人大颗粒淋巴细胞抗菌多肽的分离
作者：黄宁 吴琦 王伯瑶
单位：华西医科大学病生教研室 感染免疫研究室(成都 610041)
关键词：
中国病理生理杂志990866 新近的资料表明T淋巴细胞和NK细胞具有直接抗细菌、真菌和寄生虫作用，其分子基础受到关注。现已报道从猪细胞毒性T细胞和NK细胞发现一链长为78个氨基酸残基的小分子抗菌肽，并对肿瘤细胞亦具细胞毒性。本文报道从人大颗粒淋巴胞浆颗粒中分离抗菌多肽。取健康人外周新鲜血，用淋巴细胞分层液分离单个核细胞，离心洗涤，用RPMI 1640完全培养基(含rIL-21 000 U/mL)，于37℃，5% CO2孵箱培养7 d。收集IL-2刺激的淋巴细胞，0.34 mol/L蔗糖匀浆，经差速离心获得胞浆颗粒，用5%乙酸提取酸性可溶物。电泳凝胶/琼脂糖弥散抗菌技术发现三条抗菌蛋白带。经制备性AU-PAGE获得HLP-1、和HLP-2和HLP-3等3个抗菌组分，琼脂糖弥散抗菌试验显示对大肠杆菌、绿脓杆菌和金色葡萄球菌等均具很强抗菌活性。SDS-PAGE分析显示HLP-3已为纯化分子，其分子量约为7 kD；HLP-2包含3个多肽，分子量范围5.6～8.8 kD；HLP-1组分相当复杂，包含6个多肽分子，分子量范围5.5～13.0 kD。, http://www.100md.com
单位：华西医科大学病生教研室 感染免疫研究室(成都 610041)
关键词：
中国病理生理杂志990866 新近的资料表明T淋巴细胞和NK细胞具有直接抗细菌、真菌和寄生虫作用，其分子基础受到关注。现已报道从猪细胞毒性T细胞和NK细胞发现一链长为78个氨基酸残基的小分子抗菌肽，并对肿瘤细胞亦具细胞毒性。本文报道从人大颗粒淋巴胞浆颗粒中分离抗菌多肽。取健康人外周新鲜血，用淋巴细胞分层液分离单个核细胞，离心洗涤，用RPMI 1640完全培养基(含rIL-21 000 U/mL)，于37℃，5% CO2孵箱培养7 d。收集IL-2刺激的淋巴细胞，0.34 mol/L蔗糖匀浆，经差速离心获得胞浆颗粒，用5%乙酸提取酸性可溶物。电泳凝胶/琼脂糖弥散抗菌技术发现三条抗菌蛋白带。经制备性AU-PAGE获得HLP-1、和HLP-2和HLP-3等3个抗菌组分，琼脂糖弥散抗菌试验显示对大肠杆菌、绿脓杆菌和金色葡萄球菌等均具很强抗菌活性。SDS-PAGE分析显示HLP-3已为纯化分子，其分子量约为7 kD；HLP-2包含3个多肽，分子量范围5.6～8.8 kD；HLP-1组分相当复杂，包含6个多肽分子，分子量范围5.5～13.0 kD。, http://www.100md.com