γ射线照射预防供者淋巴细胞输注相关移植物抗宿主病的实验研究
作者：张立成 郭坤元 曹履先
单位：510282 广州，第一军医大学珠江医院血液科
关键词：
中华放射医学与防护杂志/990532 作者通过观察60Co γ射线照射对小鼠脾T淋巴细胞增殖活性的影响，借助于动物模型证实了γ射线照射对供者淋巴细胞输注(DLI)相关GVHD的预防作用，试图探索γ射线照射能够最大程度地去除T细胞增殖活性，避免移植物抗宿主病(GVHD)发生而不损害DLI抗白血病作用的适宜剂量和方法。
材料和方法：(1)动物：近交系Balb/C(H-2d)，8～9周龄及出生48～72小时的615H-2K/Balb/CH-2dF1小鼠。(2)GVHD动物模型：参照孟玉茹等(中华血液学杂志，1993，14：564)方法，稍作改进。供鼠为亲代Balb/C(H-2d)小鼠，受鼠为新生及成年F1小鼠。供鼠脾细胞经不同剂量(0、7.5 Gy)60Co γ?射线照射后注射给受鼠，同时设相应照射剂量的同基因脾细胞输注组及正常对照组，观察GVHD发生。(3)评价指标：新生F1小鼠GVHD以脾指数表示：脾指数(SI1)=脾重/体重；脾指数(SI2)=实验组SI1/对照组SI1，通过认为SI2≥1.3即有意义；成年小鼠致死性GVHD以存活率结合病理来评价。
结果和讨论：供鼠脾细胞经不同剂量(0、2.5、5.0、7.5和10 Gy)60Co γ射线照射后，T细胞对IL-2刺激的增殖活性呈照射剂量依赖性降低，7.5 Gy已基本去除其增殖活性，FCM测定S期比例为0.8%。从受鼠发生GVHD的结果看，同基因脾细胞输注及正常对照组，均无GVHD发生，存活率100%；而异基因脾细胞输注组(0、7.5 Gy)，受鼠存活率分别为50%与83%(χ2=24.4，P<0.01)，SI2均大于1.3，但两组SI1比较差异具有非常显著性(P<0.01)。
GVHD发生的免疫学基础在于供者T淋巴细胞识别宿主异体不合抗原，在受者体内大量增殖，并直接或间接通过一系列生物因子对宿主造成的免疫病理损害。传统GVHD的预防侧重于T细胞增殖活性的去除，往往忽略其细胞毒功能的发挥，但近年来的研究发现，7.5 Gy γ射线照射能够在最大程度去除T细胞增殖活性的同时，不影响其表型及效应功能的发挥，甚至能够增强其细胞毒活性，本实验的初步研究结果也证实了这一点。从两组受鼠发生GVHD的结果看，7.5 Gy γ射线照射能够显著降低致死性GVHD的发生率(χ2=24.4，P<0.01)，且GVHD发生的程度具有非常显著的统计学意义(P<0.01)。尽管两组受鼠SI2均大于1.3，一方面可能与本实验输注的脾细胞数量偏多有关，另一方面更说明了GVHD毕竟是一种多因素，多种机制共同参与的复杂病理过程，要从根本上彻底去除，尚需克服很多困难。但7.5 Gy γ射线照射能够最大程度地去除T细胞增殖活性，避免GVHD的发生，为进一步研究保留或放大DLI的抗白血病作用打下了基础，亦为DLT广泛应用于自体骨髓及外周血干细胞移植，发挥移植物抗白血病作用，逆转或预防白血病复发开辟了一条新的思路。
(收稿：1998-11-30 修回：1999-3-23), http://www.100md.com
单位：510282 广州，第一军医大学珠江医院血液科
关键词：
中华放射医学与防护杂志/990532 作者通过观察60Co γ射线照射对小鼠脾T淋巴细胞增殖活性的影响，借助于动物模型证实了γ射线照射对供者淋巴细胞输注(DLI)相关GVHD的预防作用，试图探索γ射线照射能够最大程度地去除T细胞增殖活性，避免移植物抗宿主病(GVHD)发生而不损害DLI抗白血病作用的适宜剂量和方法。
材料和方法：(1)动物：近交系Balb/C(H-2d)，8～9周龄及出生48～72小时的615H-2K/Balb/CH-2dF1小鼠。(2)GVHD动物模型：参照孟玉茹等(中华血液学杂志，1993，14：564)方法，稍作改进。供鼠为亲代Balb/C(H-2d)小鼠，受鼠为新生及成年F1小鼠。供鼠脾细胞经不同剂量(0、7.5 Gy)60Co γ?射线照射后注射给受鼠，同时设相应照射剂量的同基因脾细胞输注组及正常对照组，观察GVHD发生。(3)评价指标：新生F1小鼠GVHD以脾指数表示：脾指数(SI1)=脾重/体重；脾指数(SI2)=实验组SI1/对照组SI1，通过认为SI2≥1.3即有意义；成年小鼠致死性GVHD以存活率结合病理来评价。
结果和讨论：供鼠脾细胞经不同剂量(0、2.5、5.0、7.5和10 Gy)60Co γ射线照射后，T细胞对IL-2刺激的增殖活性呈照射剂量依赖性降低，7.5 Gy已基本去除其增殖活性，FCM测定S期比例为0.8%。从受鼠发生GVHD的结果看，同基因脾细胞输注及正常对照组，均无GVHD发生，存活率100%；而异基因脾细胞输注组(0、7.5 Gy)，受鼠存活率分别为50%与83%(χ2=24.4，P<0.01)，SI2均大于1.3，但两组SI1比较差异具有非常显著性(P<0.01)。
GVHD发生的免疫学基础在于供者T淋巴细胞识别宿主异体不合抗原，在受者体内大量增殖，并直接或间接通过一系列生物因子对宿主造成的免疫病理损害。传统GVHD的预防侧重于T细胞增殖活性的去除，往往忽略其细胞毒功能的发挥，但近年来的研究发现，7.5 Gy γ射线照射能够在最大程度去除T细胞增殖活性的同时，不影响其表型及效应功能的发挥，甚至能够增强其细胞毒活性，本实验的初步研究结果也证实了这一点。从两组受鼠发生GVHD的结果看，7.5 Gy γ射线照射能够显著降低致死性GVHD的发生率(χ2=24.4，P<0.01)，且GVHD发生的程度具有非常显著的统计学意义(P<0.01)。尽管两组受鼠SI2均大于1.3，一方面可能与本实验输注的脾细胞数量偏多有关，另一方面更说明了GVHD毕竟是一种多因素，多种机制共同参与的复杂病理过程，要从根本上彻底去除，尚需克服很多困难。但7.5 Gy γ射线照射能够最大程度地去除T细胞增殖活性，避免GVHD的发生，为进一步研究保留或放大DLI的抗白血病作用打下了基础，亦为DLT广泛应用于自体骨髓及外周血干细胞移植，发挥移植物抗白血病作用，逆转或预防白血病复发开辟了一条新的思路。
(收稿：1998-11-30 修回：1999-3-23), http://www.100md.com