rhIL-6对辐射小鼠的保护及其对血小板损伤作用的拮抗效应
作者：孙FDA2 田志刚 王郡甫 唐松山 冯进波 崔淑莲 黄漫详
单位：250062 济南，山东省医科院基础所山东肿瘤生物治疗研究中心(孙FDA2 田志刚 王郡甫 冯进波)；510507 广州，广东燕塘生物化学制药厂(唐松山 崔淑莲 黄漫祥)
关键词：IL-6；辐射；血小板；造血；生存期
中华放射医学与防护杂志980420 目的 研究国产rhIL-6对造血系统的作用及其抗辐射效应。方法 选用C57BL/6小鼠，分别腹腔注射生理盐水(HBSS)或rhIL-6，然后致死全身照射或先致死全身照射后腹腔注射HBSS或rhIL-6。结果 在辐射后对小鼠具治疗效果，平均生存期由9.3天延长至12.7天，对RBC、HGB、HCT、PLT均有明显的促再生作用，rhIL-6预防注射亦可拮抗辐射的致死反应，平均生存期由9.3天延长至11.5天。结论 rhIL-6在体内具有促进血细胞再生作用，从而延缓致死辐射所致死亡。
, 百拇医药
Recombinant human interleukin-6 protects mice from lethal irradiation and has effects on platelets.Sun Rui,Tian Zhigang,Wang Junfu,et al.Shandong Cancer Biotherapy Centers,Shandong Academy of Medical Sciences,Jinan 250062,China.
Objective To study the effects of rhIL-6 on platelets and its possible utilization in irradiation-induced myelosupperssion.Methods The rhIL-6 (5μg/day ×7 days) was injected into lethaly irradiated C57BL/6 mice before or after irradiation.Results The survival was significantly prolonged by rhIL-6 administration either before or after irradiation when compared with HBSS group (P<0.01).The mean survival period prolonged from 9.3 days to 12.7 days(rhIL-6 administration after irradiation) or to 11.5 days (rhIL-6 administration before irradiation).rhIL-6 enhanced the contents of RBC,HGB,HCT and PLT.Conclusion The research indicates that rhIL-6 may improve platelets and be a possibly potential candidate for the treatment of irradiation-induced myelosupression in clinic.
, 百拇医药
Key words rhIL-6 Ionizing radiation Platelets Survival
IL-6是一种多功能的细胞因子，动物体内实验证明IL-6对造血和免疫功能的正向调节尤为显著[1]。近二、三年来国外学者已多次在人体内I/II期临床实验性治疗中证实rhIL-6对各种癌症患者具有安全性，且均显示出明显的促血小板再生作用[2，3]。本实验室自1990年开始自行研制rhIL-6，在美国国立癌症研究所实验动物中心进行的动物实验性治疗。
1 材料和方法
动物：C57BL/6小鼠，雌性，8～12周龄，18～22g。随机分为实验组和对照组，每组10只小鼠，该实验重复3次。
rhIL-6：本室自制冻干制品，比活度为1×108IU/mg，纯度大于99%。内毒素小于0.5EU/ml，其他各类指标均符合国家重组DNA制品检验标准。
, 百拇医药
体内实验：①rhIL-6延长致死辐射小鼠的生存期的体内实验。C57BL/6小鼠，随机分为4组。其中两组先后分别腹腔注射HBSS(0.2ml)、rhIL-6(5μg/0.2ml)每日一次，共7次，然后致死剂量全身一次性照射(137Cs,850cGy,4.5分钟)，另外两组先致死剂量全身一次性照射，24小时后分别腹腔注射HBSS(0.2ml)或rhIL-6(5μg/0.2ml)每日一次，共7次，观察小鼠的生存期。②rhIL-6提高正常小鼠血小板含量的体内实验。C57BL/6小鼠，随机分为2组，分别腹腔注射HBSS(0.2ml)或rhIL-6(5μg/0.2ml)每日一次，连续7天，取尾静脉外周血，测血液学指标。
血液学指标检测：各组小鼠分别在给药前后、照射前和照射后一周分别取尾静脉EDTA抗凝外周血，用HC820血液分析仪进行WBC、RBC、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、血小板(PLT)含量分析。
统计学处理：生存期检验采用Wilcoxon方法，平均生存期采用Kaplan-Meier方法。其他实验结果采用非配对计量资料t检验，P值范围P<0.01和P<0.05。
, 百拇医药
2 结果
2.1 rhIL-6延长致死辐射小鼠的生存期
2.1.1 rhIL-6对致死辐射小鼠的治疗作用
C57BL/6小鼠接受全身照射后注射HBSS或rhIL-6，小鼠生存期结果表明，rhIL-6组小鼠生存期明显长于对照组(P<0.01)，平均生存期由9.3天延长至12.7天，在对照组小鼠全部死亡时(第12天)，治疗组仍有60%存活。
2.1.2 rhIL-6预防辐射所致小鼠死亡
C57BL/6小鼠注射HBSS或rhIL-6后接受全身照射，结果表明，先给予rhIL-6组亦可明显延长小鼠生存期(P<0.01)，平均生存期由9.3天延长至11.5天，在对照组小鼠全部死亡时(第12天)，治疗组仍有50%存活。提示rhIL-6可部分预防或部分拮抗由辐射引起的小鼠死亡。
, 百拇医药
2.2 rhIL-6延缓致死辐射小鼠血小板下降
表1所示，当C57BL/6小鼠接受全身照射后给予rhIL-6，外周血WBC、RBC、HGB、HCT和PLT较对照组均有提高，尤其是以PLT升高明显，升高幅度为46%。当57BL/6小鼠注射rhIL-6后接受全身照射，一周后血液学指标检测结果显示外周血RBC、HGB、HCT和PLT较对照组下降幅度明显减慢，其中PLT最为明显，下降幅度仅为对照组的45.4%。
2.3 rhIL-6可提高正常鼠血小板含量
表2所示，当C57BL/6小鼠给予rhIL-6后，外周血PLT数量升高明显，升高幅度为63.5%，结果提示rhIL-6可以提高正常小鼠体内PLT含量。
表1 rhIL-6对致死剂量照射后小鼠外周血的影响 (
±s) 组别
, 百拇医药
WBC(×109/L)
RBC(×1012/L)
HGB(g/dL)
HCT(Vol%)
PLT(×109/L)
对照组
0.18±0.04
6.62±0.29
9.52±0.29
31.12±0.74
242.6±47.4
, 百拇医药
照射后给予IL-6
0.24±0.03*
8.21±0.48*
11.30±0.71*
39.5±3.28*
451.9±27.3**
照射前给予IL-6
0.17±0.05
9.01±0.34*
11.67±0.86*
, 百拇医药
41.6±4.06*
444.5±35.7**
注：与对照组相 **P<0.05；**P<0.01
表2 rhIL-6对正常鼠外周血的影响 (
±s) 组别
WBC(×109/L)
RBC(×1012/L)
HGB(g/dL)
HCT(Vol%)
PLT(×109/L)
, 百拇医药
对照组
10.64±1.01
12.21±0.25
14.94±0.81
60.5±1.42
588.4±43.9
IL-6组
10.0±1.39
10.82±0.49
14.60±0.44
52.8±2.43
1614.9±152.7**
, 百拇医药
注：与对照比相比 *P<0.05；**P<0.01
3 讨论
近期的动物实验性治疗和临床Ⅰ/Ⅱ期实验的结果均提示rhIL-6在恢复机体造血功能尤其是血小板再生方面有较强的药用价值。动物实验亦证实rhIL-6可促进骨髓巨核前体细胞数量增加和外周血血小板形成[4]。本研究采用国产符合药检标准的rhIL-6系统观察了rhIL-6对正常鼠、辐射后rhIL-6治疗鼠和rhIL-6预防辐射鼠的血小板变化及相应的生存期变化，结果证实国产rhIL-6可明显提高小鼠血小板含量且延长辐射小鼠的生存期与一定期间内的生存率，提示国产rhIL-6有临床应用前景。
参考文献
1 Houssiau FA,Coulie PG,Van Snick J.Distinct role of IL-1 and IL-6 in human T-cell activation.J Immunol,1989,143:2520.
, http://www.100md.com
2 Estey E,Andreeff M.Phase Ⅱ study of rhIL-6 in patients with smolderly relapse od acute myelogenous leukemia.Leukemia,1995,9:1440.
3 Bouffet E,Philip T,Negrier C,et al.Phase Ⅰ study of rhIL-6 in children with solid tumour in relapse.Eur J Cancer,1997,33:1620.
4 Mayer P,Geissler K,Vatlert D,et al.rhIL-6 is a potant inducer of the acute phase response and elevate the blood platelets in nonhuman primates.Exp Hematol,1991,19:688
(收稿：1998-02-24 修回：1998-04-21), http://www.100md.com(孙FDA2 田志刚 王郡甫 唐松山 冯进波 崔淑莲 黄漫详)
单位：250062 济南，山东省医科院基础所山东肿瘤生物治疗研究中心(孙FDA2 田志刚 王郡甫 冯进波)；510507 广州，广东燕塘生物化学制药厂(唐松山 崔淑莲 黄漫祥)
关键词：IL-6；辐射；血小板；造血；生存期
中华放射医学与防护杂志980420 目的 研究国产rhIL-6对造血系统的作用及其抗辐射效应。方法 选用C57BL/6小鼠，分别腹腔注射生理盐水(HBSS)或rhIL-6，然后致死全身照射或先致死全身照射后腹腔注射HBSS或rhIL-6。结果 在辐射后对小鼠具治疗效果，平均生存期由9.3天延长至12.7天，对RBC、HGB、HCT、PLT均有明显的促再生作用，rhIL-6预防注射亦可拮抗辐射的致死反应，平均生存期由9.3天延长至11.5天。结论 rhIL-6在体内具有促进血细胞再生作用，从而延缓致死辐射所致死亡。
, 百拇医药
Recombinant human interleukin-6 protects mice from lethal irradiation and has effects on platelets.Sun Rui,Tian Zhigang,Wang Junfu,et al.Shandong Cancer Biotherapy Centers,Shandong Academy of Medical Sciences,Jinan 250062,China.
Objective To study the effects of rhIL-6 on platelets and its possible utilization in irradiation-induced myelosupperssion.Methods The rhIL-6 (5μg/day ×7 days) was injected into lethaly irradiated C57BL/6 mice before or after irradiation.Results The survival was significantly prolonged by rhIL-6 administration either before or after irradiation when compared with HBSS group (P<0.01).The mean survival period prolonged from 9.3 days to 12.7 days(rhIL-6 administration after irradiation) or to 11.5 days (rhIL-6 administration before irradiation).rhIL-6 enhanced the contents of RBC,HGB,HCT and PLT.Conclusion The research indicates that rhIL-6 may improve platelets and be a possibly potential candidate for the treatment of irradiation-induced myelosupression in clinic.
, 百拇医药
Key words rhIL-6 Ionizing radiation Platelets Survival
IL-6是一种多功能的细胞因子，动物体内实验证明IL-6对造血和免疫功能的正向调节尤为显著[1]。近二、三年来国外学者已多次在人体内I/II期临床实验性治疗中证实rhIL-6对各种癌症患者具有安全性，且均显示出明显的促血小板再生作用[2，3]。本实验室自1990年开始自行研制rhIL-6，在美国国立癌症研究所实验动物中心进行的动物实验性治疗。
1 材料和方法
动物：C57BL/6小鼠，雌性，8～12周龄，18～22g。随机分为实验组和对照组，每组10只小鼠，该实验重复3次。
rhIL-6：本室自制冻干制品，比活度为1×108IU/mg，纯度大于99%。内毒素小于0.5EU/ml，其他各类指标均符合国家重组DNA制品检验标准。
, 百拇医药
体内实验：①rhIL-6延长致死辐射小鼠的生存期的体内实验。C57BL/6小鼠，随机分为4组。其中两组先后分别腹腔注射HBSS(0.2ml)、rhIL-6(5μg/0.2ml)每日一次，共7次，然后致死剂量全身一次性照射(137Cs,850cGy,4.5分钟)，另外两组先致死剂量全身一次性照射，24小时后分别腹腔注射HBSS(0.2ml)或rhIL-6(5μg/0.2ml)每日一次，共7次，观察小鼠的生存期。②rhIL-6提高正常小鼠血小板含量的体内实验。C57BL/6小鼠，随机分为2组，分别腹腔注射HBSS(0.2ml)或rhIL-6(5μg/0.2ml)每日一次，连续7天，取尾静脉外周血，测血液学指标。
血液学指标检测：各组小鼠分别在给药前后、照射前和照射后一周分别取尾静脉EDTA抗凝外周血，用HC820血液分析仪进行WBC、RBC、血红蛋白(HGB)、红细胞压积(HCT)、血小板(PLT)含量分析。
统计学处理：生存期检验采用Wilcoxon方法，平均生存期采用Kaplan-Meier方法。其他实验结果采用非配对计量资料t检验，P值范围P<0.01和P<0.05。
, 百拇医药
2 结果
2.1 rhIL-6延长致死辐射小鼠的生存期
2.1.1 rhIL-6对致死辐射小鼠的治疗作用
C57BL/6小鼠接受全身照射后注射HBSS或rhIL-6，小鼠生存期结果表明，rhIL-6组小鼠生存期明显长于对照组(P<0.01)，平均生存期由9.3天延长至12.7天，在对照组小鼠全部死亡时(第12天)，治疗组仍有60%存活。
2.1.2 rhIL-6预防辐射所致小鼠死亡
C57BL/6小鼠注射HBSS或rhIL-6后接受全身照射，结果表明，先给予rhIL-6组亦可明显延长小鼠生存期(P<0.01)，平均生存期由9.3天延长至11.5天，在对照组小鼠全部死亡时(第12天)，治疗组仍有50%存活。提示rhIL-6可部分预防或部分拮抗由辐射引起的小鼠死亡。
, 百拇医药
2.2 rhIL-6延缓致死辐射小鼠血小板下降
表1所示，当C57BL/6小鼠接受全身照射后给予rhIL-6，外周血WBC、RBC、HGB、HCT和PLT较对照组均有提高，尤其是以PLT升高明显，升高幅度为46%。当57BL/6小鼠注射rhIL-6后接受全身照射，一周后血液学指标检测结果显示外周血RBC、HGB、HCT和PLT较对照组下降幅度明显减慢，其中PLT最为明显，下降幅度仅为对照组的45.4%。
2.3 rhIL-6可提高正常鼠血小板含量
表2所示，当C57BL/6小鼠给予rhIL-6后，外周血PLT数量升高明显，升高幅度为63.5%，结果提示rhIL-6可以提高正常小鼠体内PLT含量。
表1 rhIL-6对致死剂量照射后小鼠外周血的影响 (
±s) 组别, 百拇医药
WBC(×109/L)
RBC(×1012/L)
HGB(g/dL)
HCT(Vol%)
PLT(×109/L)
对照组
0.18±0.04
6.62±0.29
9.52±0.29
31.12±0.74
242.6±47.4
, 百拇医药
照射后给予IL-6
0.24±0.03*
8.21±0.48*
11.30±0.71*
39.5±3.28*
451.9±27.3**
照射前给予IL-6
0.17±0.05
9.01±0.34*
11.67±0.86*
, 百拇医药
41.6±4.06*
444.5±35.7**
注：与对照组相 **P<0.05；**P<0.01
表2 rhIL-6对正常鼠外周血的影响 (
±s) 组别WBC(×109/L)
RBC(×1012/L)
HGB(g/dL)
HCT(Vol%)
PLT(×109/L)
, 百拇医药
对照组
10.64±1.01
12.21±0.25
14.94±0.81
60.5±1.42
588.4±43.9
IL-6组
10.0±1.39
10.82±0.49
14.60±0.44
52.8±2.43
1614.9±152.7**
, 百拇医药
注：与对照比相比 *P<0.05；**P<0.01
3 讨论
近期的动物实验性治疗和临床Ⅰ/Ⅱ期实验的结果均提示rhIL-6在恢复机体造血功能尤其是血小板再生方面有较强的药用价值。动物实验亦证实rhIL-6可促进骨髓巨核前体细胞数量增加和外周血血小板形成[4]。本研究采用国产符合药检标准的rhIL-6系统观察了rhIL-6对正常鼠、辐射后rhIL-6治疗鼠和rhIL-6预防辐射鼠的血小板变化及相应的生存期变化，结果证实国产rhIL-6可明显提高小鼠血小板含量且延长辐射小鼠的生存期与一定期间内的生存率，提示国产rhIL-6有临床应用前景。
参考文献
1 Houssiau FA,Coulie PG,Van Snick J.Distinct role of IL-1 and IL-6 in human T-cell activation.J Immunol,1989,143:2520.
, http://www.100md.com
2 Estey E,Andreeff M.Phase Ⅱ study of rhIL-6 in patients with smolderly relapse od acute myelogenous leukemia.Leukemia,1995,9:1440.
3 Bouffet E,Philip T,Negrier C,et al.Phase Ⅰ study of rhIL-6 in children with solid tumour in relapse.Eur J Cancer,1997,33:1620.
4 Mayer P,Geissler K,Vatlert D,et al.rhIL-6 is a potant inducer of the acute phase response and elevate the blood platelets in nonhuman primates.Exp Hematol,1991,19:688
(收稿：1998-02-24 修回：1998-04-21), http://www.100md.com(孙FDA2 田志刚 王郡甫 唐松山 冯进波 崔淑莲 黄漫详)