nm23蛋白表达与胃癌、大肠癌DNA含量及增殖细胞核抗原表达的关系
作者：王川 张祥福 杨发端 卢辉山
单位：
关键词：
一 一、材料与方法
1.nm23/二磷酸核苷激酶(NDPK)表达阴性、弱阳性或强阳性的胃癌[1]各11例、大肠癌[2]各8例，存档组织块重新制备4 μm连续切片。即用型抗增殖细胞核抗原(PCNA)单克隆抗体(PC10)购自福州迈新生物技术开发公司。PCNA指数(PI)为1 000个癌细胞核中PCNA阳性细胞核数目，以百分数表示。
2.切片行Feulgen染色[3]，使用CMIAS 007真彩色医学图像分析系统，每例检测约200个癌细胞核积分吸光度(IA)，分别以同切片中癌周围30～40个小淋巴细胞核作为正常二倍体(DNA 2c)对照。按单个癌细胞核IA与淋巴细胞核平均IA的比值统计DNA 2c、DNA 3c～4c、DNA 5c和DNA>5c癌细胞的百分率，DNA>5c细胞为非整倍体细胞[3]。每一例肿瘤DNA指数(DI)=癌细胞核平均IA值÷对照淋巴细胞核平均IA值，代表肿瘤总体DNA含量水平。
, 百拇医药
3.统计数据以平均值±标准差(
±s)表示，统计学采用t检验分析组间差异。
二、结果
1.胃癌nm23/NDPK表达与细胞核DNA含量及PCNA表达的关系：与nm23/NDPK表达弱阳性或强阳性的胃癌比较，nm23/NDPK阴性者PCNA表达水平高、DNA指数高，DNA2c细胞检出率低、DNA>5c细胞检出率高(表1)。
表1 胃癌nm23/NDPK表达与细胞核DNA含量、PCNA表达的关系(±s)
, 百拇医药
nm23/NDPK表达
DI
DNA倍体百分率(%)
PI(%)
2c
3c～4c
5c
>5c
阴性
2.3±0.7
21.2± 8.1
40.3±12.4
, 百拇医药 12.2±2.8
26.4±15.3
48.7±24.1
弱阳性
1.7±0.4*
35.1±14.5*
42.0± 7.6
10.0±5.7
12.9± 8.6*
25.9±17.6*
强阳性
, 百拇医药
1.5±0.5**
44.4±20.2**
36.4± 9.5
8.3±5.7
10.9±10.9*
27.1±15.0*
注：与nm23/NDPK阴性组比较：*P<0.05；**P<0.01 2.大肠癌nm23/NDPK表达与细胞核DNA含量及PCNA表达的关系：与nm23/NDPK表达弱阳性或强阳性的大肠癌相比较，nm23/NDPK阴性表达者PCNA表达水平高，DNA指数高，DNA 2c细胞检出率低、DNA 5c或DNA>5c细胞检出率明显增高(表2)。
, 百拇医药
表2 大肠癌nm23/NDPK表达与细胞核DNA含量、PCNA表达的关系(±s)
nm23/NDPK表达
DI
DNA倍体百分率(%)
PI(%)
2c
3c～4c
5c
>5c
, 百拇医药 阴性
2.3±0.3
17.5± 5.1
37.5± 7.3
18.1±5.2
26.8±9.4
56.8±24.8
弱阳性
1.4±0.4**
57.3±19.8**
29.5±10.5
6.7±5.3*
, 百拇医药
6.5±5.8**
25.5±10.1*
强阳性
1.3±0.2**
50.5±10.9**
37.0± 9.7
7.2±2.4**
5.4±3.8**
25.2±12.7*
注：与nm23/NDPK阴性组比较：*P<0.01；**P<0.001
, 百拇医药
三、讨论
nm23基因定位于染色体17q21～22处[4]，其编码产物NDPK主要存在于细胞浆和质膜上，通过合成三磷酸核苷(除ATP外)而参与G蛋白介导的信号传递、细胞骨架微管的聚合或解聚、以及纺锤体的形成等过程。我们曾报道，nm23基因产物/NDPK的表达与大肠癌[2]和胃癌[1]区域淋巴结转移、癌组织浸润深度、临床病理分期呈密切负相关，与患者的术后生存率呈正相关；提示检测nm23/NDPK表达水平可作为判断胃癌、大肠癌预后的辅助指标。
细胞核DNA含量和PCNA表达状况是反映细胞增殖能力的重要指标[3，5]。本研究结果显示nm23/NDPK表达阴性的胃癌和大肠癌DNA指数及PCNA指数均显著高于nm23/NDPK阳性(包括强阳性和弱阳性)者，提示相对于nm23/NDPK阳性表达的胃癌或大肠癌而言，nm23/NDPK阴性者具有更强的增殖活性，这可能是导致nm23/NDPK阴性表达的胃癌或大肠癌具有更为恶性的生物学行为的基础。在DNA倍体分布形式上，nm23/NDPK阴性表达的胃癌和大肠癌非整倍体细胞(DNA>5c)百分率显著高于nm23/NDPK阳性者，而二倍体细胞比率则明显降低，表明nm23/NDPK失表达与胃癌、大肠癌非整倍体细胞的形成有关，其机制可能在于nm23/NDPK失表达使纺锤体的结构或功能异常，从而导致非整倍体细胞的形成。
, 百拇医药
本课题受福建省重点科技项目基金资助(基金编号95-Z-133)
参考文献
1 王川，张祥福，杨发端，等.nm23基因在人胃癌中的表达及其与预后的关系.中华外科杂志，1996，34：249.
2 王川，张祥福，杨发端，等.nm23基因产物/NDPK在大肠癌中的表达及其临床意义.中华病理学杂志，1995，24：356-358.
3 Erhardt K, Auer G, Bj
rkholm E, et al. Prognostic significance of nuclesr DNA content in serous ovarian tumors. Cancer Res, 1984,44：2198-2202.
, http://www.100md.com
4 Backer JM, Mendola CF, Kovescdi I, et al. Chromosomal localization and nucleoside diphosphate kinase activity of human metastasis-suppressor genes nm23-1 and nm23-2.Oncogene, 1993,8：497-502.
5 Ogata K, Kurki P, Celis JE, et al. Monoclonal antibodies to a nuclear protein associated with DNA replication. Exp Cell Res, 1987,168：475-486.
(收稿：1997-01-13), 百拇医药
单位：
关键词：
一 一、材料与方法
1.nm23/二磷酸核苷激酶(NDPK)表达阴性、弱阳性或强阳性的胃癌[1]各11例、大肠癌[2]各8例，存档组织块重新制备4 μm连续切片。即用型抗增殖细胞核抗原(PCNA)单克隆抗体(PC10)购自福州迈新生物技术开发公司。PCNA指数(PI)为1 000个癌细胞核中PCNA阳性细胞核数目，以百分数表示。
2.切片行Feulgen染色[3]，使用CMIAS 007真彩色医学图像分析系统，每例检测约200个癌细胞核积分吸光度(IA)，分别以同切片中癌周围30～40个小淋巴细胞核作为正常二倍体(DNA 2c)对照。按单个癌细胞核IA与淋巴细胞核平均IA的比值统计DNA 2c、DNA 3c～4c、DNA 5c和DNA>5c癌细胞的百分率，DNA>5c细胞为非整倍体细胞[3]。每一例肿瘤DNA指数(DI)=癌细胞核平均IA值÷对照淋巴细胞核平均IA值，代表肿瘤总体DNA含量水平。
, 百拇医药
3.统计数据以平均值±标准差(
±s)表示，统计学采用t检验分析组间差异。二、结果
1.胃癌nm23/NDPK表达与细胞核DNA含量及PCNA表达的关系：与nm23/NDPK表达弱阳性或强阳性的胃癌比较，nm23/NDPK阴性者PCNA表达水平高、DNA指数高，DNA2c细胞检出率低、DNA>5c细胞检出率高(表1)。
表1 胃癌nm23/NDPK表达与细胞核DNA含量、PCNA表达的关系(
±s), 百拇医药
nm23/NDPK表达
DI
DNA倍体百分率(%)
PI(%)
2c
3c～4c
5c
>5c
阴性
2.3±0.7
21.2± 8.1
40.3±12.4
, 百拇医药 12.2±2.8
26.4±15.3
48.7±24.1
弱阳性
1.7±0.4*
35.1±14.5*
42.0± 7.6
10.0±5.7
12.9± 8.6*
25.9±17.6*
强阳性
, 百拇医药
1.5±0.5**
44.4±20.2**
36.4± 9.5
8.3±5.7
10.9±10.9*
27.1±15.0*
注：与nm23/NDPK阴性组比较：*P<0.05；**P<0.01 2.大肠癌nm23/NDPK表达与细胞核DNA含量及PCNA表达的关系：与nm23/NDPK表达弱阳性或强阳性的大肠癌相比较，nm23/NDPK阴性表达者PCNA表达水平高，DNA指数高，DNA 2c细胞检出率低、DNA 5c或DNA>5c细胞检出率明显增高(表2)。
, 百拇医药
表2 大肠癌nm23/NDPK表达与细胞核DNA含量、PCNA表达的关系(
±s)nm23/NDPK表达
DI
DNA倍体百分率(%)
PI(%)
2c
3c～4c
5c
>5c
, 百拇医药 阴性
2.3±0.3
17.5± 5.1
37.5± 7.3
18.1±5.2
26.8±9.4
56.8±24.8
弱阳性
1.4±0.4**
57.3±19.8**
29.5±10.5
6.7±5.3*
, 百拇医药
6.5±5.8**
25.5±10.1*
强阳性
1.3±0.2**
50.5±10.9**
37.0± 9.7
7.2±2.4**
5.4±3.8**
25.2±12.7*
注：与nm23/NDPK阴性组比较：*P<0.01；**P<0.001
, 百拇医药
三、讨论
nm23基因定位于染色体17q21～22处[4]，其编码产物NDPK主要存在于细胞浆和质膜上，通过合成三磷酸核苷(除ATP外)而参与G蛋白介导的信号传递、细胞骨架微管的聚合或解聚、以及纺锤体的形成等过程。我们曾报道，nm23基因产物/NDPK的表达与大肠癌[2]和胃癌[1]区域淋巴结转移、癌组织浸润深度、临床病理分期呈密切负相关，与患者的术后生存率呈正相关；提示检测nm23/NDPK表达水平可作为判断胃癌、大肠癌预后的辅助指标。
细胞核DNA含量和PCNA表达状况是反映细胞增殖能力的重要指标[3，5]。本研究结果显示nm23/NDPK表达阴性的胃癌和大肠癌DNA指数及PCNA指数均显著高于nm23/NDPK阳性(包括强阳性和弱阳性)者，提示相对于nm23/NDPK阳性表达的胃癌或大肠癌而言，nm23/NDPK阴性者具有更强的增殖活性，这可能是导致nm23/NDPK阴性表达的胃癌或大肠癌具有更为恶性的生物学行为的基础。在DNA倍体分布形式上，nm23/NDPK阴性表达的胃癌和大肠癌非整倍体细胞(DNA>5c)百分率显著高于nm23/NDPK阳性者，而二倍体细胞比率则明显降低，表明nm23/NDPK失表达与胃癌、大肠癌非整倍体细胞的形成有关，其机制可能在于nm23/NDPK失表达使纺锤体的结构或功能异常，从而导致非整倍体细胞的形成。
, 百拇医药
本课题受福建省重点科技项目基金资助(基金编号95-Z-133)
参考文献
1 王川，张祥福，杨发端，等.nm23基因在人胃癌中的表达及其与预后的关系.中华外科杂志，1996，34：249.
2 王川，张祥福，杨发端，等.nm23基因产物/NDPK在大肠癌中的表达及其临床意义.中华病理学杂志，1995，24：356-358.
3 Erhardt K, Auer G, Bj
rkholm E, et al. Prognostic significance of nuclesr DNA content in serous ovarian tumors. Cancer Res, 1984,44：2198-2202., http://www.100md.com
4 Backer JM, Mendola CF, Kovescdi I, et al. Chromosomal localization and nucleoside diphosphate kinase activity of human metastasis-suppressor genes nm23-1 and nm23-2.Oncogene, 1993,8：497-502.
5 Ogata K, Kurki P, Celis JE, et al. Monoclonal antibodies to a nuclear protein associated with DNA replication. Exp Cell Res, 1987,168：475-486.
(收稿：1997-01-13), 百拇医药