重组可溶性TRAIL在大肠杆菌中的表达、分离纯化及其诱导肿瘤细胞凋亡活性的研究
作者：刘彦信 史娟 郑德先
单位：中国医学科学院基础医学研究所 中国协和医科大学基础医学院 医学分子生物学国家重点实验室，北京 100005
关键词：
中国病理生理杂志0010199
目的和方法：本项研究建立了高效稳定表达可溶型TRAIL(rsTRAIL, TNF-related apoptosis inducting ligand)重组融合蛋白的工程菌，并进行了该重组融合蛋白的表达、分离纯化及诱导肿瘤细胞凋亡活性的研究。结果：重组融合蛋白在大肠杆菌中的表达产量可达到菌体总蛋白的30%左右，亲和层析纯化后，重组融合蛋白的纯度可达95%以上。其表现分子量约为22 kD，等电点为6.29，N-末端的氨基酸顺序与理论值相同。该融合蛋白在浓度为0.1～1 μg/mL时，能显著诱导所试全部7种肿瘤细胞株细胞凋亡，不能诱导正常鼠成纤维细胞细胞凋亡；对贲门癌、乳腺癌、恶性胸腺瘤等原代细胞也具有很强的杀伤作用，但不杀伤正常人外周血淋巴细胞；动物实验研究表明，能显著抑制人肝癌细胞在裸鼠体内生长，而对正常小鼠无任何毒性。结论：该重组融合蛋白能特异性地诱导肿瘤细胞凋亡，具有重要临床应用前景。, http://www.100md.com
单位：中国医学科学院基础医学研究所 中国协和医科大学基础医学院 医学分子生物学国家重点实验室，北京 100005
关键词：
中国病理生理杂志0010199
目的和方法：本项研究建立了高效稳定表达可溶型TRAIL(rsTRAIL, TNF-related apoptosis inducting ligand)重组融合蛋白的工程菌，并进行了该重组融合蛋白的表达、分离纯化及诱导肿瘤细胞凋亡活性的研究。结果：重组融合蛋白在大肠杆菌中的表达产量可达到菌体总蛋白的30%左右，亲和层析纯化后，重组融合蛋白的纯度可达95%以上。其表现分子量约为22 kD，等电点为6.29，N-末端的氨基酸顺序与理论值相同。该融合蛋白在浓度为0.1～1 μg/mL时，能显著诱导所试全部7种肿瘤细胞株细胞凋亡，不能诱导正常鼠成纤维细胞细胞凋亡；对贲门癌、乳腺癌、恶性胸腺瘤等原代细胞也具有很强的杀伤作用，但不杀伤正常人外周血淋巴细胞；动物实验研究表明，能显著抑制人肝癌细胞在裸鼠体内生长，而对正常小鼠无任何毒性。结论：该重组融合蛋白能特异性地诱导肿瘤细胞凋亡，具有重要临床应用前景。, http://www.100md.com