益气活血方对放射损伤骨髓基质细胞生长的影响
作者：王炳胜 刘秀芳 王涛 付显成 袁长瑞
单位：(075000 河北，张家口251医院中医肿瘤科)
关键词：
中华放射医学与防护杂志000316 骨髓基质细胞在调节造血细胞的增生和分化中起活性作用，是造血诱导微环 境的主要组成成分[1]，放射诱导造血功能障碍的主要机理是基质细胞的损伤 [2]。本研究观察不同类型中药对放射损伤后小鼠骨髓基质细胞体外集落(CFU-F)形成能 力的影响。
一、材料和方法：
1.动物 清洁级昆明小鼠200只，雌雄各100只，体重25～30 g，随机分成治疗组及照射对 照组，各组均为40只。
2.药物 按健脾益气、补肝肾、活血化瘀、益气活血治疗原则分别组成a、b、c、d方剂。 各方 药物组成如下：a.黄芪30 g、山药15 g、太子参30 g、茯苓、扁豆、白术各15 g；b.补骨 脂20 g、熟地20 g、仙灵脾30 g、女贞子20 g、枸杞子20 g；c.丹参30 g、地龙15 g、川芎15 g 、赤芍30 g、鸡血藤30 g；d.黄芪30 g、太子参25 g、白术15 g、鸡血藤30 g、地龙15 g 、丹参30 g、川芎15 g。上述药物水煎、醇沉、过滤、配制成100%药液后分装灭菌。
, 百拇医药
3.动物造模 治疗组及照射对照组小鼠均采用6MV直线加速器行全身照射，吸收剂量为5.0 Gy，剂量率为2.0 Gy/min。受照后治疗组小鼠即腹腔内注射a,b,c,d液，对照组注射生 理盐水，每只0.3 ml，每日2次连续6 d，第7、14 d，取小鼠股骨髓，制成骨髓细胞(BMC) 液，分离出基质细胞层进行体外培养，各组每次分别为20只。
4.基质细胞培养 取放射损伤后第7、14 d各组BMC液，参照刘文励等[3]培养方法 ，培养第7 d后观察各组CFU-F数目，然后继续培养，至14、21、28 d观察CFU-F数目。
5.实验数据的统计学处理：进行t检验，结果以
±s表示。
二、结果
1.放射损伤后不同时间培养7 d后各组CFU-F数目(表1)。放射损伤后第7 d治疗组与照射对 照组相比较，均差异有显著性(P<0.05、0.05、0.01、0.01)。表明健脾益气，补肝 肾 ，活血化瘀，益气活血均能减轻放射对骨髓基质细胞的损伤。以活血化瘀，益气活血明显， 但二者间差异无显著性(P>0.05)。第14 d， a,b,c,d,与对照组比较，情况与第7 d相似 ，但c,d组相比，两组有差异显著性(P<0.01)，说明益气活血方剂在减轻放射对 基质细胞损伤方面，优于活血化瘀方剂。
, 百拇医药
表1 伤后不同时间各组小鼠股骨髓CF U-F数目(±s) 组别
动物数(只)
伤后时间
(d)
7
14
治疗组：a
20
36±10*
58±8*
b
, http://www.100md.com
20
21±9*
57±12*
c
20
52±12△
89±13△
d
20
47±11△
122±16△**
, 百拇医药
照射对照组
20
16±2
39±9
注：与对照组比较*P<0 .05 △P<0.01 c,d比较14天,**P<0.01
2.放射损伤后不同培养时间各组CFU-F数目(表2)。表2结果为放射损伤后第7 d小鼠股BMC细 胞不同培养时间CFU-F情况。应用不同类型中药的放射损伤后基质细胞集落各不相同，在第1 4 d, a,b,c,d,与照射对照组比较及c,d比较差异有显著性(P<0.01)，从14、2 1、 28 d综合分析，在减轻放射对基质细胞损伤方面，益气活血>活血化瘀>健脾益气>补肝肾。
三、讨论
, 百拇医药 放射治疗是晚期恶性肿瘤的主要治疗方法，造血功能损伤是其主要并发症，常因造血功能损 伤而中断治疗。目前中药多采用健脾益气，活血化瘀，补肝肾等方剂防治放射对骨 髓造血功 能的损伤。微环境的基质与造血基质细胞被认为是土壤与种子，二者相互依存。基质细胞通 过产生和分泌多种细胞因子和其它活性物质对造血干、祖细胞的增殖和发育起重要的调控作 用，国内外的研究结果表明[4]，骨髓基质细胞(BMSC)具有较高的辐射敏感性，这 种损伤明显影响造血功能的恢复速度，甚至成为长期骨髓再生低下的主要影响因素。
表2 不同培养时间小鼠股骨髓CFU-F 数目(±s) 组别
动物数
(只)
培养时间(d)
, http://www.100md.com
7
14
21
28
治疗组：a
20
36±10
78±16△
+
++
b
20
21±9
, http://www.100md.com
49±11△
186±24△△
+
c
20
52±12
112±14△
++
+++
d
20
47±11
, http://www.100md.com
159±19△*
++
++++
照射对照组
20
16±2
35±8
176±17
+
注： +小团片状生长，团片状生长，团片状生长，未融合成片状，片状生成；与照射对照组比较，△P<0.01， d与c比较 ，*P<0.01，第21天b与对照组相比， △△P>0.05
放射的早期损伤表现为骨髓静脉窦扩张，充血、血流瘀滞、基质细胞急剧减少。基质细胞修 复，必须先有微循环系统，特别是静脉窦结构的恢复，静脉窦的修复，保证了基质细胞生长 所需要的营养物质及体液因子，活血化瘀药能很好地修复损伤的静脉窦，血流变畅。祖国医 学认为，气为血之帅，血为气之母，气虚则血瘀，血瘀则气行不畅，故益气活血化瘀更能进 一步改善微循环血流，促使基质细胞生长所需的微环境得到改善，由此表明益气活血药物在 防治放射对BMSC的损伤方面优于活血化瘀药。
, 百拇医药
参考文献
1 陈幸华，罗成基，郭朝华，等.5.0 Gy放射损伤对小鼠骨髓基质细胞周期DNA含 量的影响.第三军医大学学报，1996，18：209-210.
2 Wilkins BS,Jones DB.Vascular networks within the stroma of human long term bo ne marrow cultures.J Pathol， 1995,177:295-298.
3 刘文励，董伟，何美冬，等.复方活血汤对辐射损伤小鼠骨髓基质细胞粘附功能的影响. 中国中西医结合杂志，1997，17：354-355.
4 陈家佩，刘秀英.骨髓基质细胞的辐射效应及其临床意义.中国应用生理杂志，1988，4： 336-338.
(收稿日期:1999-09-19), 百拇医药
单位：(075000 河北，张家口251医院中医肿瘤科)
关键词：
中华放射医学与防护杂志000316 骨髓基质细胞在调节造血细胞的增生和分化中起活性作用，是造血诱导微环 境的主要组成成分[1]，放射诱导造血功能障碍的主要机理是基质细胞的损伤 [2]。本研究观察不同类型中药对放射损伤后小鼠骨髓基质细胞体外集落(CFU-F)形成能 力的影响。
一、材料和方法：
1.动物 清洁级昆明小鼠200只，雌雄各100只，体重25～30 g，随机分成治疗组及照射对 照组，各组均为40只。
2.药物 按健脾益气、补肝肾、活血化瘀、益气活血治疗原则分别组成a、b、c、d方剂。 各方 药物组成如下：a.黄芪30 g、山药15 g、太子参30 g、茯苓、扁豆、白术各15 g；b.补骨 脂20 g、熟地20 g、仙灵脾30 g、女贞子20 g、枸杞子20 g；c.丹参30 g、地龙15 g、川芎15 g 、赤芍30 g、鸡血藤30 g；d.黄芪30 g、太子参25 g、白术15 g、鸡血藤30 g、地龙15 g 、丹参30 g、川芎15 g。上述药物水煎、醇沉、过滤、配制成100%药液后分装灭菌。
, 百拇医药
3.动物造模 治疗组及照射对照组小鼠均采用6MV直线加速器行全身照射，吸收剂量为5.0 Gy，剂量率为2.0 Gy/min。受照后治疗组小鼠即腹腔内注射a,b,c,d液，对照组注射生 理盐水，每只0.3 ml，每日2次连续6 d，第7、14 d，取小鼠股骨髓，制成骨髓细胞(BMC) 液，分离出基质细胞层进行体外培养，各组每次分别为20只。
4.基质细胞培养 取放射损伤后第7、14 d各组BMC液，参照刘文励等[3]培养方法 ，培养第7 d后观察各组CFU-F数目，然后继续培养，至14、21、28 d观察CFU-F数目。
5.实验数据的统计学处理：进行t检验，结果以
±s表示。二、结果
1.放射损伤后不同时间培养7 d后各组CFU-F数目(表1)。放射损伤后第7 d治疗组与照射对 照组相比较，均差异有显著性(P<0.05、0.05、0.01、0.01)。表明健脾益气，补肝 肾 ，活血化瘀，益气活血均能减轻放射对骨髓基质细胞的损伤。以活血化瘀，益气活血明显， 但二者间差异无显著性(P>0.05)。第14 d， a,b,c,d,与对照组比较，情况与第7 d相似 ，但c,d组相比，两组有差异显著性(P<0.01)，说明益气活血方剂在减轻放射对 基质细胞损伤方面，优于活血化瘀方剂。
, 百拇医药
表1 伤后不同时间各组小鼠股骨髓CF U-F数目(
±s) 组别动物数(只)
伤后时间
(d)
7
14
治疗组：a
20
36±10*
58±8*
b
, http://www.100md.com
20
21±9*
57±12*
c
20
52±12△
89±13△
d
20
47±11△
122±16△**
, 百拇医药
照射对照组
20
16±2
39±9
注：与对照组比较*P<0 .05 △P<0.01 c,d比较14天,**P<0.01
2.放射损伤后不同培养时间各组CFU-F数目(表2)。表2结果为放射损伤后第7 d小鼠股BMC细 胞不同培养时间CFU-F情况。应用不同类型中药的放射损伤后基质细胞集落各不相同，在第1 4 d, a,b,c,d,与照射对照组比较及c,d比较差异有显著性(P<0.01)，从14、2 1、 28 d综合分析，在减轻放射对基质细胞损伤方面，益气活血>活血化瘀>健脾益气>补肝肾。
三、讨论
, 百拇医药 放射治疗是晚期恶性肿瘤的主要治疗方法，造血功能损伤是其主要并发症，常因造血功能损 伤而中断治疗。目前中药多采用健脾益气，活血化瘀，补肝肾等方剂防治放射对骨 髓造血功 能的损伤。微环境的基质与造血基质细胞被认为是土壤与种子，二者相互依存。基质细胞通 过产生和分泌多种细胞因子和其它活性物质对造血干、祖细胞的增殖和发育起重要的调控作 用，国内外的研究结果表明[4]，骨髓基质细胞(BMSC)具有较高的辐射敏感性，这 种损伤明显影响造血功能的恢复速度，甚至成为长期骨髓再生低下的主要影响因素。
表2 不同培养时间小鼠股骨髓CFU-F 数目(
±s) 组别动物数
(只)
培养时间(d)
, http://www.100md.com
7
14
21
28
治疗组：a
20
36±10
78±16△
+
++
b
20
21±9
, http://www.100md.com
49±11△
186±24△△
+
c
20
52±12
112±14△
++
+++
d
20
47±11
, http://www.100md.com
159±19△*
++
++++
照射对照组
20
16±2
35±8
176±17
+
注： +小团片状生长，团片状生长，团片状生长，未融合成片状，片状生成；与照射对照组比较，△P<0.01， d与c比较 ，*P<0.01，第21天b与对照组相比， △△P>0.05
放射的早期损伤表现为骨髓静脉窦扩张，充血、血流瘀滞、基质细胞急剧减少。基质细胞修 复，必须先有微循环系统，特别是静脉窦结构的恢复，静脉窦的修复，保证了基质细胞生长 所需要的营养物质及体液因子，活血化瘀药能很好地修复损伤的静脉窦，血流变畅。祖国医 学认为，气为血之帅，血为气之母，气虚则血瘀，血瘀则气行不畅，故益气活血化瘀更能进 一步改善微循环血流，促使基质细胞生长所需的微环境得到改善，由此表明益气活血药物在 防治放射对BMSC的损伤方面优于活血化瘀药。
, 百拇医药
参考文献
1 陈幸华，罗成基，郭朝华，等.5.0 Gy放射损伤对小鼠骨髓基质细胞周期DNA含 量的影响.第三军医大学学报，1996，18：209-210.
2 Wilkins BS,Jones DB.Vascular networks within the stroma of human long term bo ne marrow cultures.J Pathol， 1995,177:295-298.
3 刘文励，董伟，何美冬，等.复方活血汤对辐射损伤小鼠骨髓基质细胞粘附功能的影响. 中国中西医结合杂志，1997，17：354-355.
4 陈家佩，刘秀英.骨髓基质细胞的辐射效应及其临床意义.中国应用生理杂志，1988，4： 336-338.
(收稿日期:1999-09-19), 百拇医药