火棉胶包埋法在制作断层解剖学标本上的应用
作者：李云生 田德润 于春水 于志强
单位：天津医科大学解剖学教研室 300070 天津市
关键词：
中国临床解剖学杂志000141 随着断层解剖学、医学影像学的发展，制备与磁共振图像(MRI)相匹配的断层解剖学标本也有很大提高。作者自1996年至今，改进传统的火棉胶包埋方法，对结构精细，临床意义重大的局部进行包埋，用大脑切片机制成断层标本，取得了很好的效果。现将有关制备方法和取材事项介绍如下：
1 火棉胶包埋法的技术要点
1.1 组织的制备和包埋步骤
取用经福尔马林固定后的成人鞍区和脊柱腰部为实验材料，步骤如下：①标本脱钙：所用材料用10%盐酸浸泡7～15d，直至骨组织可用针刺入时为止；②冲洗：取出标本，用循环水冲洗24h；③常规脱水：将标本逐级脱水，直到标本变硬为止；④浸胶：将脱水后的标本块先浸入5%火棉胶中，在真空干燥箱内以66kPa的压力抽真空30 min，静置1天后，再抽真空，再静置1天后浸入8%火棉胶中；以同样条件抽真空2次。⑤包埋与制块：用15%火棉胶作为包埋剂，包埋块的形成约15～30d(这个时间主要取决于火棉胶溶剂的蒸发速度)。将包埋块置入70%酒精中硬化保存；⑥焊块与切片：此操作均与传统方法相同[1，2]。
, 百拇医药
1.2 断层标本的制备
取用的局部材料大小取决于切片机的类型，以我室使用的德国酒浸L型大脑切片机为例，该机型标本组织块的焊托盘最大直径为20 cm，焊托盘平面至切刀距离为18 cm。标本取材体积在18 cm×18 cm×15 cm为宜，应取材前设计好标本的焊接面和切面。切片厚度一般设置在0.5～1.0 mm，根据实验者需要亦可切至50～100 μm。
2 结果
用经火棉胶包埋的局部组织块制作的断层切面均能清楚显示出不同的组织结构及其关系。切片显示，颅底鞍区(海绵窦)内脑神经、颈内动脉及蝶窦的状况(见图1)；腰部(脊柱区)断面可见椎间盘，椎间关节及椎管内的脊神经根(见图2)。
图1 经海绵窦鞍结节前部层面
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图2 经第2、3腰椎连结部层面
3 讨论
传统的火棉胶(Nitro celluloid)包埋法主要用于神经组织、心脏和内脏器官等小块组织的包埋，而用于大的局部组织包埋则未见报道，以往的断层标本制作一般用低温冰冻后锯切，厚度一般在1～2 cm。随着磁共振图像和功能磁共振图像的发展，扫描层越来越薄，与之匹配的断层切片趋向薄型化。对于1～2 cm厚度的断层结构已不能满足影像学和外科学的发展需要，不能提供翔实的，特别是匹配MRI的断层切片资料和疑难手术入路资料， 这就需要断层切片制备方法的不断改进。目前，用生物塑化技术制备的断层切片厚度为1.2 mm，锯路损耗0.3 mm[3]。但塑化技术设备要求高，费用贵，现在国内尚未普及。本文提供的方法简单，经济，可适用于头颅、颈部、脊柱区及四肢关节的断层解剖，不仅标本可连续切片而且对切片厚度的选择有较大的随意性；0.5 mm以下的切片还可进行组织染色，能翔实阐述局部断层的解剖关系。■
参考文献：
[1]田中克己.显微镜标本的制作法.北京：科学出版社，1961.110
[2]鞠 躬，万选才，董新文.神经解剖学方法.北京：人民卫生出版社，1985.8
[3]张绍祥，刘正津，何光篪.生物塑化技术.中国临床解剖学杂志，1996，14(1)：67
收稿日期：1999-04-14, http://www.100md.com
单位：天津医科大学解剖学教研室 300070 天津市
关键词：
中国临床解剖学杂志000141 随着断层解剖学、医学影像学的发展，制备与磁共振图像(MRI)相匹配的断层解剖学标本也有很大提高。作者自1996年至今，改进传统的火棉胶包埋方法，对结构精细，临床意义重大的局部进行包埋，用大脑切片机制成断层标本，取得了很好的效果。现将有关制备方法和取材事项介绍如下：
1 火棉胶包埋法的技术要点
1.1 组织的制备和包埋步骤
取用经福尔马林固定后的成人鞍区和脊柱腰部为实验材料，步骤如下：①标本脱钙：所用材料用10%盐酸浸泡7～15d，直至骨组织可用针刺入时为止；②冲洗：取出标本，用循环水冲洗24h；③常规脱水：将标本逐级脱水，直到标本变硬为止；④浸胶：将脱水后的标本块先浸入5%火棉胶中，在真空干燥箱内以66kPa的压力抽真空30 min，静置1天后，再抽真空，再静置1天后浸入8%火棉胶中；以同样条件抽真空2次。⑤包埋与制块：用15%火棉胶作为包埋剂，包埋块的形成约15～30d(这个时间主要取决于火棉胶溶剂的蒸发速度)。将包埋块置入70%酒精中硬化保存；⑥焊块与切片：此操作均与传统方法相同[1，2]。
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1.2 断层标本的制备
取用的局部材料大小取决于切片机的类型，以我室使用的德国酒浸L型大脑切片机为例，该机型标本组织块的焊托盘最大直径为20 cm，焊托盘平面至切刀距离为18 cm。标本取材体积在18 cm×18 cm×15 cm为宜，应取材前设计好标本的焊接面和切面。切片厚度一般设置在0.5～1.0 mm，根据实验者需要亦可切至50～100 μm。
2 结果
用经火棉胶包埋的局部组织块制作的断层切面均能清楚显示出不同的组织结构及其关系。切片显示，颅底鞍区(海绵窦)内脑神经、颈内动脉及蝶窦的状况(见图1)；腰部(脊柱区)断面可见椎间盘，椎间关节及椎管内的脊神经根(见图2)。
图1 经海绵窦鞍结节前部层面
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图2 经第2、3腰椎连结部层面
3 讨论
传统的火棉胶(Nitro celluloid)包埋法主要用于神经组织、心脏和内脏器官等小块组织的包埋，而用于大的局部组织包埋则未见报道，以往的断层标本制作一般用低温冰冻后锯切，厚度一般在1～2 cm。随着磁共振图像和功能磁共振图像的发展，扫描层越来越薄，与之匹配的断层切片趋向薄型化。对于1～2 cm厚度的断层结构已不能满足影像学和外科学的发展需要，不能提供翔实的，特别是匹配MRI的断层切片资料和疑难手术入路资料， 这就需要断层切片制备方法的不断改进。目前，用生物塑化技术制备的断层切片厚度为1.2 mm，锯路损耗0.3 mm[3]。但塑化技术设备要求高，费用贵，现在国内尚未普及。本文提供的方法简单，经济，可适用于头颅、颈部、脊柱区及四肢关节的断层解剖，不仅标本可连续切片而且对切片厚度的选择有较大的随意性；0.5 mm以下的切片还可进行组织染色，能翔实阐述局部断层的解剖关系。■
参考文献：
[1]田中克己.显微镜标本的制作法.北京：科学出版社，1961.110
[2]鞠 躬，万选才，董新文.神经解剖学方法.北京：人民卫生出版社，1985.8
[3]张绍祥，刘正津，何光篪.生物塑化技术.中国临床解剖学杂志，1996，14(1)：67
收稿日期：1999-04-14, http://www.100md.com