盐酸二甲双胍胶囊的药动学与相对生物利用度研究
作者：范鲁雁 仇益群 汤 震
单位：范鲁雁 安徽省合肥市第一人民医院药剂科，合肥 230061；仇益群 汤 震 上海市静安区中心医院临床药学与临床药理科，上海 200040
关键词：二甲双胍；药代动力学；生物利用度
安徽医科大学学报990411 摘要：目的 研究盐酸二甲双胍胶囊在正常人体内的药物动力学和相对生物利用度。方法 10例健康男性志愿者，随机分为两组，分别交叉口服盐酸二甲双胍胶囊和片剂采用通过反相HPLC法测定盐酸二甲双胍在体内的药物浓度。结果 口服1 000 mg盐酸二甲双胍胶囊片剂的达峰时间(Tmax)分别为1.83 h±0.56 h和1.83 h±0.50 h；峰浓度(Cmax)分别为2.25 mg.L-1±0.49 mg.L-1和2.24 mg.L-1±0.50 mg.L-1；消除半衰期(T1/2β)分别为2.40 h±0.23 h和2.40 h±0.28 h；药时曲线下面积(AUC)分别为13.41 mg.h-1.L-1±3.55 mg.h-1.L-1和12.99 mg.h-1.L-1±3.39 mg.h-1.L-1，经t检验，两种剂型的药代动力学参数无显著性差异；口服盐酸二甲双胍胶囊对其片剂的相对生物利用度为103.24%。结论 两种制剂具有生物等效性。
, 百拇医药
中国图书资料分类法分类号：R977.15；R969.4
Pharmacokinetics and relative bioavailability of
metformin hydrochloride capsules
Fan Luyan, Chou Yichun, Tang Zhen
(Department of Pharmacy, First Peoples Hospital of Hefei,Hefei 230061)
Abstract Objective The present study focus on the pharmacokinatics and relative bioavailability of metformin hydrochloride in healthy volunteers. Methods A single oral dose of 1 000 mg of two different forms (capsules and tablets) of metformin hydrochloride were given to 10 healthy male volunteers in a randomized crossover study. Drug concentrations in plasma were assayed by reverse-HPLC method. Results The pharmacokinetic parameters of the two different forms were: Tmax(1.83±0.56) h, (1.83±0.50) h；Cmax(2.25±0.49) mg.L-1, (2.24±0.50) mg.L-1；T1/2β(2.40±0.23) h, (2.40±0.28) h；AUC(13.41±3.55) mg.h-1.L-1, (12.99±3.39) mg.h-1.L-1 respectively. The pharmacokinetic parameters showed no significant differences between two different forms (P>0.05). The relative bioavailability of capsules to tablets was 103.24%. Conclusion Two different forms of metformin hydrochloride are bioequivalent.
, 百拇医药
MeSH meformin pharmacokinetics; biological availability
二甲双胍是双胍类口服降糖药。由于它降糖作用明显、肯定，不引起低血糖，可明显降低餐后高血糖，适合Ⅱ型糖尿病患者；同时它还改善胰岛素抗性等〔1，2〕。因此，在临床得到广泛应用。我们采用反相高效液相色谱法对盐酸二甲双胍胶囊的血药浓度进行测定，以研究其在健康志愿者体内药物动力学和相对生物利用度，现将结果报道如下。
1 材料和方法
1.1 药物与试剂 盐酸二甲双胍胶囊：250 mg.粒-1，上海医药职大联合药厂，批号：980201。盐酸二甲双胍片剂：250 mg.片-1，上海思富制药有限公司市售产品，批号：980301。盐酸二甲双胍标准品：由上海医药职大联合药厂提供，批号：970312。磷酸二氢钾、氢氧化钠均为分析纯，乙腈、甲醇为HPLC级。
, 百拇医药
1.2 仪器 瑞典Kontron仪器公司经济实用Ⅱ(EA Ⅱ)型高效液相仪；TDX CENTRIFUGE，美国雅培仪器公司；80-2离心沉淀器，上海手术器械厂；XW-80A旋涡混合器，上海医科大学仪器厂。
1.3 试验对象的选择 10例健康受试者，男性，平均年龄22.6岁±0.8岁，平均体重63 kg±7.5 kg。所有受试者在参加试验前均接受全面体格检查，包括心、肝、肾功能、血象等，检查结果提示均正常。受试者无药物过敏史，无长期服药和嗜酒史，2周内无细菌和病毒感染，4周内没有参加其它药物试验，3个月内无献血史。1.4 给药方法及采样时间 10例受试者按随机表采用双向随机交叉分配为A、B两组，A组先给予上海医药职大联合药厂试制的盐酸二甲双胍胶囊(250 mg.粒-1)，经2周洗脱期后再给予市售上海思富制药有限公司的盐酸二甲双胍片(250 mg.片-1)，B组则相反。受试者隔夜禁食。试验当日，清晨空腹口服盐酸二甲双胍胶囊或片剂250 mg×4，并喝水200 ml，服药后禁食4 h。受试者在受试过程中禁烟、酒和高脂肪食物，全日服用标准餐。每位受试者分别于服药前、服药后的0.5，1，1.5，2，3，4，6，8，10 h，从前臂静脉取血3 ml，静置，4 000 r.min-1，离心5 min，取血清1 ml，置于-20℃储存，待测。
, 百拇医药
1.5 血药浓度测定方法
1.5.1 色谱条件 色谱柱：国产YWGC18反相色谱柱(10 μm, 4.6 mm×15 cm)；流动相：乙腈 0.005 mol.L-1，磷酸缓冲液(pH 3.5)(80：20 V/V)；流速：1.5 ml.min-1；灵敏度 0.001AUFs；紫外检测波长：240 nm；柱温：室温。
1.5.2 测定方法 取待测血清0.5 ml，加入2 ml乙腈，振荡均匀5 min，1 000 r.min-1，离心5 min，取上清液20 μl进样。〔3〕
1.5.3 标准曲线制备 取6支试管，加入正常人血清0.5 ml，然后加入1 g.L-1盐酸二甲双胍标准品，配制成浓度分别为0.05， 0.25， 0.5， 1， 2， 4 mg.L-1的盐酸二甲双胍标准品，按样品处理方法进行处理，进样20 μl，获得相应的血清样品色谱图(见图1)。测定盐酸二双胍的峰面积值，结果如下，以浓度为X，峰面积比为Y，得回归方程：Y=0.09619X+1.1466，相关系数：r=0.9996。提示盐酸二甲双胍的浓度在0.05～4 mg.L-1范围内有良好的线性。
, 百拇医药
图1 盐酸二甲双胍血清图谱
A 空白血清；B 盐酸二甲双胍标准品水溶液；C 盐酸二甲双胍标准品血浆
1.5.4 回收率实验与精密度实验 精确配制50， 500， 2 000 mg.L-1盐酸二甲双胍血清标准品，按样品处理方法进行处理，取20 μl进样，并配制相同浓度的盐酸二甲双胍溶液标准品，按样品处理方法进行处理，取20 μl进样，求得相对回收率。取上述3个浓度盐酸二甲双胍血清标准品，按样品处理方法进行处理，同1天内进样3次，求得日内变异，连续3天进样，求得日间变异。测得3种浓度的回收率分别为95.64%，95.04%，94.91%。3种浓度的日内RSD≤3.33%；日间RSD≤8.99%。
1.6 计算方法 采用上海第二医科大学药理教研室研制的PK-GRAPH动力学软件包，按二室模型进行拟合，计算出下列动力学参数：Tmax、Cmax、AUC、T1/2β、CL、Vd、Ke、相对生物利用度F。
, 百拇医药
2 结果
10例受试者口服二甲双胍1.0 g两种制剂后的平均药时曲线图，见图2。从试验得知盐酸二甲双胍胶囊和片剂的达峰时间在2 h左右，峰浓度值分别为2 256.46 μg.L-1±677.94 μg.L-1和2 304.76 μg.L-1±588.96 μg.L-1。10例受试者口服1.0 g两种制剂后的药代动力学参数自身对照见表1。相对生物利用度：以片剂为标准参比制剂计算胶囊的相对生物利用度，F(%)=AUC胶囊/AUC片剂×100%=13 409.20/12 988.72×100%=103.24%。统计分析：对表1中的药动学参数进行单双侧t检验，差异均无显著性(P>0.05)，表明两者具有生物等效。表1 10例受试者口服1.0 g两种制剂后的药代动力学参数自身对照(
±s) 参数
, 百拇医药
Ke
(/h)
T1/2β
(h)
AUC
CL
(L.h-1)
Vd
(L)
Tmax
(h)
Cmax
, 百拇医药
胶囊
0.29±0.03
2.4±0.23
13 409.20±3 548
79.44±31.19
287.33±86.42
1.83±0.56
2 251.3±487.8
片剂
0.29±0.03
2.4±0.28
12 989.72±3 390
, http://www.100md.com
81.06±18.05
312.51±100.83
1.83±0.50
2 236.5±501.6
P
>0.05
>0.05
>0.05
>0.05
>0.05
>0.05
>0.05
, 百拇医药
图2 10例健康志愿者口服二甲
双胍1 g两种制剂的平均血药浓度
3 讨论
我们采用反相高效液相色谱法进行盐酸二甲双胍的血药浓度测定，提取方法简单方便，所用试剂少，成本低，且对环境造成的污染小，本法的灵敏度和精确度、回收率高。并且每次测定所用血清量少，适用于临床血药浓度测定和药物动力学研究。从试验结果可知两种制剂在人体内的药物动力学过程存在着人体差异，但其药物动力学主要参数相似，经统计学处理，差异无显著性(我们采用反相高效液相色谱法进行盐酸二甲双胍的血药浓度测定，提取方法简单方便，所用试剂少，成本低，且对环境造成的污染小，本法的灵敏度和精确度、回收率高。并且每次测定所用血清量少，适用于临床血药浓度测定和药物动力学研究。从试验结果可知两种制剂在人体内的药物动力学过程存在着人体差异，但其药物动力学主要参数相似，经统计学处理，差异无显著性(P>0.05)，且与文献报道相似〔3，4〕，因此这两种制剂具有生物等效性。
, 百拇医药
(本实验在上海市静安区中心医院临床药理科进行)
作者简介：范鲁雁，女，47岁，副主任药师
参考文献
1 Marchetti P, Benzi L, Cecchetti P et al. Plasma biguanide levels are correlated with metabolic effects in diabetic patients. Clin Pharmacol Ther, 1987;41(4):450～454
2 Somogyi A, Stockley C, Keaf J et al. Reduction of metformin renal tubular seretion by cimetidine in man. Br J Clin Pharmacol, 1987;23(5):545～551
, 百拇医药
3 刘 京，申竹芳，谢明智等.HPLC法测定盐酸二甲双胍肠溶胶囊及片剂的人体药代动力学及其生物利用度. 中国临床药理学杂志, 1994；10(3)：165～170
4 Sambol NC, Chiang J, Lin ET et al. Kidney function and age are both predictors of pharmacokinetics of metformin. J Clin Pharmacol, 1995;35(11):1 094～1 102
1999-04-05收稿
1999-08-06修回, 百拇医药
单位：范鲁雁 安徽省合肥市第一人民医院药剂科，合肥 230061；仇益群 汤 震 上海市静安区中心医院临床药学与临床药理科，上海 200040
关键词：二甲双胍；药代动力学；生物利用度
安徽医科大学学报990411 摘要：目的 研究盐酸二甲双胍胶囊在正常人体内的药物动力学和相对生物利用度。方法 10例健康男性志愿者，随机分为两组，分别交叉口服盐酸二甲双胍胶囊和片剂采用通过反相HPLC法测定盐酸二甲双胍在体内的药物浓度。结果 口服1 000 mg盐酸二甲双胍胶囊片剂的达峰时间(Tmax)分别为1.83 h±0.56 h和1.83 h±0.50 h；峰浓度(Cmax)分别为2.25 mg.L-1±0.49 mg.L-1和2.24 mg.L-1±0.50 mg.L-1；消除半衰期(T1/2β)分别为2.40 h±0.23 h和2.40 h±0.28 h；药时曲线下面积(AUC)分别为13.41 mg.h-1.L-1±3.55 mg.h-1.L-1和12.99 mg.h-1.L-1±3.39 mg.h-1.L-1，经t检验，两种剂型的药代动力学参数无显著性差异；口服盐酸二甲双胍胶囊对其片剂的相对生物利用度为103.24%。结论 两种制剂具有生物等效性。
, 百拇医药
中国图书资料分类法分类号：R977.15；R969.4
Pharmacokinetics and relative bioavailability of
metformin hydrochloride capsules
Fan Luyan, Chou Yichun, Tang Zhen
(Department of Pharmacy, First Peoples Hospital of Hefei,Hefei 230061)
Abstract Objective The present study focus on the pharmacokinatics and relative bioavailability of metformin hydrochloride in healthy volunteers. Methods A single oral dose of 1 000 mg of two different forms (capsules and tablets) of metformin hydrochloride were given to 10 healthy male volunteers in a randomized crossover study. Drug concentrations in plasma were assayed by reverse-HPLC method. Results The pharmacokinetic parameters of the two different forms were: Tmax(1.83±0.56) h, (1.83±0.50) h；Cmax(2.25±0.49) mg.L-1, (2.24±0.50) mg.L-1；T1/2β(2.40±0.23) h, (2.40±0.28) h；AUC(13.41±3.55) mg.h-1.L-1, (12.99±3.39) mg.h-1.L-1 respectively. The pharmacokinetic parameters showed no significant differences between two different forms (P>0.05). The relative bioavailability of capsules to tablets was 103.24%. Conclusion Two different forms of metformin hydrochloride are bioequivalent.
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MeSH meformin pharmacokinetics; biological availability
二甲双胍是双胍类口服降糖药。由于它降糖作用明显、肯定，不引起低血糖，可明显降低餐后高血糖，适合Ⅱ型糖尿病患者；同时它还改善胰岛素抗性等〔1，2〕。因此，在临床得到广泛应用。我们采用反相高效液相色谱法对盐酸二甲双胍胶囊的血药浓度进行测定，以研究其在健康志愿者体内药物动力学和相对生物利用度，现将结果报道如下。
1 材料和方法
1.1 药物与试剂 盐酸二甲双胍胶囊：250 mg.粒-1，上海医药职大联合药厂，批号：980201。盐酸二甲双胍片剂：250 mg.片-1，上海思富制药有限公司市售产品，批号：980301。盐酸二甲双胍标准品：由上海医药职大联合药厂提供，批号：970312。磷酸二氢钾、氢氧化钠均为分析纯，乙腈、甲醇为HPLC级。
, 百拇医药
1.2 仪器 瑞典Kontron仪器公司经济实用Ⅱ(EA Ⅱ)型高效液相仪；TDX CENTRIFUGE，美国雅培仪器公司；80-2离心沉淀器，上海手术器械厂；XW-80A旋涡混合器，上海医科大学仪器厂。
1.3 试验对象的选择 10例健康受试者，男性，平均年龄22.6岁±0.8岁，平均体重63 kg±7.5 kg。所有受试者在参加试验前均接受全面体格检查，包括心、肝、肾功能、血象等，检查结果提示均正常。受试者无药物过敏史，无长期服药和嗜酒史，2周内无细菌和病毒感染，4周内没有参加其它药物试验，3个月内无献血史。1.4 给药方法及采样时间 10例受试者按随机表采用双向随机交叉分配为A、B两组，A组先给予上海医药职大联合药厂试制的盐酸二甲双胍胶囊(250 mg.粒-1)，经2周洗脱期后再给予市售上海思富制药有限公司的盐酸二甲双胍片(250 mg.片-1)，B组则相反。受试者隔夜禁食。试验当日，清晨空腹口服盐酸二甲双胍胶囊或片剂250 mg×4，并喝水200 ml，服药后禁食4 h。受试者在受试过程中禁烟、酒和高脂肪食物，全日服用标准餐。每位受试者分别于服药前、服药后的0.5，1，1.5，2，3，4，6，8，10 h，从前臂静脉取血3 ml，静置，4 000 r.min-1，离心5 min，取血清1 ml，置于-20℃储存，待测。
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1.5 血药浓度测定方法
1.5.1 色谱条件 色谱柱：国产YWGC18反相色谱柱(10 μm, 4.6 mm×15 cm)；流动相：乙腈 0.005 mol.L-1，磷酸缓冲液(pH 3.5)(80：20 V/V)；流速：1.5 ml.min-1；灵敏度 0.001AUFs；紫外检测波长：240 nm；柱温：室温。
1.5.2 测定方法 取待测血清0.5 ml，加入2 ml乙腈，振荡均匀5 min，1 000 r.min-1，离心5 min，取上清液20 μl进样。〔3〕
1.5.3 标准曲线制备 取6支试管，加入正常人血清0.5 ml，然后加入1 g.L-1盐酸二甲双胍标准品，配制成浓度分别为0.05， 0.25， 0.5， 1， 2， 4 mg.L-1的盐酸二甲双胍标准品，按样品处理方法进行处理，进样20 μl，获得相应的血清样品色谱图(见图1)。测定盐酸二双胍的峰面积值，结果如下，以浓度为X，峰面积比为Y，得回归方程：Y=0.09619X+1.1466，相关系数：r=0.9996。提示盐酸二甲双胍的浓度在0.05～4 mg.L-1范围内有良好的线性。
, 百拇医药
图1 盐酸二甲双胍血清图谱
A 空白血清；B 盐酸二甲双胍标准品水溶液；C 盐酸二甲双胍标准品血浆
1.5.4 回收率实验与精密度实验 精确配制50， 500， 2 000 mg.L-1盐酸二甲双胍血清标准品，按样品处理方法进行处理，取20 μl进样，并配制相同浓度的盐酸二甲双胍溶液标准品，按样品处理方法进行处理，取20 μl进样，求得相对回收率。取上述3个浓度盐酸二甲双胍血清标准品，按样品处理方法进行处理，同1天内进样3次，求得日内变异，连续3天进样，求得日间变异。测得3种浓度的回收率分别为95.64%，95.04%，94.91%。3种浓度的日内RSD≤3.33%；日间RSD≤8.99%。
1.6 计算方法 采用上海第二医科大学药理教研室研制的PK-GRAPH动力学软件包，按二室模型进行拟合，计算出下列动力学参数：Tmax、Cmax、AUC、T1/2β、CL、Vd、Ke、相对生物利用度F。
, 百拇医药
2 结果
10例受试者口服二甲双胍1.0 g两种制剂后的平均药时曲线图，见图2。从试验得知盐酸二甲双胍胶囊和片剂的达峰时间在2 h左右，峰浓度值分别为2 256.46 μg.L-1±677.94 μg.L-1和2 304.76 μg.L-1±588.96 μg.L-1。10例受试者口服1.0 g两种制剂后的药代动力学参数自身对照见表1。相对生物利用度：以片剂为标准参比制剂计算胶囊的相对生物利用度，F(%)=AUC胶囊/AUC片剂×100%=13 409.20/12 988.72×100%=103.24%。统计分析：对表1中的药动学参数进行单双侧t检验，差异均无显著性(P>0.05)，表明两者具有生物等效。表1 10例受试者口服1.0 g两种制剂后的药代动力学参数自身对照(
±s) 参数, 百拇医药
Ke
(/h)
T1/2β
(h)
AUC
CL
(L.h-1)
Vd
(L)
Tmax
(h)
Cmax
, 百拇医药
胶囊
0.29±0.03
2.4±0.23
13 409.20±3 548
79.44±31.19
287.33±86.42
1.83±0.56
2 251.3±487.8
片剂
0.29±0.03
2.4±0.28
12 989.72±3 390
, http://www.100md.com
81.06±18.05
312.51±100.83
1.83±0.50
2 236.5±501.6
P
>0.05
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图2 10例健康志愿者口服二甲
双胍1 g两种制剂的平均血药浓度
3 讨论
我们采用反相高效液相色谱法进行盐酸二甲双胍的血药浓度测定，提取方法简单方便，所用试剂少，成本低，且对环境造成的污染小，本法的灵敏度和精确度、回收率高。并且每次测定所用血清量少，适用于临床血药浓度测定和药物动力学研究。从试验结果可知两种制剂在人体内的药物动力学过程存在着人体差异，但其药物动力学主要参数相似，经统计学处理，差异无显著性(我们采用反相高效液相色谱法进行盐酸二甲双胍的血药浓度测定，提取方法简单方便，所用试剂少，成本低，且对环境造成的污染小，本法的灵敏度和精确度、回收率高。并且每次测定所用血清量少，适用于临床血药浓度测定和药物动力学研究。从试验结果可知两种制剂在人体内的药物动力学过程存在着人体差异，但其药物动力学主要参数相似，经统计学处理，差异无显著性(P>0.05)，且与文献报道相似〔3，4〕，因此这两种制剂具有生物等效性。
, 百拇医药
(本实验在上海市静安区中心医院临床药理科进行)
作者简介：范鲁雁，女，47岁，副主任药师
参考文献
1 Marchetti P, Benzi L, Cecchetti P et al. Plasma biguanide levels are correlated with metabolic effects in diabetic patients. Clin Pharmacol Ther, 1987;41(4):450～454
2 Somogyi A, Stockley C, Keaf J et al. Reduction of metformin renal tubular seretion by cimetidine in man. Br J Clin Pharmacol, 1987;23(5):545～551
, 百拇医药
3 刘 京，申竹芳，谢明智等.HPLC法测定盐酸二甲双胍肠溶胶囊及片剂的人体药代动力学及其生物利用度. 中国临床药理学杂志, 1994；10(3)：165～170
4 Sambol NC, Chiang J, Lin ET et al. Kidney function and age are both predictors of pharmacokinetics of metformin. J Clin Pharmacol, 1995;35(11):1 094～1 102
1999-04-05收稿
1999-08-06修回, 百拇医药