结直肠癌mdm2、p21和p53蛋白的表达
作者：刘坤平 莫鉴锋 谢芝香 胡国洪 原伟权 张永东 叶勇
单位：
刘坤平(广东省清远市人民医院病理科 511500)；谢芝香(广东省清远市人民医院病理科 511500)；胡国洪(广东省清远市人民医院病理科 511500)；叶勇(广东省清远市人民医院病理科 511500)；莫鉴锋(广东省清远市人民医院外科 511500)；原伟权(广东省清远市人民医院肿瘤科 511500)；张永东(广东省清远市人民医院内科 511500)
关键词：
一一、材料与方法
1.标本：89份石蜡组织取自1991～1994年期间本院结直肠腺癌手术切除标本，术后随访3～6年。其中高分化腺癌30例，中分化腺癌44例， 低分化腺癌15例。按Dukes临床分期，无A期病例，B期42例，C期37例，D期10例。 纤维结肠镜及病理检查未发现异常的结直肠粘膜活检标本12例做对照。组织均常规甲醛溶液固定，石蜡包埋，连续切片，分别作常规HE染色，mdm2 、p21、p53蛋白免疫组化染色。
, 百拇医药
2.免疫组化染色：采用SP法，鼠抗mdm2(SMp14)、p53 (Do-1)、 p21(187)为Santa Cruz公司试剂，SP试剂盒为Zymed公司试剂，均购自北京中山生物技术有限公司。mdm2、p21、p53抗体浓度均为1∶50，并增加微波处理，以PBS代替一抗作阴性对照，已知阳性的食管癌标本作为阳性对照。
3.免疫组化染色结果判断标准：mdm2、p21、p53蛋白均以细胞核着色为阳性标记，无细胞核染色及阳性细胞数<5%为阴性，阳性细胞数>5%为阳性， 其中阳性细胞数>50%为强阳性。
4.统计学处理：进行卡方检验及继续校正卡方检验。
二、结果
1.各种蛋白阳性表达与临床、病理因素的关系: mdm2、p53、p21蛋白均为细胞核局灶性或弥漫性着色。12例正常结直肠粘膜未见三者的阳性表达。结直肠癌p53蛋白阳性率为62.9%(56/89)，其中强阳性表达36例。mdm2阳性率为24.7%(22/89)，未见强阳性表达。p21阳性率为35.9%(32/89)，其中强阳性表达2例。mdm2阳性率随组织学分级，临床分期增高有增高趋势，并在B、C期临床分期之间有显著差异(P<0.05)，但与组织学分级无关(P>0.05)。p53蛋白阳性率在组织学分级、临床分期之间差异无显著性(P>0.05)。p21阳性率随组织学分级、临床分期增高有下降趋势，并在低分化组有明显下降(P＝0.051)， 但未见与临床分期的相关性(P>0.05)。
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2.mdm2、p53、p21蛋白阳性表达与预后的关系：术后随访资料完整的41例病例，3年生存率为58.5%(24/41)，17 例死亡。mdm2阳性表达与术后第1年生存率明显相关(P<0.05)，与第2、第3年的生存率无关(P>0.05)。p53阳性表达率在各年生存组均低于死亡组，但差异无显著性(P>0.05)， p21阳性表达率在各年生存组均高于死亡组，但差异也未见显著性(P>0.05)。
3.mdm2、p21蛋白表达与p53蛋白表达的关系：22例mdm2阳性表达者中，p53阳性有18例，p53阴性有4例。32例p21阳性者中，p21阳性而p53阴性有20例，p21和p53均阳性有12例。mdm2、p53、p21均阳性有5例。
三、讨论
研究表明mdm2蛋白能与p53蛋白结合，导致 p53蛋白稳定易被检出,本结果及文献报道显示结直肠癌mdm2蛋白表达伴有不同程度p53蛋白同时表达的现象[1,2]，提示高表达的p53蛋白，不仅是由于p53基因突变，也包含有与mdm2结合功能失活性p53蛋白，mdm2 作为癌蛋白对结直肠癌的进展及预后有一定的影响，是评估预后的参考指标。本组结直肠癌p21阳性表达不但出现在p53阴性表达的病例里，也出现在p53阳性表达的病例里，与文献报道一致[1，3]，提示p21蛋白可通过p53依赖及非依赖性机制产生。本检测结果提示p21蛋白表达对结直肠癌组织分化可能有一定的影响，其对肿瘤发生发展的影响还有待进一步研究。
, http://www.100md.com
基金项目：本课题受广东省科委重点科技攻关项目基金(编号9622046-04)及卫生厅科研基金资助
参考文献：
[1]Valassiadou KE, Stefanaki K, Tzardi M,et al. Immunohistochemical expression of p53,bcl-2,mdm2 and waf1/p21 proteins in colorectal adenocarcinomas. Anticancer Res, 1997,17: 2571-2576.
[2]Hao XP, Gunther T, Roessner A, et al. Expression of mdm2 and p53 in epithelial neoplasms of the colorectum. Mol Pathol, 1998,51:26-29.
[3]Yasui W, Akama Y, Yokozaki H,et al. Expression of p21WAF1/CIP1 in colorectal adenomas and adenocarcinomas and its correlation with p53 protein expression. Pathol Int, 1997,47:470-477.
收稿日期：1999-03-15, 百拇医药
单位：
刘坤平(广东省清远市人民医院病理科 511500)；谢芝香(广东省清远市人民医院病理科 511500)；胡国洪(广东省清远市人民医院病理科 511500)；叶勇(广东省清远市人民医院病理科 511500)；莫鉴锋(广东省清远市人民医院外科 511500)；原伟权(广东省清远市人民医院肿瘤科 511500)；张永东(广东省清远市人民医院内科 511500)
关键词：
一一、材料与方法
1.标本：89份石蜡组织取自1991～1994年期间本院结直肠腺癌手术切除标本，术后随访3～6年。其中高分化腺癌30例，中分化腺癌44例， 低分化腺癌15例。按Dukes临床分期，无A期病例，B期42例，C期37例，D期10例。 纤维结肠镜及病理检查未发现异常的结直肠粘膜活检标本12例做对照。组织均常规甲醛溶液固定，石蜡包埋，连续切片，分别作常规HE染色，mdm2 、p21、p53蛋白免疫组化染色。
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2.免疫组化染色：采用SP法，鼠抗mdm2(SMp14)、p53 (Do-1)、 p21(187)为Santa Cruz公司试剂，SP试剂盒为Zymed公司试剂，均购自北京中山生物技术有限公司。mdm2、p21、p53抗体浓度均为1∶50，并增加微波处理，以PBS代替一抗作阴性对照，已知阳性的食管癌标本作为阳性对照。
3.免疫组化染色结果判断标准：mdm2、p21、p53蛋白均以细胞核着色为阳性标记，无细胞核染色及阳性细胞数<5%为阴性，阳性细胞数>5%为阳性， 其中阳性细胞数>50%为强阳性。
4.统计学处理：进行卡方检验及继续校正卡方检验。
二、结果
1.各种蛋白阳性表达与临床、病理因素的关系: mdm2、p53、p21蛋白均为细胞核局灶性或弥漫性着色。12例正常结直肠粘膜未见三者的阳性表达。结直肠癌p53蛋白阳性率为62.9%(56/89)，其中强阳性表达36例。mdm2阳性率为24.7%(22/89)，未见强阳性表达。p21阳性率为35.9%(32/89)，其中强阳性表达2例。mdm2阳性率随组织学分级，临床分期增高有增高趋势，并在B、C期临床分期之间有显著差异(P<0.05)，但与组织学分级无关(P>0.05)。p53蛋白阳性率在组织学分级、临床分期之间差异无显著性(P>0.05)。p21阳性率随组织学分级、临床分期增高有下降趋势，并在低分化组有明显下降(P＝0.051)， 但未见与临床分期的相关性(P>0.05)。
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2.mdm2、p53、p21蛋白阳性表达与预后的关系：术后随访资料完整的41例病例，3年生存率为58.5%(24/41)，17 例死亡。mdm2阳性表达与术后第1年生存率明显相关(P<0.05)，与第2、第3年的生存率无关(P>0.05)。p53阳性表达率在各年生存组均低于死亡组，但差异无显著性(P>0.05)， p21阳性表达率在各年生存组均高于死亡组，但差异也未见显著性(P>0.05)。
3.mdm2、p21蛋白表达与p53蛋白表达的关系：22例mdm2阳性表达者中，p53阳性有18例，p53阴性有4例。32例p21阳性者中，p21阳性而p53阴性有20例，p21和p53均阳性有12例。mdm2、p53、p21均阳性有5例。
三、讨论
研究表明mdm2蛋白能与p53蛋白结合，导致 p53蛋白稳定易被检出,本结果及文献报道显示结直肠癌mdm2蛋白表达伴有不同程度p53蛋白同时表达的现象[1,2]，提示高表达的p53蛋白，不仅是由于p53基因突变，也包含有与mdm2结合功能失活性p53蛋白，mdm2 作为癌蛋白对结直肠癌的进展及预后有一定的影响，是评估预后的参考指标。本组结直肠癌p21阳性表达不但出现在p53阴性表达的病例里，也出现在p53阳性表达的病例里，与文献报道一致[1，3]，提示p21蛋白可通过p53依赖及非依赖性机制产生。本检测结果提示p21蛋白表达对结直肠癌组织分化可能有一定的影响，其对肿瘤发生发展的影响还有待进一步研究。
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基金项目：本课题受广东省科委重点科技攻关项目基金(编号9622046-04)及卫生厅科研基金资助
参考文献：
[1]Valassiadou KE, Stefanaki K, Tzardi M,et al. Immunohistochemical expression of p53,bcl-2,mdm2 and waf1/p21 proteins in colorectal adenocarcinomas. Anticancer Res, 1997,17: 2571-2576.
[2]Hao XP, Gunther T, Roessner A, et al. Expression of mdm2 and p53 in epithelial neoplasms of the colorectum. Mol Pathol, 1998,51:26-29.
[3]Yasui W, Akama Y, Yokozaki H,et al. Expression of p21WAF1/CIP1 in colorectal adenomas and adenocarcinomas and its correlation with p53 protein expression. Pathol Int, 1997,47:470-477.
收稿日期：1999-03-15, 百拇医药