双嘧达莫和腺苷-磷酸对照射小鼠染色体畸变和微核的影响
作者：卜桂兰 刘丽波 金玉珂
单位：130021 长春，白求恩医科大学放射医学研究所
关键词：
中华放射医学与防护杂志000416 双嘧达莫(Dipyridamole,DP)又名潘生丁，是传统的心血管系统药物。1993年捷克学者Pospisil等人首先研究和报道了DP和腺苷-磷酸(AMP)联合应用对照射小鼠的造血生成具有辐射保护作用[1]。本文作者着重研究了预先给予DP和AMP对不同剂量X射线照射小鼠所诱发的染色体畸变和骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核率的影响，为探讨DP和AMP的辐射防护作用提供基础资料。
一、材料和方法
1.实验动物及处理：雄性健康成年鼠随机分为两组：单纯照射组SI(对照组)，给药加不同剂量照射组DP+AMP(给药组)。参照文献[1]，给药前将2 mg DP溶于0.4 ml的0.4%的酒石酸溶液中，5 mg AMP溶于0.2 ml蒸馏水中，先于皮下注射DP，20 min后腹腔注射AMP；对照组分别给予0.4%酒石酸溶液和等体积灭菌生理盐水。60 min后行不同剂量X射线一次照射。照射条件：Philips深部X射线治疗机，电压200 kV，电流10 mA，滤过板为0.5 mmCu+1.0 mmAl，球靶距离为50 cm，吸收剂量率为0.287 Gy/min，吸收剂量分别为0、1、2、4和6 Gy。照射后24 h取材。
, 百拇医药
2.标本制备及分析：骨髓细胞染色体标本制备参照文献[2]方法，畸变分析及判定参照文献[3]和[4]；骨髓PCE微核标本制备参照Schmid法[5],每只动物计数2 000个PCE细胞,微核率以千分率表示。
3.统计学方法：采用χ2检验。
二、实验结果
1.DP+AMP对不同剂量X射线照射小鼠诱发骨髓细胞染色体畸变(CA)的影响
表1 DP+AMP对不同剂量X射线照射
小鼠骨髓细胞染色体畸变的影响 剂量
(Gy)
n
, 百拇医药
观察细胞数
染色体畸变/100细胞
畸变细胞率(%)
SI
DP+AMP
SI
DP+AMP
SI
DP+AMP
0
6
600
600
, http://www.100md.com
0.1
0.1
0.1
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1
6
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32.0
16.0**
22.0
6.0**
2
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6
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600
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24.0**
33.0
16.0**
4
6
600
600
246.0
56.3**
, 百拇医药
63.3
20.0**
6
6
600
600
112.7
101.0
34.9
40.0
注：与对照组比较，**P<0.01 由表1可见，在0剂量照射条件下，DP+AMP对正常小鼠无诱发染色体畸变作用；4 Gy以下照射时，给药组较对照组染色体畸变及畸变细胞率均明显降低，统计学处理差异有非常显著性(P<0.01)。
, 百拇医药
2.DP+AMP对不同剂量X射线照射小鼠骨髓PCE微核率的影响
表2 DP+AMP对不同剂量X射线照射
小鼠骨髓PCE微核率的影响 吸收剂量
(Gy)
动物数
(n)
微核率(‰)
SI
DP+AMP
0
6
8.0
, 百拇医药
4.5**
1
6
37.0
18.0**
2
6
69.0
27.5**
4
6
77.0
, 百拇医药 36.0**
6
6
80.0
44.0**
注：与对照组比较，**P<0.01 由表2可以看出，预先一次性给予DP+AMP，可明显降低不同剂量X射线照射小鼠所诱发的PCE微核率，而且呈现良好的线性关系。
三、讨论
迄今为止，哺乳动物骨髓细胞染色体畸变分析和PCE微核试验已发展成为标准的实验方法，广泛应用于辐射损伤、化学诱变、毒理学研究及抗辐射药物筛选等方面[6，7]。本实验以小鼠骨髓CA、PCE微核率为指标观察了预先给予DP+AMP对辐射诱发小鼠骨髓CA和PCE微核率的影响。结果表明：在0剂量时，单纯给药组的染色体畸变和畸变细胞率与对照组相比，差异无显著性，说明DP+AMP本身对正常小鼠的染色体无诱变作用；1、2、4 Gy剂量组在预先给予DP+AMP的情况下，可明显降低辐射诱发的小鼠骨髓细胞染色体畸变和畸变细胞率，差异有非常显著性(P<0.01)，说明DP+AMP对不同剂量X射线照射小鼠所诱发的CA有明显的保护作用。而6 Gy剂量组保护效果不佳，可能是由于照射剂量过大，染色体损伤过重，给畸变分析及辨认带来诸多影响有关。本实验结果还表明，预先给予DP+AMP可明显降低辐射诱发的小鼠PCE微核率，且呈现良好的线性关系，差异有显著性。提示CA和PCE微核率的结果是一致的。本实验证明DP+AMP联合应用对小鼠具有辐射防护作用。
, 百拇医药
参考文献
1， Pospisil M.Elevation of extracellular adenosine induces radioprotective effects in mice.Radiat Res,1993,134:323-330.
2， 徐唯安，黄幸纾.染色体畸变试验简介.环境保护，1979，1：30-31.
3， Preston R,William A,Michael A,et al.Mamalian in vivo and in vitro cytogenetic assay:areport of the O.S.EPA's Gene-Toxprogram.Mutat Res,1981,87:143-149.
4， 蔡露，金玉珂.小鼠染色体畸变类型研究.动物学杂志，1988，23(4)：11-14.
5， Schmid W.Chemical mutagen testing on in vivo somatic mamalian cells.Agents Actions,1973,3:77-81.
6， 龚守良，主编.实用基础医学实验技术.长春：吉林科技出版社，1991.120-195.
7， 黄幸纾，陈星若.环境化学致突变致畸致癌试验方法.杭州：浙江科技出版社，1985.220-229.
(收稿日期:1999-08-30), http://www.100md.com
单位：130021 长春，白求恩医科大学放射医学研究所
关键词：
中华放射医学与防护杂志000416 双嘧达莫(Dipyridamole,DP)又名潘生丁，是传统的心血管系统药物。1993年捷克学者Pospisil等人首先研究和报道了DP和腺苷-磷酸(AMP)联合应用对照射小鼠的造血生成具有辐射保护作用[1]。本文作者着重研究了预先给予DP和AMP对不同剂量X射线照射小鼠所诱发的染色体畸变和骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核率的影响，为探讨DP和AMP的辐射防护作用提供基础资料。
一、材料和方法
1.实验动物及处理：雄性健康成年鼠随机分为两组：单纯照射组SI(对照组)，给药加不同剂量照射组DP+AMP(给药组)。参照文献[1]，给药前将2 mg DP溶于0.4 ml的0.4%的酒石酸溶液中，5 mg AMP溶于0.2 ml蒸馏水中，先于皮下注射DP，20 min后腹腔注射AMP；对照组分别给予0.4%酒石酸溶液和等体积灭菌生理盐水。60 min后行不同剂量X射线一次照射。照射条件：Philips深部X射线治疗机，电压200 kV，电流10 mA，滤过板为0.5 mmCu+1.0 mmAl，球靶距离为50 cm，吸收剂量率为0.287 Gy/min，吸收剂量分别为0、1、2、4和6 Gy。照射后24 h取材。
, 百拇医药
2.标本制备及分析：骨髓细胞染色体标本制备参照文献[2]方法，畸变分析及判定参照文献[3]和[4]；骨髓PCE微核标本制备参照Schmid法[5],每只动物计数2 000个PCE细胞,微核率以千分率表示。
3.统计学方法：采用χ2检验。
二、实验结果
1.DP+AMP对不同剂量X射线照射小鼠诱发骨髓细胞染色体畸变(CA)的影响
表1 DP+AMP对不同剂量X射线照射
小鼠骨髓细胞染色体畸变的影响 剂量
(Gy)
n
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观察细胞数
染色体畸变/100细胞
畸变细胞率(%)
SI
DP+AMP
SI
DP+AMP
SI
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注：与对照组比较，**P<0.01 由表1可见，在0剂量照射条件下，DP+AMP对正常小鼠无诱发染色体畸变作用；4 Gy以下照射时，给药组较对照组染色体畸变及畸变细胞率均明显降低，统计学处理差异有非常显著性(P<0.01)。
, 百拇医药
2.DP+AMP对不同剂量X射线照射小鼠骨髓PCE微核率的影响
表2 DP+AMP对不同剂量X射线照射
小鼠骨髓PCE微核率的影响 吸收剂量
(Gy)
动物数
(n)
微核率(‰)
SI
DP+AMP
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注：与对照组比较，**P<0.01 由表2可以看出，预先一次性给予DP+AMP，可明显降低不同剂量X射线照射小鼠所诱发的PCE微核率，而且呈现良好的线性关系。
三、讨论
迄今为止，哺乳动物骨髓细胞染色体畸变分析和PCE微核试验已发展成为标准的实验方法，广泛应用于辐射损伤、化学诱变、毒理学研究及抗辐射药物筛选等方面[6，7]。本实验以小鼠骨髓CA、PCE微核率为指标观察了预先给予DP+AMP对辐射诱发小鼠骨髓CA和PCE微核率的影响。结果表明：在0剂量时，单纯给药组的染色体畸变和畸变细胞率与对照组相比，差异无显著性，说明DP+AMP本身对正常小鼠的染色体无诱变作用；1、2、4 Gy剂量组在预先给予DP+AMP的情况下，可明显降低辐射诱发的小鼠骨髓细胞染色体畸变和畸变细胞率，差异有非常显著性(P<0.01)，说明DP+AMP对不同剂量X射线照射小鼠所诱发的CA有明显的保护作用。而6 Gy剂量组保护效果不佳，可能是由于照射剂量过大，染色体损伤过重，给畸变分析及辨认带来诸多影响有关。本实验结果还表明，预先给予DP+AMP可明显降低辐射诱发的小鼠PCE微核率，且呈现良好的线性关系，差异有显著性。提示CA和PCE微核率的结果是一致的。本实验证明DP+AMP联合应用对小鼠具有辐射防护作用。
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参考文献
1， Pospisil M.Elevation of extracellular adenosine induces radioprotective effects in mice.Radiat Res,1993,134:323-330.
2， 徐唯安，黄幸纾.染色体畸变试验简介.环境保护，1979，1：30-31.
3， Preston R,William A,Michael A,et al.Mamalian in vivo and in vitro cytogenetic assay:areport of the O.S.EPA's Gene-Toxprogram.Mutat Res,1981,87:143-149.
4， 蔡露，金玉珂.小鼠染色体畸变类型研究.动物学杂志，1988，23(4)：11-14.
5， Schmid W.Chemical mutagen testing on in vivo somatic mamalian cells.Agents Actions,1973,3:77-81.
6， 龚守良，主编.实用基础医学实验技术.长春：吉林科技出版社，1991.120-195.
7， 黄幸纾，陈星若.环境化学致突变致畸致癌试验方法.杭州：浙江科技出版社，1985.220-229.
(收稿日期:1999-08-30), http://www.100md.com