β-防御素-2基因在子宫颈的固有表达
作者：陈新年 黄宁 吴琦 王伯瑶
单位：华西医科大学感染免疫研究室 病理生理教研室(成都 610041)
关键词：
中国病理生理杂志990870 根据Gene Bank大鼠β-防御素-2 cDNA序列，设计特异引物：R15′3′GCA CCA GGC TTC AGT CAT G；R25′3′CAT GGA GGA GCA AAT TCT G。引物由Gibco公司合成。取Wistar大鼠宫颈组织，用Qiagen公司生产的RNA提取试剂盒提取总RNA，以此为模板，采用RT-PCR技术，按照试剂盒说明操作，扩增cDNA，反应条件下：50℃保温30 min，使mRNA逆转录为cDNA；94℃预变性2 min，然后进行30个PCR循环：94℃ 30 s，58℃退火30 s，68℃延伸45 s；最后在68℃继续延伸7 min。RT-PCR产物在1.5%琼脂糖凝胶上电泳，其结查显示应用上述β-防御素-2引物，从大鼠宫颈总RNA中扩增出了一条约290 bp的DNA片段，该片段大小与预测的大鼠β-防御素-2 cDNA片段大小一致。人β-防御素-2于1997年从人银屑病皮损组织中分离获得，具广谱抗菌活性。新近从Gene Bank中检索到与人β-防御素-2同源的大鼠cDNA序列，但尚未见文章发表。日本和美国学者报道子宫颈粘液具抗菌活性，并认为这种抗菌活性是由于溶菌酶的作用。我们和国外另一些学者的研究显示宫颈粘液溶菌酶含量低，难以解释宫颈粘液强大而广谱的抗菌活性。本实验研究提示β-防御素-2可能是子宫颈抗感染作用的重要介质。, http://www.100md.com
单位：华西医科大学感染免疫研究室 病理生理教研室(成都 610041)
关键词：
中国病理生理杂志990870 根据Gene Bank大鼠β-防御素-2 cDNA序列，设计特异引物：R15′3′GCA CCA GGC TTC AGT CAT G；R25′3′CAT GGA GGA GCA AAT TCT G。引物由Gibco公司合成。取Wistar大鼠宫颈组织，用Qiagen公司生产的RNA提取试剂盒提取总RNA，以此为模板，采用RT-PCR技术，按照试剂盒说明操作，扩增cDNA，反应条件下：50℃保温30 min，使mRNA逆转录为cDNA；94℃预变性2 min，然后进行30个PCR循环：94℃ 30 s，58℃退火30 s，68℃延伸45 s；最后在68℃继续延伸7 min。RT-PCR产物在1.5%琼脂糖凝胶上电泳，其结查显示应用上述β-防御素-2引物，从大鼠宫颈总RNA中扩增出了一条约290 bp的DNA片段，该片段大小与预测的大鼠β-防御素-2 cDNA片段大小一致。人β-防御素-2于1997年从人银屑病皮损组织中分离获得，具广谱抗菌活性。新近从Gene Bank中检索到与人β-防御素-2同源的大鼠cDNA序列，但尚未见文章发表。日本和美国学者报道子宫颈粘液具抗菌活性，并认为这种抗菌活性是由于溶菌酶的作用。我们和国外另一些学者的研究显示宫颈粘液溶菌酶含量低，难以解释宫颈粘液强大而广谱的抗菌活性。本实验研究提示β-防御素-2可能是子宫颈抗感染作用的重要介质。, http://www.100md.com