99Tcm-Q3代谢特性的研究
作者：范成中 谭天秩 李云春 匡安仁 梁正路 陈跃
单位：成都,华西医科大学附属第一医院核医学科 610041
关键词：
中华核医学杂志000422 对新型心肌灌注显像剂99Tcm-N,N′-亚乙基-二(乙酰丙酮亚胺)二[三(3-甲氧基-1-丙基)膦](Q3)进行代谢特性研究,为其心肌摄取、滞留和清除机制的解释提供实验依据。
一、材料和方法
Q3为自行合成。取Wistar种大鼠6只,雌、雄各3只,每只大鼠经尾静脉注射99Tcm-Q3 0.5 mL(含载体10 mg,约37 MBq),1 h后断头处死,尽快取出一定量有关组织,如血液、心、肝、肺、肾、小肠、尿液等。将所取组织先用生理盐水洗去血污,再用滤纸揩干,分别置于预冷的0.05 mol/L pH值7.2 Tris-HCl匀浆缓冲液中,迅速制成组织匀浆。以3 500 r/min低温离心10 min后,立即提取上清液,取1 mL上清液用等体积乙酸乙酯萃取,再3 500 r/min离心30 min分离有机层,用氮气吹干至10～20 μL。用TLC法以聚丙酰胺-6薄层层析条作支撑物,乙腈作展开剂,测定组织匀浆样品萃取有机相中各代谢成分的Rf值,并计算放射化学纯度。
, http://www.100md.com
将新鲜鼠血1 mL用20 U肝素抗凝后,以3 000 r/min离心10 min,分离血浆及血细胞,用电子天平分别称湿重,再准确称重100 μL后测定其放射性计数,根据它们的重量比求得血浆和血细胞各自总的放射性计数,并计算出血浆与全血的放射性百分率。血浆代谢物分析及大鼠尿液中代谢物分析同上。取健康人血2 mL,用20 U肝素抗凝后,加入99Tcm-Q3 3.7 MBq,漩涡混匀,20 ℃保温1.5 h后,进行分布及代谢特性分析。
二、结果
薄层层析法(TLC)测得标记物中各成分Rf值为:99Tcm-Q3 0.9～1.0;99TcmO-4 0.3～0.4;99Tcm-Sn胶体及水解还原99Tcm 0～0.1;[99Tcm(Ⅴ)(acac2en)O+]0.5。纸层析法(PC)检测标记物中各成分Rf值分别为:99Tcm-Q3 丙酮中为0～0.1;生理盐水中为0.9。2种展开剂中99TcmO-4均离开原点:丙酮中,Rf值为0.9;生理盐水中,Rf值为0.7～0.8。99Tcm-Sn胶体及水解还原99Tcm在2种展开剂中Rf值均为0～0.1。99Tcm(Ⅴ)-N,N′-亚乙基-二(乙酰丙酮亚胺)在丙酮中Rf值为0～0.1;生理盐水中为1。TLC 和PC法可相互验证。
, 百拇医药
大鼠心、肝、肺、肾、小肠组织匀浆的上清液及血浆、尿液中70%～80%的放射性可被乙酸乙酯萃取,其中分解产物仅为99TcmO-4,约20%的放射性不能被乙酸乙酯萃取。测得大鼠血浆中放射性分布占全血的(83±2.5)%(
±s,n=6),测得人血浆中的放射性分布占全血的82.7%,其代谢产物仅见99TcmO-4。
三、讨论
研究结果显示:99Tcm-Q3是一种极具潜力的新型心肌灌注显像剂[1-3],具有心肌摄取早、摄取值高、肝清除快的特点,推测其原因可能与3个因素有关:①99Tcm-Q3的+1价阳离子特性可能促使其经Na+-K+泵介入心肌细胞;②99Tcm-Q3中99Tcm(Ⅲ)阳离子核的电化学惰性,使之在体内不能被还原为中性的99Tcm(Ⅱ),故99Tcm-Q3一旦进入细胞便能稳定贮留[4];③99Tcm-Q3的亲脂性也使之更易进入心肌细胞。本研究结果发现:99Tcm-Q3注射1 h后,测得大鼠体内血浆、尿液及心肌、肝、肺、肾、小肠组织匀浆的乙酸乙酯萃取有机相中,绝大部分放射性仍以99Tcm-Q3原形存在,其他降解产物仅见99TcmO-4,未发现99Tcm-Q3的中间产物99Tcm-N,N′-亚乙基-二(乙酰丙酮亚胺)或其他产物。而且所见99TcmO-4可能主要来自99Tcm-Q3的自分解。这可能与机体主要器官组织中缺乏分解99Tcm-Q3的酶和(或)与99Tcm-Q3本身的99Tcm(Ⅲ)阳离子核的电化学惰性有关。对人离体血研究结果与鼠所得结果一致。
, 百拇医药
参 考 文 献
1，李云春, 谭天秩, 范成中, 等. 心肌灌注显像剂99Tcm-Q3的研制. 中华核医学杂志, 1999, 19:89-91.
2，Gerson MC, Millard RW, McGoron AJ, et al. Myocardial uptake and kinetic properties of 99 Tcm-Q3 in dogs. J Nucl Med, 1994, 35:1698-1706.
3，Gerson MC, Lukes J, Deutsch E, et al. Comparison of 99 Tcm-Q3 and 201 Tl for detection of coronary artery disease in humans. J Nucl Med, 1994, 35:580-586.
4，Deutsch E, Vanderheyden JL, Gerundini P, et al. Development of nonreducible 99 Tcm-(Ⅲ) cations as myocardial perfusion imaging agents: initial experience in humans. J Nucl Med, 1987, 28:1870-1880.
(收稿日期:1999-08-23), 百拇医药
单位：成都,华西医科大学附属第一医院核医学科 610041
关键词：
中华核医学杂志000422 对新型心肌灌注显像剂99Tcm-N,N′-亚乙基-二(乙酰丙酮亚胺)二[三(3-甲氧基-1-丙基)膦](Q3)进行代谢特性研究,为其心肌摄取、滞留和清除机制的解释提供实验依据。
一、材料和方法
Q3为自行合成。取Wistar种大鼠6只,雌、雄各3只,每只大鼠经尾静脉注射99Tcm-Q3 0.5 mL(含载体10 mg,约37 MBq),1 h后断头处死,尽快取出一定量有关组织,如血液、心、肝、肺、肾、小肠、尿液等。将所取组织先用生理盐水洗去血污,再用滤纸揩干,分别置于预冷的0.05 mol/L pH值7.2 Tris-HCl匀浆缓冲液中,迅速制成组织匀浆。以3 500 r/min低温离心10 min后,立即提取上清液,取1 mL上清液用等体积乙酸乙酯萃取,再3 500 r/min离心30 min分离有机层,用氮气吹干至10～20 μL。用TLC法以聚丙酰胺-6薄层层析条作支撑物,乙腈作展开剂,测定组织匀浆样品萃取有机相中各代谢成分的Rf值,并计算放射化学纯度。
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将新鲜鼠血1 mL用20 U肝素抗凝后,以3 000 r/min离心10 min,分离血浆及血细胞,用电子天平分别称湿重,再准确称重100 μL后测定其放射性计数,根据它们的重量比求得血浆和血细胞各自总的放射性计数,并计算出血浆与全血的放射性百分率。血浆代谢物分析及大鼠尿液中代谢物分析同上。取健康人血2 mL,用20 U肝素抗凝后,加入99Tcm-Q3 3.7 MBq,漩涡混匀,20 ℃保温1.5 h后,进行分布及代谢特性分析。
二、结果
薄层层析法(TLC)测得标记物中各成分Rf值为:99Tcm-Q3 0.9～1.0;99TcmO-4 0.3～0.4;99Tcm-Sn胶体及水解还原99Tcm 0～0.1;[99Tcm(Ⅴ)(acac2en)O+]0.5。纸层析法(PC)检测标记物中各成分Rf值分别为:99Tcm-Q3 丙酮中为0～0.1;生理盐水中为0.9。2种展开剂中99TcmO-4均离开原点:丙酮中,Rf值为0.9;生理盐水中,Rf值为0.7～0.8。99Tcm-Sn胶体及水解还原99Tcm在2种展开剂中Rf值均为0～0.1。99Tcm(Ⅴ)-N,N′-亚乙基-二(乙酰丙酮亚胺)在丙酮中Rf值为0～0.1;生理盐水中为1。TLC 和PC法可相互验证。
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大鼠心、肝、肺、肾、小肠组织匀浆的上清液及血浆、尿液中70%～80%的放射性可被乙酸乙酯萃取,其中分解产物仅为99TcmO-4,约20%的放射性不能被乙酸乙酯萃取。测得大鼠血浆中放射性分布占全血的(83±2.5)%(
±s,n=6),测得人血浆中的放射性分布占全血的82.7%,其代谢产物仅见99TcmO-4。三、讨论
研究结果显示:99Tcm-Q3是一种极具潜力的新型心肌灌注显像剂[1-3],具有心肌摄取早、摄取值高、肝清除快的特点,推测其原因可能与3个因素有关:①99Tcm-Q3的+1价阳离子特性可能促使其经Na+-K+泵介入心肌细胞;②99Tcm-Q3中99Tcm(Ⅲ)阳离子核的电化学惰性,使之在体内不能被还原为中性的99Tcm(Ⅱ),故99Tcm-Q3一旦进入细胞便能稳定贮留[4];③99Tcm-Q3的亲脂性也使之更易进入心肌细胞。本研究结果发现:99Tcm-Q3注射1 h后,测得大鼠体内血浆、尿液及心肌、肝、肺、肾、小肠组织匀浆的乙酸乙酯萃取有机相中,绝大部分放射性仍以99Tcm-Q3原形存在,其他降解产物仅见99TcmO-4,未发现99Tcm-Q3的中间产物99Tcm-N,N′-亚乙基-二(乙酰丙酮亚胺)或其他产物。而且所见99TcmO-4可能主要来自99Tcm-Q3的自分解。这可能与机体主要器官组织中缺乏分解99Tcm-Q3的酶和(或)与99Tcm-Q3本身的99Tcm(Ⅲ)阳离子核的电化学惰性有关。对人离体血研究结果与鼠所得结果一致。
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参 考 文 献
1，李云春, 谭天秩, 范成中, 等. 心肌灌注显像剂99Tcm-Q3的研制. 中华核医学杂志, 1999, 19:89-91.
2，Gerson MC, Millard RW, McGoron AJ, et al. Myocardial uptake and kinetic properties of 99 Tcm-Q3 in dogs. J Nucl Med, 1994, 35:1698-1706.
3，Gerson MC, Lukes J, Deutsch E, et al. Comparison of 99 Tcm-Q3 and 201 Tl for detection of coronary artery disease in humans. J Nucl Med, 1994, 35:580-586.
4，Deutsch E, Vanderheyden JL, Gerundini P, et al. Development of nonreducible 99 Tcm-(Ⅲ) cations as myocardial perfusion imaging agents: initial experience in humans. J Nucl Med, 1987, 28:1870-1880.
(收稿日期:1999-08-23), 百拇医药