肺癌患者血清sIL-6R检测的临床研究
作者：王静 张茂林 马利军 孙培宗 王俊平 董君 张罗献
单位：王静 孙培宗 王俊平 董君(河南医科大学第一附属医院呼吸内科 郑州 450052)；张茂林(河南医科大学无机化学教研室 郑州 450052)；马利军 张罗献(河南省人民医院呼吸内科 郑州 450003)
关键词：肺肿瘤；可溶性；白细胞介素-6；受体
河南医科大学学报000330 摘要 目的：通过检测肺癌患者在不同临床阶段血清中sIL-6R的水平，探索sIL-6R在肺癌患者体内变化的规律，为估计病情、判断预后寻找一个客观指标。方法：Ⅰ期和Ⅳ期肺癌患者各20例，对照组20例，分别抽取空腹血离心后，留取血清，用ELISA方法检测。结果：对照组血清sIL-6R水平为(46.83±6.70)μg/L; Ⅰ期肺癌组血清sIL-6R水平为(58.63±3.94)μg/L； Ⅳ期肺癌组 血清sIL-6R水平为(69.23±18.73)μg/L，Ⅰ期和Ⅳ期肺癌组血清sIL-6R水平均明显高于对照组(P<0.001);Ⅳ期肺癌组 血清sIL-6R水平又明显高于Ⅰ期肺癌组(P<0.001)；3组之间经方差分析和q检验，差异有显著性(P<0.001)。结论：肺癌患者体内存在着sIL-6R的异常表达。Ⅳ期肺癌患者血清中sIL-6R水平高于Ⅰ期患者。当病情进展、病灶范围增大时，体内sIL-6R表达增多。 提示sIL-6R可能是肺癌患者预后不良的指标。
, 百拇医药
分类号 R734.2
Clinical study on serum sIL-6R of lung cancer cases
WANG Jing，SUN Peizong，WANG Junping，DONG Jun，(Department of Respiratory Medicine,the First Affiliated Hospital, Henan Medical University，Zhengzhou 450052)
ZHANG Maolin，(Department of inorganic Chemistry, Henan Medical University ，Zhengzhou 450052)
MA Lijun，ZHANG Luoxian
, 百拇医药
(Department of Respiratory Medicine,the People′s Hospital of Henan Province，Zhengzhou 450003)
Abstract Aim:In order to find an objective indicator of estimating the state of lung carcer and judging its prognosis ,and the lever of serum sIL-6R in different stages of lung carcer cases were measured. Methods : 20 cases of lung carcer in stage Ⅰ and 20 cases in stage Ⅳ were selected as two test groups ,and the control group also contained 20 cases . Their blood samples were centrifuged to seperate the serum which were used to be detested the levels of sIL-6R by ELISA. Results: The levels of sIL-6R of stage Ⅰ group, stage Ⅳ group and the control group were (58.63±3.94)μg/L , (69.23±18.37)μg/L and (46.83±6.70)μg/L ， respectively. Those in the test groups were obviously higher than that in the control group (P<0.001).That in stage Ⅳ group was obviously higher than that in stage Ⅰ (P<0.001) . The analysis of variance and q-test verified that the differences between the three groups were significant . Conclusion: The level of sIL-6R of lung cancer cases was higher than that of the control group, which indicated that the lung cancer patients have abnormal expression of sIL-6R . The stage Ⅳ cases had higher level of sIL-6R than that of the stage Ⅰ group, and the worse the illness is, the higher the expression of sIL-6R is. The level of sIL-6R could be probably considered as an objective indicator of lung cancer's prognosis.
, 百拇医药
Key words lung cancer；soluble interleukin-6;receptor
本研究通过检测肺癌患者在不同临床阶段血清中可溶性白细胞介素-6 受体(sIL-6R)的水平，监测肺癌患者在病情进展不同阶段(转移前后)血清中sIL-6R的水平，进一步探索sIL-6R与肺癌发生、发展的关系，试图将sIL-6R作为肺癌标记物及预后因子应用于临床，协助肺癌的诊断和预后的判断。
1 材料与方法
1.1 一般资料 研究对象为1997年9月～1998年12月本院门诊和住院肺癌患者40例，男23例，女17例。根据国际抗癌联盟(UICC)1985年制定的TNM分期[1]进行分组。肺癌患者的组织学类型均经纤维支气管镜下取活检证实。
1.2 分组
, 百拇医药
1.2.1 对照组：健康人20例, 其中男13例，女7例，年龄22～60岁，平均40岁，既往健康，近期无感染，无心、肺、肝、肾脏病史。
1.2.2 Ⅰ期肺癌组：20例,男12例，女8例，年龄29～70岁，平均46岁，其中腺癌11例，鳞癌8例，小细胞癌1例，均为首次确诊患者，未用过化疗药物。
1.2.3 Ⅳ期肺癌组：20例, 男11例，女9例，年龄25～73岁，平均54岁，其中腺癌12例，鳞癌7例，小细胞癌1例，均为首次确诊患者，未用过化疗药物。
1.3 实验材料 sIL-6R试剂盒,由法国国际免疫公司出品,购自苏州法国国际免疫公司驻中国总部。酶标仪DG 3022 (华东电子管厂)。XK 96-Ⅲ型微量振荡器，(上海医疗器械厂)。 可调精确移液器具(法国)。
1.4 实验方法 对照组和肺癌组患者分别抽取静脉血3 ml，放置3 h后离心取血清于干净试管内，加盖后置-30 ℃冰箱内保存。 用ELISA方法检测 sIL-6R。 将标本复溶后，于1 h内加样测定。
, 百拇医药
1.5 统计学处理 美国SAS统计学软件包，实验数据用
±s表示。3组之间比较采用方差分析，各组之间比较采用q检验。
2 结果
对照组、Ⅰ期肺癌组、Ⅳ期肺癌组研究对象血清sIL-6R测定结果如表1。
表1 3组研究对象sIL-6R测定结果比较 组别
n
sIL-6R/(μg.L-1)
对照组
20
46.83±6.70
, 百拇医药
Ⅰ期肺癌组
20
56.63±3.94
Ⅳ期肺癌组
20
69.23±18.73
3组之间相互比较，P均<0.001
3组之间比较采用方差分析，各组之间比较用q检验，结果显示：肺癌患者血清中sIL-6R水平均高于正常人；Ⅳ期患者又高于Ⅰ期患者; 经统计学处理，差异有显著性，P<0.001。Ⅳ期患者因有远处转移或有恶性胸腔积液，说明肺癌细胞增殖活跃，癌细胞表面IL-6R高表达，提示随病情进展，血清中sIL-6R水平增高。由于病例少，肺癌不同组织学类型之间未作比较。
, 百拇医药
3 讨论
白细胞介素-6(Interleukin-6，IL-6)是一种具有多功能生物活性的多肽物质[2]，在人体内可作用于多种靶细胞，特别是近年来发现IL-6在肿瘤的发生、发展过程中有重要作用。IL-6的多种生物学效应都是通过靶细胞膜上的白细胞介素-6受体(Interleukin-6 Receptor,IL-6R)及可溶性白细胞介素-6受体( soluble Interleukin-6 Receptor,sIL-6R)介导的[3]。sIL-6R的产生机制有两种，其一是细胞膜上的IL-6R经蛋白酶水解脱落形成[4]，另一种机制则是认为存在着编码sIL-6R的mRNA[5]。与IL-6有关的疾病往往伴有IL-6R表达的异常或亲和力的改变，提示IL-6及其受体的平衡失调会影响机体整个内环境的稳定,甚至诱发恶性肿瘤[6]。据文献报道，对肺腺癌和肺巨细胞癌进行体外培养均发现有IL-6R表达的异常[7，8]，提示IL-6R的异常表达与肺癌的发生和转归密切相关。
, 百拇医药
无限制增长是恶性肿瘤的基本特征，细胞因子对肿瘤细胞的生长具有调控作用。国内、外学者就恶性肿瘤细胞IL-6R表达异常做了许多研究，Takizawa等[7]对人肺腺癌细胞株A 549及其他一些细胞株RERF-Lc-m,VMRC-Lcp,Lc-Lsq,A 431等进行体外培养，发现这些细胞上清液中可测到IL-6，而且这些细胞表面存在有IL-6R。曾灵芳等[9]研究发现，IL-6和IL-6R以自分泌方式参与肺癌的生长增殖调控，结果是促进肺癌细胞的增殖，而且在肺巨细胞癌的转移中发挥了重要作用。
本研究通过检测肺癌患者血清中sIL-6R水平，发现肺癌患者血清中sIL-6R水平明显高于正常对照组，说明肺癌患者体内存在有IL-6R的高表达。Ⅳ期肺癌患者，存在有癌细胞的远处转移，癌细胞数量多，癌细胞表达IL-6R更多，血清中sIL-6R水平非但高于正常人，而且高于Ⅰ期肺癌患者。3组数据之间经统计学处理差异有显著性，进一步提示sIL-6R不但参与肺癌细胞的增殖和生长，而且参与了肺癌的转移。在临床中可考虑将sIL-6R作为肺癌细胞的标志物之一用于肺癌的诊断，而且当血清中sIL-6R升高较明显时应考虑有转移倾向，用于估计病情和判断预后。
, 百拇医药
基金项目：郑州市科委科技攻关项目 9901243
研究方向：肺癌及慢性阻塞性肺疾病
作者简介：王静，女，42岁，硕士，副教授，参考文献
[1]陈灏珠.内科学. 第4版. 北京:人民卫生出版社, 1996.106
[2]Bauer J, Bauer TM, Kalb T, et al. Regulation of interleukin 6 receptor expression in human monocytes and monocyte-derived macrophages. Comparison with the expression in human hepatocytes. J Exp Med， 1989, 170(5): 1 537
, http://www.100md.com [3]Yawata H, Yasukawa K, Natsuka S,et al. Structure function analysis of human IL-6 receptor: dissociation of amino acid residues required for IL-6-binding and for IL-6 signal transduction through gp130. EMBO J， 1993,12(4): 1 705
[4]Mullberg J, Schooltink H, Stoyan T,et al. The soluble interleukin-6 receptor is generated by shedding. Eur J Immunol， 1993 , 23(2): 473
[5]赖春宁, 黎燕, 倪长源,等. 肿瘤细胞系IL-6Rα/IL-6Rβ 基因表达的生物学效应.细胞与分子免疫学杂志，1997, 13(4): 17
, 百拇医药
[6]Aione D, Dicarlo E, Li W, et al. Coexpression of IL-6 and soluble IL-6R causes nodular regenerative hyperplasia and adenomas of the liver. EMBO J,1998,17(19): 5 588
[7]Takizawa H, Ohtoshi T, Ohta K,et al. Growth inhibition of human lung cancer cell lines by interleukin 6 in vitro: a possible role in tumor growth via an autocrine mechanism. Cancer Res，1993 , 53(18): 4 175
[8]Katz A, Shulman LM, Revel M,et al. Combined therapy with IL-6 and inactivated tumor cells suppresses metastasis in mice bearing 3LL lung carcinomas. Int J Cancer， 1993 , 53(5): 812
[9]曾灵芳,崔文,方伟岗,等. 肺巨细胞癌不同转移亚克隆 生长因子表达及反应性差异的探讨.中华病理学杂志，1997,26(2)：93
19999-10-26收稿, http://www.100md.com
单位：王静 孙培宗 王俊平 董君(河南医科大学第一附属医院呼吸内科 郑州 450052)；张茂林(河南医科大学无机化学教研室 郑州 450052)；马利军 张罗献(河南省人民医院呼吸内科 郑州 450003)
关键词：肺肿瘤；可溶性；白细胞介素-6；受体
河南医科大学学报000330 摘要 目的：通过检测肺癌患者在不同临床阶段血清中sIL-6R的水平，探索sIL-6R在肺癌患者体内变化的规律，为估计病情、判断预后寻找一个客观指标。方法：Ⅰ期和Ⅳ期肺癌患者各20例，对照组20例，分别抽取空腹血离心后，留取血清，用ELISA方法检测。结果：对照组血清sIL-6R水平为(46.83±6.70)μg/L; Ⅰ期肺癌组血清sIL-6R水平为(58.63±3.94)μg/L； Ⅳ期肺癌组 血清sIL-6R水平为(69.23±18.73)μg/L，Ⅰ期和Ⅳ期肺癌组血清sIL-6R水平均明显高于对照组(P<0.001);Ⅳ期肺癌组 血清sIL-6R水平又明显高于Ⅰ期肺癌组(P<0.001)；3组之间经方差分析和q检验，差异有显著性(P<0.001)。结论：肺癌患者体内存在着sIL-6R的异常表达。Ⅳ期肺癌患者血清中sIL-6R水平高于Ⅰ期患者。当病情进展、病灶范围增大时，体内sIL-6R表达增多。 提示sIL-6R可能是肺癌患者预后不良的指标。
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分类号 R734.2
Clinical study on serum sIL-6R of lung cancer cases
WANG Jing，SUN Peizong，WANG Junping，DONG Jun，(Department of Respiratory Medicine,the First Affiliated Hospital, Henan Medical University，Zhengzhou 450052)
ZHANG Maolin，(Department of inorganic Chemistry, Henan Medical University ，Zhengzhou 450052)
MA Lijun，ZHANG Luoxian
, 百拇医药
(Department of Respiratory Medicine,the People′s Hospital of Henan Province，Zhengzhou 450003)
Abstract Aim:In order to find an objective indicator of estimating the state of lung carcer and judging its prognosis ,and the lever of serum sIL-6R in different stages of lung carcer cases were measured. Methods : 20 cases of lung carcer in stage Ⅰ and 20 cases in stage Ⅳ were selected as two test groups ,and the control group also contained 20 cases . Their blood samples were centrifuged to seperate the serum which were used to be detested the levels of sIL-6R by ELISA. Results: The levels of sIL-6R of stage Ⅰ group, stage Ⅳ group and the control group were (58.63±3.94)μg/L , (69.23±18.37)μg/L and (46.83±6.70)μg/L ， respectively. Those in the test groups were obviously higher than that in the control group (P<0.001).That in stage Ⅳ group was obviously higher than that in stage Ⅰ (P<0.001) . The analysis of variance and q-test verified that the differences between the three groups were significant . Conclusion: The level of sIL-6R of lung cancer cases was higher than that of the control group, which indicated that the lung cancer patients have abnormal expression of sIL-6R . The stage Ⅳ cases had higher level of sIL-6R than that of the stage Ⅰ group, and the worse the illness is, the higher the expression of sIL-6R is. The level of sIL-6R could be probably considered as an objective indicator of lung cancer's prognosis.
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Key words lung cancer；soluble interleukin-6;receptor
本研究通过检测肺癌患者在不同临床阶段血清中可溶性白细胞介素-6 受体(sIL-6R)的水平，监测肺癌患者在病情进展不同阶段(转移前后)血清中sIL-6R的水平，进一步探索sIL-6R与肺癌发生、发展的关系，试图将sIL-6R作为肺癌标记物及预后因子应用于临床，协助肺癌的诊断和预后的判断。
1 材料与方法
1.1 一般资料 研究对象为1997年9月～1998年12月本院门诊和住院肺癌患者40例，男23例，女17例。根据国际抗癌联盟(UICC)1985年制定的TNM分期[1]进行分组。肺癌患者的组织学类型均经纤维支气管镜下取活检证实。
1.2 分组
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1.2.1 对照组：健康人20例, 其中男13例，女7例，年龄22～60岁，平均40岁，既往健康，近期无感染，无心、肺、肝、肾脏病史。
1.2.2 Ⅰ期肺癌组：20例,男12例，女8例，年龄29～70岁，平均46岁，其中腺癌11例，鳞癌8例，小细胞癌1例，均为首次确诊患者，未用过化疗药物。
1.2.3 Ⅳ期肺癌组：20例, 男11例，女9例，年龄25～73岁，平均54岁，其中腺癌12例，鳞癌7例，小细胞癌1例，均为首次确诊患者，未用过化疗药物。
1.3 实验材料 sIL-6R试剂盒,由法国国际免疫公司出品,购自苏州法国国际免疫公司驻中国总部。酶标仪DG 3022 (华东电子管厂)。XK 96-Ⅲ型微量振荡器，(上海医疗器械厂)。 可调精确移液器具(法国)。
1.4 实验方法 对照组和肺癌组患者分别抽取静脉血3 ml，放置3 h后离心取血清于干净试管内，加盖后置-30 ℃冰箱内保存。 用ELISA方法检测 sIL-6R。 将标本复溶后，于1 h内加样测定。
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1.5 统计学处理 美国SAS统计学软件包，实验数据用
±s表示。3组之间比较采用方差分析，各组之间比较采用q检验。2 结果
对照组、Ⅰ期肺癌组、Ⅳ期肺癌组研究对象血清sIL-6R测定结果如表1。
表1 3组研究对象sIL-6R测定结果比较 组别
n
sIL-6R/(μg.L-1)
对照组
20
46.83±6.70
, 百拇医药
Ⅰ期肺癌组
20
56.63±3.94
Ⅳ期肺癌组
20
69.23±18.73
3组之间相互比较，P均<0.001
3组之间比较采用方差分析，各组之间比较用q检验，结果显示：肺癌患者血清中sIL-6R水平均高于正常人；Ⅳ期患者又高于Ⅰ期患者; 经统计学处理，差异有显著性，P<0.001。Ⅳ期患者因有远处转移或有恶性胸腔积液，说明肺癌细胞增殖活跃，癌细胞表面IL-6R高表达，提示随病情进展，血清中sIL-6R水平增高。由于病例少，肺癌不同组织学类型之间未作比较。
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3 讨论
白细胞介素-6(Interleukin-6，IL-6)是一种具有多功能生物活性的多肽物质[2]，在人体内可作用于多种靶细胞，特别是近年来发现IL-6在肿瘤的发生、发展过程中有重要作用。IL-6的多种生物学效应都是通过靶细胞膜上的白细胞介素-6受体(Interleukin-6 Receptor,IL-6R)及可溶性白细胞介素-6受体( soluble Interleukin-6 Receptor,sIL-6R)介导的[3]。sIL-6R的产生机制有两种，其一是细胞膜上的IL-6R经蛋白酶水解脱落形成[4]，另一种机制则是认为存在着编码sIL-6R的mRNA[5]。与IL-6有关的疾病往往伴有IL-6R表达的异常或亲和力的改变，提示IL-6及其受体的平衡失调会影响机体整个内环境的稳定,甚至诱发恶性肿瘤[6]。据文献报道，对肺腺癌和肺巨细胞癌进行体外培养均发现有IL-6R表达的异常[7，8]，提示IL-6R的异常表达与肺癌的发生和转归密切相关。
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无限制增长是恶性肿瘤的基本特征，细胞因子对肿瘤细胞的生长具有调控作用。国内、外学者就恶性肿瘤细胞IL-6R表达异常做了许多研究，Takizawa等[7]对人肺腺癌细胞株A 549及其他一些细胞株RERF-Lc-m,VMRC-Lcp,Lc-Lsq,A 431等进行体外培养，发现这些细胞上清液中可测到IL-6，而且这些细胞表面存在有IL-6R。曾灵芳等[9]研究发现，IL-6和IL-6R以自分泌方式参与肺癌的生长增殖调控，结果是促进肺癌细胞的增殖，而且在肺巨细胞癌的转移中发挥了重要作用。
本研究通过检测肺癌患者血清中sIL-6R水平，发现肺癌患者血清中sIL-6R水平明显高于正常对照组，说明肺癌患者体内存在有IL-6R的高表达。Ⅳ期肺癌患者，存在有癌细胞的远处转移，癌细胞数量多，癌细胞表达IL-6R更多，血清中sIL-6R水平非但高于正常人，而且高于Ⅰ期肺癌患者。3组数据之间经统计学处理差异有显著性，进一步提示sIL-6R不但参与肺癌细胞的增殖和生长，而且参与了肺癌的转移。在临床中可考虑将sIL-6R作为肺癌细胞的标志物之一用于肺癌的诊断，而且当血清中sIL-6R升高较明显时应考虑有转移倾向，用于估计病情和判断预后。
, 百拇医药
基金项目：郑州市科委科技攻关项目 9901243
研究方向：肺癌及慢性阻塞性肺疾病
作者简介：王静，女，42岁，硕士，副教授，参考文献
[1]陈灏珠.内科学. 第4版. 北京:人民卫生出版社, 1996.106
[2]Bauer J, Bauer TM, Kalb T, et al. Regulation of interleukin 6 receptor expression in human monocytes and monocyte-derived macrophages. Comparison with the expression in human hepatocytes. J Exp Med， 1989, 170(5): 1 537
, http://www.100md.com [3]Yawata H, Yasukawa K, Natsuka S,et al. Structure function analysis of human IL-6 receptor: dissociation of amino acid residues required for IL-6-binding and for IL-6 signal transduction through gp130. EMBO J， 1993,12(4): 1 705
[4]Mullberg J, Schooltink H, Stoyan T,et al. The soluble interleukin-6 receptor is generated by shedding. Eur J Immunol， 1993 , 23(2): 473
[5]赖春宁, 黎燕, 倪长源,等. 肿瘤细胞系IL-6Rα/IL-6Rβ 基因表达的生物学效应.细胞与分子免疫学杂志，1997, 13(4): 17
, 百拇医药
[6]Aione D, Dicarlo E, Li W, et al. Coexpression of IL-6 and soluble IL-6R causes nodular regenerative hyperplasia and adenomas of the liver. EMBO J,1998,17(19): 5 588
[7]Takizawa H, Ohtoshi T, Ohta K,et al. Growth inhibition of human lung cancer cell lines by interleukin 6 in vitro: a possible role in tumor growth via an autocrine mechanism. Cancer Res，1993 , 53(18): 4 175
[8]Katz A, Shulman LM, Revel M,et al. Combined therapy with IL-6 and inactivated tumor cells suppresses metastasis in mice bearing 3LL lung carcinomas. Int J Cancer， 1993 , 53(5): 812
[9]曾灵芳,崔文,方伟岗,等. 肺巨细胞癌不同转移亚克隆 生长因子表达及反应性差异的探讨.中华病理学杂志，1997,26(2)：93
19999-10-26收稿, http://www.100md.com