丹参对氧自由基损伤的离体肺动脉内皮细胞释放内皮素和前列环素的影响
作者：姜 智 刘焕星 亓久生 张荣银 梁炜兰
单位：山东省泰安市中心医院(泰安 271000)
关键词：
丹参对氧自由基损伤的离体肺动脉内皮 细胞释放内皮素和前列环素的影响 近年研究表明，氧自由基参与急性或慢性肺损伤。血管内皮细胞受损，血管舒缩因子的合成释放异常，可能参与某些呼吸系统疾病的发病过程。本文通过体外细胞培养，研究了丹参对自由基损伤的肺动脉内皮细胞释放内皮素(endothelin, ET)和前列环素(prostacyclin, PGI2)的影响，旨在探讨丹参对自由基损伤后肺血管内皮细胞的功能有无恢复作用。
材料与方法
1.内皮细胞培养：无菌操作取成年杂种猪肺动脉段，用胶原酶消化法获取内皮细胞，加入含20%小牛血清的M199培养液(Sigma公司)，按1×108/L细胞量接种于培养瓶中，37℃、5%CO2培养，细胞长满后用胰蛋白酶消化传代。
, http://www.100md.com
2.细胞分组：2～3代内皮细胞，以5×108/L细胞量接种于24孔培养板中，待细胞长至基本融合状态后，分正常对照组(NC)，氧自由基组(OFR)与氧自由基+丹参组(OFR+SM)(后两组均0.1 mmol/L黄嘌呤+400U/L黄嘌呤氧化酶)(Sigma公司)，每组12孔，37℃温育30min,1500r/min离心15 min，弃上清，加入M199培养液(含20%小牛血清)，丹参组再加入25mg丹参注射液(上海第一制药厂，批号：970503，含生药3000g/L)，37℃、5%CO2培养24h，1500r/min离心15min，留取上清待测。
3.ET、PGI2代谢产物6-酮-PGF1α水平测定：
ET、6-酮-PGF1α测定按放免试剂盒(解放军总医院)说明书进行。
结 果
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结果见表1。
表1 氧自由基和丹参培养的内皮细胞上清内皮素、前列环素含量变化
Tab 1 Change of levels of ET and PGI2 in supernatant of
endothelial cells incubated with oxygen radicals and Salviae
Miltiorrhizae (
±s,n=12)
Group
, 百拇医药
ET(pg/L)
PGI2(ng/L)
NC
9.2±2.6
124.4±15.3
OFR
20.4±3.2*
90.3±10.7*
OFR+SM
8.8±2.7
117.8±16.2
, 百拇医药
*P<0.01，vs NC 讨 论
血管内皮细胞分泌的ET具有很强的缩血管和促血管平滑肌增生作用，在肺动脉高压的形成中可能起着重要作用。有学者证实，炎性细胞释放的氧自由基和弹性蛋白酶可通过直接和间接作用抑制内皮细胞合成PGI2，使肺循环阻力和肺动脉压升高。实验显示氧自由基组细胞培养上清中ET含量明显增加，PGI2含量明显低于正常对照组，表明氧自由基可促进肺动脉内皮细胞释放ET，抑制PGI2合成分泌。因此推测，氧自由基可能通过损伤肺血管内皮细胞，参与了肺动脉高压的形成。
丹参是一种具有广泛生物学活性的中药，近年一些学者发现，丹参有明显的清除自由基作用。本实验显示经氧自由基损伤的肺动脉内皮细胞加用丹参后释放ET、PGI2水平与正常组无显著差异，表明丹参可使自由基损伤的肺动脉内皮细胞合成释放ET和PGI2的功能得到恢复，从而可能对肺动脉高压的发生和发展起到抑制作用。
收稿日期：1997年11月24日
修稿日期：1998年5月13日, 百拇医药
单位：山东省泰安市中心医院(泰安 271000)
关键词：
丹参对氧自由基损伤的离体肺动脉内皮 细胞释放内皮素和前列环素的影响 近年研究表明，氧自由基参与急性或慢性肺损伤。血管内皮细胞受损，血管舒缩因子的合成释放异常，可能参与某些呼吸系统疾病的发病过程。本文通过体外细胞培养，研究了丹参对自由基损伤的肺动脉内皮细胞释放内皮素(endothelin, ET)和前列环素(prostacyclin, PGI2)的影响，旨在探讨丹参对自由基损伤后肺血管内皮细胞的功能有无恢复作用。
材料与方法
1.内皮细胞培养：无菌操作取成年杂种猪肺动脉段，用胶原酶消化法获取内皮细胞，加入含20%小牛血清的M199培养液(Sigma公司)，按1×108/L细胞量接种于培养瓶中，37℃、5%CO2培养，细胞长满后用胰蛋白酶消化传代。
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2.细胞分组：2～3代内皮细胞，以5×108/L细胞量接种于24孔培养板中，待细胞长至基本融合状态后，分正常对照组(NC)，氧自由基组(OFR)与氧自由基+丹参组(OFR+SM)(后两组均0.1 mmol/L黄嘌呤+400U/L黄嘌呤氧化酶)(Sigma公司)，每组12孔，37℃温育30min,1500r/min离心15 min，弃上清，加入M199培养液(含20%小牛血清)，丹参组再加入25mg丹参注射液(上海第一制药厂，批号：970503，含生药3000g/L)，37℃、5%CO2培养24h，1500r/min离心15min，留取上清待测。
3.ET、PGI2代谢产物6-酮-PGF1α水平测定：
ET、6-酮-PGF1α测定按放免试剂盒(解放军总医院)说明书进行。
结 果
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结果见表1。
表1 氧自由基和丹参培养的内皮细胞上清内皮素、前列环素含量变化
Tab 1 Change of levels of ET and PGI2 in supernatant of
endothelial cells incubated with oxygen radicals and Salviae
Miltiorrhizae (
±s,n=12)Group
, 百拇医药
ET(pg/L)
PGI2(ng/L)
NC
9.2±2.6
124.4±15.3
OFR
20.4±3.2*
90.3±10.7*
OFR+SM
8.8±2.7
117.8±16.2
, 百拇医药
*P<0.01，vs NC 讨 论
血管内皮细胞分泌的ET具有很强的缩血管和促血管平滑肌增生作用，在肺动脉高压的形成中可能起着重要作用。有学者证实，炎性细胞释放的氧自由基和弹性蛋白酶可通过直接和间接作用抑制内皮细胞合成PGI2，使肺循环阻力和肺动脉压升高。实验显示氧自由基组细胞培养上清中ET含量明显增加，PGI2含量明显低于正常对照组，表明氧自由基可促进肺动脉内皮细胞释放ET，抑制PGI2合成分泌。因此推测，氧自由基可能通过损伤肺血管内皮细胞，参与了肺动脉高压的形成。
丹参是一种具有广泛生物学活性的中药，近年一些学者发现，丹参有明显的清除自由基作用。本实验显示经氧自由基损伤的肺动脉内皮细胞加用丹参后释放ET、PGI2水平与正常组无显著差异，表明丹参可使自由基损伤的肺动脉内皮细胞合成释放ET和PGI2的功能得到恢复，从而可能对肺动脉高压的发生和发展起到抑制作用。
收稿日期：1997年11月24日
修稿日期：1998年5月13日, 百拇医药