太原市部分人群诺瓦克样病毒血清抗体水平的调查
作者：靖宇 钱渊 吴立平 马建瑞
单位：靖宇、钱渊 100020 首都儿科研究所北京市感染与免疫中心实验室；吴立平、马建瑞 山西省太原市卫生防疫站
关键词：诺沃克病毒；血清流行病学方法；抗体；病毒；酶联免疫吸附测定
中华儿科杂志990912 【摘要】 目的 为了解诺瓦克样病毒在太原市人群中的感染状况。方法 采用间接ELISA，分别以重组杆状病毒表达的Norwalk (rNV)和Mexico (rMX)病毒样颗粒为抗原，对来自太原市的不同年龄人群的322份血清标本进行了诺瓦克样病毒(NV)特异性IgG抗体检测。结果 总检出率为NV 78.6%, Mexico病毒(MX)82.9%。不同年龄人群两种型别抗原的抗体检出情况类似：7～11个月的阳性率最低，分别为NV 37.5%, MX 31.3%；1岁时达到NV 48.1%，MX 70.4%；2～3岁时达到NV 69.2%，MX 88.5%；4～6岁后均接近或超过90%。结论 太原市人群中这两种血清型的诺瓦克样病毒感染十分普遍。
, http://www.100md.com
Seroprevalence of Norwalk-like virus infection in Taiyuan city
JING Yu*, QIAN Yuan, WU Liping, et al.
*Beijing Municipal Laboratory of Infection and Immunity, Capital Institute of Pediatrics, Beijing 100020
【Abstract】 Objective To understand the seroprevalence of Norwalk-like virus (NV) infection in Taiyuan city, Shanxi province. Methods A total of 322 serum specimens collected in Taiyuan city, Shanxi province were tested by an indirect enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) for specific IgG antibody against Norwalk-like virus (rNV) and Mexican virus (rMX) using baculovirus-expressed recombinant capsid proteins as antigens. Results Out of 322 specimens tested, 78.6% were positive for antibody to rNV and 82.9% to rMX. The prevalence patterns of antibodies against these two viruses were similar: Antibody prevalence was the lowest in 7- to 11-month-old infants with 37.5% positive for rNV and 31.3% for rMX; and increased in 1-year-old children to 48.1% for rNV and 70.4% for rMX; in 2 to 3-year-old children, it reached 69.2% for rNV and 88.5% for rMX; and in age group over 4 - 6 years, it was close to 90% or higher for both. Conclusion The observed high prevalence and early age antibody acquisition suggest that infections with these two human calicivirus strains were common in this area.
, 百拇医药
【Key words】 Norwalk virus Seropidemiologic methods Antibodies, viral Enzyme-linked immunosorbent assay
诺瓦克样病毒(Norwalk-like human caliciviruses)是一种导致腹泻的重要病毒病原，直径26～32 nm，电镜下呈有结构的小圆形态，属杯状病毒科。据国外文献报道，这类病毒与人急性胃肠炎的暴发流行关系密切，因而受到研究重视。与轮状病毒导致的婴幼儿重症腹泻不同，诺瓦克样病毒主要导致成人和儿童急性胃肠炎，所致疾病症状相对较轻，且有自限性[1]。
诺瓦克样病毒在我国人群腹泻中的重要性尚未见报道。我国方肇寅等[2]于1995年在河南省腹泻患儿粪便标本中证明我国人群中有该病毒感染，我们已经通过血清抗体水平的调查证明北京地区该病毒的感染相当普遍[3] 。为了进一步积累国内该病毒感染的血清学资料，了解该病毒在我国不同地区人群中的感染状况，我们应用酶免疫法，对来自山西省太原市人群的血清标本进行了诺瓦克样病毒特异性IgG抗体检测，初步获得了该地区诺瓦克样病毒感染的血清学资料。
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材料和方法
一、实验材料
1.抗原：纯化的重组杆状病毒表达的Norwalk (rNV)[1,4-7]和Mexico (rMX)[1,8,9] 病毒结构蛋白在体外形成的病毒样颗粒(属不同血清型)，由美国东弗吉尼亚医学院儿科研究中心Dr. Jiang惠赠。
2.血清标本：从山西省太原市若干医院门诊非腹泻病人中收集到，共322例，1997年2月～1997年11月收集, -20℃保存。
二、免疫酶技术
于96孔酶免疫反应板(购于日本)每孔加入50 μl rNV或rMX-PBS (1 μg/ml), 4℃包被过夜；用pH 7.3的0.05%Tween-PBS (PBST)洗一遍；每孔加入200 μl 5%脱脂奶(美国市售)-PBST, 37℃封闭1小时；洗两遍；每孔加入50 μl用1%脱脂奶-PBST 1∶200稀释的待测血清, 37℃孵育2小时；洗六遍；每孔加入50 μl辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG (购于GIBCO公司, 1∶8 000稀释), 37℃孵育2小时；洗六遍；每孔加入50 μl底物TMB (购于GIBCO公司)，室温显色10分钟；每孔加入50 μl 0.5 mol/L H2SO4终止反应；使用美国Molecular Device公司生产的Emax读取吸光度A450(曾称光密度OD)。包被、封闭、孵育过程均在湿盒中进行。预试验确定抗原和二抗最佳稀释度,并做抗原、二抗、底物空白对照和已知阴性、阳性血清(Dr. Jiang提供)对照。检测时每板均设无血清对照、阴性血清对照。根据阴性血清标本A值的分布情况(来自正态总体)，将A450≥0.2者判定为阳性。预实验及正式实验均设两个平行孔。实验重复性良好(选取部分血清重复实验，结果表明阴性、阳性判断无误，同一份阳性血清在不同次实验中A值相差不大)。
, 百拇医药
结果
血清IgG抗体检测结果显示，322份血清标本中rNV和rMX IgG抗体总检出率分别为78.6%和82.9%。二者抗体阳性率随年龄的分布形式类似(表1)：3个月以内抗体阳性率分别为NV 86.7%, Mexico病毒(MX) 83.3%； 7～11个月降至最低，为NV 37.5%, MX 31.3%；1岁时升至NV 48.1%, MX 70.4%；2～3岁时达到NV 69.2%，MX 88.5%；4～6岁后MX接近或达到100%，NV接近90%，13～19岁后接近或达到100%。比较同一年龄段NV和MX抗体阳性率，做χ2检验，各年龄段差异无显著性。分别比较相邻年龄段NV或MX抗体阳性率，做χ2 检验，显示7～11月组与1岁组MX抗体阳性率差异有显著性。
表1 人群血清诺瓦克样病毒(rNV、rMX)
特异性IgG抗体检测结果 组别
, 百拇医药
标本数
抗体阳性率(%)
NV
MX
≤3个月
30
86.7
83.3
4～6个月
31
51.6
61.3
7～11个月
, 百拇医药
32
37.5
31.3
～1岁
27
48.1
70.4*
～3岁
26
69.2
88.5
～6岁
29
, 百拇医药
89.7
100.0
～12岁
32
90.6
93.8
～19岁
28
100.0
100.0
～29岁
27
96.3
, 百拇医药
96.3
～49岁
30
96.7
96.7
≥50岁
30
100.0
96.7
合计
322
78.6
82.9
, 百拇医药
注* 与7～11个月组比较，抗体阳性率有显著性升高,P<0.005
讨论
一、 研究背景
国外研究表明，诺瓦克样病毒是除轮状病毒外导致腹泻最主要的病毒病原之一，其重要性在于它与水源、食物等污染造成的腹泻暴发流行关系密切。这类病毒流行于世界各地，血清型丰富。在美国已报告有Norwalk virus(NV)、snow mountain virus(SMV)、Hawaii virus(HV)等几种血清型，在日本、英国等国家，也有各自不同的血清型[1]。目前它还被分为NV和MX两个基因组[10,11]。有学者用重组杆状病毒系统表达了NV和MX病毒株的结构蛋白，纯化的结构蛋白在体外能形成病毒样颗粒。经研究，在免疫电镜技术及ELISA中，这种病毒样颗粒与天然病毒的抗原性极为相似，加速了对诺瓦克样病毒的研究[4-7,12,13]。本研究使用的两种抗原rNV和rMX经以往的研究证明分别属于不同血清型，其中MX与SMV血清型一致[8,9]。
, 百拇医药
二、 本研究的意义
本组结果显示，两种血清型的诺瓦克样病毒(NV、MX)在研究人群中的流行均很普遍，322份血清标本中NV和MX特异性IgG抗体的总检出率分别为78.6%和82.9%。二者在人群中的年龄分布形式相似，仅有微小差异，表现在：3个月以内组NV、MX抗体阳性率均高于80%，这种抗体多为母传抗体，间接反映了成人的高感染率。提示婴儿发生该病毒初次感染的年龄很小，感染率较高，这或许与孩子较早地参与群体活动，如上幼儿园，上学，而活动范围并不只局限在家庭或固定场所有关。同时，持续的高抗体阳性率提示人群感染病毒可能非常频繁，因为目前的研究显示诺瓦克样病毒抗体不会在人体内持续很久[1，14]。此外，在小年龄段，MX抗体阳性率比NV抗体阳性上升速度更快，提示人群接触MX病原的机会可能比接触NV病原更大，或者人群中MX血清型病原的流行可能比NV血清型病原更为普遍。有学者推测，80年代初，NV血清型病原的流行占主导地位，而进入90年代，SMV血清型病原有可能占据了上风。但有待进一步证实。
, 百拇医药
诺瓦克样病毒在太原市人群中的流行情况是：至少存在两种血清型别(NV、MX)的病原同时流行，二者都具有感染率高、初次感染年龄小的特点。尽管该地区诺瓦克样病毒的感染率很高，尚未见腹泻暴发流行与该病毒关系的报道。以往的资料显示，诺瓦克样病毒在发展中国家的人群感染率普遍高于发达国家，而由该病毒引起的腹泻暴发流行却多发生在发达国家[1]。发展中国家人口较多，生活空间相对狭窄，使得病毒通过水源、食物或人-人接触的传播更为普遍。少量多次的接触感染可能保持了人群高抗体阳性率，而高抗体阳性率是否反而避免了人群中腹泻的暴发流行，还有待进一步探讨。
参考文献
1 Kapikian AZ,Estes MK,Chanock RM. Norwalk group of viruses. In: Fields BN, Knipe DM, Howley PM, eds. Fields Virology. 3rd ed. Philadelphia:Raven, 1996. 783-810.
, 百拇医药
2 方肇寅，温乐英，晋圣谨,等. 在我国腹泻患儿中发现诺瓦克样病毒感染. 病毒学报, 1995, 11:215-219.
3 靖宇，钱渊，王洛平. 北京地区人群诺瓦克样病毒血清抗体水平的调查. 病毒学报，1998，14:321-327.
4 Jiang X,Graham DY,Wang K,et al. Norwalk virus genome cloning and characterization. Science ,1990,250:1580-1583.
5 Jiang X, Wang J, Graham DY, et al. Expression, self-assembly and antigenicity of the Norwalk virus capsid protein. J Virol, 1992, 66: 6527-6532.
, 百拇医药
6 Parker S,Cubitt D,Jiang X,et al. Efficacy of a recombinant Norwalk virus protein enzyme immunoassay for the diagnosis of infections with Norwalk virus and other human “candidate” caliciviruses. J Med Virol,1993,41:179-184.
7 Green KY, Lew JF,Jiang X,et al. Comparison of the reactivities of baculovirus-expressed recombinant Norwalk virus capsid antigen with those of the native Norwalk virus antigen in serologic assays and some epidemiologic observation. J Clin Microbiol, 1993,31:2185-2191.
, http://www.100md.com
8 Jiang X, Matson DO, Ruiz-Palacios GM, et al. Expression,self-assembly and antigenicity of a snow mountain agent-like calicivirus capsid protein. J Clin Microbiol,1995,33:1452-1455.
9 Jiang X, Matson DO, Velazquez FR, et al. Study of Norwalk related viruses in Mexican children. J Med Virol, 1995,47:309-316.
10 Jiang X, Matson DO, Cubitt WD, et al. Genetic and antigenetic diversity of human caliciviruses(HuCVs) using RT-PCR and new ELISAs. Viral Gastroenteritis Arch Virol, 1996,12 Suppl:251-262.
, http://www.100md.com
11 Berke T, Golding B, Jiang X, et al. A phylogenetic analysis of the caliciviruses. J Med Virol, 1997,52:419-424.
12 Graham DY, Jiang X, Tanaka T, et al. Norwalk virus infection of volunteers: new insights based on improved assays. J Infect Dis,1994,170:34-43.
13 Treanor JJ, Jiang X, Madore P, et al. Subclass specific serum antibody responses to recombinant Norwalk capsid antigen (rNV) in adults infected with Norwalk, Snow mountain, or Hawaii viruses.J Clin Microbiol,1993,31:1630-1634.
14 Johnson PC, Mathewson JJ, DuPont HL,et al. Multiple-challenge study of host susceptibility to Norwalk gastroenteritis in US adults. J Infect Dis,1990,161:18-21.
(收稿：1998-08-28 修回：1999-05-21), 百拇医药
单位：靖宇、钱渊 100020 首都儿科研究所北京市感染与免疫中心实验室；吴立平、马建瑞 山西省太原市卫生防疫站
关键词：诺沃克病毒；血清流行病学方法；抗体；病毒；酶联免疫吸附测定
中华儿科杂志990912 【摘要】 目的 为了解诺瓦克样病毒在太原市人群中的感染状况。方法 采用间接ELISA，分别以重组杆状病毒表达的Norwalk (rNV)和Mexico (rMX)病毒样颗粒为抗原，对来自太原市的不同年龄人群的322份血清标本进行了诺瓦克样病毒(NV)特异性IgG抗体检测。结果 总检出率为NV 78.6%, Mexico病毒(MX)82.9%。不同年龄人群两种型别抗原的抗体检出情况类似：7～11个月的阳性率最低，分别为NV 37.5%, MX 31.3%；1岁时达到NV 48.1%，MX 70.4%；2～3岁时达到NV 69.2%，MX 88.5%；4～6岁后均接近或超过90%。结论 太原市人群中这两种血清型的诺瓦克样病毒感染十分普遍。
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Seroprevalence of Norwalk-like virus infection in Taiyuan city
JING Yu*, QIAN Yuan, WU Liping, et al.
*Beijing Municipal Laboratory of Infection and Immunity, Capital Institute of Pediatrics, Beijing 100020
【Abstract】 Objective To understand the seroprevalence of Norwalk-like virus (NV) infection in Taiyuan city, Shanxi province. Methods A total of 322 serum specimens collected in Taiyuan city, Shanxi province were tested by an indirect enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) for specific IgG antibody against Norwalk-like virus (rNV) and Mexican virus (rMX) using baculovirus-expressed recombinant capsid proteins as antigens. Results Out of 322 specimens tested, 78.6% were positive for antibody to rNV and 82.9% to rMX. The prevalence patterns of antibodies against these two viruses were similar: Antibody prevalence was the lowest in 7- to 11-month-old infants with 37.5% positive for rNV and 31.3% for rMX; and increased in 1-year-old children to 48.1% for rNV and 70.4% for rMX; in 2 to 3-year-old children, it reached 69.2% for rNV and 88.5% for rMX; and in age group over 4 - 6 years, it was close to 90% or higher for both. Conclusion The observed high prevalence and early age antibody acquisition suggest that infections with these two human calicivirus strains were common in this area.
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【Key words】 Norwalk virus Seropidemiologic methods Antibodies, viral Enzyme-linked immunosorbent assay
诺瓦克样病毒(Norwalk-like human caliciviruses)是一种导致腹泻的重要病毒病原，直径26～32 nm，电镜下呈有结构的小圆形态，属杯状病毒科。据国外文献报道，这类病毒与人急性胃肠炎的暴发流行关系密切，因而受到研究重视。与轮状病毒导致的婴幼儿重症腹泻不同，诺瓦克样病毒主要导致成人和儿童急性胃肠炎，所致疾病症状相对较轻，且有自限性[1]。
诺瓦克样病毒在我国人群腹泻中的重要性尚未见报道。我国方肇寅等[2]于1995年在河南省腹泻患儿粪便标本中证明我国人群中有该病毒感染，我们已经通过血清抗体水平的调查证明北京地区该病毒的感染相当普遍[3] 。为了进一步积累国内该病毒感染的血清学资料，了解该病毒在我国不同地区人群中的感染状况，我们应用酶免疫法，对来自山西省太原市人群的血清标本进行了诺瓦克样病毒特异性IgG抗体检测，初步获得了该地区诺瓦克样病毒感染的血清学资料。
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材料和方法
一、实验材料
1.抗原：纯化的重组杆状病毒表达的Norwalk (rNV)[1,4-7]和Mexico (rMX)[1,8,9] 病毒结构蛋白在体外形成的病毒样颗粒(属不同血清型)，由美国东弗吉尼亚医学院儿科研究中心Dr. Jiang惠赠。
2.血清标本：从山西省太原市若干医院门诊非腹泻病人中收集到，共322例，1997年2月～1997年11月收集, -20℃保存。
二、免疫酶技术
于96孔酶免疫反应板(购于日本)每孔加入50 μl rNV或rMX-PBS (1 μg/ml), 4℃包被过夜；用pH 7.3的0.05%Tween-PBS (PBST)洗一遍；每孔加入200 μl 5%脱脂奶(美国市售)-PBST, 37℃封闭1小时；洗两遍；每孔加入50 μl用1%脱脂奶-PBST 1∶200稀释的待测血清, 37℃孵育2小时；洗六遍；每孔加入50 μl辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG (购于GIBCO公司, 1∶8 000稀释), 37℃孵育2小时；洗六遍；每孔加入50 μl底物TMB (购于GIBCO公司)，室温显色10分钟；每孔加入50 μl 0.5 mol/L H2SO4终止反应；使用美国Molecular Device公司生产的Emax读取吸光度A450(曾称光密度OD)。包被、封闭、孵育过程均在湿盒中进行。预试验确定抗原和二抗最佳稀释度,并做抗原、二抗、底物空白对照和已知阴性、阳性血清(Dr. Jiang提供)对照。检测时每板均设无血清对照、阴性血清对照。根据阴性血清标本A值的分布情况(来自正态总体)，将A450≥0.2者判定为阳性。预实验及正式实验均设两个平行孔。实验重复性良好(选取部分血清重复实验，结果表明阴性、阳性判断无误，同一份阳性血清在不同次实验中A值相差不大)。
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结果
血清IgG抗体检测结果显示，322份血清标本中rNV和rMX IgG抗体总检出率分别为78.6%和82.9%。二者抗体阳性率随年龄的分布形式类似(表1)：3个月以内抗体阳性率分别为NV 86.7%, Mexico病毒(MX) 83.3%； 7～11个月降至最低，为NV 37.5%, MX 31.3%；1岁时升至NV 48.1%, MX 70.4%；2～3岁时达到NV 69.2%，MX 88.5%；4～6岁后MX接近或达到100%，NV接近90%，13～19岁后接近或达到100%。比较同一年龄段NV和MX抗体阳性率，做χ2检验，各年龄段差异无显著性。分别比较相邻年龄段NV或MX抗体阳性率，做χ2 检验，显示7～11月组与1岁组MX抗体阳性率差异有显著性。
表1 人群血清诺瓦克样病毒(rNV、rMX)
特异性IgG抗体检测结果 组别
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标本数
抗体阳性率(%)
NV
MX
≤3个月
30
86.7
83.3
4～6个月
31
51.6
61.3
7～11个月
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32
37.5
31.3
～1岁
27
48.1
70.4*
～3岁
26
69.2
88.5
～6岁
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89.7
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～12岁
32
90.6
93.8
～19岁
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～29岁
27
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～49岁
30
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96.7
≥50岁
30
100.0
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合计
322
78.6
82.9
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注* 与7～11个月组比较，抗体阳性率有显著性升高,P<0.005
讨论
一、 研究背景
国外研究表明，诺瓦克样病毒是除轮状病毒外导致腹泻最主要的病毒病原之一，其重要性在于它与水源、食物等污染造成的腹泻暴发流行关系密切。这类病毒流行于世界各地，血清型丰富。在美国已报告有Norwalk virus(NV)、snow mountain virus(SMV)、Hawaii virus(HV)等几种血清型，在日本、英国等国家，也有各自不同的血清型[1]。目前它还被分为NV和MX两个基因组[10,11]。有学者用重组杆状病毒系统表达了NV和MX病毒株的结构蛋白，纯化的结构蛋白在体外能形成病毒样颗粒。经研究，在免疫电镜技术及ELISA中，这种病毒样颗粒与天然病毒的抗原性极为相似，加速了对诺瓦克样病毒的研究[4-7,12,13]。本研究使用的两种抗原rNV和rMX经以往的研究证明分别属于不同血清型，其中MX与SMV血清型一致[8,9]。
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二、 本研究的意义
本组结果显示，两种血清型的诺瓦克样病毒(NV、MX)在研究人群中的流行均很普遍，322份血清标本中NV和MX特异性IgG抗体的总检出率分别为78.6%和82.9%。二者在人群中的年龄分布形式相似，仅有微小差异，表现在：3个月以内组NV、MX抗体阳性率均高于80%，这种抗体多为母传抗体，间接反映了成人的高感染率。提示婴儿发生该病毒初次感染的年龄很小，感染率较高，这或许与孩子较早地参与群体活动，如上幼儿园，上学，而活动范围并不只局限在家庭或固定场所有关。同时，持续的高抗体阳性率提示人群感染病毒可能非常频繁，因为目前的研究显示诺瓦克样病毒抗体不会在人体内持续很久[1，14]。此外，在小年龄段，MX抗体阳性率比NV抗体阳性上升速度更快，提示人群接触MX病原的机会可能比接触NV病原更大，或者人群中MX血清型病原的流行可能比NV血清型病原更为普遍。有学者推测，80年代初，NV血清型病原的流行占主导地位，而进入90年代，SMV血清型病原有可能占据了上风。但有待进一步证实。
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诺瓦克样病毒在太原市人群中的流行情况是：至少存在两种血清型别(NV、MX)的病原同时流行，二者都具有感染率高、初次感染年龄小的特点。尽管该地区诺瓦克样病毒的感染率很高，尚未见腹泻暴发流行与该病毒关系的报道。以往的资料显示，诺瓦克样病毒在发展中国家的人群感染率普遍高于发达国家，而由该病毒引起的腹泻暴发流行却多发生在发达国家[1]。发展中国家人口较多，生活空间相对狭窄，使得病毒通过水源、食物或人-人接触的传播更为普遍。少量多次的接触感染可能保持了人群高抗体阳性率，而高抗体阳性率是否反而避免了人群中腹泻的暴发流行，还有待进一步探讨。
参考文献
1 Kapikian AZ,Estes MK,Chanock RM. Norwalk group of viruses. In: Fields BN, Knipe DM, Howley PM, eds. Fields Virology. 3rd ed. Philadelphia:Raven, 1996. 783-810.
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2 方肇寅，温乐英，晋圣谨,等. 在我国腹泻患儿中发现诺瓦克样病毒感染. 病毒学报, 1995, 11:215-219.
3 靖宇，钱渊，王洛平. 北京地区人群诺瓦克样病毒血清抗体水平的调查. 病毒学报，1998，14:321-327.
4 Jiang X,Graham DY,Wang K,et al. Norwalk virus genome cloning and characterization. Science ,1990,250:1580-1583.
5 Jiang X, Wang J, Graham DY, et al. Expression, self-assembly and antigenicity of the Norwalk virus capsid protein. J Virol, 1992, 66: 6527-6532.
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7 Green KY, Lew JF,Jiang X,et al. Comparison of the reactivities of baculovirus-expressed recombinant Norwalk virus capsid antigen with those of the native Norwalk virus antigen in serologic assays and some epidemiologic observation. J Clin Microbiol, 1993,31:2185-2191.
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8 Jiang X, Matson DO, Ruiz-Palacios GM, et al. Expression,self-assembly and antigenicity of a snow mountain agent-like calicivirus capsid protein. J Clin Microbiol,1995,33:1452-1455.
9 Jiang X, Matson DO, Velazquez FR, et al. Study of Norwalk related viruses in Mexican children. J Med Virol, 1995,47:309-316.
10 Jiang X, Matson DO, Cubitt WD, et al. Genetic and antigenetic diversity of human caliciviruses(HuCVs) using RT-PCR and new ELISAs. Viral Gastroenteritis Arch Virol, 1996,12 Suppl:251-262.
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11 Berke T, Golding B, Jiang X, et al. A phylogenetic analysis of the caliciviruses. J Med Virol, 1997,52:419-424.
12 Graham DY, Jiang X, Tanaka T, et al. Norwalk virus infection of volunteers: new insights based on improved assays. J Infect Dis,1994,170:34-43.
13 Treanor JJ, Jiang X, Madore P, et al. Subclass specific serum antibody responses to recombinant Norwalk capsid antigen (rNV) in adults infected with Norwalk, Snow mountain, or Hawaii viruses.J Clin Microbiol,1993,31:1630-1634.
14 Johnson PC, Mathewson JJ, DuPont HL,et al. Multiple-challenge study of host susceptibility to Norwalk gastroenteritis in US adults. J Infect Dis,1990,161:18-21.
(收稿：1998-08-28 修回：1999-05-21), 百拇医药