儿童铅暴露与肾脏功能的相关关系
作者：雷晓燕 熊海金 赵一方 张宏
单位：雷晓燕(730000 兰州，甘肃省人民医院小儿科)；熊海金(730000 兰州，甘肃省人民医院小儿科)；赵一方(730000 兰州，甘肃省人民医院小儿科)；张宏(730000 兰州，甘肃省人民医院小儿科)
关键词：
中华儿科杂志000720 近年来，由于交通的发展和现代装饰材料的普及，使居民生活环境受到了不同程度的铅污染，这些污染对儿童的健康构成了严重的威协。铅暴露不仅可造成儿童脑及神经发育的毒性[1]，还可引起厌食[2]、抗氧化功能的改变[3]。自1998年5月～6月，对兰州市某工厂幼儿园的70名儿童做血铅测定的同时，进一步检测了肾功能，分析其相关性。现报道如下。
对象
, 百拇医药
被检儿童来自兰州市某工厂(铅污染较重区域)附近的一所幼儿园，共70例，其中男性34例，女性36例，年龄为4～6岁，平均(5.2±1.0)岁，所在区域大气及土壤中测试铅水平分别为7.8μg/m3和(101±65)mg/kg，超过国家标准的5.2倍(大气铅含量为1.5 μg/m3/季度)。
方法
1.血铅测定：用无火焰原子吸收光谱法。取静脉血0.1 ml加入0.1 NHNO2 215 μl，离心后取上清液2 μl导入Varian-Techtron PE-5100型原子光度仪的石墨炉原子化，进行铅浓度定量，从标本采样到进样的全过程均采用严格处理的无铅器皿。根据1991年美国CDC标准，不管有无临床症状及血生化的改变，只要血铅≥100 μg/L者则诊断为铅中毒。
2.血、尿β2-微球蛋白(β2-MG)测定：清晨抽取静脉血1 ml，尿标本留除晨尿以外的任意尿约10 ml，用0.1的NaOH调pH至7.0左右，两者均置于-20℃保存，集中检测，采用北方免疫试剂所提供的放射免疫试剂盒，操作按说明书进行，测定仪器为FJ2008自动γ免疫计数器。儿童参考值：血β2-MG (2.2±0.7)μg/ml；尿β2-MG<0.4 μg/ml。
, 百拇医药
3.尿乙酰β-D-葡萄糖苷酶(NAG)测定：用任意一次新鲜中段尿离心后取上清液，由保定长城临床试剂公司提供的试剂盒，以2-氯-4-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(CNP-NAG糖苷)为底物，在日立SABA 18型生化自动分析仪上作连续监测法测定，波长405/485 nm，吸样18 μl，底物工作液350 μl，温度37℃，反应进入线性阶段后连续监测吸光度变化，微机自动计算吸光度每分钟变量，换算成单位(U/L)，正常参考值为<30 U/L。用同一份尿样同时测定肌酐浓度，以每毫摩尔肌酐比值[U/(mmol.Cr) (Cr代表肌酐)]表示，采用碱性苦味酸速率法。
4.NAG/Cr比值测定：为减少尿量变化对浓度的影响，常规分析结果以尿酶单位与尿肌酐比值方式表示[U/(mmol.Cr)尿NAG(U/L)/尿肌酐(mmol/L)=NAG U/(mmol.Cr)]。正常比值：2.37 U/(mmol.Cr)，此反映尿NAG的排出率，4～6岁儿童约为21.31 U/(mmol.Cr)。
, 百拇医药
5.统计学处理：利用statistic 统计软件在586计算机上处理各项数据并进行描述性统计分析，因整体数据呈偏态分布，故而将数据进行对数处理，然后再做相关性分析及t检验。
结果
1.血铅含量及各项肾功能指标：在70例小儿中，血铅≥100 μg/L者62例，其中男32例，女30例。血铅最大值393.6 μg/L，最小值189.19 μg/L，标准差75.27 μg/L，几何均值159.24 μg/L，中位数160.79 μg/L，呈偏态分布，男女性别间差异无显著性(表1)。
表1 各指标描述性统计分析(n=70) 变量名
平均值
标准差
最小值
, 百拇医药
最大值
血铅(μg/L)
189.178 6
75.216 9
39.1
393.6
血β2-MG(μg/ml)
1.422 9
0.321 6
1.2
2.6
尿β2-MG(μg/ml)
, 百拇医药
0.134 3
0.114 0
0.01
0.62
NAG(U/L)
5.980 0
6.537 2
0.2
46.4
尿Cr(mmol/L)
5.224 9
2.974 1
, 百拇医药
0.97
13.62
NAG/Cr[U/(mmol.Cr)]
1.174 0
0.917 6
0.03
6.49
表2 血铅与肾功能各项指标相关分析 变量名
血β2-MG(μg/ml)
尿β2-MG
(μg/ml)
, 百拇医药
尿NAG
(U/L)
尿Cr
(mmol/L)
NAG/Cr
[U/(mmol*Cr)]
相关系数(r)
0.060
0.112
0.244
-0.187
0.473
, 百拇医药 P值
0.619
0.352
0.041
0.120
0.001
表3 NAG/Cr的 t检验 血铅水平样本数(例)
平均值
标准差
标准误
最小值
最大值
t值
, http://www.100md.com
P值
31(血铅≥200 μg/L)
1.667
1.121
0.201
0.33
6.49
4.166
<0.01
39(血铅<200 μg/L)
0.781
0.423
, http://www.100md.com
0.067
0.03
1.98
2.血铅含量与肾功能各指标的相关性：血铅水平与尿NAG活性成正相关(r=0.244,P<0.05)，与NAG/Cr比值亦呈正相关关系(r=0.473)P<0.001，而血铅与血、尿β2-MG、尿Cr、尿微量蛋白等无明显相关性(表2)。
3.血铅水平与NAG/Cr[U/(mmol.Cr)]比值间的关系：血铅含量≥200 μg/L 31例，其NAG/Cr的
±s为1.667±1.121，<200 μg/L的39例，其NAG/Cr的±s 为0.781±0.423，两组间差异有显著性 (t=4.166)，P<0.01，见表3。
, 百拇医药
讨论
1.铅污染区儿童的血铅含量：我们调查的兰州市某工厂幼儿园位于铅污染较严重区域，它与储电池厂紧紧相邻，对面50米处有一造漆厂，幼儿园面临交通干线，环境铅污染处于十分严重的状态。我们对该幼儿园4～6岁的70例儿童进行了血铅含量测定，结果发现，除8例小儿血铅水平<100 μg/L外，余62例血铅水平均≥100 μg/L，铅中毒的发生率为89%，8例血铅<100 μg/L的儿童，据调查均为经常不上幼儿园的小孩。
2.血铅与NAG的相关性：NAG是存在于肾小管及尿路上皮中的溶酶体之一，属酸性水解酶。以近曲小管含量最丰富，其分子量较大，通常不能被肾小球滤过，肝、脾、肺、脑等组织也有此酶，但不受血中酶的干扰，其活性又不易受尿中细胞和细菌等影响，冷藏条件下保存数日不失活，故对诊断肾损伤及估计其受损程度很有临床价值[4]。本组检测了70例小儿血铅水平，其最大值为393.6 μg/L,最小值为39.1 μg/L，均值189.2 μg/L，将其血铅≥200 μg/L与<200 μg/L的儿童分别计算出相应的尿NAG排出率(NAG/Cr对数)，结果发现，血铅≥200 μg/L小儿，尿NAG排出率与NAG/Cr比值均明显增高，与血铅水平有显著性相关性(P<0.01)，血铅含量每上升50 μg/L时，尿NAG排出率增加6.8%(以NAG/Cr比值计算)，Verberk等[5]亦报道了151例小儿血铅均值为342 μg/L，发现血铅水平每上升100 μg/L，尿NAG活性增加13.5%，本研究结果与 Verberk 报道等[5]的数据基本相符，说明血铅浓度达一定程度时(≥200μg/L以上)就可引起肾脏的损害。我们检测的70例小儿，尿Cr均在正常范围之内，可能是尿Cr值常受尿量，尿pH、尿色原等因素的影响，故临床上一般忽略不计，若留取24h或一定时间范围的尿计算尿量有许多困难，用任意一次尿若以容量单位报告尿酶活性(U/ml或U/L)则误差较大，因此临床应用中仍以肌酐比值法计算酶排出率较为可靠。我们认为，该研究首次表明了环境铅暴露对小儿肾脏的损害，未发现血铅与反映肾小管重吸收作用的血、尿β2-MG，尿微量蛋白等之间的关系，可能表示肾小管损伤尚未妨碍正常的蛋白重吸收，环境铅致小儿血铅升高引起NAG排泄增加，为今后的病理学研究提供了依据。
, http://www.100md.com
基金项目：甘肃省九七科技攻关项目(GK972-2-41A)
参考文献
1，符邵莲，郑国庆，胡江，等. 铅的神经发育毒性评价方法的研究. 癌变、畸变、突变，1997， 9：7-9.
2，王郁文，李宏向，朱慧芬，等. 铅与小儿厌食症的关系探讨. 中国实用儿科杂志，1995，10：54.
3，俞苏蒙. 环境铅接触对学龄儿童血脂质过氧化和超氧化歧化酶影响的研究. 职业医学，1995，4：7-8.
4，王淑娟，周惠平，夏铁安. 现代实验诊断学手册.北京： 北京医科大学 中国协和医科大学联合出版社， 1995.354-355.
5，Verberk MM, Willems TZP, Verplanke AJW, et al. Environmental lead and renal effects in children. Arch Environ Health, 1996, 51:83-87.
(收稿日期：1999-10-12), http://www.100md.com
单位：雷晓燕(730000 兰州，甘肃省人民医院小儿科)；熊海金(730000 兰州，甘肃省人民医院小儿科)；赵一方(730000 兰州，甘肃省人民医院小儿科)；张宏(730000 兰州，甘肃省人民医院小儿科)
关键词：
中华儿科杂志000720 近年来，由于交通的发展和现代装饰材料的普及，使居民生活环境受到了不同程度的铅污染，这些污染对儿童的健康构成了严重的威协。铅暴露不仅可造成儿童脑及神经发育的毒性[1]，还可引起厌食[2]、抗氧化功能的改变[3]。自1998年5月～6月，对兰州市某工厂幼儿园的70名儿童做血铅测定的同时，进一步检测了肾功能，分析其相关性。现报道如下。
对象
, 百拇医药
被检儿童来自兰州市某工厂(铅污染较重区域)附近的一所幼儿园，共70例，其中男性34例，女性36例，年龄为4～6岁，平均(5.2±1.0)岁，所在区域大气及土壤中测试铅水平分别为7.8μg/m3和(101±65)mg/kg，超过国家标准的5.2倍(大气铅含量为1.5 μg/m3/季度)。
方法
1.血铅测定：用无火焰原子吸收光谱法。取静脉血0.1 ml加入0.1 NHNO2 215 μl，离心后取上清液2 μl导入Varian-Techtron PE-5100型原子光度仪的石墨炉原子化，进行铅浓度定量，从标本采样到进样的全过程均采用严格处理的无铅器皿。根据1991年美国CDC标准，不管有无临床症状及血生化的改变，只要血铅≥100 μg/L者则诊断为铅中毒。
2.血、尿β2-微球蛋白(β2-MG)测定：清晨抽取静脉血1 ml，尿标本留除晨尿以外的任意尿约10 ml，用0.1的NaOH调pH至7.0左右，两者均置于-20℃保存，集中检测，采用北方免疫试剂所提供的放射免疫试剂盒，操作按说明书进行，测定仪器为FJ2008自动γ免疫计数器。儿童参考值：血β2-MG (2.2±0.7)μg/ml；尿β2-MG<0.4 μg/ml。
, 百拇医药
3.尿乙酰β-D-葡萄糖苷酶(NAG)测定：用任意一次新鲜中段尿离心后取上清液，由保定长城临床试剂公司提供的试剂盒，以2-氯-4-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(CNP-NAG糖苷)为底物，在日立SABA 18型生化自动分析仪上作连续监测法测定，波长405/485 nm，吸样18 μl，底物工作液350 μl，温度37℃，反应进入线性阶段后连续监测吸光度变化，微机自动计算吸光度每分钟变量，换算成单位(U/L)，正常参考值为<30 U/L。用同一份尿样同时测定肌酐浓度，以每毫摩尔肌酐比值[U/(mmol.Cr) (Cr代表肌酐)]表示，采用碱性苦味酸速率法。
4.NAG/Cr比值测定：为减少尿量变化对浓度的影响，常规分析结果以尿酶单位与尿肌酐比值方式表示[U/(mmol.Cr)尿NAG(U/L)/尿肌酐(mmol/L)=NAG U/(mmol.Cr)]。正常比值：2.37 U/(mmol.Cr)，此反映尿NAG的排出率，4～6岁儿童约为21.31 U/(mmol.Cr)。
, 百拇医药
5.统计学处理：利用statistic 统计软件在586计算机上处理各项数据并进行描述性统计分析，因整体数据呈偏态分布，故而将数据进行对数处理，然后再做相关性分析及t检验。
结果
1.血铅含量及各项肾功能指标：在70例小儿中，血铅≥100 μg/L者62例，其中男32例，女30例。血铅最大值393.6 μg/L，最小值189.19 μg/L，标准差75.27 μg/L，几何均值159.24 μg/L，中位数160.79 μg/L，呈偏态分布，男女性别间差异无显著性(表1)。
表1 各指标描述性统计分析(n=70) 变量名
平均值
标准差
最小值
, 百拇医药
最大值
血铅(μg/L)
189.178 6
75.216 9
39.1
393.6
血β2-MG(μg/ml)
1.422 9
0.321 6
1.2
2.6
尿β2-MG(μg/ml)
, 百拇医药
0.134 3
0.114 0
0.01
0.62
NAG(U/L)
5.980 0
6.537 2
0.2
46.4
尿Cr(mmol/L)
5.224 9
2.974 1
, 百拇医药
0.97
13.62
NAG/Cr[U/(mmol.Cr)]
1.174 0
0.917 6
0.03
6.49
表2 血铅与肾功能各项指标相关分析 变量名
血β2-MG(μg/ml)
尿β2-MG
(μg/ml)
, 百拇医药
尿NAG
(U/L)
尿Cr
(mmol/L)
NAG/Cr
[U/(mmol*Cr)]
相关系数(r)
0.060
0.112
0.244
-0.187
0.473
, 百拇医药 P值
0.619
0.352
0.041
0.120
0.001
表3 NAG/Cr的 t检验 血铅水平样本数(例)
平均值
标准差
标准误
最小值
最大值
t值
, http://www.100md.com
P值
31(血铅≥200 μg/L)
1.667
1.121
0.201
0.33
6.49
4.166
<0.01
39(血铅<200 μg/L)
0.781
0.423
, http://www.100md.com
0.067
0.03
1.98
2.血铅含量与肾功能各指标的相关性：血铅水平与尿NAG活性成正相关(r=0.244,P<0.05)，与NAG/Cr比值亦呈正相关关系(r=0.473)P<0.001，而血铅与血、尿β2-MG、尿Cr、尿微量蛋白等无明显相关性(表2)。
3.血铅水平与NAG/Cr[U/(mmol.Cr)]比值间的关系：血铅含量≥200 μg/L 31例，其NAG/Cr的
±s为1.667±1.121，<200 μg/L的39例，其NAG/Cr的±s 为0.781±0.423，两组间差异有显著性 (t=4.166)，P<0.01，见表3。, 百拇医药
讨论
1.铅污染区儿童的血铅含量：我们调查的兰州市某工厂幼儿园位于铅污染较严重区域，它与储电池厂紧紧相邻，对面50米处有一造漆厂，幼儿园面临交通干线，环境铅污染处于十分严重的状态。我们对该幼儿园4～6岁的70例儿童进行了血铅含量测定，结果发现，除8例小儿血铅水平<100 μg/L外，余62例血铅水平均≥100 μg/L，铅中毒的发生率为89%，8例血铅<100 μg/L的儿童，据调查均为经常不上幼儿园的小孩。
2.血铅与NAG的相关性：NAG是存在于肾小管及尿路上皮中的溶酶体之一，属酸性水解酶。以近曲小管含量最丰富，其分子量较大，通常不能被肾小球滤过，肝、脾、肺、脑等组织也有此酶，但不受血中酶的干扰，其活性又不易受尿中细胞和细菌等影响，冷藏条件下保存数日不失活，故对诊断肾损伤及估计其受损程度很有临床价值[4]。本组检测了70例小儿血铅水平，其最大值为393.6 μg/L,最小值为39.1 μg/L，均值189.2 μg/L，将其血铅≥200 μg/L与<200 μg/L的儿童分别计算出相应的尿NAG排出率(NAG/Cr对数)，结果发现，血铅≥200 μg/L小儿，尿NAG排出率与NAG/Cr比值均明显增高，与血铅水平有显著性相关性(P<0.01)，血铅含量每上升50 μg/L时，尿NAG排出率增加6.8%(以NAG/Cr比值计算)，Verberk等[5]亦报道了151例小儿血铅均值为342 μg/L，发现血铅水平每上升100 μg/L，尿NAG活性增加13.5%，本研究结果与 Verberk 报道等[5]的数据基本相符，说明血铅浓度达一定程度时(≥200μg/L以上)就可引起肾脏的损害。我们检测的70例小儿，尿Cr均在正常范围之内，可能是尿Cr值常受尿量，尿pH、尿色原等因素的影响，故临床上一般忽略不计，若留取24h或一定时间范围的尿计算尿量有许多困难，用任意一次尿若以容量单位报告尿酶活性(U/ml或U/L)则误差较大，因此临床应用中仍以肌酐比值法计算酶排出率较为可靠。我们认为，该研究首次表明了环境铅暴露对小儿肾脏的损害，未发现血铅与反映肾小管重吸收作用的血、尿β2-MG，尿微量蛋白等之间的关系，可能表示肾小管损伤尚未妨碍正常的蛋白重吸收，环境铅致小儿血铅升高引起NAG排泄增加，为今后的病理学研究提供了依据。
, http://www.100md.com
基金项目：甘肃省九七科技攻关项目(GK972-2-41A)
参考文献
1，符邵莲，郑国庆，胡江，等. 铅的神经发育毒性评价方法的研究. 癌变、畸变、突变，1997， 9：7-9.
2，王郁文，李宏向，朱慧芬，等. 铅与小儿厌食症的关系探讨. 中国实用儿科杂志，1995，10：54.
3，俞苏蒙. 环境铅接触对学龄儿童血脂质过氧化和超氧化歧化酶影响的研究. 职业医学，1995，4：7-8.
4，王淑娟，周惠平，夏铁安. 现代实验诊断学手册.北京： 北京医科大学 中国协和医科大学联合出版社， 1995.354-355.
5，Verberk MM, Willems TZP, Verplanke AJW, et al. Environmental lead and renal effects in children. Arch Environ Health, 1996, 51:83-87.
(收稿日期：1999-10-12), http://www.100md.com