63±1.41
22.13±0.83
1.89±0.01*
43.75
低剂量
内折乙素
8
8
19.83±1.06
, 百拇医药
25.5±1.77
2.13±0.53*
36.6
高剂量
内折乙素
8
8
19.13±0.35
22.5±1.19
1.82±0.87*
45.83
*与阴性对照组比较P<0.05
, http://www.100md.com
表5 内折乙素对小鼠腹水型S180的作用 组 别
n
体重/g
t(存活)/d
生命延长率/%
始
末
始
末
阴性对照组
8
0
20.13±1.13
, 百拇医药
27.13±9.36
12.37±0.74
-
阳性对照组
8
1
19.75±0.46
23.38±2.13
40.00±11.30*
223.36
低剂量内折乙素
8
, 百拇医药
0
19.63±0.74
29.25±1.58
27.63±05.88*
123.36
高剂量内折乙素
8
0
19.63±0.74
24.38±2.01
36.50±06.48*
195.07
, 百拇医药
*与阴性对照组比较P<0.05
表6 内折乙素对小鼠腹水型HCA的作用 组 别
n
体重/g
t(存活)/d
生命延长率/%
始
末
始
末
阴性对照组
8
, http://www.100md.com 0
18.50±1.13
27.88±2.69
13.25±01.29
-
阳性对照组
8
2
09.13±0.78
22.63±3.42
35.13±07.67*
165.13
, 百拇医药
低剂量内折乙素
8
0
18.75±0.71
27.31±2.89
23.50±09.61*
73.50
高剂量内折乙素
8
2
19.13±0.83
26.63±3.94
, http://www.100md.com
33.00±19.22*
149.06
*与阴性对照组比较P<0.05
2.3 内折乙素对小鼠溶血素的影响 对照组的最大溶血稀释度为1∶512，内折乙素低、高2剂量组的最大溶血稀释度分别为1∶512，1∶256，5-Fu组的最大溶血稀释度为1∶32，表明本品在25 mg/kg剂量时，对以溶血素反应为指标的体液免疫可能有轻度抑制作用。
2.4 内折乙素对DNCB诱导的小鼠迟发性超敏反应的影响 见表7。
表7 内折乙素对DNCB
诱导的小鼠迟发性超敏反应的影响 (n=8) 组 别
耳肿胀度/mg
, 百拇医药
脾指数
/(mg.g-1)
胸腺指数
/(mg.g-1)
阴性对照组
1.53±0.21
8.452±0.824
4.504±0.439
阳性对照组
, 百拇医药 2.02±0.33*
4.382±0.902*
1.921±0.307*
低剂量
内折乙素
1.67±2.04
7.645±0.961
3.966±0.537
高剂量
内折乙素
, http://www.100md.com 1.65±2.87
7.965±0.745
4.335±0.214
*与阴性对照组比较P<0.05
3 讨论
从体内、外实验结果来看，内折乙素具有较强的抗肿瘤作用，且抗瘤谱较广，能抑制Lewis肺癌、S180实体型以及HCA实体型等实体瘤的增长，也能明显增加荷S180腹水型和荷HCA腹水型小鼠的生命延长率，其抗肿瘤作用的强弱呈剂量依赖性，本实验设有12.5 mg/kg和25 mg/kg 2剂量组，其中以25 mg/kg为最好。内折乙素小剂量有一定的抑瘤作用，而高剂量组则有明显抗肿瘤作用，与阴性对照组相比差异有显著性，而与阳性对照组相比则差异无显著性。机体免疫功能影响的实验结果证明，内折乙素对小鼠细胞免疫无影响，在25 mg/kg剂量时，对小鼠溶血素水平有较轻微抑制，表明在该剂量时，本品对小鼠的体液免疫有较轻微影响，但与阳性对照组相比，差异显著。5-Fu作为本实验阳性对照药，对小鼠各瘤株有明显的抑制作用，其抑瘤率与阴性对照组相比，均有明显差异，但免疫实验结果又表明，5-Fu对机体免疫亦呈现明显抑制作用，这样就限制了本品在临床上的应用。
, 百拇医药
内折乙素的抗肿瘤作用虽然稍逊于5-Fu，但仍显示出较强的抗肿瘤作用，而免疫实验结果又表明，其对机体免疫功能没有明显影响，且由于内折乙素可从内折香茶菜中提取，内折香茶菜又盛产于河南、江苏、四川、安徽、山东等地，资源丰富，表明该化合物具有较好的临床应用价值，可作为一种有前途的抗肿瘤药物，对其进一步深入研究与开发。
基金项目：河南省科技攻关资助项目 991180121
作者简介：李继成，男，48岁，大学本科，研究方向：内折香茶菜抗肿瘤作用及机制.
参考文献：
[1]李继成，袁宝梅，苏金玲，等.内折香茶菜乙素的化学结果.中草药，1996，27(6)：232
[2]王庆端，王绵英，刘海君，等.鲁山冬凌草甲素的抗肿瘤作用研究.河南医科大学学报，1987，22(4)：372
[3]徐叔云.药理实验方法学.第2版.北京：人民卫生出版社，1992.
(收稿日期：1999-10-10), 百拇医药
单位：叶启霞(河南省医学科学研究所 郑州 450052)；李继成 杨丽嘉 刘兰琦(河南医科大学医学实验中心 郑州 450052)；魏育今(河南医科大学第一附属医院耳鼻咽喉科 郑州 450052)
关键词：内折香茶菜乙素；艾氏腹水癌；肉瘤180；肝肿瘤；Lewis肺肿瘤；药物作用
河南医科大学学报000213摘 要：目的：研究内折香茶菜乙素(以下简称内折乙素)对动物移植性肿瘤的作用以及对机体免疫状态的影响。方法：以动物移植性肿瘤艾氏腹水癌(ECA)、肉瘤180(S180)、肝癌(HCA)、Lewis肺癌为模型，以5-Fu为阳性对照组，以生理盐水为阴性对照组，观察12.5 mg/kg和25mg/kg内折乙素的抗肿瘤作用，并采用小鼠溶血素实验和小鼠迟发性变态反应实验观察内折乙素对机体免疫状态的影响。结果：内折乙素与阴性对照组相比在体外对ECA肿瘤细胞有较强的杀伤力，在体内对S180实体型和腹水型肿瘤，HCA实体型和腹水型肿瘤以及Lewis肺癌实体型肿瘤均有较强的抑瘤作用，与阳性对照组相比，对机体免疫状态无明显影响。结论：内折乙素具有较强的抗肿瘤作用，且对机体免疫状态无明显影响。
, 百拇医药
分类号：R284.2
Study on the antitumor effect of Rabdosia Inflexusin B(Thundkundo)
YE Qixia
(Henan Medical Institute, Zhengzhou 450052)
LI Jicheng,YANG Lijia,LIU Lanqi
(Laboratory Center of Medical Research,Henan Medical University,Zhengzhou 450052)
WIE Yujin
, 百拇医药 (Department of Otolaryngology,the First Affiliated Hospital,Henan Medical University,Zhengzhou 450052)
Abstract：Aim：To study the effects of Rabdosia Inflexusin B on transplanted tumors and the immunological influence in mice.Methods:The antitumor effects of Inflexusin B in 12.5 mg/kg and 25 mg/kg dosage on Ehrlich ascites carcinoma(ECA),Sarcoma180(S180),hepatoma carcinoma (HCA),and Lewis lung carcinoma(Lewis)were investigated by using the inplanted tumor animal models.The immunological effects were observed by using hemolysin and delayed hypersensitive tests in mice.The 5-Fu was used as positive control and the normal saline as blank control.Results:It showed that Inflexusin B had significant cytotoxicity against ECA cell in vitro and had high antitumor activity against S180 solid and ascites,HCA solid and ascites and Lewis solid in vivo when compared with the blank control.There was no prominent influence of Inflexusin on immunological state of the animals when compared with 5-Fu.Conclusion:Infexusin B has relative high potent antitumor effect and no obvious influence on immunological state of the animals.
, 百拇医药
Key words：Inflexusin B;Ehrlich awcites carcinoma;sarcoma180;hepatoma carcinoma;Lewis lung carcinoma;drug effect▲
内折香茶菜(Rabdosia inflesus(Thundkundo))是冬凌草(Rabdusia rubencens)同科同属植物，广泛分布于河南、江苏、四川、安徽、山东等地。本课题组对内折香茶菜粗制剂进行了药理作用的前期研究，结果表明，其对体内和体外的艾氏腹水癌(Ehrlich ascites carcinoma,ECA)肿瘤细胞有明显的抑制作用。从内折香茶菜中提取的单体——内折香茶菜乙素(简称内折乙素)属于新的二萜类化合物[1]，经鉴定其纯度为99%。作者采用多种动物移植性肿瘤模型，观察内折乙素对动物肿瘤的抑制作用，并对动物溶血素水平和迟发性超敏反应进行了检测，观察内折乙素对机体免疫功能的影响。
1 材料与方法
, 百拇医药
1.1 材料 内折乙素由河南医科大学医学实验中心新药研究室提供，实验时用生理盐水稀释到所需含量备用。由河南医科大学实验动物中心提供昆明种小白鼠128只，C57纯系小鼠32只，体重为(20±2)g，雌雄兼用。实验室温度为22～25 ℃，常规饲料喂养，饮水量不限。瘤株包括ECA、肉瘤180(S180)实体型及腹水型，肝癌(HCA)实体型及腹水型、Lewis肺癌实体型，各瘤株均由河南省医学科学研究所药理室保种，按常规方法传代接种。
1.2 方法
1.2.1 内折乙素对体外培养的ECA瘤细胞生长的影响：无菌条件下，抽取荷ECA肿瘤小鼠腹水，混悬于RPMI 1640完全培养液中，调细胞浓度为5×105 ml-1，接种于培养瓶中，每瓶接种细胞悬液1.9 ml，按拟定剂量加入内折乙素药液0.1 ml，总体积2 ml，置体积分数为5% CO2培养箱中37 ℃培养24 h后取出，采用台盼兰拒染法测定细胞杀伤率[2]。
, 百拇医药
1.2.2 内折乙素体内的抗肿瘤作用：抗S180和抗HCA实验组动物均为昆明种小白鼠，抗Lewis肺癌实验组动物为C57纯系小鼠，各实验组均分为4组：阴性对照组，生理盐水10 ml/kg；阳性对照组，5-Fu 20 mg/kg；内折乙素低剂量组，12.5 mg/kg；内折乙素高剂量组，25 mg/kg；每组8只动物。实验按常规方法接种，接种后次日按拟定剂量腹腔注射(ip)给药，1次/d，连续10 d。腹水型肿瘤以生命延长率为疗效指标，停药后继续观察60 d，死亡动物以实际存活时间为生存时间，长期存活动物以60 d为生存时间计算。实体型肿瘤以瘤重抑制率作为疗效指标，于停药次日将肿瘤剖出精确称重。实验结果的统计学方法用t检验。
1.2.3 对机体免疫功能的影响[3]：采用小鼠溶血素实验，测定本品对小鼠体液免疫状态的影响，本实验分组同1.2.2，用昆明种小鼠进行实验。以体积分数20%绵羊红细胞对小鼠致敏，0.5 ml/鼠，于致敏后第2 d给药，连用5 d，于致敏后第5 d进行免疫实验，取灭活的小鼠眼眶血清2 ml，以2倍稀释法加入每一试管，每试管加入体积分数0.03%绵羊红细胞0.2 ml及体积分数为20%豚鼠血清0.2 ml，充分摇匀，于37 ℃培养30 min,观察其最大溶血稀释度。采用小鼠迟发性超敏反应实验，测定本品对小鼠细胞免疫状态的影响，实验分组同前，各用药组动物按拟定剂量连续用药10 d，实验的第5 d于小鼠腹部用新鲜配制的10 g/L 2,4-二硝基氯苯(DNCB)丙酮、麻油溶液50 μl致敏(丙酮麻油体积之比为1∶1)，第11 d再以新鲜配制的10 g/L DNCB丙酮、麻油10 μl涂于小鼠右耳进行攻击，24 h处死动物，剪下小鼠左右两耳壳，用打孔器打下直径为8 mm的耳片精确称重，以左右两耳重量之差为肿胀度，同时取其胸腺、脾脏精确称重。计算其脾指数和胸腺指数，实验结果用
表示，组间比较用t检验。, 百拇医药
2 结果
2.1 内折乙素对体外培养的ECA瘤细胞生长的影响 见表1。
表1 内折乙素对体外培养的ECA瘤细胞生长的影响 组 别
ρ(内折乙素)/(mg.L-1)
兰染率/%
对照组
生理盐水0.1 ml
0～5
用药组1
2.000
, 百拇医药
100
用药组2
1.000
100
用药组3
0.500
87
用药组4
0.250
64
用药组5
0.125
48
, 百拇医药
由表1可以看出，内折乙素剂量为2 mg/L时，细胞杀伤率为100%，当减小到0.125 mg/L时则为48%，作用明显减弱，表明该化合物在体外对ECA肿瘤细胞有较强的细胞毒作用，且随剂量增大而作用增强。
2.2 内折乙素体内抗肿瘤作用 见表2～6。
表2 内折乙素对小鼠实体型Lewis肺癌的作用 组别组
n
体重/g
瘤重/g
抑瘤率/%
始
末
始
, 百拇医药
末
阴性对照组
8
8
18.88±0.83
23.50±1.28
3.07±0.34
-
阳性对照组
8
8
19.00±0.93
19.69±0.75
, http://www.100md.com
1.18±0.78*
62.79
低剂量
内折乙素组
8
8
18.88±0.89
20.88±0.69
1.69±0.58*
44.95
高剂量
内折乙素组
, 百拇医药
8
8
18.80±0.89
21.13±1.03
1.48±0.68*
51.50
*与阴性对照组比较P<0.05
表3 内折乙素对小鼠实体型S180的作用 组 别
n
体重/g
瘤重/g
抑瘤率/%
, http://www.100md.com
始
末
始
末
阴性对照组
8
8
20.00±0.93
23.06±1.29
2.55±0.65
-
阳性对照组
8
, 百拇医药
8
20.00±0.46
22.88±1.25
1.21±0.19*
52.7
低剂量
内折乙素组
8
8
19.63±0.74
22.00±2.28
2.08±0.72*
, 百拇医药
18.4
高剂量
内折乙素组
8
8
19.37±1.06
23.13±1.38
1.48±0.73*
45.1
*与阴性对照组比较P<0.05
表4 内折乙素对小鼠实体型HCA的作用 组 别
n
, 百拇医药
体重/g
瘤重/g
抑瘤率/%
始
末
始
末
阴性对照组
8
8
19.13±0.64
24.88±1.46
3.36±0.41
, 百拇医药
-
阳性对照组
8
8
19.63±1.41
22.13±0.83
1.89±0.01*
43.75
低剂量
内折乙素
8
8
19.83±1.06
, 百拇医药
25.5±1.77
2.13±0.53*
36.6
高剂量
内折乙素
8
8
19.13±0.35
22.5±1.19
1.82±0.87*
45.83
*与阴性对照组比较P<0.05
, http://www.100md.com
表5 内折乙素对小鼠腹水型S180的作用 组 别
n
体重/g
t(存活)/d
生命延长率/%
始
末
始
末
阴性对照组
8
0
20.13±1.13
, 百拇医药
27.13±9.36
12.37±0.74
-
阳性对照组
8
1
19.75±0.46
23.38±2.13
40.00±11.30*
223.36
低剂量内折乙素
8
, 百拇医药
0
19.63±0.74
29.25±1.58
27.63±05.88*
123.36
高剂量内折乙素
8
0
19.63±0.74
24.38±2.01
36.50±06.48*
195.07
, 百拇医药
*与阴性对照组比较P<0.05
表6 内折乙素对小鼠腹水型HCA的作用 组 别
n
体重/g
t(存活)/d
生命延长率/%
始
末
始
末
阴性对照组
8
, http://www.100md.com 0
18.50±1.13
27.88±2.69
13.25±01.29
-
阳性对照组
8
2
09.13±0.78
22.63±3.42
35.13±07.67*
165.13
, 百拇医药
低剂量内折乙素
8
0
18.75±0.71
27.31±2.89
23.50±09.61*
73.50
高剂量内折乙素
8
2
19.13±0.83
26.63±3.94
, http://www.100md.com
33.00±19.22*
149.06
*与阴性对照组比较P<0.05
2.3 内折乙素对小鼠溶血素的影响 对照组的最大溶血稀释度为1∶512，内折乙素低、高2剂量组的最大溶血稀释度分别为1∶512，1∶256，5-Fu组的最大溶血稀释度为1∶32，表明本品在25 mg/kg剂量时，对以溶血素反应为指标的体液免疫可能有轻度抑制作用。
2.4 内折乙素对DNCB诱导的小鼠迟发性超敏反应的影响 见表7。
表7 内折乙素对DNCB
诱导的小鼠迟发性超敏反应的影响 (n=8) 组 别
耳肿胀度/mg
, 百拇医药
脾指数
/(mg.g-1)
胸腺指数
/(mg.g-1)
阴性对照组
1.53±0.21
8.452±0.824
4.504±0.439
阳性对照组
, 百拇医药 2.02±0.33*
4.382±0.902*
1.921±0.307*
低剂量
内折乙素
1.67±2.04
7.645±0.961
3.966±0.537
高剂量
内折乙素
, http://www.100md.com 1.65±2.87
7.965±0.745
4.335±0.214
*与阴性对照组比较P<0.05
3 讨论
从体内、外实验结果来看，内折乙素具有较强的抗肿瘤作用，且抗瘤谱较广，能抑制Lewis肺癌、S180实体型以及HCA实体型等实体瘤的增长，也能明显增加荷S180腹水型和荷HCA腹水型小鼠的生命延长率，其抗肿瘤作用的强弱呈剂量依赖性，本实验设有12.5 mg/kg和25 mg/kg 2剂量组，其中以25 mg/kg为最好。内折乙素小剂量有一定的抑瘤作用，而高剂量组则有明显抗肿瘤作用，与阴性对照组相比差异有显著性，而与阳性对照组相比则差异无显著性。机体免疫功能影响的实验结果证明，内折乙素对小鼠细胞免疫无影响，在25 mg/kg剂量时，对小鼠溶血素水平有较轻微抑制，表明在该剂量时，本品对小鼠的体液免疫有较轻微影响，但与阳性对照组相比，差异显著。5-Fu作为本实验阳性对照药，对小鼠各瘤株有明显的抑制作用，其抑瘤率与阴性对照组相比，均有明显差异，但免疫实验结果又表明，5-Fu对机体免疫亦呈现明显抑制作用，这样就限制了本品在临床上的应用。
, 百拇医药
内折乙素的抗肿瘤作用虽然稍逊于5-Fu，但仍显示出较强的抗肿瘤作用，而免疫实验结果又表明，其对机体免疫功能没有明显影响，且由于内折乙素可从内折香茶菜中提取，内折香茶菜又盛产于河南、江苏、四川、安徽、山东等地，资源丰富，表明该化合物具有较好的临床应用价值，可作为一种有前途的抗肿瘤药物，对其进一步深入研究与开发。
基金项目：河南省科技攻关资助项目 991180121
作者简介：李继成，男，48岁，大学本科，研究方向：内折香茶菜抗肿瘤作用及机制.
参考文献：
[1]李继成，袁宝梅，苏金玲，等.内折香茶菜乙素的化学结果.中草药，1996，27(6)：232
[2]王庆端，王绵英，刘海君，等.鲁山冬凌草甲素的抗肿瘤作用研究.河南医科大学学报，1987，22(4)：372
[3]徐叔云.药理实验方法学.第2版.北京：人民卫生出版社，1992.
(收稿日期：1999-10-10), 百拇医药