心力衰竭大鼠循环RAS激活与血浆PAI-1活性变化
作者：李贺 牛凤珍 胡小萍 贺威琼 李波 张国元 吴宗贵
单位：张国元 吴宗贵 李 贺 上海长征医院心内科(上海 200003)；贺威琼 李波 牛凤珍 解放军202医院；胡小萍 上海浦南医院
关键词：
心力衰竭大鼠循环RAS激活与血浆PAI
临床研究表明，心力衰竭(heart failure,HF)患者发生血栓 栓塞的危险和血液呈高凝状 态与心衰严重程度有关 。高肾素的高血压患者发生心肌梗塞(myocardial infarction，MI) 的危险较低肾素患者高5倍，并且冠心病、脑梗塞新发作的危险增加。血浆纤溶酶原激活物 抑制物(plasminogen activitor inhibitor-1，PAI-1)水平增高与发生血栓栓塞性疾病有关 。临床研究观察到，血管紧张素转化酶抑制剂(angiotensin converting enzyme inhibitor ,ACEI)治疗可降低MI后左室功能不全患者冠脉血栓复发，提示血管紧张素II(angiotensin I I，AngII)可能直接参与血栓形成。因此，HF时肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin s ystem，RAS)激活，An gII 水平增高也将增高PAI-1水平，增加血栓栓塞的危险性。本实验检测HF大鼠心功能、循 环RAS及PAI活性变化，并讨论HF时RAS激活对内源性纤溶系统的作用及其意义。
, 百拇医药
方 法
1.动物模型复制及心功能检测：雄性Wistar大鼠(体重：250～300 g)，随机分为假手术 对照、动静脉瘘(aortacaval fistula，ACF)手术-HF二组，各15只。参照Garcia等的方法 ，以18G针头穿刺腹主动脉-腔静脉建立ACF-HF模型。术后常规饲养。
参照Litwin等的方法检测左心室收缩压(LVSP)和舒张末压(LVEDP)。大鼠ACF术后7 d 内左心收缩功能明显减退，此后逐渐代偿，术后30 d时心脏功能处于代偿期 。本实验对照 组、HF组各取10只，每组5只于术后3 d、30 d检测LVSP和LVEDP。第二次心功能检测同时采 集血样。
2.血样品采集、处理及检测：为避免假手术大鼠术后早期应激性RAS增高影响实 验结果观察，实验大鼠分别于术前3 d，术后9、30 d取尾血2.5 mL，按检测要求处理后，-7 0℃保存。用放射免疫方法测定血浆肾素活性(plasma renin activity，PRA)、AngII，试剂 盒分别为Incstar Co和北京北方放免试剂研究所提供，用发色底物法检测PAI活性，试剂盒 为福建太阳生物技术公司提供。严格按试剂盒说明书操作。
, 百拇医药
3.数据分析：实验数据以均值±标准差(
±s)表示，用t检验，方差分析组 间q检验作统计处理。
结 果
假手术对照组、HF组左心室功能比较：见表1。假手术对照组、HF组大鼠手术前后血浆P RA、AngII变化见表2。二组大鼠手术前、后血浆PAI活性变化见图1。
表1 术后3、30 d假手术对照组、HF组左心功能的变化
Tab 1 Changes of left ventricular function of sham and
HF group after ACF(±s,n=5)
, 百拇医药
Group
Sham group
HF group
d 3 after the surgery
LVSP (kPa)
16.85±0.58
12.38±0.72▲
LVEDP(kPa)
-0.41±0.34
0.37±0.25▲
d 30 after the surgery
, 百拇医药
LVSP (kPa)
17.05±0.67
15.14±0.40 *▲
LVEDP(kPa)
-0.55±0.25
-0.26 ±0.16*
* P<0.05 vs d 3；▲P<0.05 vs, sham group
表2 假手术组、 HF组血浆PRA(μg/L)、AngII(ng/L)水平变化
Tab 2 Changes of PRA(μg/L) and AngII (ng/L) levels in sham and HF group
, 百拇医药
(±s,n=10)
Group
Day before the surgery
Day after the surgery
3
9
30
Sham group
PRA
10.64±5.12
, 百拇医药
9.15±4.52#
10.36±3.78#
AngII
480.21±121.98
451.22±142.19#
501.90±1 08.89#
HF group
PRA
10.55±4.36
28.12±2.26*
, 百拇医药
23.54±3.82*
AngII
452.67±133.68
2310.00±555.52*#▲
1616 .46±233.88*
* P<0.05, vs d 3 before the surgery；# P<0.05, vs HF group; ▲P<0.05, vs d 30
Fig 1 Changes of plasma PAI acti vity in sham and HF groupaP<0.05, vs baseline, b P<0.05 comparison bet ween the groups at same time, c P<0.05 vs baseline in same group.
, 百拇医药
图1 假手术、HF组大鼠手术前后血浆PAI活性变化
讨 论
临床研究提示，RAS激活与发生血栓栓塞疾病有密切关系。滴注AngII可使血压正常和高 血压患者循环PAI-1抗原水平迅速、显著地升高，并呈现量-效关系，ACEI治疗选择性降低AMI患者血浆PAI-1活性及抗原水平，对组织型纤溶酶原激活物(tissue type plasminogen ac tivitor，t-PA)无影响。实验证明AngII可诱导培养的内皮细胞合成PAI-1、ACEI可减少正常大鼠主动脉壁和气囊损伤的主动脉壁PAI表达。这些证据表明，RAS激活时AngII水平增加 主要影响PAI，并通过增高血浆PAI-1水平降低内源性纤溶系统活性、促进血栓形成。纤溶系 统是体内抵抗血管内血栓形成的主要内源性防御机制之一，血管纤溶活性主要由t-PA和PAI- 1决定，PAI是t-PA的主要抑制物。本实验观察到，HF组大鼠左心功能显著减退，循环RAS激活，血浆PAI-1活性增高，随心功能改善RAS激活减弱，PAI-1活性随之下降，说明HF时AngII 水平增高使血浆PAI-1活性增高，提示RAS与体内纤溶功能间有密切联系。这一结果可用以解 释严重心功不全患者血液呈高凝状态，及发生血栓栓塞疾病危险增高的原因。本实验结果提 示，HF时RAS激活对导致机体纤溶系统功能失衡有重要作用，因此抑制HF时RAS过度激活，对 改善HF患者的高凝状态，降低严重HF患者血栓栓塞性疾病的发生可能有重要意义。
(1998年6月1日收稿，1998年12月22日修回), 百拇医药
单位：张国元 吴宗贵 李 贺 上海长征医院心内科(上海 200003)；贺威琼 李波 牛凤珍 解放军202医院；胡小萍 上海浦南医院
关键词：
心力衰竭大鼠循环RAS激活与血浆PAI
临床研究表明，心力衰竭(heart failure,HF)患者发生血栓 栓塞的危险和血液呈高凝状 态与心衰严重程度有关 。高肾素的高血压患者发生心肌梗塞(myocardial infarction，MI) 的危险较低肾素患者高5倍，并且冠心病、脑梗塞新发作的危险增加。血浆纤溶酶原激活物 抑制物(plasminogen activitor inhibitor-1，PAI-1)水平增高与发生血栓栓塞性疾病有关 。临床研究观察到，血管紧张素转化酶抑制剂(angiotensin converting enzyme inhibitor ,ACEI)治疗可降低MI后左室功能不全患者冠脉血栓复发，提示血管紧张素II(angiotensin I I，AngII)可能直接参与血栓形成。因此，HF时肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin s ystem，RAS)激活，An gII 水平增高也将增高PAI-1水平，增加血栓栓塞的危险性。本实验检测HF大鼠心功能、循 环RAS及PAI活性变化，并讨论HF时RAS激活对内源性纤溶系统的作用及其意义。
, 百拇医药
方 法
1.动物模型复制及心功能检测：雄性Wistar大鼠(体重：250～300 g)，随机分为假手术 对照、动静脉瘘(aortacaval fistula，ACF)手术-HF二组，各15只。参照Garcia等的方法 ，以18G针头穿刺腹主动脉-腔静脉建立ACF-HF模型。术后常规饲养。
参照Litwin等的方法检测左心室收缩压(LVSP)和舒张末压(LVEDP)。大鼠ACF术后7 d 内左心收缩功能明显减退，此后逐渐代偿，术后30 d时心脏功能处于代偿期 。本实验对照 组、HF组各取10只，每组5只于术后3 d、30 d检测LVSP和LVEDP。第二次心功能检测同时采 集血样。
2.血样品采集、处理及检测：为避免假手术大鼠术后早期应激性RAS增高影响实 验结果观察，实验大鼠分别于术前3 d，术后9、30 d取尾血2.5 mL，按检测要求处理后，-7 0℃保存。用放射免疫方法测定血浆肾素活性(plasma renin activity，PRA)、AngII，试剂 盒分别为Incstar Co和北京北方放免试剂研究所提供，用发色底物法检测PAI活性，试剂盒 为福建太阳生物技术公司提供。严格按试剂盒说明书操作。
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3.数据分析：实验数据以均值±标准差(
±s)表示，用t检验，方差分析组 间q检验作统计处理。结 果
假手术对照组、HF组左心室功能比较：见表1。假手术对照组、HF组大鼠手术前后血浆P RA、AngII变化见表2。二组大鼠手术前、后血浆PAI活性变化见图1。
表1 术后3、30 d假手术对照组、HF组左心功能的变化
Tab 1 Changes of left ventricular function of sham and
HF group after ACF(
±s,n=5), 百拇医药
Group
Sham group
HF group
d 3 after the surgery
LVSP (kPa)
16.85±0.58
12.38±0.72▲
LVEDP(kPa)
-0.41±0.34
0.37±0.25▲
d 30 after the surgery
, 百拇医药
LVSP (kPa)
17.05±0.67
15.14±0.40 *▲
LVEDP(kPa)
-0.55±0.25
-0.26 ±0.16*
* P<0.05 vs d 3；▲P<0.05 vs, sham group
表2 假手术组、 HF组血浆PRA(μg/L)、AngII(ng/L)水平变化
Tab 2 Changes of PRA(μg/L) and AngII (ng/L) levels in sham and HF group
, 百拇医药
(
±s,n=10)Group
Day before the surgery
Day after the surgery
3
9
30
Sham group
PRA
10.64±5.12
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9.15±4.52#
10.36±3.78#
AngII
480.21±121.98
451.22±142.19#
501.90±1 08.89#
HF group
PRA
10.55±4.36
28.12±2.26*
, 百拇医药
23.54±3.82*
AngII
452.67±133.68
2310.00±555.52*#▲
1616 .46±233.88*
* P<0.05, vs d 3 before the surgery；# P<0.05, vs HF group; ▲P<0.05, vs d 30
Fig 1 Changes of plasma PAI acti vity in sham and HF groupaP<0.05, vs baseline, b P<0.05 comparison bet ween the groups at same time, c P<0.05 vs baseline in same group.
, 百拇医药
图1 假手术、HF组大鼠手术前后血浆PAI活性变化
讨 论
临床研究提示，RAS激活与发生血栓栓塞疾病有密切关系。滴注AngII可使血压正常和高 血压患者循环PAI-1抗原水平迅速、显著地升高，并呈现量-效关系，ACEI治疗选择性降低AMI患者血浆PAI-1活性及抗原水平，对组织型纤溶酶原激活物(tissue type plasminogen ac tivitor，t-PA)无影响。实验证明AngII可诱导培养的内皮细胞合成PAI-1、ACEI可减少正常大鼠主动脉壁和气囊损伤的主动脉壁PAI表达。这些证据表明，RAS激活时AngII水平增加 主要影响PAI，并通过增高血浆PAI-1水平降低内源性纤溶系统活性、促进血栓形成。纤溶系 统是体内抵抗血管内血栓形成的主要内源性防御机制之一，血管纤溶活性主要由t-PA和PAI- 1决定，PAI是t-PA的主要抑制物。本实验观察到，HF组大鼠左心功能显著减退，循环RAS激活，血浆PAI-1活性增高，随心功能改善RAS激活减弱，PAI-1活性随之下降，说明HF时AngII 水平增高使血浆PAI-1活性增高，提示RAS与体内纤溶功能间有密切联系。这一结果可用以解 释严重心功不全患者血液呈高凝状态，及发生血栓栓塞疾病危险增高的原因。本实验结果提 示，HF时RAS激活对导致机体纤溶系统功能失衡有重要作用，因此抑制HF时RAS过度激活，对 改善HF患者的高凝状态，降低严重HF患者血栓栓塞性疾病的发生可能有重要意义。
(1998年6月1日收稿，1998年12月22日修回), 百拇医药