实验兔眼晶体残留囊膜的标本制作
作者：张可杰 李绍珍
单位：646000 四川泸州医学院附属医院眼科(张可杰)；中山医科大学中山眼科中心(李绍珍)
关键词：
中华病理学杂志/990221 白内障囊外摘除术合并后房型人工晶体植入术，以其手术安全、并发症少，使白内障复明手术达到了较理想的水平[1]。但由于残留的前囊下晶体上皮细胞异常增殖，并沿后囊移行，引起延迟的后发性白内障的发生；并且囊膜上的增殖细胞和胶原收缩，使残囊产生皱襞[2-4]，二者均严重损害已恢复的视力，成为囊外白内障手术常见的术后并发症，且术后2～3年发生率在成人为15%～50%，在婴幼儿几乎达100%[3，5]。为此，许多学者对清除和抑制残留的晶体上皮细胞进行了大量的实验和临床研究[6-8]。为了观察和研究白内障术后残留的囊膜及其下晶体上皮细胞生长、增殖和变化，我们创立了一种使晶体残囊膜标本保持完整的制作方法，效果十分满意。
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一、材料和方法
1.动物：29只新西兰大白兔，雄性，体重2.5-3.0 kg。由中山医科大学实验动物中心提供。
2.分组及手术方式： 将29只兔随机分为3组。第1组11只(22只眼)，术后30分钟摘除眼球；第2组7只(14只眼)，术后3天摘除眼球；第3组11只(22只眼)，术后60天摘除眼球。29只兔(58只眼)中，第1、2组各3只兔(12只眼)行晶体囊外摘除术，其余23只兔(46只眼)均行晶体超声乳化术。
3.晶体残囊膜标本制作：(1)眼球摘除后立即放入4%甲醛液中，固定24小时；(2)将已固定的眼球沿角膜缘剪除角膜；(3)沿赤道前环形剪除眼后段球壁和玻璃体，其中12点钟位球壁与角膜缘的距离较6点钟位长3mm，以便切片后区分方位；(4)将标本再固定24小时后，经逐级酒精脱水，二甲苯透明，浸蜡3小时；(5)把浸蜡后的标本从2～5点钟位或7～11点钟位垂直切除后，以此平面为切片面，立即包埋于蜡块中；(6)切片机除去1～1.5mm组织后，开始切片。切片厚6 μm，常规HE染色，透明、封片后，即制得完整的残留晶体囊膜切片；(7)光镜下观察、摄影。
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二、结果
制片均获成功，易移位的瞳孔区的囊膜可满意的显示(图1)。
图1 瞳孔及瞳孔区松弛的残留的晶体后囊膜 HE×50
三、讨论
晶体囊膜薄而透明，前囊厚约7～11 μm，后囊仅为4～7 μm，肉眼看不见。晶体囊外摘除术后，由于无晶体内容物填充，残留的晶体囊膜松驰。但在未损伤的晶体悬韧带均匀牵引下，尚能维持正常的位置和平展状态。若采用将眼球前后径剖开的制作切片方法，晶体囊膜的一侧失去了牵引，发生收缩、卷曲、移位，尤其是后囊膜中央部位，变化更明显。再经过制片过程中所必需的程序，如脱水、透明、浸蜡等，囊膜的变形、移位更加严重。切片后不能观察到正常位置或完整的晶体残囊膜，甚至切片中看不到晶体囊膜，导致制片失败。 用本方法制片，由于在标本处理的全过程中，几乎始终保持着晶体悬韧带对残留的晶体囊膜的均匀牵引，维持着晶体囊膜的正常位置和平展状态，克服了标本制作过程中脱水及冷热变化等使组织挛缩，囊膜变形、移位等因素。待标本浸蜡后，蜡质已渗入组织中，标本已基本定形，囊膜已具有一定抗皱缩能力，才切除一侧的睫状体及囊膜，并立即包埋于温度相似的蜡块中，消除了冷热变化对囊膜可能产生的退缩变形作用。切片后显微镜下可观察到有完整晶体残囊膜；通过观察保留的眼球壁的长短，可分辨出切片的方位。此方法简单、有效，3组不同时间摘除眼球所制得的标本切片均获成功，是一种效果满意的制作晶体囊膜切片的好方法。
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本课题受美国中华医学基金会(CMB)基金资助(编号90-534)
参考文献
1 张尧贞，何守志.国内白内障手术现状.中华眼科杂志，1993，29：5-7.
2 Jaffe NS, Jaffe MS, Jaffe GF. Retained lens material. In：Jaffe NS, Jaffe MS, Jaffe GF, eds. cataract surgery and its complication. 5th ed. St. Louis： CV Mosby Co， 1990.560-576.
3 McDonnell PJ, Green WR, Maumenee AE, et al. Pathology of intraocular lenses in 33 eyes examined postmortem. Ophthalmology, 1983,90:386-403.
, 百拇医药
4 McDonnell PJ, Zarbin MA, Green WR. Posterior capsule opacification in pseudophakic eyes. Ophthalmology, 1983,90:1548-1553.
5 Nishi O. Incidence of Posterior capsule opacification in eyes with and without posterior chamber intraocular lenses. J Cataract Refract Surg, 1986,12:519-522.
6 Chollet P, Malecaze F, Hullin F, et al. Inhibition of intraocular fibrin formation with annexin V. Br J Ophthalmol, 1992, 76:450-452.
, 百拇医药
7 Nishi O, Nishi K, Hikida M . Remove of lens epithelial cells following Loosening of the junctional complex. J Cataract Refract Surg, 1993, 19:56-61.
8 Hara T, Hara T, Yasuda A, et al. Accomodative intraocular Lens with spring action—— Part 2.Fixation in the living rabbit. Ophthalmic Surg, 1992,23:632-635.
(收稿：1998-03-10 修回：1998-08-14), 百拇医药
单位：646000 四川泸州医学院附属医院眼科(张可杰)；中山医科大学中山眼科中心(李绍珍)
关键词：
中华病理学杂志/990221 白内障囊外摘除术合并后房型人工晶体植入术，以其手术安全、并发症少，使白内障复明手术达到了较理想的水平[1]。但由于残留的前囊下晶体上皮细胞异常增殖，并沿后囊移行，引起延迟的后发性白内障的发生；并且囊膜上的增殖细胞和胶原收缩，使残囊产生皱襞[2-4]，二者均严重损害已恢复的视力，成为囊外白内障手术常见的术后并发症，且术后2～3年发生率在成人为15%～50%，在婴幼儿几乎达100%[3，5]。为此，许多学者对清除和抑制残留的晶体上皮细胞进行了大量的实验和临床研究[6-8]。为了观察和研究白内障术后残留的囊膜及其下晶体上皮细胞生长、增殖和变化，我们创立了一种使晶体残囊膜标本保持完整的制作方法，效果十分满意。
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一、材料和方法
1.动物：29只新西兰大白兔，雄性，体重2.5-3.0 kg。由中山医科大学实验动物中心提供。
2.分组及手术方式： 将29只兔随机分为3组。第1组11只(22只眼)，术后30分钟摘除眼球；第2组7只(14只眼)，术后3天摘除眼球；第3组11只(22只眼)，术后60天摘除眼球。29只兔(58只眼)中，第1、2组各3只兔(12只眼)行晶体囊外摘除术，其余23只兔(46只眼)均行晶体超声乳化术。
3.晶体残囊膜标本制作：(1)眼球摘除后立即放入4%甲醛液中，固定24小时；(2)将已固定的眼球沿角膜缘剪除角膜；(3)沿赤道前环形剪除眼后段球壁和玻璃体，其中12点钟位球壁与角膜缘的距离较6点钟位长3mm，以便切片后区分方位；(4)将标本再固定24小时后，经逐级酒精脱水，二甲苯透明，浸蜡3小时；(5)把浸蜡后的标本从2～5点钟位或7～11点钟位垂直切除后，以此平面为切片面，立即包埋于蜡块中；(6)切片机除去1～1.5mm组织后，开始切片。切片厚6 μm，常规HE染色，透明、封片后，即制得完整的残留晶体囊膜切片；(7)光镜下观察、摄影。
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二、结果
制片均获成功，易移位的瞳孔区的囊膜可满意的显示(图1)。
图1 瞳孔及瞳孔区松弛的残留的晶体后囊膜 HE×50
三、讨论
晶体囊膜薄而透明，前囊厚约7～11 μm，后囊仅为4～7 μm，肉眼看不见。晶体囊外摘除术后，由于无晶体内容物填充，残留的晶体囊膜松驰。但在未损伤的晶体悬韧带均匀牵引下，尚能维持正常的位置和平展状态。若采用将眼球前后径剖开的制作切片方法，晶体囊膜的一侧失去了牵引，发生收缩、卷曲、移位，尤其是后囊膜中央部位，变化更明显。再经过制片过程中所必需的程序，如脱水、透明、浸蜡等，囊膜的变形、移位更加严重。切片后不能观察到正常位置或完整的晶体残囊膜，甚至切片中看不到晶体囊膜，导致制片失败。 用本方法制片，由于在标本处理的全过程中，几乎始终保持着晶体悬韧带对残留的晶体囊膜的均匀牵引，维持着晶体囊膜的正常位置和平展状态，克服了标本制作过程中脱水及冷热变化等使组织挛缩，囊膜变形、移位等因素。待标本浸蜡后，蜡质已渗入组织中，标本已基本定形，囊膜已具有一定抗皱缩能力，才切除一侧的睫状体及囊膜，并立即包埋于温度相似的蜡块中，消除了冷热变化对囊膜可能产生的退缩变形作用。切片后显微镜下可观察到有完整晶体残囊膜；通过观察保留的眼球壁的长短，可分辨出切片的方位。此方法简单、有效，3组不同时间摘除眼球所制得的标本切片均获成功，是一种效果满意的制作晶体囊膜切片的好方法。
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本课题受美国中华医学基金会(CMB)基金资助(编号90-534)
参考文献
1 张尧贞，何守志.国内白内障手术现状.中华眼科杂志，1993，29：5-7.
2 Jaffe NS, Jaffe MS, Jaffe GF. Retained lens material. In：Jaffe NS, Jaffe MS, Jaffe GF, eds. cataract surgery and its complication. 5th ed. St. Louis： CV Mosby Co， 1990.560-576.
3 McDonnell PJ, Green WR, Maumenee AE, et al. Pathology of intraocular lenses in 33 eyes examined postmortem. Ophthalmology, 1983,90:386-403.
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4 McDonnell PJ, Zarbin MA, Green WR. Posterior capsule opacification in pseudophakic eyes. Ophthalmology, 1983,90:1548-1553.
5 Nishi O. Incidence of Posterior capsule opacification in eyes with and without posterior chamber intraocular lenses. J Cataract Refract Surg, 1986,12:519-522.
6 Chollet P, Malecaze F, Hullin F, et al. Inhibition of intraocular fibrin formation with annexin V. Br J Ophthalmol, 1992, 76:450-452.
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7 Nishi O, Nishi K, Hikida M . Remove of lens epithelial cells following Loosening of the junctional complex. J Cataract Refract Surg, 1993, 19:56-61.
8 Hara T, Hara T, Yasuda A, et al. Accomodative intraocular Lens with spring action—— Part 2.Fixation in the living rabbit. Ophthalmic Surg, 1992,23:632-635.
(收稿：1998-03-10 修回：1998-08-14), 百拇医药