小儿巨细胞包涵体病组织中病毒抗原检测及其临床意义的研究
作者：吕庆杰 闻德亮 李冠群 王伟
单位：吕庆杰、李冠群、王伟：110003 沈阳，中国医科大学第二临床学院病理科，闻德亮：儿内科
关键词：巨细胞病毒感染；免疫组织化学；抗原；病毒
中华儿科杂志990807 摘要 目的 探讨小儿巨细胞病毒(CMV)感染组织病变及与临床的关系。方法 用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(简称S-P法)，检测44例小儿巨细胞包涵体病(CID)尸检腮腺、肺、肾、肝组织石蜡切片组织中CMV感染情况。结果 CMV不仅存在于包涵体巨细胞，还广泛存在于无包涵体形成的巨细胞及形态正常的细胞。腮腺、肺、肾、肝组织CMV抗原阳性率分别为91%、59%、37%、27%。62%的全身型CID合并多脏器受累。肺组织炎症反应级别和临床症状的轻重与肺CMV感染的严重程度平行相关。结论 CMV感染细胞广泛，有些感染细胞无形态学变化。全身型CID易合并多脏器受累。CMV相关性肺炎以间质性肺炎为主，且CMV在其中可能起主导作用。
, 百拇医药
Detection of cytomegalovirus antigen in tissues by immunohistochemistry and its clinical significance in cytomegalic inclusion body disease of children
LU Qingjie,WEN Deliang,LI Guanqun,et al.
Department of Pathology,The Second Clinical College,China Medical University,Shenyang 110003
Abstract Objective To investigate the relationship between the pathological changes of CMV infection in children and clinical manifestations.Methods Parraffin-embeded parotid gland,lung,kidney and liver tissue sections prepared from autopsy material of 44 infants died of cytomegalic inclusion body disease (CID) were used to detect CMV antigen by immunohistochemistry (streptavidin-peroxidase or S-P method).Results CMV antigen was detected not only in most of cytomegalic cells with cytomegalic inclusion bodies (CIB) but also in many non-CIB cytomegalic cells and morphologically normal cells.CMV antigen was detected in 91% of parotid gland tissues,59% of lung tissues,37% of kidney tissues and in 27% of liver tissues.62% of the patients with generalized CID had multiple sites involvement.Grades of inflammation in lungs and severity of symptoms correlated directly with the severity of CMV infection in lungs.Conclusion CMV infected cells were widespread,some of them had no morphological changes.Patients with generalized CID more often had multiple sites involvement than those without generalized CID.Sections from most of CMV related pneumonia cases showed histological features of interstitial pneumonia,and CMV may play a leading role in the pathogenesis of the pneumonia.
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Key words Cytomegalovirus infections Immunohistochemistry Antigens,viral
巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)是广泛感染人类的重要病原之一，尤其胎儿、婴儿、器官移植和免疫缺陷患者等感染CMV可导致严重疾患，甚至死亡。本研究用免疫组化法检测小儿巨细胞包涵体病(CID)尸检主要脏器中CMV感染，探讨CMV感染与组织病变及临床的关系，明确CMV感染特点，为临床CMV感染的诊治提供依据。
材料与方法
一、材料
收集1979年至1995年我科常规诊断CID的病例44例。其中男性28例，女性16例。2天～1个月16例，～8个月27例，15个月1例。临床诊断肺炎17例，败血症、肝炎综合征各7例，胆道闭锁、CID各3例，先天性心脏病、化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、白血病各1例，诊断不清3例。
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二、实验方法
取全身各器官组织常规石蜡切片，HE染色。取腮腺、肺、肾、肝组织石蜡块，分别切成5 μm厚的切片，采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(简称S-P法)处理组织。一抗为抗CMV早期和晚期抗原的鼠抗人CMV单克隆抗体(DAKO，CCH2)；S-P试剂盒为Maxim Biotech公司产品。具体步骤：石蜡切片常规脱蜡至水，4%胃蛋白酶37℃消化30分钟，洗涤，0.3% H2O2甲醇液室温孵育20分钟，洗涤，1∶100非免疫动物血清室温孵育10分钟，加一抗室温孵育60分钟，洗涤，加二抗室温孵育10分钟，洗涤，加三抗室温孵育10分钟，洗涤，AEC试剂显色，苏木素复染。阳性细胞核或浆内出现红色颗粒。CMV感染的轻重以每平方厘米切片面积中CMV抗原阳性细胞数来判定：(+)：1～9；(++)：10～50；(+++)：>50。用含有大量典型巨细胞包涵体(CIB)的腮腺组织作阳性对照，正常腮腺组织作阴性对照。数据处理采用χ2检验。
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结果
一、S-P法与HE法CMV检测结果比较
当CMV感染仅限于腮腺时称限局型CID(确切说法应为“限局型CMV感染”，本研究暂采用习惯用法)；当CMV感染出现于腮腺以外任何一个脏器时称全身型CID。本组CID，HE法检出限局型24例，全身型20例；而S-P法检出限局型15例，全身型29例。两种方法同时检测腮腺、肺、肾、肝共163个组织块，两者同时阳性65块，同时阴性77块，HE阴性而S-P法阳性20块，HE阳性而S-P法阴性仅1块。经卡方检验，差异有非常显著意义(χ2=15.4，P<0.01)，表明S-P法优于HE法。
二、CMV感染细胞的特征及分布
绝大多数包涵体巨细胞CMV抗原阳性，另外许多无包涵体形成的巨细胞及形态正常的细胞均可见CMV感染(图1～3)。各脏器CMV感染细胞多少不等，单个散在或灶性分布。CMV感染细胞种类多样：腮腺内主要为导管上皮，少数为腺泡上皮及间质细胞；肺内多为肺泡上皮及细支气管上皮，部分为巨噬细胞、血管内皮及肺泡间隔内的组织细胞；肾内多为皮质区小管上皮，髓质区很少受累；肝内绝大多数为肝细胞，仅1例见汇管区小胆管受累。有些病例组织中或小血管内发现散在或成堆的白细胞CMV感染。
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图1 肺巨细胞包涵体CMV抗原阳性。S-P法，×400
图2 肾巨细胞包涵体及正常形态细胞CMV抗原阳性 。S-P法，×400
图3 肺泡增生上皮CMV抗原阳性。S-P法，×400
三、各脏器CMV检测结果
腮腺、肺、肾、肝CMV抗原阳性率分别为91%(32/35)、59%(26/44)、37%(16/43)、27%(11/41)。肺、肾及肝脏三组相比，肺CMV抗原阳性率高于肾或肝脏，差异有显著意义(χ2=4.2，P<0.05；χ2=8.9，P<0.01)。肾与肝脏CMV抗原阳性率差异不显著。
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四、CID与多脏器受累的关系
29例全身型CID中，同时累及肺、肾、肝脏中2个以上脏器的有18例，占62%。
肺CMV感染组中，56%(14/25)同时伴有肾CMV感染，42%(10/24)同时伴有肝CMV感染，而肺无CMV感染组中仅有11%(2/18)同时伴有肾CMV感染，6%(1/17)同时伴有肝CMV感染。经统计学处理，差异均有显著意义(χ2=9.0，P<0.01；χ2=4.8，P<0.05)。即肺CMV感染者较未感染者易同时伴有肾或肝CMV感染，肾与肝组间相比差异不显著。
五、肺CMV感染与肺组织炎症反应的关系
按肺组织内炎症反应的轻重：少量灶性、较多片状、大量成片炎细胞浸润，将其分为轻、中、重度。肺CMV感染的严重程度与肺组织炎症反应级别显著相关(χ2=7.8，P<0.05)。肺CMV感染细胞数(+)组中，中重度炎症反应占36%(5/14)，显著低于(++)～(+++)组中的83%(10/12)(χ2=6.0，P<0.05)。表明肺CMV感染的严重程度与炎症反应级别呈平行关系。74%的CMV相关性肺炎以间质性肺炎为主，显著高于非CMV相关性肺炎中间质性肺炎所占的比例22%(χ2=4.7,P<0.05)。42%(8/19)的CMV相关性肺炎合并支气管肺炎。肺CMV感染细胞数(+)～(++)组与(+++)组中合并支气管肺炎的比例差异不显著。
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六、肺CMV感染与症状、体征的关系
排除肺结核、心功能衰竭等可影响肺部症状、体征的病例，将20例肺CMV感染患儿咳嗽、喘憋等症状和肺干湿音等体征均分为无、轻、明显三个级别。肺CMV感染的严重程度与肺部症状、体征的轻重显著相关(χ2值分别为99.4、56.3，P值均小于0.05)。肺CMV感染细胞数(+)～(++)组症状重的12例中有3例，显著低于(+++)组中的8例中有6例(χ2=4.9，P<0.05)。两组中有明显体征的比例为1/12和3/8差异不显著。
讨论
一、S-P法与HE法检测CMV感染的比较
常规组织学诊断CMV感染主要根据典型包涵体的形成。但这种改变并不是在所有的CMV感染都出现[1]，所以常规组织学诊断必然造成漏诊，也妨碍对CMV感染全面正确的认识。本研究及其它研究均证明免疫组化法用于细胞组织中CMV感染的检测，快速简便、灵敏度高、特异性强，优于常规组织学检查[1]。该法用于临床各种脱落细胞、细针穿刺活检及尸检组织中CMV感染的诊断及研究，可提高诊断率，并全面客观地反映CMV感染的特征，而且有直接病原学诊断意义。
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二、CMV感染细胞的特征及种类
本研究与原位杂交等研究一样，证实CMV不仅存在于包涵体巨细胞，还广泛存在于无包涵体的巨细胞及形态正常的细胞[2，3],这有助于正确识别CMV感染细胞的种类。在腮腺、肺及肾，CMV有嗜上皮性；肝内CMV多感染肝细胞；另外还可见各种白细胞CMV感染。血管内白细胞CMV感染为巨细胞病毒血症，活动性CMV感染的指征[4]。这些未发生形态变化的CMV感染细胞可能处于感染的早期，典型包涵体尚未形成；或为少量病毒在细胞内低水平复制，尚不足以引起细胞病变。这些细胞是否可能成为CMV的长期潜伏宿主，成为日后CMV再激活的源泉，尚待进一步研究证实。
三、肺CMV感染组织病变及与临床的关系
本研究证实，肺CMV感染大多数表现为不同程度的炎症改变，而且以间质性肺炎为主，其中42%的CMV相关性肺炎合并支气管肺炎。因为病毒性肺炎多表现为间质性肺炎，而支气管肺炎多为细菌性肺炎的组织学特征，所以虽然缺乏肺部其它病原体感染的病原学资料，但仍可从一个侧面提示本组CMV相关性肺炎部分合并有其它病原体混合感染。文献资料也证实CMV相关性肺炎常合并其它病原体混合感染[5，6]，因此，CMV在其中所起的作用常难以判断。本研究发现，肺组织的炎症反应级别与肺CMV感染的严重程度平行相关，而其中支气管肺炎的伴发率并不随肺CMV感染细胞的增多而增加，肺部症状的轻重也与肺CMV感染的严重程度平行。因此，我们认为CMV在致肺炎的过程中，包括与其它病原并存的混合感染中，CMV可能起着主导作用。
, 百拇医药
临床已注意到小儿症状性CMV感染易出现多脏器损害，本组研究为62%的全身型CID患儿至少同时有2个脏器CMV感染，直接证实全身型CID易发生多脏器受累，特别是肺CMV感染易同时伴有肾或肝CMV感染。但肺部体征与肺CMV感染及病变程度并不平行，因此临床上应常规行胸部X线摄片，以便及早发现CMV相关性肺炎，及时治疗。
参考文献
1 Sano N， Izumi K.Hepatic cytomegalovirus involvement in autopsy cases.Acta Pathol Jpn,1991,41: 668-672.
2 Andersen CB.Detection of cytomegalovirus infected cells in autopsy material by in situ hybridization.APMIS,1990,98:363-368.
, 百拇医药
3 Myerson D,Hackman RC,Nelson JA,et al.Widespread presence of histologically occult cytomegalovirus.Hum Pathol,1984,15: 430-439.
4 Shibata D,Martin WJ,Appleman MD,et al.Detection of CMV DNA in peripheral blood of patients infected with human immunodeficiency virus.J Infect Dis,1988,158:1185-1192.
5 Klatt EC,Shibata D.Cytomegalovirus infection in the acquired immunodeficiency syndrome.Arch Pathol Lab Med,1988,112: 540-544.
6 王世俊，董永绥.小儿巨细胞病毒相关性急性下呼吸道感染.中国实用儿科杂志，1994，9：346-348.
(收稿：1998-12-01 修回：1999-03-23), 百拇医药
单位：吕庆杰、李冠群、王伟：110003 沈阳，中国医科大学第二临床学院病理科，闻德亮：儿内科
关键词：巨细胞病毒感染；免疫组织化学；抗原；病毒
中华儿科杂志990807 摘要 目的 探讨小儿巨细胞病毒(CMV)感染组织病变及与临床的关系。方法 用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(简称S-P法)，检测44例小儿巨细胞包涵体病(CID)尸检腮腺、肺、肾、肝组织石蜡切片组织中CMV感染情况。结果 CMV不仅存在于包涵体巨细胞，还广泛存在于无包涵体形成的巨细胞及形态正常的细胞。腮腺、肺、肾、肝组织CMV抗原阳性率分别为91%、59%、37%、27%。62%的全身型CID合并多脏器受累。肺组织炎症反应级别和临床症状的轻重与肺CMV感染的严重程度平行相关。结论 CMV感染细胞广泛，有些感染细胞无形态学变化。全身型CID易合并多脏器受累。CMV相关性肺炎以间质性肺炎为主，且CMV在其中可能起主导作用。
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Detection of cytomegalovirus antigen in tissues by immunohistochemistry and its clinical significance in cytomegalic inclusion body disease of children
LU Qingjie,WEN Deliang,LI Guanqun,et al.
Department of Pathology,The Second Clinical College,China Medical University,Shenyang 110003
Abstract Objective To investigate the relationship between the pathological changes of CMV infection in children and clinical manifestations.Methods Parraffin-embeded parotid gland,lung,kidney and liver tissue sections prepared from autopsy material of 44 infants died of cytomegalic inclusion body disease (CID) were used to detect CMV antigen by immunohistochemistry (streptavidin-peroxidase or S-P method).Results CMV antigen was detected not only in most of cytomegalic cells with cytomegalic inclusion bodies (CIB) but also in many non-CIB cytomegalic cells and morphologically normal cells.CMV antigen was detected in 91% of parotid gland tissues,59% of lung tissues,37% of kidney tissues and in 27% of liver tissues.62% of the patients with generalized CID had multiple sites involvement.Grades of inflammation in lungs and severity of symptoms correlated directly with the severity of CMV infection in lungs.Conclusion CMV infected cells were widespread,some of them had no morphological changes.Patients with generalized CID more often had multiple sites involvement than those without generalized CID.Sections from most of CMV related pneumonia cases showed histological features of interstitial pneumonia,and CMV may play a leading role in the pathogenesis of the pneumonia.
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Key words Cytomegalovirus infections Immunohistochemistry Antigens,viral
巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)是广泛感染人类的重要病原之一，尤其胎儿、婴儿、器官移植和免疫缺陷患者等感染CMV可导致严重疾患，甚至死亡。本研究用免疫组化法检测小儿巨细胞包涵体病(CID)尸检主要脏器中CMV感染，探讨CMV感染与组织病变及临床的关系，明确CMV感染特点，为临床CMV感染的诊治提供依据。
材料与方法
一、材料
收集1979年至1995年我科常规诊断CID的病例44例。其中男性28例，女性16例。2天～1个月16例，～8个月27例，15个月1例。临床诊断肺炎17例，败血症、肝炎综合征各7例，胆道闭锁、CID各3例，先天性心脏病、化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、白血病各1例，诊断不清3例。
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二、实验方法
取全身各器官组织常规石蜡切片，HE染色。取腮腺、肺、肾、肝组织石蜡块，分别切成5 μm厚的切片，采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(简称S-P法)处理组织。一抗为抗CMV早期和晚期抗原的鼠抗人CMV单克隆抗体(DAKO，CCH2)；S-P试剂盒为Maxim Biotech公司产品。具体步骤：石蜡切片常规脱蜡至水，4%胃蛋白酶37℃消化30分钟，洗涤，0.3% H2O2甲醇液室温孵育20分钟，洗涤，1∶100非免疫动物血清室温孵育10分钟，加一抗室温孵育60分钟，洗涤，加二抗室温孵育10分钟，洗涤，加三抗室温孵育10分钟，洗涤，AEC试剂显色，苏木素复染。阳性细胞核或浆内出现红色颗粒。CMV感染的轻重以每平方厘米切片面积中CMV抗原阳性细胞数来判定：(+)：1～9；(++)：10～50；(+++)：>50。用含有大量典型巨细胞包涵体(CIB)的腮腺组织作阳性对照，正常腮腺组织作阴性对照。数据处理采用χ2检验。
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结果
一、S-P法与HE法CMV检测结果比较
当CMV感染仅限于腮腺时称限局型CID(确切说法应为“限局型CMV感染”，本研究暂采用习惯用法)；当CMV感染出现于腮腺以外任何一个脏器时称全身型CID。本组CID，HE法检出限局型24例，全身型20例；而S-P法检出限局型15例，全身型29例。两种方法同时检测腮腺、肺、肾、肝共163个组织块，两者同时阳性65块，同时阴性77块，HE阴性而S-P法阳性20块，HE阳性而S-P法阴性仅1块。经卡方检验，差异有非常显著意义(χ2=15.4，P<0.01)，表明S-P法优于HE法。
二、CMV感染细胞的特征及分布
绝大多数包涵体巨细胞CMV抗原阳性，另外许多无包涵体形成的巨细胞及形态正常的细胞均可见CMV感染(图1～3)。各脏器CMV感染细胞多少不等，单个散在或灶性分布。CMV感染细胞种类多样：腮腺内主要为导管上皮，少数为腺泡上皮及间质细胞；肺内多为肺泡上皮及细支气管上皮，部分为巨噬细胞、血管内皮及肺泡间隔内的组织细胞；肾内多为皮质区小管上皮，髓质区很少受累；肝内绝大多数为肝细胞，仅1例见汇管区小胆管受累。有些病例组织中或小血管内发现散在或成堆的白细胞CMV感染。
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图1 肺巨细胞包涵体CMV抗原阳性。S-P法，×400
图2 肾巨细胞包涵体及正常形态细胞CMV抗原阳性 。S-P法，×400
图3 肺泡增生上皮CMV抗原阳性。S-P法，×400
三、各脏器CMV检测结果
腮腺、肺、肾、肝CMV抗原阳性率分别为91%(32/35)、59%(26/44)、37%(16/43)、27%(11/41)。肺、肾及肝脏三组相比，肺CMV抗原阳性率高于肾或肝脏，差异有显著意义(χ2=4.2，P<0.05；χ2=8.9，P<0.01)。肾与肝脏CMV抗原阳性率差异不显著。
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四、CID与多脏器受累的关系
29例全身型CID中，同时累及肺、肾、肝脏中2个以上脏器的有18例，占62%。
肺CMV感染组中，56%(14/25)同时伴有肾CMV感染，42%(10/24)同时伴有肝CMV感染，而肺无CMV感染组中仅有11%(2/18)同时伴有肾CMV感染，6%(1/17)同时伴有肝CMV感染。经统计学处理，差异均有显著意义(χ2=9.0，P<0.01；χ2=4.8，P<0.05)。即肺CMV感染者较未感染者易同时伴有肾或肝CMV感染，肾与肝组间相比差异不显著。
五、肺CMV感染与肺组织炎症反应的关系
按肺组织内炎症反应的轻重：少量灶性、较多片状、大量成片炎细胞浸润，将其分为轻、中、重度。肺CMV感染的严重程度与肺组织炎症反应级别显著相关(χ2=7.8，P<0.05)。肺CMV感染细胞数(+)组中，中重度炎症反应占36%(5/14)，显著低于(++)～(+++)组中的83%(10/12)(χ2=6.0，P<0.05)。表明肺CMV感染的严重程度与炎症反应级别呈平行关系。74%的CMV相关性肺炎以间质性肺炎为主，显著高于非CMV相关性肺炎中间质性肺炎所占的比例22%(χ2=4.7,P<0.05)。42%(8/19)的CMV相关性肺炎合并支气管肺炎。肺CMV感染细胞数(+)～(++)组与(+++)组中合并支气管肺炎的比例差异不显著。
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六、肺CMV感染与症状、体征的关系
排除肺结核、心功能衰竭等可影响肺部症状、体征的病例，将20例肺CMV感染患儿咳嗽、喘憋等症状和肺干湿音等体征均分为无、轻、明显三个级别。肺CMV感染的严重程度与肺部症状、体征的轻重显著相关(χ2值分别为99.4、56.3，P值均小于0.05)。肺CMV感染细胞数(+)～(++)组症状重的12例中有3例，显著低于(+++)组中的8例中有6例(χ2=4.9，P<0.05)。两组中有明显体征的比例为1/12和3/8差异不显著。
讨论
一、S-P法与HE法检测CMV感染的比较
常规组织学诊断CMV感染主要根据典型包涵体的形成。但这种改变并不是在所有的CMV感染都出现[1]，所以常规组织学诊断必然造成漏诊，也妨碍对CMV感染全面正确的认识。本研究及其它研究均证明免疫组化法用于细胞组织中CMV感染的检测，快速简便、灵敏度高、特异性强，优于常规组织学检查[1]。该法用于临床各种脱落细胞、细针穿刺活检及尸检组织中CMV感染的诊断及研究，可提高诊断率，并全面客观地反映CMV感染的特征，而且有直接病原学诊断意义。
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二、CMV感染细胞的特征及种类
本研究与原位杂交等研究一样，证实CMV不仅存在于包涵体巨细胞，还广泛存在于无包涵体的巨细胞及形态正常的细胞[2，3],这有助于正确识别CMV感染细胞的种类。在腮腺、肺及肾，CMV有嗜上皮性；肝内CMV多感染肝细胞；另外还可见各种白细胞CMV感染。血管内白细胞CMV感染为巨细胞病毒血症，活动性CMV感染的指征[4]。这些未发生形态变化的CMV感染细胞可能处于感染的早期，典型包涵体尚未形成；或为少量病毒在细胞内低水平复制，尚不足以引起细胞病变。这些细胞是否可能成为CMV的长期潜伏宿主，成为日后CMV再激活的源泉，尚待进一步研究证实。
三、肺CMV感染组织病变及与临床的关系
本研究证实，肺CMV感染大多数表现为不同程度的炎症改变，而且以间质性肺炎为主，其中42%的CMV相关性肺炎合并支气管肺炎。因为病毒性肺炎多表现为间质性肺炎，而支气管肺炎多为细菌性肺炎的组织学特征，所以虽然缺乏肺部其它病原体感染的病原学资料，但仍可从一个侧面提示本组CMV相关性肺炎部分合并有其它病原体混合感染。文献资料也证实CMV相关性肺炎常合并其它病原体混合感染[5，6]，因此，CMV在其中所起的作用常难以判断。本研究发现，肺组织的炎症反应级别与肺CMV感染的严重程度平行相关，而其中支气管肺炎的伴发率并不随肺CMV感染细胞的增多而增加，肺部症状的轻重也与肺CMV感染的严重程度平行。因此，我们认为CMV在致肺炎的过程中，包括与其它病原并存的混合感染中，CMV可能起着主导作用。
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临床已注意到小儿症状性CMV感染易出现多脏器损害，本组研究为62%的全身型CID患儿至少同时有2个脏器CMV感染，直接证实全身型CID易发生多脏器受累，特别是肺CMV感染易同时伴有肾或肝CMV感染。但肺部体征与肺CMV感染及病变程度并不平行，因此临床上应常规行胸部X线摄片，以便及早发现CMV相关性肺炎，及时治疗。
参考文献
1 Sano N， Izumi K.Hepatic cytomegalovirus involvement in autopsy cases.Acta Pathol Jpn,1991,41: 668-672.
2 Andersen CB.Detection of cytomegalovirus infected cells in autopsy material by in situ hybridization.APMIS,1990,98:363-368.
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3 Myerson D,Hackman RC,Nelson JA,et al.Widespread presence of histologically occult cytomegalovirus.Hum Pathol,1984,15: 430-439.
4 Shibata D,Martin WJ,Appleman MD,et al.Detection of CMV DNA in peripheral blood of patients infected with human immunodeficiency virus.J Infect Dis,1988,158:1185-1192.
5 Klatt EC,Shibata D.Cytomegalovirus infection in the acquired immunodeficiency syndrome.Arch Pathol Lab Med,1988,112: 540-544.
6 王世俊，董永绥.小儿巨细胞病毒相关性急性下呼吸道感染.中国实用儿科杂志，1994，9：346-348.
(收稿：1998-12-01 修回：1999-03-23), 百拇医药