结核杆菌抗原抗体的检测在结核性脑膜炎诊断中的意义
作者：卢贤瑜 王绍映 邓一平 胡修瑾 兰景刚 陶昆
单位：400046 重庆医科大学临床微生物学、免疫学教研室(卢贤瑜、邓一平、陶昆)，儿科学院(王绍映、胡修瑾)；中国预防医学科学院流行病研究所微生物室(兰景刚)
关键词：
中华儿科杂志/980811
结核性脑膜炎(简称结脑)是儿科常见的传染病之一，常因诊断和治疗不及时而危及患儿生命或留下后遗症。该病的早期临床表现和脑脊液(CSF)改变往往不典型，加上盲目用药对病程的干扰，很容易造成误诊。实验室诊断中细菌培养结果虽是确切可靠的，但阳性率低且不及时。我们采用ELISA法平行检测了结脑患儿和其他疾病患儿脑脊液中结核抗原和抗纯蛋白衍化物(PPD)抗体IgG，对两者结果进行了比较，并探讨了其临床意义。
对象：24例临床已确诊结脑的患儿脑脊液。临床诊断依据：(1)有脑膜炎的临床表现；(2)CSF生化符合结脑改变；(3)部分病例同时伴有脑外结核；(4)经抗结核治疗有效。29例其他疾病患儿的脑脊液，病种有：细菌性脑膜炎、病毒性脑膜炎、颅内肿瘤、癫痫等10种脑疾患和非脑疾患的其他疾病。所有标本均采自重庆医科大学儿童医院。
, 百拇医药
方法：结核抗原的检测：参考庄玉辉和张清福等人制结核抗体的方法加以修改，用超声波粉碎的卡介苗(BCG)加PPD，并加福氏完全佐剂先后免疫家兔共6次，历时2月余，获得抗血清。经(NH4)2SO4盐析2次后测蛋白含量。用过碘酸钠法标记辣根过氧化物酶，滴定工作浓度为1∶80。抗体包被浓度为50μg/ml。用双抗夹心法测CSF中结核抗原。抗PPD抗体IgG的检测：包被PPD浓度为10 μg/ml，ELISA间接法测抗PPD抗体IgG。实验结果用酶标光度仪测492 nm吸光度[A，曾称光密度(OD)]。所有检测数据经统计学处理后，以A≥0.20为阳性结果。
结果：24例结脑患儿CSF中结核抗原阳性者有20例,阴性4例,阳性率为83.3%。抗体阳性者有22例,阴性2例,阳性率为91.7%。24例结脑CSF中,抗原抗体均阳性者18例,故两法阳性符合率为75%。其余6例中有2例抗原阳性,4例抗体阳性。这6例单项阳性者临床上经抗结核治疗,症状均明显好转,临床仍支持结脑诊断。24例结脑CSF中无1例两项检测均为阴性者。29例非结脑患儿CSF中无1例抗原阳性,故抗原检测特异性为100%；抗体阳性有2例,故抗体检测特异性为93.1%。结脑组与其他疾病组比较，结核抗原和抗体的检测结果差异有显著意义(P<0.01)。结脑组中抗原和抗体间的阳性率差异无显著意义(P>0.05)。
, 百拇医药
讨论：检测结果表明，如果单检测抗原或抗体，会造成少数漏诊。平行地对抗原、抗体进行检测，则可对单项检测中的假阴性予以弥补，减少漏诊。本组有6例结脑标本单项抗原或抗体为阳性，这些标本经重复实验证实，分析其原因，有多种可能。据某些文献报道ELISA试验检测结核抗原抗体就有5%左右的假阳性和(或)假阴性的可能。此外在感染早期CSF中已有少量结核抗原存在，而抗体IgG还未足够产生,表现为单项抗原阳性。单项抗体阳性者,推测可能与病程有一定关系。当然对两项检测均阳性者诊断较肯定，如仅有一项阳性者，必须结合临床、脑脊液的其他检验及其他诊断结核的检测，如PPD皮试等。遗憾的是本组未做PPD皮试,故无这方面的资料进行分析。本组6例单项阳性者在临床上均有结脑症状,故临床上仍按结脑治疗,并有明显疗效。29例对照组中有2例抗体检测为阳性，1例是5个月的流行性脑脊髓膜炎患儿，1例是高热惊厥患儿，其结核抗体阳性的原因尚不清楚。据某些资料报道在非结脑CSF中可有低滴度的结核抗体存在。
用ELISA法检测CSF中结核抗原抗体国内外均有些报道，尤以报道检测抗体为多。对选用的抗原也不一样。有BCG提取物、OT、聚合OT、PPD等。我们先后用过上述几种抗原，认为PPD最为稳定可靠，并易定量，便于推广。在检测抗原中获得高效价抗体是关键。经多种方法的比较，我们认为本检测所述制抗体的方法较好，所制的抗体效价较高。由于ELISA法检测结核抗原、抗体有一定假阳性或假阴性结果,因此我们认为尽可能平行检测这两项指标，对减少漏诊误诊是很有效的。而且ELISA法较成熟稳定,方法简便，不需特殊仪器、试剂，与PCR技术检测结核抗原相比更易于在基层医院广泛推广。, http://www.100md.com
单位：400046 重庆医科大学临床微生物学、免疫学教研室(卢贤瑜、邓一平、陶昆)，儿科学院(王绍映、胡修瑾)；中国预防医学科学院流行病研究所微生物室(兰景刚)
关键词：
中华儿科杂志/980811
结核性脑膜炎(简称结脑)是儿科常见的传染病之一，常因诊断和治疗不及时而危及患儿生命或留下后遗症。该病的早期临床表现和脑脊液(CSF)改变往往不典型，加上盲目用药对病程的干扰，很容易造成误诊。实验室诊断中细菌培养结果虽是确切可靠的，但阳性率低且不及时。我们采用ELISA法平行检测了结脑患儿和其他疾病患儿脑脊液中结核抗原和抗纯蛋白衍化物(PPD)抗体IgG，对两者结果进行了比较，并探讨了其临床意义。
对象：24例临床已确诊结脑的患儿脑脊液。临床诊断依据：(1)有脑膜炎的临床表现；(2)CSF生化符合结脑改变；(3)部分病例同时伴有脑外结核；(4)经抗结核治疗有效。29例其他疾病患儿的脑脊液，病种有：细菌性脑膜炎、病毒性脑膜炎、颅内肿瘤、癫痫等10种脑疾患和非脑疾患的其他疾病。所有标本均采自重庆医科大学儿童医院。
, 百拇医药
方法：结核抗原的检测：参考庄玉辉和张清福等人制结核抗体的方法加以修改，用超声波粉碎的卡介苗(BCG)加PPD，并加福氏完全佐剂先后免疫家兔共6次，历时2月余，获得抗血清。经(NH4)2SO4盐析2次后测蛋白含量。用过碘酸钠法标记辣根过氧化物酶，滴定工作浓度为1∶80。抗体包被浓度为50μg/ml。用双抗夹心法测CSF中结核抗原。抗PPD抗体IgG的检测：包被PPD浓度为10 μg/ml，ELISA间接法测抗PPD抗体IgG。实验结果用酶标光度仪测492 nm吸光度[A，曾称光密度(OD)]。所有检测数据经统计学处理后，以A≥0.20为阳性结果。
结果：24例结脑患儿CSF中结核抗原阳性者有20例,阴性4例,阳性率为83.3%。抗体阳性者有22例,阴性2例,阳性率为91.7%。24例结脑CSF中,抗原抗体均阳性者18例,故两法阳性符合率为75%。其余6例中有2例抗原阳性,4例抗体阳性。这6例单项阳性者临床上经抗结核治疗,症状均明显好转,临床仍支持结脑诊断。24例结脑CSF中无1例两项检测均为阴性者。29例非结脑患儿CSF中无1例抗原阳性,故抗原检测特异性为100%；抗体阳性有2例,故抗体检测特异性为93.1%。结脑组与其他疾病组比较，结核抗原和抗体的检测结果差异有显著意义(P<0.01)。结脑组中抗原和抗体间的阳性率差异无显著意义(P>0.05)。
, 百拇医药
讨论：检测结果表明，如果单检测抗原或抗体，会造成少数漏诊。平行地对抗原、抗体进行检测，则可对单项检测中的假阴性予以弥补，减少漏诊。本组有6例结脑标本单项抗原或抗体为阳性，这些标本经重复实验证实，分析其原因，有多种可能。据某些文献报道ELISA试验检测结核抗原抗体就有5%左右的假阳性和(或)假阴性的可能。此外在感染早期CSF中已有少量结核抗原存在，而抗体IgG还未足够产生,表现为单项抗原阳性。单项抗体阳性者,推测可能与病程有一定关系。当然对两项检测均阳性者诊断较肯定，如仅有一项阳性者，必须结合临床、脑脊液的其他检验及其他诊断结核的检测，如PPD皮试等。遗憾的是本组未做PPD皮试,故无这方面的资料进行分析。本组6例单项阳性者在临床上均有结脑症状,故临床上仍按结脑治疗,并有明显疗效。29例对照组中有2例抗体检测为阳性，1例是5个月的流行性脑脊髓膜炎患儿，1例是高热惊厥患儿，其结核抗体阳性的原因尚不清楚。据某些资料报道在非结脑CSF中可有低滴度的结核抗体存在。
用ELISA法检测CSF中结核抗原抗体国内外均有些报道，尤以报道检测抗体为多。对选用的抗原也不一样。有BCG提取物、OT、聚合OT、PPD等。我们先后用过上述几种抗原，认为PPD最为稳定可靠，并易定量，便于推广。在检测抗原中获得高效价抗体是关键。经多种方法的比较，我们认为本检测所述制抗体的方法较好，所制的抗体效价较高。由于ELISA法检测结核抗原、抗体有一定假阳性或假阴性结果,因此我们认为尽可能平行检测这两项指标，对减少漏诊误诊是很有效的。而且ELISA法较成熟稳定,方法简便，不需特殊仪器、试剂，与PCR技术检测结核抗原相比更易于在基层医院广泛推广。, http://www.100md.com