小儿下呼吸道衣原体感染的研究
作者：李文仲 汪玎妍 罗宪玲 蔡若莲 刘梅珍 孙云霞
单位：510080 广州，广东省人民医院儿科(李文仲、蔡若莲、刘梅珍、孙云霞)，病毒室(汪玎妍、罗宪玲)
关键词：
中华儿科杂志981024 于1992年11月～1997年8月对住院的130例下呼吸道感染患儿进行咽拭子衣原体培养分离或聚合酶链反应(PCR)检测，血清衣原体特异性IgM、IgG抗体或PCR检测，以证实沙眼衣原体(CT)和肺炎衣原体(CPn)是小儿下呼吸道感染的病原体之一，并对不同检测方法所得结果进行讨论。
对象：130例中男87例，女43例。1岁以内婴儿60例，～3岁42例，～7岁28例。诊断为支气管肺炎85例(65.4%)，支气管炎35例(26.9%)，支气管哮喘并感染10例(7.7%)。
, http://www.100md.com
方法：63例咽拭子标本采用培养分离法检测衣原体，直接荧光法检测CT，单克隆抗体购自美国Syva公司，间接荧光法检测CPn，单克隆抗体购自美国华盛顿大学基金会。79例血清标本采用微量间接荧光法检测衣原体抗体，CT抗原购自中山医科大学微生物教研室，CPn抗原购自美国华盛顿大学基金会。羊抗人IgG、IgM荧光抗体购自军事医学科学院微生物流行病研究所。67例用PCR法测定咽拭子CT，51例用PCR法测定血液CT和CPn，用本实验室自制试剂盒进行，引物设计根据Gold软件检索，沙眼衣原体引物序列为5′TAG TAA CTG CCA CTT CAT CA3′，5′TTC CCC TTG TAA TTC GTT GC3′，使用9600扩增仪进行PCR检测。
结果：1.130例均取咽拭子检查，其中63例用培养分离法检测均阴性，67例用PCR法测CT阳性率11.9%(8/67)。
2.79例测血清衣原体抗体，结果见附表。CT IgM阳性率15%(12/79)，IgG阳性率8%(6/79)；CPn IgM阳性率5%(4/79)，IgG阳性率6%(5/79)。CT阳性率20%(16/79)，CPn阳性率11%(9/79)，两种抗体配对四格表比较，差异无显著意义(χ2=2.00，P>0.05)。判断标准：IgM 1∶16为阳性，IgG 1∶32为阳性。51例用PCR法测定全血仅1例CPn阳性。
, 百拇医药
附表 79例血清衣原体抗体检出情况 血清抗体
阳性例数
IgM
IgG
IgM+IgG
合计(%)
CT
8
3
2
13(16.5)
CPn
3
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3…
6(8)
CT+CPn……
3*
3(4)
合计
11
6
5
22(27.9)
* 其中CT IgM和CPn IgG阳性2例，CT IgG和CPn IgM阳性1例 3.衣原体阳性患儿临床表现：在20例咽拭子CT和血清CT IgM抗体阳性患儿中，18例缓慢起病，鼻塞、流涕、咳嗽，其中10例有频繁干咳、气促及轻微发绀，7例(35%)轻中度发热，2例(10%)高热39℃以上，双肺闻及音或哮鸣音14例。X线检查共18例，2例轻度肺气肿，10例纹理增粗及斑片状阴影。3例病程达2个月以上，1例8个月婴儿诊断重症肺炎，多器官损害。5例(25%)采用大环内酯类药治疗。
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讨论：本组资料证实衣原体是小儿下呼吸道感染的病原体之一，咽拭子CT的阳性率为12%(8/67)，血清衣原体抗体阳性率为28%(22/79)。Paisley[1]等分析了102例5岁以内急性下呼吸道感染患儿，证实CT 10例(10%)。Carballal等[2]研究255例1～18个月肺炎与毛细支气管炎患儿。CT感染49例(19.2%)。本组有15%(12/79)病例为CT IgM阳性，IgM效价增高说明近期存在CT感染，提示CT是这些下呼吸道感染患儿的致病菌之一。有8%(6/79)为CT IgG抗体阳性，提示患儿曾有过CT感染。2例CT IgM与IgG均阳性，示CT反复感染。曾认为CPn仅在青少年和成人中流行，其所致人类呼吸道感染具有流行性和地方性，世界各地成人血清中抗体水平较高，介于25%～55%之间，男性高于女性[2，3]。本组CPn IgM阳性率为5%(4/79)，IgG阳性率为6%(5/79)，提示CPn也能引起小儿下呼吸道感染。有3例CT抗体和CPn抗体同时都阳性，提示衣原体2个属先后被感染。本组CT与CPn抗体阳性率比较无显著性差异，表明这两种衣原体引起的小儿下呼吸道感染率相近似。
, 百拇医药
衣原体肺炎症状轻重不一，多数起病缓慢，常先有鼻塞，鼻充血， 而后出现气促和频繁间断咳嗽，咳后有呕吐和青紫，肺部可听到湿啰音，大多无发热。故有人提出婴儿没有发热而表现为轻型呼吸困难常是衣原体肺炎诊断的唯一线索。我们所观察有35%(7/20)轻中度发热，10%(2/20)高热，提示衣原体肺炎部分伴有发热。X线照片示肺充气过度，间质性，弥漫性炎症及斑片状阴影。病程常迁延，如不治疗可长达4～6个月之久。本组有3例CT感染者为迁延性肺炎。1例CT感染患儿为重症肺炎，多器官损害，经抢救痊愈。
为防止病程迁延都应抗生素治疗，常用有效抗生素为大环内酯类。本组有2例迁延性肺炎在病程2个月时经应用罗红霉素和交沙霉素才痊愈。
本研究发现用不同方法检测阳性率相差很大。本组咽拭子用培养分离法检测，全部阴性，而用PCR检测阳性率达12%(8/67)。因咽拭子细胞培养对标本的要求高，要有活菌存在才能培养成功，可能与我们用棉拭子在咽部取材时擦拭的力度不够，不能取得含有足量的病原体的上皮细胞有关。因PCR检测只需标本中含有少许病原体的DNA片断即能获得阳性结果。本组有51例用PCR检测全血衣原体，仅检出1例CPn，远低于血清衣原体抗体的阳性率(27.9%)，可能因衣原体主要寄生在呼吸道上皮细胞而不进入血液循环，血液中不存在抗原，故PCR方法不易测出。
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参考文献
1 Paisley JW, Lauer BA, McIntosh K, et al. Pathogens associated with acute lower respiratory tract infection in young clildren. Pediatr Infect Dis, 1984,3：14-19.
2 Carballal G, Mahony JB, Videla C, et al. Chlamydial antibodies in children with lower respiratory disease. Pediatr Infect Dis J, 1992,11：68-71.
3 Marrie TJ, Grayston JT, Wang SP, et al. Pneumonia associated with the TWAR strain of chlamydia. Ann Intern Med, 1987,106：507-511.
(收稿：1998-01-23 修回：1998-06-20), http://www.100md.com
单位：510080 广州，广东省人民医院儿科(李文仲、蔡若莲、刘梅珍、孙云霞)，病毒室(汪玎妍、罗宪玲)
关键词：
中华儿科杂志981024 于1992年11月～1997年8月对住院的130例下呼吸道感染患儿进行咽拭子衣原体培养分离或聚合酶链反应(PCR)检测，血清衣原体特异性IgM、IgG抗体或PCR检测，以证实沙眼衣原体(CT)和肺炎衣原体(CPn)是小儿下呼吸道感染的病原体之一，并对不同检测方法所得结果进行讨论。
对象：130例中男87例，女43例。1岁以内婴儿60例，～3岁42例，～7岁28例。诊断为支气管肺炎85例(65.4%)，支气管炎35例(26.9%)，支气管哮喘并感染10例(7.7%)。
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方法：63例咽拭子标本采用培养分离法检测衣原体，直接荧光法检测CT，单克隆抗体购自美国Syva公司，间接荧光法检测CPn，单克隆抗体购自美国华盛顿大学基金会。79例血清标本采用微量间接荧光法检测衣原体抗体，CT抗原购自中山医科大学微生物教研室，CPn抗原购自美国华盛顿大学基金会。羊抗人IgG、IgM荧光抗体购自军事医学科学院微生物流行病研究所。67例用PCR法测定咽拭子CT，51例用PCR法测定血液CT和CPn，用本实验室自制试剂盒进行，引物设计根据Gold软件检索，沙眼衣原体引物序列为5′TAG TAA CTG CCA CTT CAT CA3′，5′TTC CCC TTG TAA TTC GTT GC3′，使用9600扩增仪进行PCR检测。
结果：1.130例均取咽拭子检查，其中63例用培养分离法检测均阴性，67例用PCR法测CT阳性率11.9%(8/67)。
2.79例测血清衣原体抗体，结果见附表。CT IgM阳性率15%(12/79)，IgG阳性率8%(6/79)；CPn IgM阳性率5%(4/79)，IgG阳性率6%(5/79)。CT阳性率20%(16/79)，CPn阳性率11%(9/79)，两种抗体配对四格表比较，差异无显著意义(χ2=2.00，P>0.05)。判断标准：IgM 1∶16为阳性，IgG 1∶32为阳性。51例用PCR法测定全血仅1例CPn阳性。
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附表 79例血清衣原体抗体检出情况 血清抗体
阳性例数
IgM
IgG
IgM+IgG
合计(%)
CT
8
3
2
13(16.5)
CPn
3
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3…
6(8)
CT+CPn……
3*
3(4)
合计
11
6
5
22(27.9)
* 其中CT IgM和CPn IgG阳性2例，CT IgG和CPn IgM阳性1例 3.衣原体阳性患儿临床表现：在20例咽拭子CT和血清CT IgM抗体阳性患儿中，18例缓慢起病，鼻塞、流涕、咳嗽，其中10例有频繁干咳、气促及轻微发绀，7例(35%)轻中度发热，2例(10%)高热39℃以上，双肺闻及音或哮鸣音14例。X线检查共18例，2例轻度肺气肿，10例纹理增粗及斑片状阴影。3例病程达2个月以上，1例8个月婴儿诊断重症肺炎，多器官损害。5例(25%)采用大环内酯类药治疗。
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讨论：本组资料证实衣原体是小儿下呼吸道感染的病原体之一，咽拭子CT的阳性率为12%(8/67)，血清衣原体抗体阳性率为28%(22/79)。Paisley[1]等分析了102例5岁以内急性下呼吸道感染患儿，证实CT 10例(10%)。Carballal等[2]研究255例1～18个月肺炎与毛细支气管炎患儿。CT感染49例(19.2%)。本组有15%(12/79)病例为CT IgM阳性，IgM效价增高说明近期存在CT感染，提示CT是这些下呼吸道感染患儿的致病菌之一。有8%(6/79)为CT IgG抗体阳性，提示患儿曾有过CT感染。2例CT IgM与IgG均阳性，示CT反复感染。曾认为CPn仅在青少年和成人中流行，其所致人类呼吸道感染具有流行性和地方性，世界各地成人血清中抗体水平较高，介于25%～55%之间，男性高于女性[2，3]。本组CPn IgM阳性率为5%(4/79)，IgG阳性率为6%(5/79)，提示CPn也能引起小儿下呼吸道感染。有3例CT抗体和CPn抗体同时都阳性，提示衣原体2个属先后被感染。本组CT与CPn抗体阳性率比较无显著性差异，表明这两种衣原体引起的小儿下呼吸道感染率相近似。
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衣原体肺炎症状轻重不一，多数起病缓慢，常先有鼻塞，鼻充血， 而后出现气促和频繁间断咳嗽，咳后有呕吐和青紫，肺部可听到湿啰音，大多无发热。故有人提出婴儿没有发热而表现为轻型呼吸困难常是衣原体肺炎诊断的唯一线索。我们所观察有35%(7/20)轻中度发热，10%(2/20)高热，提示衣原体肺炎部分伴有发热。X线照片示肺充气过度，间质性，弥漫性炎症及斑片状阴影。病程常迁延，如不治疗可长达4～6个月之久。本组有3例CT感染者为迁延性肺炎。1例CT感染患儿为重症肺炎，多器官损害，经抢救痊愈。
为防止病程迁延都应抗生素治疗，常用有效抗生素为大环内酯类。本组有2例迁延性肺炎在病程2个月时经应用罗红霉素和交沙霉素才痊愈。
本研究发现用不同方法检测阳性率相差很大。本组咽拭子用培养分离法检测，全部阴性，而用PCR检测阳性率达12%(8/67)。因咽拭子细胞培养对标本的要求高，要有活菌存在才能培养成功，可能与我们用棉拭子在咽部取材时擦拭的力度不够，不能取得含有足量的病原体的上皮细胞有关。因PCR检测只需标本中含有少许病原体的DNA片断即能获得阳性结果。本组有51例用PCR检测全血衣原体，仅检出1例CPn，远低于血清衣原体抗体的阳性率(27.9%)，可能因衣原体主要寄生在呼吸道上皮细胞而不进入血液循环，血液中不存在抗原，故PCR方法不易测出。
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参考文献
1 Paisley JW, Lauer BA, McIntosh K, et al. Pathogens associated with acute lower respiratory tract infection in young clildren. Pediatr Infect Dis, 1984,3：14-19.
2 Carballal G, Mahony JB, Videla C, et al. Chlamydial antibodies in children with lower respiratory disease. Pediatr Infect Dis J, 1992,11：68-71.
3 Marrie TJ, Grayston JT, Wang SP, et al. Pneumonia associated with the TWAR strain of chlamydia. Ann Intern Med, 1987,106：507-511.
(收稿：1998-01-23 修回：1998-06-20), http://www.100md.com