妊高征患者血浆中末端补体复合物的测定及其意义
作者：上官毕文 黄醒华 张春红 张俊芝
单位：上官毕文 张春红 张俊芝 北京妇产医院检验中心 100006；黄醒华 产科
关键词：妊娠并发征；心血管；高血压；补体膜攻击复合物；纤连蛋白类
中华妇产科杂志990708 【摘要】 目的 探讨末端补体复合物(SC5b-9)在妊高征发病中的作用及其与血管内皮细胞损伤的关系。方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测47例妊高征患者(妊高征组)、15例有妊高征高危因素者(高危组)和40例正常孕妇(对照组)血浆中SC5b-9含量，同时测定循环免疫复合物(CIC)、纤维结合蛋白(Fn)含量。结果 (1)妊高征组及高危组SC5b-9含量增高、CIC含量下降，与对照组比较，差异有极显著性(P<0.01)。中、重度妊高征患者Fn含量增高，与对照组比较，差异有极显著性(P<0.01)。(2)妊高征组及高危组 SC5b-9的异常(<450 μg/L)率明显高于对照组(P<0.01),中、重度妊高征组Fn的异常(<308 g/L)率明显高于对照组(P<0.01)。结论 循环免疫复合物是补体激活的起始物质，补体活化的末端产物参与了妊高征的发生和发展，并与血管内皮细胞损伤有着密切关系。
, 百拇医药
A Study of Plasma Terminal SC5b-9 Complement Complex in Patients with Pregnancy Induced Hypertension
SHANGGUAN Biwen, HUANG Xinghua, ZHANG Chunhong, et al.
Obstetrics and Gynecology Hospital of Beijing, Beijing 100006
【Abstract】 Objective To study the relationship between complement SC5b-9 complex and damage of vascular endothelial in pregnancy induced hypertension(PIH) . Methods Plasma SC5b-9, Serum circulate immunocomplex (CIC), fibronectin (Fn) levels were determined with ELISA in 47 cases of PIH (study group 1) and 15 cases with potential risk factors of PIH (study group 2) and 40 cases of normal pregnancies (control group). Results SC5b-9 level increased and CIC level decreased significantly in study group 1 and study group 2 than that in control group (P<0.01). The Fn level increased in moderate and severe PIH cases than that of mild PIH and control group (P<0.01). The positive rates of SC5b-9 in study group 1 and study group 2 were significantly higher than those of the control group (P<0.01).The positive rate of Fn in moderate and severe PIH cases significantly higher than those of mild PIH cases and control group (P<0.01). Conclusion Complement was activated by classical pathway. Terminal SC5b-9 complement complex play an important roles in the pathogenesis of PIH and has close relationship with vascular endthelial damage.
, 百拇医药
【Key words】 Pregnancy complications, cardiovascular Hypertension Complement membrane attack complex Fibronectins
目前，血管内皮细胞损伤是妊高征发病的重要环节已被公众认可，对血浆中细胞毒性因子的研究[1]也日益引起重视，活化的补体便是其中之一。补体激活的最终产物是末端补体复合物(C5b-9)，它与S蛋白结合形成SC5b-9而存在于血浆中，其生物学活性是使红细胞、血小板、毛细血管内皮细胞等细胞膜发生严重损伤，从而导致细胞的死亡。我们对妊高征患者进行血浆 SC5b-9的测定，并同时测定循环免疫复合物(circulate immunocomplex， CIC)及纤维结合蛋白(fibronectin， Fn)含量，旨在探讨补体复合物在妊高征发病中的作用及与血管内皮细胞损伤间的关系。
资料与方法
, http://www.100md.com
一、资料来源
1.妊高征组：选自1998年3～9月在我院妇产科住院的患者47例，年龄24～35岁，孕周26～40周，其中轻度妊高征21例，中度14例，重度12例。妊高征诊断标准按《妇产科学》第3版[2]。
2.高危组：选自1998年3～9月在我院产科门诊就诊的、有妊高征危险因素的孕妇15例，年龄24～41岁,孕周20～38周,其中高龄初产妇9例，妊娠合并糖尿病3例,有不良产史2例，妊娠合并高血压 1例。
3.对照组：选自1998年3～9月在我院产科门诊就诊的正常孕妇40例，年龄24～33岁，孕周25～36周，无重要脏器疾病史，无其他妊娠并发症。
二、试验方法
1.标本的采集与处理:常规静脉采血, 分离血清及血浆，-20℃冰冻保存。
, 百拇医药
2.标本测定:(1) SC5b-9,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体夹心法双孔测定,方法及试剂盒由中国医学科学院基础医学研究所生化室提供。(2) CIC,采用ELISA间接法测定。试剂盒由北京华美生物工程公司提供。(3)Fn，免疫浊度法测定。试剂盒由福建太阳生物工程公司提供。
三、统计学处理
计数资料经χ2检验，计量资料经t检验及秩和检验。
结果
一、3组各项测定结果比较
1. SC5b-9:由于所测数值间差距较大(从2位数到5位数不等)，用均数及标准差不能全面正确的反映其平均水平，故采用秩和检验中的平均秩次来描述，高危组SC5b-9平均秩次为37.63，轻度妊高征者为43.83，中度妊高征者为41.75，重度妊高征者为41.18，均明显高于对照组(22.63，P<0.01)，轻、中、重度妊高征者间比较，差异无显著性(P>0.05)，且两组的SC5b-9含量分布亦明显有别于对照组。见表1。
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表1 各组孕妇血浆SC5b-9含量分布比较(例数) 组别
例数
含量(μg/L)
<450
450～
1 001～
3 001～
>5 001
对照组
40
36
2
, http://www.100md.com 2
0
0
高危组
15
6
1
2
2
4
妊高征组
47
15
13
, 百拇医药
8
4
7
注：SC5b-9正常值为<450 μg/L 2.CIC、Fn：妊高征组CIC含量明显低于对照组(P<0.01)，高危组与对照组比较，差异有显著性(P<0.05)。高危组及轻度妊高征者Fn值与对照组比较，差异无显著性(P>0.05)，中、重度妊高征者Fn值与对照组比较,差异有极显著性(P<0.01)。见表2。
表2 各组孕妇血浆CIC、Fn含量比较(
±s) 组别
例数
CIC(μg/L)
Fn (g/L)
, 百拇医药
对照组
40
9.0±4.0
205.0± 51.5
高危组
15
6.8±3.5
228.0±121.2
妊高征组
轻度
21
3.6 ±2.7
239.7± 57.3
, http://www.100md.com
中度
14
5.8 ±1.9
337.0 ±112.9
重度
12
3.8 ±2.1
349.4 ± 65.1
二、各组SC5b-9、Fn异常率比较
以450 μg/L，308 g/L分别作为 SC5b-9、Fn的临界值(正常值由药盒制造商提供),高于此值为异常，则妊高征组及高危组SC5b-9含量异常率明显高于对照组(P<0.01)，中、重度妊高征者Fn含量的异常率与对照组比较，差异有极显著性(P<0.01)，轻度妊高征者及高危组与对照组比较，差异无显著性(P>0.05)。见表3。表3 各组孕妇血浆SC5b-9、Fn含量异常率比较 组别
, 百拇医药
例数
SC5b-9含量异常
Fn含量异常
例数
百分比(%)
例数
百分比(%)
正常组
40
4
10.0
2
5.0
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高危组
15
9
60.0
0
0.0
妊高征组
轻度
21
13
61.9
3
14.3
, 百拇医药 中度
14
8
57.1
5
35.7
重度
12
8
66.7
8
66.7
讨论
一、SC5b-9在妊高征发病中的作用
, http://www.100md.com
C5b-9是补体活化的末端产物，在血浆中与S蛋白结合成 SC5b-9 复合物，它可通过与血小板、嗜中性粒细胞、上皮细胞、红细胞等细胞膜上的S蛋白受体结合，而导致细胞溶解[3]。 Blanchard等[4]研究表明，在体外SC5b-9可以导致细胞内膜功能的抑制及细胞的死亡。 Haeger等[5]报道了妊娠合并溶血、血板减少、肝酶升高综合征的患者血浆 SC5b-9显著增高，以后又报道先兆子痫患者在分娩时及分娩后1天 SC5b-9显著升高，随后降至正常。本研究结果表明， SC5b-9的含量在妊高征及有妊高征高危因素者中显著升高，可能是导致内皮细胞损伤的重要原因之一。 SC5b-9除本身可致细胞损伤外，还可导致组织胺、前列腺素、血栓素、白细胞介素6、氧自由基、过氧化酶等物质的合成与释放[6]，而这些物质均可对血管内皮细胞的功能产生抑制或损伤，从而引发妊高征。
二、循环免疫复合物在妊高征中的作用
, 百拇医药
妊娠时，如机体免疫功能失调，可导致诸如滋养层膜抗原、胎儿红细胞抗原等进入母体循环，产生抗体；或因某些自身成分的变异，产生诸如抗心磷脂抗体、抗血管内皮抗体等自身抗体，此时形成的免疫复合物，不易被机体清除，则可沉积于血管壁，激活补体，引起一系列损伤。我们对47例妊高征患者及15例高危妊娠者进行CIC的测定，发现比对照组有显著性下降，提示CIC可能参与了补体激活的经典途径，并因消耗过度而致含量降低。郑英茹等[7]研究表明，妊高征时血中补体C1q含量下降，而 C1q正是连接免疫复合物与补体活化之间的桥梁。从一个侧面支持了上述的推测。同时亦有证据表明，妊高征者的胎盘和肾脏血管壁有过量的免疫复合物沉积，这也有可能是 CIC含量下降的原因。
三、Fn在妊高征中的作用
关于Fn在妊高征中的价值，已多有论述。我们的研究结果显示，轻度妊高征时无论Fn的含量还是异常率都与对照组无明显差异。因而用Fn来预测妊高征还有待商榷。不过随着病情的加重，Fn的含量和异常率均随之上升，标志着内皮损伤的程度。
, http://www.100md.com
妊高征的病因至今未能明了，免疫因素在其中所起的作用很重要。虽然目前还不清楚妊高征时补体活化为何如此活跃，但也不妨作如下推测：由某种原因引起的免疫平衡失调，导致机体产生了不易被清除的免疫复合物，并沉积在血管壁，激活了补体，使 SC5b-9复合物含量增加，对全身血管内皮细胞产生毒性作用，使血管内皮受损及多脏器、多系统的损伤，最终导致妊高征。从我们的实验结果分析，SC5b-9较之Fn更敏感，且有些患者在症状出现几周前即有 SC5b-9的升高，这给妊高征的预测提供了新的指标。
参考文献
1 张斌,庄依亮.细胞毒性因子与妊高征. 中华妇产科杂志,1997,32:49-51.
2 郑怀美主编. 妇产科学.第3版.北京:人民卫生出版社,1990.110-120.
3 Gregory B. The compelement SC5b-9 complex mediates cell adhesion through a vitronectin receptor.J Immunol, 1990,145:209-214.
, http://www.100md.com
4 Blanchard KP, Dankert JR. C9-Mediated killing of bacterial cells by transferred C5b-8 complexes: transferred C5b-9 complexes are nonbactericidal. Infect Immun, 1994,62: 4101-4106.
5 Haeger M, Unander M, Bengtsson A. Enhanced anaphylatoxin and terminal C5b-9 complement complex formation in patients with the syndrome of hemolyssis, elevated liver enzymes and low plateler count. Obstet Gynecol, 1990, 76: 698-702.
6 Haeger M, Unander M, Andersson B, et al.Incresed release of tumor necrosis factor-alpha and interleukin-6 in women with the syndrome of hemolysis, elevated liver enzymes, and low platelet count. Acta Obstet Gynecol, 1996, 75: 695-701.
7 郑英茹,陈竹钦,颜建华, 等. 妊高征患者血中补体活化与内皮细胞损伤关系的研究. 中华妇产科杂志, 1996, 31:152-155.
(收稿：1998-11-02 修回：1999-04-08), http://www.100md.com
单位：上官毕文 张春红 张俊芝 北京妇产医院检验中心 100006；黄醒华 产科
关键词：妊娠并发征；心血管；高血压；补体膜攻击复合物；纤连蛋白类
中华妇产科杂志990708 【摘要】 目的 探讨末端补体复合物(SC5b-9)在妊高征发病中的作用及其与血管内皮细胞损伤的关系。方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测47例妊高征患者(妊高征组)、15例有妊高征高危因素者(高危组)和40例正常孕妇(对照组)血浆中SC5b-9含量，同时测定循环免疫复合物(CIC)、纤维结合蛋白(Fn)含量。结果 (1)妊高征组及高危组SC5b-9含量增高、CIC含量下降，与对照组比较，差异有极显著性(P<0.01)。中、重度妊高征患者Fn含量增高，与对照组比较，差异有极显著性(P<0.01)。(2)妊高征组及高危组 SC5b-9的异常(<450 μg/L)率明显高于对照组(P<0.01),中、重度妊高征组Fn的异常(<308 g/L)率明显高于对照组(P<0.01)。结论 循环免疫复合物是补体激活的起始物质，补体活化的末端产物参与了妊高征的发生和发展，并与血管内皮细胞损伤有着密切关系。
, 百拇医药
A Study of Plasma Terminal SC5b-9 Complement Complex in Patients with Pregnancy Induced Hypertension
SHANGGUAN Biwen, HUANG Xinghua, ZHANG Chunhong, et al.
Obstetrics and Gynecology Hospital of Beijing, Beijing 100006
【Abstract】 Objective To study the relationship between complement SC5b-9 complex and damage of vascular endothelial in pregnancy induced hypertension(PIH) . Methods Plasma SC5b-9, Serum circulate immunocomplex (CIC), fibronectin (Fn) levels were determined with ELISA in 47 cases of PIH (study group 1) and 15 cases with potential risk factors of PIH (study group 2) and 40 cases of normal pregnancies (control group). Results SC5b-9 level increased and CIC level decreased significantly in study group 1 and study group 2 than that in control group (P<0.01). The Fn level increased in moderate and severe PIH cases than that of mild PIH and control group (P<0.01). The positive rates of SC5b-9 in study group 1 and study group 2 were significantly higher than those of the control group (P<0.01).The positive rate of Fn in moderate and severe PIH cases significantly higher than those of mild PIH cases and control group (P<0.01). Conclusion Complement was activated by classical pathway. Terminal SC5b-9 complement complex play an important roles in the pathogenesis of PIH and has close relationship with vascular endthelial damage.
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【Key words】 Pregnancy complications, cardiovascular Hypertension Complement membrane attack complex Fibronectins
目前，血管内皮细胞损伤是妊高征发病的重要环节已被公众认可，对血浆中细胞毒性因子的研究[1]也日益引起重视，活化的补体便是其中之一。补体激活的最终产物是末端补体复合物(C5b-9)，它与S蛋白结合形成SC5b-9而存在于血浆中，其生物学活性是使红细胞、血小板、毛细血管内皮细胞等细胞膜发生严重损伤，从而导致细胞的死亡。我们对妊高征患者进行血浆 SC5b-9的测定，并同时测定循环免疫复合物(circulate immunocomplex， CIC)及纤维结合蛋白(fibronectin， Fn)含量，旨在探讨补体复合物在妊高征发病中的作用及与血管内皮细胞损伤间的关系。
资料与方法
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一、资料来源
1.妊高征组：选自1998年3～9月在我院妇产科住院的患者47例，年龄24～35岁，孕周26～40周，其中轻度妊高征21例，中度14例，重度12例。妊高征诊断标准按《妇产科学》第3版[2]。
2.高危组：选自1998年3～9月在我院产科门诊就诊的、有妊高征危险因素的孕妇15例，年龄24～41岁,孕周20～38周,其中高龄初产妇9例，妊娠合并糖尿病3例,有不良产史2例，妊娠合并高血压 1例。
3.对照组：选自1998年3～9月在我院产科门诊就诊的正常孕妇40例，年龄24～33岁，孕周25～36周，无重要脏器疾病史，无其他妊娠并发症。
二、试验方法
1.标本的采集与处理:常规静脉采血, 分离血清及血浆，-20℃冰冻保存。
, 百拇医药
2.标本测定:(1) SC5b-9,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体夹心法双孔测定,方法及试剂盒由中国医学科学院基础医学研究所生化室提供。(2) CIC,采用ELISA间接法测定。试剂盒由北京华美生物工程公司提供。(3)Fn，免疫浊度法测定。试剂盒由福建太阳生物工程公司提供。
三、统计学处理
计数资料经χ2检验，计量资料经t检验及秩和检验。
结果
一、3组各项测定结果比较
1. SC5b-9:由于所测数值间差距较大(从2位数到5位数不等)，用均数及标准差不能全面正确的反映其平均水平，故采用秩和检验中的平均秩次来描述，高危组SC5b-9平均秩次为37.63，轻度妊高征者为43.83，中度妊高征者为41.75，重度妊高征者为41.18，均明显高于对照组(22.63，P<0.01)，轻、中、重度妊高征者间比较，差异无显著性(P>0.05)，且两组的SC5b-9含量分布亦明显有别于对照组。见表1。
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表1 各组孕妇血浆SC5b-9含量分布比较(例数) 组别
例数
含量(μg/L)
<450
450～
1 001～
3 001～
>5 001
对照组
40
36
2
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0
0
高危组
15
6
1
2
2
4
妊高征组
47
15
13
, 百拇医药
8
4
7
注：SC5b-9正常值为<450 μg/L 2.CIC、Fn：妊高征组CIC含量明显低于对照组(P<0.01)，高危组与对照组比较，差异有显著性(P<0.05)。高危组及轻度妊高征者Fn值与对照组比较，差异无显著性(P>0.05)，中、重度妊高征者Fn值与对照组比较,差异有极显著性(P<0.01)。见表2。
表2 各组孕妇血浆CIC、Fn含量比较(
±s) 组别例数
CIC(μg/L)
Fn (g/L)
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对照组
40
9.0±4.0
205.0± 51.5
高危组
15
6.8±3.5
228.0±121.2
妊高征组
轻度
21
3.6 ±2.7
239.7± 57.3
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中度
14
5.8 ±1.9
337.0 ±112.9
重度
12
3.8 ±2.1
349.4 ± 65.1
二、各组SC5b-9、Fn异常率比较
以450 μg/L，308 g/L分别作为 SC5b-9、Fn的临界值(正常值由药盒制造商提供),高于此值为异常，则妊高征组及高危组SC5b-9含量异常率明显高于对照组(P<0.01)，中、重度妊高征者Fn含量的异常率与对照组比较，差异有极显著性(P<0.01)，轻度妊高征者及高危组与对照组比较，差异无显著性(P>0.05)。见表3。表3 各组孕妇血浆SC5b-9、Fn含量异常率比较 组别
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例数
SC5b-9含量异常
Fn含量异常
例数
百分比(%)
例数
百分比(%)
正常组
40
4
10.0
2
5.0
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高危组
15
9
60.0
0
0.0
妊高征组
轻度
21
13
61.9
3
14.3
, 百拇医药 中度
14
8
57.1
5
35.7
重度
12
8
66.7
8
66.7
讨论
一、SC5b-9在妊高征发病中的作用
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C5b-9是补体活化的末端产物，在血浆中与S蛋白结合成 SC5b-9 复合物，它可通过与血小板、嗜中性粒细胞、上皮细胞、红细胞等细胞膜上的S蛋白受体结合，而导致细胞溶解[3]。 Blanchard等[4]研究表明，在体外SC5b-9可以导致细胞内膜功能的抑制及细胞的死亡。 Haeger等[5]报道了妊娠合并溶血、血板减少、肝酶升高综合征的患者血浆 SC5b-9显著增高，以后又报道先兆子痫患者在分娩时及分娩后1天 SC5b-9显著升高，随后降至正常。本研究结果表明， SC5b-9的含量在妊高征及有妊高征高危因素者中显著升高，可能是导致内皮细胞损伤的重要原因之一。 SC5b-9除本身可致细胞损伤外，还可导致组织胺、前列腺素、血栓素、白细胞介素6、氧自由基、过氧化酶等物质的合成与释放[6]，而这些物质均可对血管内皮细胞的功能产生抑制或损伤，从而引发妊高征。
二、循环免疫复合物在妊高征中的作用
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妊娠时，如机体免疫功能失调，可导致诸如滋养层膜抗原、胎儿红细胞抗原等进入母体循环，产生抗体；或因某些自身成分的变异，产生诸如抗心磷脂抗体、抗血管内皮抗体等自身抗体，此时形成的免疫复合物，不易被机体清除，则可沉积于血管壁，激活补体，引起一系列损伤。我们对47例妊高征患者及15例高危妊娠者进行CIC的测定，发现比对照组有显著性下降，提示CIC可能参与了补体激活的经典途径，并因消耗过度而致含量降低。郑英茹等[7]研究表明，妊高征时血中补体C1q含量下降，而 C1q正是连接免疫复合物与补体活化之间的桥梁。从一个侧面支持了上述的推测。同时亦有证据表明，妊高征者的胎盘和肾脏血管壁有过量的免疫复合物沉积，这也有可能是 CIC含量下降的原因。
三、Fn在妊高征中的作用
关于Fn在妊高征中的价值，已多有论述。我们的研究结果显示，轻度妊高征时无论Fn的含量还是异常率都与对照组无明显差异。因而用Fn来预测妊高征还有待商榷。不过随着病情的加重，Fn的含量和异常率均随之上升，标志着内皮损伤的程度。
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妊高征的病因至今未能明了，免疫因素在其中所起的作用很重要。虽然目前还不清楚妊高征时补体活化为何如此活跃，但也不妨作如下推测：由某种原因引起的免疫平衡失调，导致机体产生了不易被清除的免疫复合物，并沉积在血管壁，激活了补体，使 SC5b-9复合物含量增加，对全身血管内皮细胞产生毒性作用，使血管内皮受损及多脏器、多系统的损伤，最终导致妊高征。从我们的实验结果分析，SC5b-9较之Fn更敏感，且有些患者在症状出现几周前即有 SC5b-9的升高，这给妊高征的预测提供了新的指标。
参考文献
1 张斌,庄依亮.细胞毒性因子与妊高征. 中华妇产科杂志,1997,32:49-51.
2 郑怀美主编. 妇产科学.第3版.北京:人民卫生出版社,1990.110-120.
3 Gregory B. The compelement SC5b-9 complex mediates cell adhesion through a vitronectin receptor.J Immunol, 1990,145:209-214.
, http://www.100md.com
4 Blanchard KP, Dankert JR. C9-Mediated killing of bacterial cells by transferred C5b-8 complexes: transferred C5b-9 complexes are nonbactericidal. Infect Immun, 1994,62: 4101-4106.
5 Haeger M, Unander M, Bengtsson A. Enhanced anaphylatoxin and terminal C5b-9 complement complex formation in patients with the syndrome of hemolyssis, elevated liver enzymes and low plateler count. Obstet Gynecol, 1990, 76: 698-702.
6 Haeger M, Unander M, Andersson B, et al.Incresed release of tumor necrosis factor-alpha and interleukin-6 in women with the syndrome of hemolysis, elevated liver enzymes, and low platelet count. Acta Obstet Gynecol, 1996, 75: 695-701.
7 郑英茹,陈竹钦,颜建华, 等. 妊高征患者血中补体活化与内皮细胞损伤关系的研究. 中华妇产科杂志, 1996, 31:152-155.
(收稿：1998-11-02 修回：1999-04-08), http://www.100md.com