窒息新生儿免疫学状态的研究
作者：刘敬 田万代 李华 高玉莲
单位：102500 北京市燕山石油化工公司职工医院儿科
关键词：
中华儿科杂志991016 窒息对新生儿免疫功能的影响尚罕见报道。本研究通过对25例窒息新生儿外周血T淋巴细胞亚群、血清可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)及免疫球蛋白(Ig)和补体(C3)等的检测，探讨新生儿窒息后易合并感染性疾病的免疫机制，为更好地改善新生儿窒息后的处理提供新的理论参考依据。
对象：(1)窒息组25例，男14例，女11例；其中重度窒息10例，轻度窒息15例；合并各种感染性疾病者8例。(2)正常对照组30例，男18例，女12例。(3)感染组10例，为不同程度的各种感染性疾病患儿，日龄4～26天。所有检测对象胎龄均为37～42周，出生体重2500～4000 g。患儿母亲均无可影响患儿免疫功能的疾患，患儿住院期间均未使用可影响其免疫功能的药物。
, 百拇医药
方法：采用α-醋酸萘酯酶染色法测定外周血T细胞亚群，感染组于入院当时，窒息组与正常对照组分别于生后1～3天、12～14天及26～28天检测以观察其动态变化。SIL-2R测定采用单克隆与多克隆双抗体夹心法，试剂盒由白求恩医科大学免疫学教研室提供。于生后1～3天及12～14天取血1～1.5 ml分离血清备检。Ig与C3测定均采用单向免疫扩散法，与SIL-2R同时取血送检。所有检测项目均由专人负责。统计学方法：t检验、方差分析及q检验、秩和检验和相关分析。
结果：1.窒息新生儿不同日龄时外周血T淋巴细胞亚群变化(表1)：新生儿窒息后CD4细胞减少，CD8细胞增加，CD4/CD8比值降低。示窒息新生儿存在T细胞亚群紊乱，在复苏后至生后1个月末，上述指标可恢复至正常对照组水平。
表1 窒息新生儿不同日龄时T细胞亚群检测结果与对照组的比较(
,%) 组别
, 百拇医药
例数
CD3
CD4
CD8
CD4/CD8
1～3天
窒息组
25
63±6
41±7*
22±6*
2.0±0.7*
, http://www.100md.com
对照组
30
66±9
47±8
19±5
2.7±0.8
12～14天
窒息组
20
68±11**
48±8**
20±5
, http://www.100md.com
2.6±0.7
对照组
25
62±9
43±8
19±5
2.3±0.7
26～28天
窒息组
15
65±7
44±7
21±3
, 百拇医药
2.2±0.5
对照组
20
62±9
41±8
21±5
2.1±0.7
注：两组比较，*P<0.01,**P<0.05
2.窒息程度对T细胞亚群的影响：对本组轻、中度窒息患儿T细胞亚群各指标进一步分析发现，虽然轻度窒息患儿T细胞总数并不减少(P<0.05),但T细胞亚群比例失调，CD4细胞减少(P<0.05)，CD8细胞增加(P<0.01)，CD4/CD8比值显著降低(P<0.01)。重度窒息儿不但CD4细胞及CD4/CD8 比值降低更明显(P<0.01,0.05),且CD3细胞亦显著降低(P<0.05)。提示重度窒息会加重新生儿T细胞亚群紊乱。
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3.窒息合并感染对新生儿T细胞亚群的影响：本研究对正常新生儿、感染性疾病患儿、单纯窒息儿及窒息并发感染等各组间的T细胞亚群进行了比较，经方差分析与q检验，证实上述各组之间T细胞亚群存在着差异，与单纯感染组比较，窒息合并感染者存在更为严重的T细胞亚群紊乱(P<0.01).从而可以排除感染因素对窒息新生儿T细胞亚群的影响。
4.窒息新生儿SIL-2R变化：急性期(1～3天)17例窒息儿SIL-2R为(707±420)U/L，恢复期(12 ～14天)15例为(362±238)U/L，对照组20例正常新生儿为(336±217)U/L。急性期与恢复期及对照组相比，P均<0.01；恢复期与对照组相比，P>0.05。可见新生儿窒息后SIL-2R水平显著升高，复苏后至生后2周可降至正常对照组水平，是其免疫功能受抑制的另一重要证据。
5.窒息新生儿不同日龄时Ig与C3的变化(表2)：新生儿窒息后IgM与C3明显降低，而IgG与IgA差异无显著意义。提示窒息儿体液免疫及非特异性免疫功能亦受到严重影响。
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表2 窒息新生儿不同日龄时Ig、C3检测结果与对照组的比较(g/L) 组别
例数
IgG
IgA
IgM
C3
1～3天
窒息组
15
9.8 (6.5～17.8)
0.36 (0～1.69)
0.79 (0～3.2)
, http://www.100md.com
0.77 (0.1～2.4)*
12～14天
窒息组
7
10.5 (8.6～13.0)
0.67 (0～1.2)**
1.56 (0.98～3.40)**
1.30 (0.93～2.10)**
对照组
15
10.1 (7.1～19.5)
, 百拇医药
0.38 (0～1.2)
1.06 (0～2.1)
1.1 (0.57～2.10)
注：各指标均以均值表示，括号内数据为范围。经秩和检验，与对照组比较，*P<0.05；与12～14天比较，**P<0.01
讨论：已知CD4/CD8比值对机体的细胞免疫和体液免疫均具有重要的调节作用，是判断机体免疫状态的重要指标[1]。本研究结果表明，窒息缺氧可导致新生儿T细胞亚群紊乱，且窒息程度越重异常越明显。动态观察发现至生后26～28天，窒息组与正常对照组T细胞亚群各指标间差异均无显著意义(P>0.05)，提示窒息所致T细胞亚群紊乱可能是暂时的。
SIL-2R是细胞膜IL-2Ra链成分在位点特异性蛋白裂解酶作用下脱落 的42KD片段，是一种重要的免疫抑制因子[2]。新生儿窒息血清SIL-2R水平升高，可抑制T淋巴细胞增殖、影响B淋巴细胞分化和产生Ig及减低NK细胞的活性等，从而降低机体的免疫功能。 CD4细胞是机体合成分泌IL-2的主要细胞，CD4细胞减少将导致IL-2生成减少；而SIL-2R水平升高又和mIL-2R竞争与IL-2结合，从而抑制IL-2的生物学活性与功能，使机体的免疫功能进一步下降。本组患儿SIL-2R水平升高程度与CD4/CD8比值降低程度具有高度相关性(r=0.88,P<0.01)是其有力证据。
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窒息缺氧对新生儿血浆Ig和补体水平的影响，主要表现为IgM和C3的降低。因在抗感染免疫的早期IgM的作用最重要，而IgM功能的发挥需补体参与。窒息新生儿由于血浆IgM和C3含量均降低，促成其易继发各种感染性疾病。
窒息导致新生儿免疫抑制的机制尚不明确，可能为[3-5]：(1)中枢神经系统具有调节免疫功能的作用，受损后可通过多种途径导致机体T、B细胞的数量和功能下降及抗体产生减少。(2)新生儿窒息及脑损伤后，体内多种神经内分泌肽类激素的合成与分泌减少，从而对机体免疫机能的调节作用下降。(3)窒息缺氧本身是否可直接抑制T细胞的增殖与分化，或者使其消耗增加甚而寿命缩短等，尚有待研究。(4)IgM与C3主要在肝脏合成，新生儿窒息后肝脏血流量减少，肝功能受抑制使其合成减少；加之IgM的合成需IL-2参与，而新生儿窒息后CD4细胞减少及SIL-2R水平升高，可导致其血清IL-2含量降低。
总之，本研究对窒息新生儿的免疫功能状态进行了初步观察，证实窒息缺氧可导致机体免疫功能紊乱，初步阐述了新生儿窒息后易于继发感染的机制，为新生儿窒息后加强消毒隔离和防治感染提供了新的理论参考。
, 百拇医药
参考文献
1 Fauci AS.The revolution in clinical immunology.JAMA,1981,246:2567-2572.
2 Rubin LA, Nelson DL. The soluble interleukin-2 receptor: biological, function and clinical application. Ann Inter Med,1990,113:619-627.
3 Vizek M,Dostal M,Soukupova D.Perinatal hypoxia suppresses immune response of adult rats.Physiol Res,1993,42:201-206.
4 陈睿，陈杰，李英华.神经内分泌-免疫系统的相互作用.国外医学儿科学分册，1995，22:261-264.
5 陆德源，主编.现代免疫学.上海：上海科学技术出版社，1995.129-131.
(收稿：1999-04-06), 百拇医药
单位：102500 北京市燕山石油化工公司职工医院儿科
关键词：
中华儿科杂志991016 窒息对新生儿免疫功能的影响尚罕见报道。本研究通过对25例窒息新生儿外周血T淋巴细胞亚群、血清可溶性白细胞介素-2受体(SIL-2R)及免疫球蛋白(Ig)和补体(C3)等的检测，探讨新生儿窒息后易合并感染性疾病的免疫机制，为更好地改善新生儿窒息后的处理提供新的理论参考依据。
对象：(1)窒息组25例，男14例，女11例；其中重度窒息10例，轻度窒息15例；合并各种感染性疾病者8例。(2)正常对照组30例，男18例，女12例。(3)感染组10例，为不同程度的各种感染性疾病患儿，日龄4～26天。所有检测对象胎龄均为37～42周，出生体重2500～4000 g。患儿母亲均无可影响患儿免疫功能的疾患，患儿住院期间均未使用可影响其免疫功能的药物。
, 百拇医药
方法：采用α-醋酸萘酯酶染色法测定外周血T细胞亚群，感染组于入院当时，窒息组与正常对照组分别于生后1～3天、12～14天及26～28天检测以观察其动态变化。SIL-2R测定采用单克隆与多克隆双抗体夹心法，试剂盒由白求恩医科大学免疫学教研室提供。于生后1～3天及12～14天取血1～1.5 ml分离血清备检。Ig与C3测定均采用单向免疫扩散法，与SIL-2R同时取血送检。所有检测项目均由专人负责。统计学方法：t检验、方差分析及q检验、秩和检验和相关分析。
结果：1.窒息新生儿不同日龄时外周血T淋巴细胞亚群变化(表1)：新生儿窒息后CD4细胞减少，CD8细胞增加，CD4/CD8比值降低。示窒息新生儿存在T细胞亚群紊乱，在复苏后至生后1个月末，上述指标可恢复至正常对照组水平。
表1 窒息新生儿不同日龄时T细胞亚群检测结果与对照组的比较(
,%) 组别, 百拇医药
例数
CD3
CD4
CD8
CD4/CD8
1～3天
窒息组
25
63±6
41±7*
22±6*
2.0±0.7*
, http://www.100md.com
对照组
30
66±9
47±8
19±5
2.7±0.8
12～14天
窒息组
20
68±11**
48±8**
20±5
, http://www.100md.com
2.6±0.7
对照组
25
62±9
43±8
19±5
2.3±0.7
26～28天
窒息组
15
65±7
44±7
21±3
, 百拇医药
2.2±0.5
对照组
20
62±9
41±8
21±5
2.1±0.7
注：两组比较，*P<0.01,**P<0.05
2.窒息程度对T细胞亚群的影响：对本组轻、中度窒息患儿T细胞亚群各指标进一步分析发现，虽然轻度窒息患儿T细胞总数并不减少(P<0.05),但T细胞亚群比例失调，CD4细胞减少(P<0.05)，CD8细胞增加(P<0.01)，CD4/CD8比值显著降低(P<0.01)。重度窒息儿不但CD4细胞及CD4/CD8 比值降低更明显(P<0.01,0.05),且CD3细胞亦显著降低(P<0.05)。提示重度窒息会加重新生儿T细胞亚群紊乱。
, http://www.100md.com
3.窒息合并感染对新生儿T细胞亚群的影响：本研究对正常新生儿、感染性疾病患儿、单纯窒息儿及窒息并发感染等各组间的T细胞亚群进行了比较，经方差分析与q检验，证实上述各组之间T细胞亚群存在着差异，与单纯感染组比较，窒息合并感染者存在更为严重的T细胞亚群紊乱(P<0.01).从而可以排除感染因素对窒息新生儿T细胞亚群的影响。
4.窒息新生儿SIL-2R变化：急性期(1～3天)17例窒息儿SIL-2R为(707±420)U/L，恢复期(12 ～14天)15例为(362±238)U/L，对照组20例正常新生儿为(336±217)U/L。急性期与恢复期及对照组相比，P均<0.01；恢复期与对照组相比，P>0.05。可见新生儿窒息后SIL-2R水平显著升高，复苏后至生后2周可降至正常对照组水平，是其免疫功能受抑制的另一重要证据。
5.窒息新生儿不同日龄时Ig与C3的变化(表2)：新生儿窒息后IgM与C3明显降低，而IgG与IgA差异无显著意义。提示窒息儿体液免疫及非特异性免疫功能亦受到严重影响。
, http://www.100md.com
表2 窒息新生儿不同日龄时Ig、C3检测结果与对照组的比较(g/L) 组别
例数
IgG
IgA
IgM
C3
1～3天
窒息组
15
9.8 (6.5～17.8)
0.36 (0～1.69)
0.79 (0～3.2)
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0.77 (0.1～2.4)*
12～14天
窒息组
7
10.5 (8.6～13.0)
0.67 (0～1.2)**
1.56 (0.98～3.40)**
1.30 (0.93～2.10)**
对照组
15
10.1 (7.1～19.5)
, 百拇医药
0.38 (0～1.2)
1.06 (0～2.1)
1.1 (0.57～2.10)
注：各指标均以均值表示，括号内数据为范围。经秩和检验，与对照组比较，*P<0.05；与12～14天比较，**P<0.01
讨论：已知CD4/CD8比值对机体的细胞免疫和体液免疫均具有重要的调节作用，是判断机体免疫状态的重要指标[1]。本研究结果表明，窒息缺氧可导致新生儿T细胞亚群紊乱，且窒息程度越重异常越明显。动态观察发现至生后26～28天，窒息组与正常对照组T细胞亚群各指标间差异均无显著意义(P>0.05)，提示窒息所致T细胞亚群紊乱可能是暂时的。
SIL-2R是细胞膜IL-2Ra链成分在位点特异性蛋白裂解酶作用下脱落 的42KD片段，是一种重要的免疫抑制因子[2]。新生儿窒息血清SIL-2R水平升高，可抑制T淋巴细胞增殖、影响B淋巴细胞分化和产生Ig及减低NK细胞的活性等，从而降低机体的免疫功能。 CD4细胞是机体合成分泌IL-2的主要细胞，CD4细胞减少将导致IL-2生成减少；而SIL-2R水平升高又和mIL-2R竞争与IL-2结合，从而抑制IL-2的生物学活性与功能，使机体的免疫功能进一步下降。本组患儿SIL-2R水平升高程度与CD4/CD8比值降低程度具有高度相关性(r=0.88,P<0.01)是其有力证据。
, http://www.100md.com
窒息缺氧对新生儿血浆Ig和补体水平的影响，主要表现为IgM和C3的降低。因在抗感染免疫的早期IgM的作用最重要，而IgM功能的发挥需补体参与。窒息新生儿由于血浆IgM和C3含量均降低，促成其易继发各种感染性疾病。
窒息导致新生儿免疫抑制的机制尚不明确，可能为[3-5]：(1)中枢神经系统具有调节免疫功能的作用，受损后可通过多种途径导致机体T、B细胞的数量和功能下降及抗体产生减少。(2)新生儿窒息及脑损伤后，体内多种神经内分泌肽类激素的合成与分泌减少，从而对机体免疫机能的调节作用下降。(3)窒息缺氧本身是否可直接抑制T细胞的增殖与分化，或者使其消耗增加甚而寿命缩短等，尚有待研究。(4)IgM与C3主要在肝脏合成，新生儿窒息后肝脏血流量减少，肝功能受抑制使其合成减少；加之IgM的合成需IL-2参与，而新生儿窒息后CD4细胞减少及SIL-2R水平升高，可导致其血清IL-2含量降低。
总之，本研究对窒息新生儿的免疫功能状态进行了初步观察，证实窒息缺氧可导致机体免疫功能紊乱，初步阐述了新生儿窒息后易于继发感染的机制，为新生儿窒息后加强消毒隔离和防治感染提供了新的理论参考。
, 百拇医药
参考文献
1 Fauci AS.The revolution in clinical immunology.JAMA,1981,246:2567-2572.
2 Rubin LA, Nelson DL. The soluble interleukin-2 receptor: biological, function and clinical application. Ann Inter Med,1990,113:619-627.
3 Vizek M,Dostal M,Soukupova D.Perinatal hypoxia suppresses immune response of adult rats.Physiol Res,1993,42:201-206.
4 陈睿，陈杰，李英华.神经内分泌-免疫系统的相互作用.国外医学儿科学分册，1995，22:261-264.
5 陆德源，主编.现代免疫学.上海：上海科学技术出版社，1995.129-131.
(收稿：1999-04-06), 百拇医药