酸中毒对胰岛素样生长因子及其结合蛋白的作用
作者：周湘 MANIAR S KLEINKNECHT C
单位：100029 北京，中日友好医院儿科(周湘)；法国巴黎BICHAT医学院肾生理室(MANIAR S、 KLEINKNECHT C)
关键词：酸中毒；尿毒症；胰岛素样生长因子Ⅰ；胰岛素样生长因子结合蛋白质类
中华儿科杂志/990405 【摘要】 目的 研究慢性代谢性酸中毒(CMA)对胰岛素样生长因子(IGF-1)及其结合蛋白(IGFBPs)的影响。方法 采用Western ligand blot等方法，对随意进食组(AL)、尿毒症酸中毒组(UA)及其对照组尿毒症未合并酸中毒组(UB)、非尿毒症酸中毒组(CA)及其对照组无酸中毒(CNA)组的大白鼠进行了血清IGFBP-1～4的测定，对UA、UB组肝脏IGFBPs mRNA进行了测定。结果 UA的大白鼠每日身长增长(0.29±0.02)cm，食物身长效益为(0.22±0.01) mm/g，低于UB组[(0.36±0.04) cm，(0.31±0.02) mm/g](P<0.01)；CA组的大白鼠每日身长增长(0.46±0.03) cm，食物身长效益为(0.41±0.02) mm/g，低于CNA组[(0.64±0.02) cm，(0.55±0.02)mm/g](P<0.01)。UA组与UB组血清IGHBP-2的比值为0.61，CA组与CNA组的比值为0.57(P<0.05)；两对比组血清IGFBP-1的比值分别为2.89倍、3.26倍(P<0.01)；肝脏的IGFBP-1 mRNA，在UA组为(1.21±0.46)Dens，在UB组为(0.92±0.16)Dens，IGFBP-2 mRNA，在UA组为(0.52±0.03) Dens，在UB组为(0.36±0.06)Dens(P<0.05)；各组间血清IGF-1差异无显著意义。结论 (1)无论由尿毒症还是由非尿毒症因素引起的酸中毒血清IGFBP-2的降低，不是肝脏产生减少，而是代谢增强。(2)血清IGFBP-2降低与酸中毒的生长障碍有一定的关系。
, 百拇医药
Effect of acidosis on insulin-like growth factor-1 and its binding proteins ZHOU Xiang*, MANIAR S, KLEINKNECHT C. * Department of Pediatrics, China-Japan Friendship Hospital, Beijing 100029
【Abstract】 Objective To investigate the effects of chronic metabolic acidosis on insulin-like growth factors-I (IGF-I) and IGF binding proteins (IGFBPs). Methods Using Western ligand blot technique, the authors measured plasma levels of IGFBP-1-4 in uremic acidotic rats (UA) and uremic but without acidotic rats (UB), in the non-uremic acidotic (CA) and pair-fed (CNA) rats and also delermined liver mRNA in UA and UB rats. Results Length gain and length gain of food efficiency in UA rats were (0.29±0.02) cm/d and (0.22±0.01) mm/g, which were lower than those of UB [(0.36±0.04) cm/d，(0.31±0.02) mm/g] (P<0.01)； length gain and length gain of food efficiency [(0.46±0.03) cm/d and (0.41±0.02) mm/g] in CA rats were also lower than those of CAN[(0.64±0.02) cm/d，(0.55±0.02) mm/g] (P<0.01). Plasma levels of IGFBP-2 in UA and CA were lower (0.61 UA vs UB, 0.57 CA vs CNA ) (P<0.05), but plasma IGFBP-1 (2.89 UA vs UB, 3.26 CA vs CAN) (P<0.01). Liver mRNA in UA was higher than that of their controls. Liver IGFBP-1 mRNA was (1.21±0.46) Dens in UA and (0.92±0.16) Dens in UB, liver IGFBP-2 mRNA was (0.52±0.03) Dens in UA and (0.36±0.06) Dens in UB(P<0.05)； Plasma level of IGF-I did not change as compared to their controls. Conclusion (1) CMA per se, whether induced by uremia or by non-uremic disorders, decreased plasma level of IGFBP-2,which was a result of enhanced IGFBP-2 catabolism instead of reduced production by the liver. (2) The reduced IGFBP-2 levels may be associated with growth retardation occuring in patients with CMA.
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【Key words】 Uremia Acidosis Insulin-like growth factorⅠ Insulin-like-growth-factors binding proteins
生长障碍是肾小管酸中毒和慢性肾功能不全(CRF)的严重合并症，目前的研究涉及到生长激素系统[1]，对胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBPs)的作用研究报道较少。本研究观察了尿毒症酸中毒和非尿毒症酸中毒时IGF-I和IGFBPs的改变，以进一步了解酸中毒对生长的影响。
材料和方法
一、实验对象
选用法国幼年雌性Spraque-Darley大白鼠，体重约60～70g。共60只，分为5组，每组12只，所有动物食用同样食物。
1.尿毒症合并酸中毒(UA)组：采用大部分肾切除术和30%酪蛋白饮食制备成尿毒症合并酸中毒的动物模型。
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2.尿毒症未合并酸中毒(UB)组：仅在UA食物中加入碳酸氢钠(1.7 g/100 g食物)纠正其酸中毒，作为UA的对照组。
3.随意进食(AL)组：采用假性肾切除术和随意30%酪蛋白饮食，仅作为UA和UB的正常对照组。
4.非尿毒症性酸中毒(CA)组：在食用水中加入3%NH4Cl，制备成酸中毒的动物模型。
5.无酸中毒对照(CNA)组：配对给予CA同样食物。
实验中每日测定大白鼠体重和食物摄入量，实验前后测定2次身长(嘴与尾的长度)、血清pH值及碳酸氢盐(HCO-3)。实验20天，取血清冷冻于-20℃，用于测定血清IGF-1和IGFBPs。杀死大白鼠快速取出肝组织速冻于液氮中，用于测定IGFBPs mRNA。
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二、实验方法
1.采用放射免疫分析法测定血清IGF-1。
2.采用Western ligand blot分析法测定血清IGFBP-3(分子量38 000～43 000)和IGFBP-4(分子量24 000)[2]。将血清标本经12%SDS聚丙乙烯凝胶电泳分析。然后电转移至醋酸纤维膜上(0.45 μm，由法国Amersham公司提供)。再将其膜置于含有
125 I标记的IGF-1约8～10×105 Cpm的缓冲液中(由
法国Amersham公司提供)，4℃培养48小时，洗去未结合的125I-IGF-1，阴干后，置-80℃放射自显影7天。X光片显示出38 000～43 000带为IGFBP-3，24 000为IGFBP-4。
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3.进一步采用Immuno blot方法在28 000～32 000区域分离IGFBP-2和IGFBP-1。将Ligand blot的纤维膜用含tween-20和5%脱脂奶粉的TBS缓冲液在室温下封闭3小时，再分别用抗牛IGFBP-2多克隆抗体(Code＃ 06-107由法国 Euromedes公司提供)和抗人IGFBP-1抗体(由巴黎Binonx教授提供)培养1小时，然后用抗免疫球蛋白培养1小时，洗去多余抗体后，用LEC药盒显影(RPN.2109，由法国Amersham公司提供)。
4.采用Northern blot 分析测定肝脏IGFBPs mRNA[3]，首先从大白鼠肝脏抽取总RNA，并用1%琼脂凝胶电泳分离，然后转移至尼龙膜上，进行预杂交后，然后分别用P32标记的IGFBP-1-cDNA、IGFBP-2-cDNA、IGFBP-4-cDNA(由荷兰鹿特丹Erasees大学Van Neck提供，)杂交过夜，经-80℃放射自显影48小时后显影。
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5.X光胶片上的显影带均采用密度测定仪进行定量测定。
二、统计学分析
一般营养及生化指标均采用Scheffer与各自的对照组相比较。血清IGFBPs用实验组和对照组的比值表示，以排除每次实验条件不同的差异，并以Sign检验分析。采用密度测定仪测定所得的资料采用Sign检验分析。
结果
1.两酸中毒组(UA、CA)每只大白鼠的血清pH均<7.25，HCO-3<13 mmol/L。UB组pH为7.45±0.01，HCO-3为27.7±0.4 mmol/L。CNA组pH为7.41±0.01，HCO-3为23.3±0.5。
, http://www.100md.com 2.表1所示各组食物摄入量及生长指标。两酸中毒组(UA、CA)的食物摄入量与其对照组相同，但身长增长和食物身长增长效益均明显低于其对照组(P<0.05)。血清IGF-1均无明显差别。
表1 各组大白鼠食物摄入量、食物效益、生长指标、血清IGF-1(
±s) 组别
鼠数
食物摄入量
(g/d)
体重增长
(g/d)
身长增长
(cm/d)
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食物体重效益
(g/g)
食物身长效益
(mm/g)
IGF-1
(μg/L)
AL
12
20.03±0.66
8.78±0.33
0.58±0.03
0.44±0.03
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0.29±0.02
UA
12
12.90±0.54
5.06±0.31
0.29±0.02*
0.39±0.02
0.22±0.01*
267±35
UB
12
11.32±0.58
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4.69±0.50
0.36±0.04
0.40±0.04
0.31±0.02
256±24
CA
12
11.39±0.57
4.79±0.37
0.46±0.03*
0.43±0.02
0.41±0.02*
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451±27
CNA
12
11.74±0.17
6.00±0.22
0.64±0.02
0.51±0.02
0.55±0.02
437±31
UA与UB，CA与CNA相比* P<0.05
3.表2所示两组酸中毒(UA、CA)血清IGFBPs与其对照组之比值，均表现为血清IGFBP-2下降，而IGFBP-1升高。IGFBP-3和IGFBP-4没有明显差别。
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表2 各对比组大白鼠血清IGFBPs的比值 各组比
鼠数
IGFBP-1
IGFBP-2
IGFBP-3
IGFBP-4
UA/UB
各12
2.89**
0.61*
1.12
0.95
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CA/CNA
各12
3.26**
0.57*
1.21
0.92
** P<0.01，* P<0.05
4.在尿毒症组，无论有无酸中毒UA、UB组，其肝脏IGFBP-1 mRNA和IGFBP-2mRNA表达组间差异无显著意义，但明显高于AL组(P<0.05)，IGFBP-4降低，但差异无显著意义(表3)。
表3 各组大白鼠肝脏的IGFBPs mRNA表达(±s Dens) 组别
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鼠数
IGFBP-1
IGFBP-2
IGFBP-4
UA
6
1.21±0.46*
0.52±0.03*
0.85±0.21
UB
6
0.92±0.16*
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0.36±0.06*
1.17±0.05
AL
6
0.32±0.09
0.11±0.12
1.46±0.24
与AL组相比* P<0.05
讨论
由于营养和肾功能不全也可导致生长障碍，影响生长激素系统[4，5]。为显示酸中毒对生长和IGF-1的影响，本研究排除了营养和肾功能的影响，两组酸中毒共同表现为身长增长和食物身长增长效益的减少，血清IGFBP-1升高，IGFBP-2降低。尿毒症合并酸中毒的肝脏IGFBP-1和IGFBP-2mRNA表达均明显高于AL组，UA与UB相比，并无差异。从而提示，酸中毒引起IGFBP-2降低，不是由于IGFBP-2在肝脏产生减少，而是IGFBP-2分解代谢增强，或者说这种IGFBP-2转录后的改变可能是由于IGFBP-2的降解增强。Jandziszak等[6]采用WLB方法测定酸中毒时IGFBP-2(32 000～28 000区域)表达无明显改变，而本研究采用Immuno blot方法在分子量32 000～28 000区域不仅分离出低水平的IGFBP-2,而且还有高水平的IGFBP-1。目前研究证实酸中毒常伴有蛋白代谢异常增加，而不改变蛋白合成，酸中毒严重程度与蛋白分解代谢有相关关系[7，8]，从而提示酸中毒的异常代谢可能直接影响IGFBP-2正常代谢，但对IGFBP-3和IGFBP-4作用较小。
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尿毒症酸中毒(UA)也表现肝脏IGFBP-1和IGFBP-2 mRNA明显上升，以及血清IGFBP-1升高，与限制食物后的营养不良、禁食后以及糖尿病IGFBPs的变化相似[4]，提示酸中毒也可刺激肝脏合成IGFBP-1和IGFBP-2增加，而不影响IGFBP-1代谢。
目前发现酸中毒可导致生长激素受体(GHR)和IGF-1血清水平和肝脏mRNA表达的降低[9]。本研究中，UA、UB组血清IGF-1高于AL组，但两组酸中毒与其对照组无明显差异，提示酸中毒对血清IGF-1无直接的影响。
IGFBP-2大量存在于新出生大白鼠血液中，也有大量的IGFBP-2在其肝、肾、肠局部组织表达，并随年龄的增长和IGFBP-3产生而逐渐减少[10]，提示IGFBP-2对生长以及局部组织和邻近组织细胞生长分化有着重要的作用，是重要的生长因子，也提示酸中毒对身长增长影响与IGFBP-2的关系。在尿毒症合并酸中毒时可导致生长激素依赖[11]，酸中毒引起IGFBP-1的升高、IGFBP-2的降低对IGF-1生物活性的影响也是值得研究的。
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经上所述，无论尿毒症还是非尿毒症因素引起的酸中毒，血清IGFBP-2的降低，不是肝脏产生减少，而是代谢增强。血清IGFBP-2降低与酸中毒的生长障碍有一定的关系。
参考文献
1 Kuemmerle N, Kriey RJ, Latta K, et al. Growth hormone and insulin-like growth factor in non-uremic acidosis and uremic acidosis. Kidney Int, 1997, 51 (Suppl 58) :102-105.
2 Hossenlopp P, Seurin P, Segovia-Quinson B, et al. Analysis of serum insulin-like growth factor biding proteins using binding protein and competitive binding studies. Analy Biochem, 1986, 154:138-143.
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3 Chomczynski P, Sacchi N. Single-step method of RNA isolation by acid Guanidinium Thiocyanate-phenol-Chloroform extraction. Anal Biochem, 1986, 162:156-160.
4 周湘，Maniar S, Kleinknect C.食物对胰岛素样生长因子-I及其结合蛋白的影响.中日友好医院学报, 1997, 11:105-107.
5 Tonshoff B, Blum WF, Mehls O. Derangement of the somatotropic hormone axis in chronic renal failure. Kidney Int, 1997, 58 (Suppl):106-113.
6 Jandziszak K, Suarez C, Wasserman E，et al. Disturbances of growth hormone-insulin-like growth factor axis and response to growth hormone in acidosis. Am J Physiol, 1998, 274:R120-127.
, 百拇医药
7 Maniar S, Laouari D, Decaux M, et al.In vivo unaltered muscle protein synthesis in experimental chronic metabolic acidosis. Kidney Int, 1994,46:1705-1712.
8 Maniar S, Kleinknecht C, Zhou X, et al. Growth hormone action is blunted by acidoss in experimented uremia or acid-load. Clin Nephrol, 1996,.46:72-76.
9 Chan W, Valerie KC, Chan JCM. Expression of insulin-like growth factor-I in uremic rats: Growth hormone resistance and nutritional intake. Kidney Int, 1993, 43:790-795.
10 Rechler MM, Brown AL.Insulin-like growth factor binding protein, Gene structure and expression. Growth Regu, 1992,2:55-58.
11 周湘，董峰，Maniar S,等，生长激素在营养不良、尿毒症、酸中毒中对胰岛素样生长因子及其结合蛋白的作用.中日友好医院学报, 1998, 12:190-193.
(收稿：1998-05-25 修回：1998-12-29), 百拇医药
单位：100029 北京，中日友好医院儿科(周湘)；法国巴黎BICHAT医学院肾生理室(MANIAR S、 KLEINKNECHT C)
关键词：酸中毒；尿毒症；胰岛素样生长因子Ⅰ；胰岛素样生长因子结合蛋白质类
中华儿科杂志/990405 【摘要】 目的 研究慢性代谢性酸中毒(CMA)对胰岛素样生长因子(IGF-1)及其结合蛋白(IGFBPs)的影响。方法 采用Western ligand blot等方法，对随意进食组(AL)、尿毒症酸中毒组(UA)及其对照组尿毒症未合并酸中毒组(UB)、非尿毒症酸中毒组(CA)及其对照组无酸中毒(CNA)组的大白鼠进行了血清IGFBP-1～4的测定，对UA、UB组肝脏IGFBPs mRNA进行了测定。结果 UA的大白鼠每日身长增长(0.29±0.02)cm，食物身长效益为(0.22±0.01) mm/g，低于UB组[(0.36±0.04) cm，(0.31±0.02) mm/g](P<0.01)；CA组的大白鼠每日身长增长(0.46±0.03) cm，食物身长效益为(0.41±0.02) mm/g，低于CNA组[(0.64±0.02) cm，(0.55±0.02)mm/g](P<0.01)。UA组与UB组血清IGHBP-2的比值为0.61，CA组与CNA组的比值为0.57(P<0.05)；两对比组血清IGFBP-1的比值分别为2.89倍、3.26倍(P<0.01)；肝脏的IGFBP-1 mRNA，在UA组为(1.21±0.46)Dens，在UB组为(0.92±0.16)Dens，IGFBP-2 mRNA，在UA组为(0.52±0.03) Dens，在UB组为(0.36±0.06)Dens(P<0.05)；各组间血清IGF-1差异无显著意义。结论 (1)无论由尿毒症还是由非尿毒症因素引起的酸中毒血清IGFBP-2的降低，不是肝脏产生减少，而是代谢增强。(2)血清IGFBP-2降低与酸中毒的生长障碍有一定的关系。
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Effect of acidosis on insulin-like growth factor-1 and its binding proteins ZHOU Xiang*, MANIAR S, KLEINKNECHT C. * Department of Pediatrics, China-Japan Friendship Hospital, Beijing 100029
【Abstract】 Objective To investigate the effects of chronic metabolic acidosis on insulin-like growth factors-I (IGF-I) and IGF binding proteins (IGFBPs). Methods Using Western ligand blot technique, the authors measured plasma levels of IGFBP-1-4 in uremic acidotic rats (UA) and uremic but without acidotic rats (UB), in the non-uremic acidotic (CA) and pair-fed (CNA) rats and also delermined liver mRNA in UA and UB rats. Results Length gain and length gain of food efficiency in UA rats were (0.29±0.02) cm/d and (0.22±0.01) mm/g, which were lower than those of UB [(0.36±0.04) cm/d，(0.31±0.02) mm/g] (P<0.01)； length gain and length gain of food efficiency [(0.46±0.03) cm/d and (0.41±0.02) mm/g] in CA rats were also lower than those of CAN[(0.64±0.02) cm/d，(0.55±0.02) mm/g] (P<0.01). Plasma levels of IGFBP-2 in UA and CA were lower (0.61 UA vs UB, 0.57 CA vs CNA ) (P<0.05), but plasma IGFBP-1 (2.89 UA vs UB, 3.26 CA vs CAN) (P<0.01). Liver mRNA in UA was higher than that of their controls. Liver IGFBP-1 mRNA was (1.21±0.46) Dens in UA and (0.92±0.16) Dens in UB, liver IGFBP-2 mRNA was (0.52±0.03) Dens in UA and (0.36±0.06) Dens in UB(P<0.05)； Plasma level of IGF-I did not change as compared to their controls. Conclusion (1) CMA per se, whether induced by uremia or by non-uremic disorders, decreased plasma level of IGFBP-2,which was a result of enhanced IGFBP-2 catabolism instead of reduced production by the liver. (2) The reduced IGFBP-2 levels may be associated with growth retardation occuring in patients with CMA.
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【Key words】 Uremia Acidosis Insulin-like growth factorⅠ Insulin-like-growth-factors binding proteins
生长障碍是肾小管酸中毒和慢性肾功能不全(CRF)的严重合并症，目前的研究涉及到生长激素系统[1]，对胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBPs)的作用研究报道较少。本研究观察了尿毒症酸中毒和非尿毒症酸中毒时IGF-I和IGFBPs的改变，以进一步了解酸中毒对生长的影响。
材料和方法
一、实验对象
选用法国幼年雌性Spraque-Darley大白鼠，体重约60～70g。共60只，分为5组，每组12只，所有动物食用同样食物。
1.尿毒症合并酸中毒(UA)组：采用大部分肾切除术和30%酪蛋白饮食制备成尿毒症合并酸中毒的动物模型。
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2.尿毒症未合并酸中毒(UB)组：仅在UA食物中加入碳酸氢钠(1.7 g/100 g食物)纠正其酸中毒，作为UA的对照组。
3.随意进食(AL)组：采用假性肾切除术和随意30%酪蛋白饮食，仅作为UA和UB的正常对照组。
4.非尿毒症性酸中毒(CA)组：在食用水中加入3%NH4Cl，制备成酸中毒的动物模型。
5.无酸中毒对照(CNA)组：配对给予CA同样食物。
实验中每日测定大白鼠体重和食物摄入量，实验前后测定2次身长(嘴与尾的长度)、血清pH值及碳酸氢盐(HCO-3)。实验20天，取血清冷冻于-20℃，用于测定血清IGF-1和IGFBPs。杀死大白鼠快速取出肝组织速冻于液氮中，用于测定IGFBPs mRNA。
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二、实验方法
1.采用放射免疫分析法测定血清IGF-1。
2.采用Western ligand blot分析法测定血清IGFBP-3(分子量38 000～43 000)和IGFBP-4(分子量24 000)[2]。将血清标本经12%SDS聚丙乙烯凝胶电泳分析。然后电转移至醋酸纤维膜上(0.45 μm，由法国Amersham公司提供)。再将其膜置于含有
125 I标记的IGF-1约8～10×105 Cpm的缓冲液中(由
法国Amersham公司提供)，4℃培养48小时，洗去未结合的125I-IGF-1，阴干后，置-80℃放射自显影7天。X光片显示出38 000～43 000带为IGFBP-3，24 000为IGFBP-4。
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3.进一步采用Immuno blot方法在28 000～32 000区域分离IGFBP-2和IGFBP-1。将Ligand blot的纤维膜用含tween-20和5%脱脂奶粉的TBS缓冲液在室温下封闭3小时，再分别用抗牛IGFBP-2多克隆抗体(Code＃ 06-107由法国 Euromedes公司提供)和抗人IGFBP-1抗体(由巴黎Binonx教授提供)培养1小时，然后用抗免疫球蛋白培养1小时，洗去多余抗体后，用LEC药盒显影(RPN.2109，由法国Amersham公司提供)。
4.采用Northern blot 分析测定肝脏IGFBPs mRNA[3]，首先从大白鼠肝脏抽取总RNA，并用1%琼脂凝胶电泳分离，然后转移至尼龙膜上，进行预杂交后，然后分别用P32标记的IGFBP-1-cDNA、IGFBP-2-cDNA、IGFBP-4-cDNA(由荷兰鹿特丹Erasees大学Van Neck提供，)杂交过夜，经-80℃放射自显影48小时后显影。
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5.X光胶片上的显影带均采用密度测定仪进行定量测定。
二、统计学分析
一般营养及生化指标均采用Scheffer与各自的对照组相比较。血清IGFBPs用实验组和对照组的比值表示，以排除每次实验条件不同的差异，并以Sign检验分析。采用密度测定仪测定所得的资料采用Sign检验分析。
结果
1.两酸中毒组(UA、CA)每只大白鼠的血清pH均<7.25，HCO-3<13 mmol/L。UB组pH为7.45±0.01，HCO-3为27.7±0.4 mmol/L。CNA组pH为7.41±0.01，HCO-3为23.3±0.5。
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表1 各组大白鼠食物摄入量、食物效益、生长指标、血清IGF-1(
±s) 组别鼠数
食物摄入量
(g/d)
体重增长
(g/d)
身长增长
(cm/d)
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食物体重效益
(g/g)
食物身长效益
(mm/g)
IGF-1
(μg/L)
AL
12
20.03±0.66
8.78±0.33
0.58±0.03
0.44±0.03
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0.29±0.02
UA
12
12.90±0.54
5.06±0.31
0.29±0.02*
0.39±0.02
0.22±0.01*
267±35
UB
12
11.32±0.58
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4.69±0.50
0.36±0.04
0.40±0.04
0.31±0.02
256±24
CA
12
11.39±0.57
4.79±0.37
0.46±0.03*
0.43±0.02
0.41±0.02*
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451±27
CNA
12
11.74±0.17
6.00±0.22
0.64±0.02
0.51±0.02
0.55±0.02
437±31
UA与UB，CA与CNA相比* P<0.05
3.表2所示两组酸中毒(UA、CA)血清IGFBPs与其对照组之比值，均表现为血清IGFBP-2下降，而IGFBP-1升高。IGFBP-3和IGFBP-4没有明显差别。
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表2 各对比组大白鼠血清IGFBPs的比值 各组比
鼠数
IGFBP-1
IGFBP-2
IGFBP-3
IGFBP-4
UA/UB
各12
2.89**
0.61*
1.12
0.95
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CA/CNA
各12
3.26**
0.57*
1.21
0.92
** P<0.01，* P<0.05
4.在尿毒症组，无论有无酸中毒UA、UB组，其肝脏IGFBP-1 mRNA和IGFBP-2mRNA表达组间差异无显著意义，但明显高于AL组(P<0.05)，IGFBP-4降低，但差异无显著意义(表3)。
表3 各组大白鼠肝脏的IGFBPs mRNA表达(
±s Dens) 组别, http://www.100md.com
鼠数
IGFBP-1
IGFBP-2
IGFBP-4
UA
6
1.21±0.46*
0.52±0.03*
0.85±0.21
UB
6
0.92±0.16*
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0.36±0.06*
1.17±0.05
AL
6
0.32±0.09
0.11±0.12
1.46±0.24
与AL组相比* P<0.05
讨论
由于营养和肾功能不全也可导致生长障碍，影响生长激素系统[4，5]。为显示酸中毒对生长和IGF-1的影响，本研究排除了营养和肾功能的影响，两组酸中毒共同表现为身长增长和食物身长增长效益的减少，血清IGFBP-1升高，IGFBP-2降低。尿毒症合并酸中毒的肝脏IGFBP-1和IGFBP-2mRNA表达均明显高于AL组，UA与UB相比，并无差异。从而提示，酸中毒引起IGFBP-2降低，不是由于IGFBP-2在肝脏产生减少，而是IGFBP-2分解代谢增强，或者说这种IGFBP-2转录后的改变可能是由于IGFBP-2的降解增强。Jandziszak等[6]采用WLB方法测定酸中毒时IGFBP-2(32 000～28 000区域)表达无明显改变，而本研究采用Immuno blot方法在分子量32 000～28 000区域不仅分离出低水平的IGFBP-2,而且还有高水平的IGFBP-1。目前研究证实酸中毒常伴有蛋白代谢异常增加，而不改变蛋白合成，酸中毒严重程度与蛋白分解代谢有相关关系[7，8]，从而提示酸中毒的异常代谢可能直接影响IGFBP-2正常代谢，但对IGFBP-3和IGFBP-4作用较小。
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尿毒症酸中毒(UA)也表现肝脏IGFBP-1和IGFBP-2 mRNA明显上升，以及血清IGFBP-1升高，与限制食物后的营养不良、禁食后以及糖尿病IGFBPs的变化相似[4]，提示酸中毒也可刺激肝脏合成IGFBP-1和IGFBP-2增加，而不影响IGFBP-1代谢。
目前发现酸中毒可导致生长激素受体(GHR)和IGF-1血清水平和肝脏mRNA表达的降低[9]。本研究中，UA、UB组血清IGF-1高于AL组，但两组酸中毒与其对照组无明显差异，提示酸中毒对血清IGF-1无直接的影响。
IGFBP-2大量存在于新出生大白鼠血液中，也有大量的IGFBP-2在其肝、肾、肠局部组织表达，并随年龄的增长和IGFBP-3产生而逐渐减少[10]，提示IGFBP-2对生长以及局部组织和邻近组织细胞生长分化有着重要的作用，是重要的生长因子，也提示酸中毒对身长增长影响与IGFBP-2的关系。在尿毒症合并酸中毒时可导致生长激素依赖[11]，酸中毒引起IGFBP-1的升高、IGFBP-2的降低对IGF-1生物活性的影响也是值得研究的。
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经上所述，无论尿毒症还是非尿毒症因素引起的酸中毒，血清IGFBP-2的降低，不是肝脏产生减少，而是代谢增强。血清IGFBP-2降低与酸中毒的生长障碍有一定的关系。
参考文献
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10 Rechler MM, Brown AL.Insulin-like growth factor binding protein, Gene structure and expression. Growth Regu, 1992,2:55-58.
11 周湘，董峰，Maniar S,等，生长激素在营养不良、尿毒症、酸中毒中对胰岛素样生长因子及其结合蛋白的作用.中日友好医院学报, 1998, 12:190-193.
(收稿：1998-05-25 修回：1998-12-29), 百拇医药