益肾化浊注射液对高糖培养肾小球系膜细胞表达FN及PAI-1mRNA的影响
作者：李岩 陈香美 张发荣 黄启福 傅博 高永翔
单位：李岩 黄启福 北京中医药大学病理教研室(100029)；陈香美 傅博 中国人民解放军总医院肾科；高永翔 张发荣 成都中医药大学
关键词：
益肾化浊注射液对高糖培养肾小球系膜细胞 表达FN及PAI
肾小球硬化过程中， 细胞外基质(ECM)的合成与降解的研究近年来受到广泛的关注。体外研究证实，肾小球的3种固有细胞均能产生ECM，其中以系膜细胞最强。在高糖刺激下，系膜细胞分泌FN明显增多，体内观察发现，组织器官硬化过程中，均有纤维连接蛋白(FN)等粘合蛋白活跃的前奏性变化。纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)主要通过抑制纤溶酶原活化物(t-PA,u-PA)的活性影响ECM降解，在ECM的过度积聚过程中起着重要的作用。中药的多种有效成分对人体的整体功能、局部器官、组织乃至在细胞分子水平上均具有调整作用。为此，本实验设计用中药制剂益肾化浊注射液刺激体外培养的系膜，观察高糖状态下对体外培养肾小球系膜细胞增殖，分泌FN以及表达FN、PAI-1mRNA影响，同时观察中药制剂益肾化浊注射液对高糖引起上述各指标变化的影响。主要方法为，进行体外肾小球系膜细胞培养，采用高糖及益肾化浊注射液作为刺激物，MTT(四甲基偶氮唑蓝)法检测细胞增殖，ELISA(酶联免疫吸附测定)法测定细胞上清FN含量，Northern印记杂交检测FN、PAI-1 mRNA表达，计算机图象分析系统对显影底片进行处理，计算出FN、PAI-1、GAPDH的灰度值。结果表明，高糖可明显抑制系膜细胞的增殖，促进其分泌FN，上调PAI-1 mRNA的表达，而益肾化浊注射液可缓解高糖所引起的上述指标的改变，并可下调FN mRNA的表达。结论认为，在体内，ECM的合成与降解是一个复杂的过程，通常存在着连锁网络调控系统，同时促进ECM合成与降解的物质本身又存在着自身的网络调控系统，中药自身的特点决定了其作用机制是多方面的、多途径的，从这种意义上讲，具有协同作用的中药制剂在不同水平、通过不同途径对机体产生作用对于调节失调的机体病理生理过程应该是更加趋于合理的，尽管益肾化浊注射液的作用机制并不十分清楚，但其对于上述指标的影响表现出很好的协同作用。, 百拇医药
单位：李岩 黄启福 北京中医药大学病理教研室(100029)；陈香美 傅博 中国人民解放军总医院肾科；高永翔 张发荣 成都中医药大学
关键词：
益肾化浊注射液对高糖培养肾小球系膜细胞 表达FN及PAI
肾小球硬化过程中， 细胞外基质(ECM)的合成与降解的研究近年来受到广泛的关注。体外研究证实，肾小球的3种固有细胞均能产生ECM，其中以系膜细胞最强。在高糖刺激下，系膜细胞分泌FN明显增多，体内观察发现，组织器官硬化过程中，均有纤维连接蛋白(FN)等粘合蛋白活跃的前奏性变化。纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)主要通过抑制纤溶酶原活化物(t-PA,u-PA)的活性影响ECM降解，在ECM的过度积聚过程中起着重要的作用。中药的多种有效成分对人体的整体功能、局部器官、组织乃至在细胞分子水平上均具有调整作用。为此，本实验设计用中药制剂益肾化浊注射液刺激体外培养的系膜，观察高糖状态下对体外培养肾小球系膜细胞增殖，分泌FN以及表达FN、PAI-1mRNA影响，同时观察中药制剂益肾化浊注射液对高糖引起上述各指标变化的影响。主要方法为，进行体外肾小球系膜细胞培养，采用高糖及益肾化浊注射液作为刺激物，MTT(四甲基偶氮唑蓝)法检测细胞增殖，ELISA(酶联免疫吸附测定)法测定细胞上清FN含量，Northern印记杂交检测FN、PAI-1 mRNA表达，计算机图象分析系统对显影底片进行处理，计算出FN、PAI-1、GAPDH的灰度值。结果表明，高糖可明显抑制系膜细胞的增殖，促进其分泌FN，上调PAI-1 mRNA的表达，而益肾化浊注射液可缓解高糖所引起的上述指标的改变，并可下调FN mRNA的表达。结论认为，在体内，ECM的合成与降解是一个复杂的过程，通常存在着连锁网络调控系统，同时促进ECM合成与降解的物质本身又存在着自身的网络调控系统，中药自身的特点决定了其作用机制是多方面的、多途径的，从这种意义上讲，具有协同作用的中药制剂在不同水平、通过不同途径对机体产生作用对于调节失调的机体病理生理过程应该是更加趋于合理的，尽管益肾化浊注射液的作用机制并不十分清楚，但其对于上述指标的影响表现出很好的协同作用。, 百拇医药