护生宝口服液对辐射的防护作用研究
作者：陈建业 曾益新 陈小君 刘宗潮 利国威 徐伯平 夏云飞
单位：陈建业(637000 南充，川北医学院生化教研室)；曾益新 陈小君 刘宗潮 利国威 徐伯平 夏云飞(中山医科大学肿瘤防治中心)
关键词：黄芪；灵芝；辐射损伤；辐射防护
中华放射医学与防护杂志000417 【摘要】 目的 研究中药辐射防护剂护生宝(HSB)对60Co γ射线损伤的防护作用，为HSB的临床应用提供实验依据。方法 用3种不同浓度的HSB和生理盐水灌胃实验组和单纯照射组小鼠，各组受试鼠给予7.5 Gy 60 Co γ射线一次性全身照射，观察不同处理组小鼠的存活率及血象变化情况。结果 HSB保护组小鼠的30 d存活率、外周血白细胞(WBC)和血小板(PLT)均显著高于单纯照射组(P<0.01)，平均保护系数高达1.77。结论 HSB具有较强的抗辐射作用、能显著提高受致死剂量60Co γ射线照射小鼠的存活率，降低辐射对小鼠外周血WBC和PLT的损伤作用。
, http://www.100md.com
Researches on radioprotective effect of Hu Sheng Bao
CHEN Jianye, ZENG Yixin, CHEN Xiaojun, et al.
(Department of Biochemistry,North Sichuan Medical College,Nanchong 637000,China)
【Abstract】 Objective To research the radioprotective effect of Hu Sheng Bao (HSB) on γ-ray-induced injury and to provide an experimental basis for the clinical use of HSB. Methods Mice were treated with three different doses of HSB or normal saline (the control group).All groups were irradiated once with 7.5 Gy 60 Co γ-rays,and then the difference in survival rates and the changes in blood cells were observed. Results The 30-day survival rate,WBC and PLT counts of HSB-protected mice were all much higher than those of the control group.The protection factor reached 1.77. Conclusion HSB has significant anti-radiation effect and can effectively raise the survival rate of mice irradiated with a lethal dose of 60 Co γ-rays and it can also reduce the radiation injury of WBC and PLT in mice.
, 百拇医药
【Key words】 Astragalus roots; Canoderma lucidum; Radiation injury; Radioprotection
作者采用60Co γ射线对小鼠进行一次性全身照射，观察了护生宝口服液对γ射线的防护作用，为辐射防护剂新药的开发和临床应用提供可靠的实验依据。
材料和方法
1.材料：①动物：昆明种小鼠由广东省卫生厅实验动物中心提供，体重18～22 g,鼠龄6～8周，雌雄各半。②药品：护生宝口服液(Hu Sheng Bao,HSB)：为复方黄芪、灵芝、绿茶提取液，由中山医科大学肿瘤防治中心研制。③照射条件：用ATC 60 Co γ射线治疗机，源距80 cm，照射面积25 cm×25 cm，对各组进行总吸收剂量为7.5 Gy、吸收剂量率为1.04 Gy/min的一次性全身照射。
, 百拇医药
2.方法：将实验小鼠随机分成5组(每组20只，雌雄各半)：正常对照组(灌胃生理盐水30 ml.kg-1.d-1，不照射)，单纯照射组(照射加30 ml.kg-1.d-1生理盐水)，低剂量HSB组(照射加HSB 37.8 g.kg-1.d-1)，中剂量HSB组(照射加HSB 52.5 g.kg-1.d-1)和高剂量HSB组(照射加HSB 75.0 g.kg-1.d-1)。各药物保护组均设1次重复。小鼠于照射前给药3 d，照射后给药10 d。观察并记录各组鼠的生存状况，体重变化，定期检测各组鼠外周血WBC和PLT变化，计算各组小鼠30 d平均生存期、存活率、保护系数及各组鼠照射后不同时期内WBC和PLT占正常对照组的百分率。
, 百拇医药
3.统计学处理：采用t检验处理数据。
结 果
1.生存期和存活率：实验结束，正常对照组生存期(天)为30.0±0.0；单纯照射组为12.5±8.1；各药物保护组分别是：低剂量HSB组为21.5±8.9和23.5±8.6，中剂量HSB组为20.9±9.6和20.2±8.5，高剂量HSB组为24.8±8.3和21.5±9.7。HSB保护组与单纯照射组小鼠生存期相比，差异有非常显著性(均P<0.01)；药物保护组不同给药剂量之间以及两次重复之间均无统计学差异。小鼠30 d存活率正常对照组为100%；单纯照射组为0%；各药物保护组分别是：低剂量HSB组为45%(9/20)和60%(12/20)，中剂量HSB组为50%(10/20)和40%(8/20)，高剂量HSB组为70%(14/20)和55%(11/20)。
2.保护系数(k≥1.2为有意义)：低剂量HSB组为1.73和1.89，中剂量HSB组为1.68和1.62，高剂量HSB组为1.99和1.73，平均值为1.77。
, 百拇医药
3.对外周血象的影响：各药物保护组的WBC和PLT与单纯照射组比较差异有非常显著性，均P<0.01(见表1)。
表1 HSB口服液对受60Co γ射线照射小鼠
外周血WBC和PLT的影响 组别
照射
后天
数(d)
WBC(×109/L)
PLT(×109/L)
WBC
(
±s)
, 百拇医药
占正常组的
百分率(%)
PLT
(±s)
占正常组的
百分率(%)
生理盐水正常组
3
10.9±2.8
100.0
853±56
, 百拇医药 100.0
单纯照射组
3
2.5±1.1
22.9
200±25
23.4
低剂量HSB组
3
8.3±2.5*
76.1
669±37*
, 百拇医药
78.4
中剂量HSB组
3
7.8±3.0*
71.6
625±31*
73.3
高剂量HSB组
3
8.4±2.1*
77.1
684±42*
, http://www.100md.com
80.2
生理盐水正常组
7
11.1±3.1
100.0
895±45
100.0
单纯照射组
7
2.9±1.2
26.1
244±31
27.3
, 百拇医药
低剂量HSB组
7
9.3±3.1*
83.8
756±39*
84.5
中剂量HSB组
7
8.8±2.8*
79.2
708±45*
79.1
, http://www.100md.com
高剂量HSB组
7
9.7±3.0*
87.4
805±45*
89.9
注：与单纯照射组比较，*P<0.01
4.体征变化：照射后2～7 d，HSB保护组小鼠活动活跃，毛色光泽，食欲无明显下降，无松脱毛和死亡现象；单纯照射组小鼠行动迟缓，毛色粘滞，食欲不振，松毛脱毛，便稀，部分鼠死亡。
5.体重变化：各实验小鼠在照射前体重均呈直线上升，用7.5 Gy 60Co γ射线照射后各受照射组小鼠体重均明显下降，其中单纯照射组小鼠体重降低最显著，在照射后第4天和第12天出现两个低谷(23.8 g/鼠和21.0 g/鼠)，以后体重缓慢回升，至第22天体重升至最高(25.4 g/鼠)，随后体重再次逐渐下降，直至全组小鼠死亡。各药物保护组小鼠照射后体重虽也下降，但降幅明显小于单纯照射组，在照射后第4天和第12天亦出现两个低谷(25.0 g/鼠和24.7 g/鼠)，但均显著高于单纯照射组，以后各药物保护组小鼠体重显逐级攀升之势，并一直持续到实验结束(见图1)。
, 百拇医药
图1 各实验组小鼠体重30 d平均生长曲线
讨 论
结果表明：HSB具有明显的抗辐射作用，能显著提高受致死剂量60Co γ射线照射小鼠的存活率和平均生存天数，其作用可能与HSB对自由基的清除，提高机体免疫功能、增强免疫调节功能和保护造血系统有关。
HSB选用益气固表的黄芪，补肝益肾、扶正固本的灵芝和生津止渴并治虚痨的绿茶组成复方，提取黄芪总黄酮(TFA)、黄芪多糖(APS)、灵芝多糖(GLP)和绿茶多酚(GTP)为主要有效成分。许多研究表明：TFA能直接清除O()/(.)2和.OH，保护细胞SOD活性，有很强的抗氧化能力[1]。APS能有效促进胸腺和脾脏的生长，加速损伤的修复，促进淋巴细胞转化，提高机体免疫调节功能[2，3]。GLP能间接诱导DNA多聚酶的生成，促进免疫细胞中DNA的合成及细胞增殖，加速免疫应答过程[4]。同时，GLP还具有拟SOD活性，能清除.OH，抑制O()/(.)2对红细胞的脂质过氧化作用[5]。GTP是一种优良的自由基清除剂和抗氧化剂，可同时清除.OH和O()/(.)2[6]，其分子结构中的酚羟基类基团在与过氧化物作用时极易发生氧化还原反应，通过提供氢原子或质子中断自由基链反应，从而达到清除自由基的目的[7]。
, 百拇医药
辐射损伤主要表现为辐射所致自由基引起的一系列DNA损伤、生物膜损伤、免疫功能损伤和造血功能损伤，而免疫缺陷所致的感染合并症是骨髓型急性辐射损伤动物死亡的主要原因。本研究用清除自由基和增强免疫功能的有效中药成分，来清除辐射所致的自由基，增强机体的免疫调节功能，因此使HSB具有极强的辐射抗性，为HSB的临床应用提供了有意义的实验资料。
基金项目： 美国中华医学基金会(CMB)基金资助项目
参考文献
1， 汪德清，沈文梅，田亚平，等.黄芪有效成分对氧自由基清除作用的ESR研究.生物化学与生物物理进展，1996，23：260-262.
2， 邵启祥，徐红芬，夏圣，等.黄芪对小鼠免疫功能的调节作用.镇江医学院学报，1994，4：261-264.
3， 周淑英，卢振初.黄芪多糖对小鼠免疫功能调节作用的观察.江苏中药，1994，15：41-42.
, 百拇医药
4， 章灵华，肖培根.近十年灵芝研究的进展.西北药学杂志，1993，8：31-35.
5， 李荣芷，何云庆.灵芝多糖抗衰老机理研究的探讨.老年医学杂志，1992，12：84-86.
6， 杨成峰，陈学敏，王桂珍，等.茶多酚清除氧自由基的研究.中国公共卫生学报，1996，15：87-88.
7， Torel T,Cillard J,Cillard P,et al.Antioxidant activity of flavonoids and reactivity with peroxy radical.Phytochemistry,1986,25:383-385.
(收稿日期:1999-09-02), 百拇医药
单位：陈建业(637000 南充，川北医学院生化教研室)；曾益新 陈小君 刘宗潮 利国威 徐伯平 夏云飞(中山医科大学肿瘤防治中心)
关键词：黄芪；灵芝；辐射损伤；辐射防护
中华放射医学与防护杂志000417 【摘要】 目的 研究中药辐射防护剂护生宝(HSB)对60Co γ射线损伤的防护作用，为HSB的临床应用提供实验依据。方法 用3种不同浓度的HSB和生理盐水灌胃实验组和单纯照射组小鼠，各组受试鼠给予7.5 Gy 60 Co γ射线一次性全身照射，观察不同处理组小鼠的存活率及血象变化情况。结果 HSB保护组小鼠的30 d存活率、外周血白细胞(WBC)和血小板(PLT)均显著高于单纯照射组(P<0.01)，平均保护系数高达1.77。结论 HSB具有较强的抗辐射作用、能显著提高受致死剂量60Co γ射线照射小鼠的存活率，降低辐射对小鼠外周血WBC和PLT的损伤作用。
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Researches on radioprotective effect of Hu Sheng Bao
CHEN Jianye, ZENG Yixin, CHEN Xiaojun, et al.
(Department of Biochemistry,North Sichuan Medical College,Nanchong 637000,China)
【Abstract】 Objective To research the radioprotective effect of Hu Sheng Bao (HSB) on γ-ray-induced injury and to provide an experimental basis for the clinical use of HSB. Methods Mice were treated with three different doses of HSB or normal saline (the control group).All groups were irradiated once with 7.5 Gy 60 Co γ-rays,and then the difference in survival rates and the changes in blood cells were observed. Results The 30-day survival rate,WBC and PLT counts of HSB-protected mice were all much higher than those of the control group.The protection factor reached 1.77. Conclusion HSB has significant anti-radiation effect and can effectively raise the survival rate of mice irradiated with a lethal dose of 60 Co γ-rays and it can also reduce the radiation injury of WBC and PLT in mice.
, 百拇医药
【Key words】 Astragalus roots; Canoderma lucidum; Radiation injury; Radioprotection
作者采用60Co γ射线对小鼠进行一次性全身照射，观察了护生宝口服液对γ射线的防护作用，为辐射防护剂新药的开发和临床应用提供可靠的实验依据。
材料和方法
1.材料：①动物：昆明种小鼠由广东省卫生厅实验动物中心提供，体重18～22 g,鼠龄6～8周，雌雄各半。②药品：护生宝口服液(Hu Sheng Bao,HSB)：为复方黄芪、灵芝、绿茶提取液，由中山医科大学肿瘤防治中心研制。③照射条件：用ATC 60 Co γ射线治疗机，源距80 cm，照射面积25 cm×25 cm，对各组进行总吸收剂量为7.5 Gy、吸收剂量率为1.04 Gy/min的一次性全身照射。
, 百拇医药
2.方法：将实验小鼠随机分成5组(每组20只，雌雄各半)：正常对照组(灌胃生理盐水30 ml.kg-1.d-1，不照射)，单纯照射组(照射加30 ml.kg-1.d-1生理盐水)，低剂量HSB组(照射加HSB 37.8 g.kg-1.d-1)，中剂量HSB组(照射加HSB 52.5 g.kg-1.d-1)和高剂量HSB组(照射加HSB 75.0 g.kg-1.d-1)。各药物保护组均设1次重复。小鼠于照射前给药3 d，照射后给药10 d。观察并记录各组鼠的生存状况，体重变化，定期检测各组鼠外周血WBC和PLT变化，计算各组小鼠30 d平均生存期、存活率、保护系数及各组鼠照射后不同时期内WBC和PLT占正常对照组的百分率。
, 百拇医药
3.统计学处理：采用t检验处理数据。
结 果
1.生存期和存活率：实验结束，正常对照组生存期(天)为30.0±0.0；单纯照射组为12.5±8.1；各药物保护组分别是：低剂量HSB组为21.5±8.9和23.5±8.6，中剂量HSB组为20.9±9.6和20.2±8.5，高剂量HSB组为24.8±8.3和21.5±9.7。HSB保护组与单纯照射组小鼠生存期相比，差异有非常显著性(均P<0.01)；药物保护组不同给药剂量之间以及两次重复之间均无统计学差异。小鼠30 d存活率正常对照组为100%；单纯照射组为0%；各药物保护组分别是：低剂量HSB组为45%(9/20)和60%(12/20)，中剂量HSB组为50%(10/20)和40%(8/20)，高剂量HSB组为70%(14/20)和55%(11/20)。
2.保护系数(k≥1.2为有意义)：低剂量HSB组为1.73和1.89，中剂量HSB组为1.68和1.62，高剂量HSB组为1.99和1.73，平均值为1.77。
, 百拇医药
3.对外周血象的影响：各药物保护组的WBC和PLT与单纯照射组比较差异有非常显著性，均P<0.01(见表1)。
表1 HSB口服液对受60Co γ射线照射小鼠
外周血WBC和PLT的影响 组别
照射
后天
数(d)
WBC(×109/L)
PLT(×109/L)
WBC
(
±s), 百拇医药
占正常组的
百分率(%)
PLT
(
±s)占正常组的
百分率(%)
生理盐水正常组
3
10.9±2.8
100.0
853±56
, 百拇医药 100.0
单纯照射组
3
2.5±1.1
22.9
200±25
23.4
低剂量HSB组
3
8.3±2.5*
76.1
669±37*
, 百拇医药
78.4
中剂量HSB组
3
7.8±3.0*
71.6
625±31*
73.3
高剂量HSB组
3
8.4±2.1*
77.1
684±42*
, http://www.100md.com
80.2
生理盐水正常组
7
11.1±3.1
100.0
895±45
100.0
单纯照射组
7
2.9±1.2
26.1
244±31
27.3
, 百拇医药
低剂量HSB组
7
9.3±3.1*
83.8
756±39*
84.5
中剂量HSB组
7
8.8±2.8*
79.2
708±45*
79.1
, http://www.100md.com
高剂量HSB组
7
9.7±3.0*
87.4
805±45*
89.9
注：与单纯照射组比较，*P<0.01
4.体征变化：照射后2～7 d，HSB保护组小鼠活动活跃，毛色光泽，食欲无明显下降，无松脱毛和死亡现象；单纯照射组小鼠行动迟缓，毛色粘滞，食欲不振，松毛脱毛，便稀，部分鼠死亡。
5.体重变化：各实验小鼠在照射前体重均呈直线上升，用7.5 Gy 60Co γ射线照射后各受照射组小鼠体重均明显下降，其中单纯照射组小鼠体重降低最显著，在照射后第4天和第12天出现两个低谷(23.8 g/鼠和21.0 g/鼠)，以后体重缓慢回升，至第22天体重升至最高(25.4 g/鼠)，随后体重再次逐渐下降，直至全组小鼠死亡。各药物保护组小鼠照射后体重虽也下降，但降幅明显小于单纯照射组，在照射后第4天和第12天亦出现两个低谷(25.0 g/鼠和24.7 g/鼠)，但均显著高于单纯照射组，以后各药物保护组小鼠体重显逐级攀升之势，并一直持续到实验结束(见图1)。
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图1 各实验组小鼠体重30 d平均生长曲线
讨 论
结果表明：HSB具有明显的抗辐射作用，能显著提高受致死剂量60Co γ射线照射小鼠的存活率和平均生存天数，其作用可能与HSB对自由基的清除，提高机体免疫功能、增强免疫调节功能和保护造血系统有关。
HSB选用益气固表的黄芪，补肝益肾、扶正固本的灵芝和生津止渴并治虚痨的绿茶组成复方，提取黄芪总黄酮(TFA)、黄芪多糖(APS)、灵芝多糖(GLP)和绿茶多酚(GTP)为主要有效成分。许多研究表明：TFA能直接清除O()/(.)2和.OH，保护细胞SOD活性，有很强的抗氧化能力[1]。APS能有效促进胸腺和脾脏的生长，加速损伤的修复，促进淋巴细胞转化，提高机体免疫调节功能[2，3]。GLP能间接诱导DNA多聚酶的生成，促进免疫细胞中DNA的合成及细胞增殖，加速免疫应答过程[4]。同时，GLP还具有拟SOD活性，能清除.OH，抑制O()/(.)2对红细胞的脂质过氧化作用[5]。GTP是一种优良的自由基清除剂和抗氧化剂，可同时清除.OH和O()/(.)2[6]，其分子结构中的酚羟基类基团在与过氧化物作用时极易发生氧化还原反应，通过提供氢原子或质子中断自由基链反应，从而达到清除自由基的目的[7]。
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辐射损伤主要表现为辐射所致自由基引起的一系列DNA损伤、生物膜损伤、免疫功能损伤和造血功能损伤，而免疫缺陷所致的感染合并症是骨髓型急性辐射损伤动物死亡的主要原因。本研究用清除自由基和增强免疫功能的有效中药成分，来清除辐射所致的自由基，增强机体的免疫调节功能，因此使HSB具有极强的辐射抗性，为HSB的临床应用提供了有意义的实验资料。
基金项目： 美国中华医学基金会(CMB)基金资助项目
参考文献
1， 汪德清，沈文梅，田亚平，等.黄芪有效成分对氧自由基清除作用的ESR研究.生物化学与生物物理进展，1996，23：260-262.
2， 邵启祥，徐红芬，夏圣，等.黄芪对小鼠免疫功能的调节作用.镇江医学院学报，1994，4：261-264.
3， 周淑英，卢振初.黄芪多糖对小鼠免疫功能调节作用的观察.江苏中药，1994，15：41-42.
, 百拇医药
4， 章灵华，肖培根.近十年灵芝研究的进展.西北药学杂志，1993，8：31-35.
5， 李荣芷，何云庆.灵芝多糖抗衰老机理研究的探讨.老年医学杂志，1992，12：84-86.
6， 杨成峰，陈学敏，王桂珍，等.茶多酚清除氧自由基的研究.中国公共卫生学报，1996，15：87-88.
7， Torel T,Cillard J,Cillard P,et al.Antioxidant activity of flavonoids and reactivity with peroxy radical.Phytochemistry,1986,25:383-385.
(收稿日期:1999-09-02), 百拇医药