β5整合素在造血细胞上的表达及其与细胞增殖和诱导凋亡的作用
作者：殷莲华 赵新永 付四清 Felix Garacia-Sanchez Deisseroth
单位：殷莲华 赵新永(上海医科大学病理生理学教研室，上海 200032)；付四清 Felix Garacia-Sanchez Deisseroth(Section of Medical Oncology, Yale University School of Medicine, New Haven, CT06520-8023)
关键词：
中国病理生理杂志0010185
目的：整合素(integrins)是一类广泛存在于细胞表面的糖蛋白。在造血细胞的整合素由α和β两个亚基组成，参与细胞与胞外基质、细胞骨架的莲接，并通过酪氨酸和丝氨酸蛋白激酶系统介导细胞信息的传递。αvβ5的过度表达与肿瘤转移及血管形成有关。αvβ3也已证实与血管形成时的能动性调节及肿瘤的转移有关。αvβ3和αvβ5均可作用在摄取腺病毒易感的细胞，因而αvβ3和αvβ5的上调可引起腺病毒与易感细胞再结合增加。为研究αvβ5的功能及其对血源性细胞的作用，我们成功的构建了逆转录病毒载体系统和四环素控制下的诱导表达载体系统，并研究其对造血细胞整合素表达时细胞凋亡和增殖的影响；方法：用去除血清的方法，观察血源性细胞凋亡和分化时αvβ5和αvβ3的变化；用抗αvβ5单克隆抗体封闭血源性细胞上的αvβ5时，观察它们对凋亡和增殖的影响。结果和结论：用pGβ5CHT载体转导造血细胞，β5 cDNA未得到表达，用无血清培养诱导血源性细胞分化和凋亡时，αvβ5和αvβ3发生不平衡表达，αvβ5表达升高，αvβ3表达下降，与有血清培养相比，αvβ5和αvβ3比例是增加的，与K562相比，αvβ5对αvβ3的比例从有血清1.146升到无血清1.370，BV173细胞从0.147到0.464，U937从0.188到0.370，HL60从0.220到0.610，这些结果提示αvβ5的表达增加可促进无血清培养细胞的凋亡；用抗αvβ5单抗隆抗体封闭U937细胞，发现U937细胞的磷脂酰丝氨酸密度显著下降，这提示封闭细胞表面αvβ5可抑制细胞无血清引起的细胞凋亡；K562细胞β5表达水平的增加可抑制细胞的增殖。通过对β5反义转录单位的诱导表达研究发现，四环素可阻止tet/vp 16调控的反义β5基因的表达，从而导致外源性和内源性β5基因的表达，β5基因表达的提高可抑制细胞增殖，因而反义β5表达的缺乏与β5表达水平的增加及细胞生长抑制有关。, 百拇医药
单位：殷莲华 赵新永(上海医科大学病理生理学教研室，上海 200032)；付四清 Felix Garacia-Sanchez Deisseroth(Section of Medical Oncology, Yale University School of Medicine, New Haven, CT06520-8023)
关键词：
中国病理生理杂志0010185
目的：整合素(integrins)是一类广泛存在于细胞表面的糖蛋白。在造血细胞的整合素由α和β两个亚基组成，参与细胞与胞外基质、细胞骨架的莲接，并通过酪氨酸和丝氨酸蛋白激酶系统介导细胞信息的传递。αvβ5的过度表达与肿瘤转移及血管形成有关。αvβ3也已证实与血管形成时的能动性调节及肿瘤的转移有关。αvβ3和αvβ5均可作用在摄取腺病毒易感的细胞，因而αvβ3和αvβ5的上调可引起腺病毒与易感细胞再结合增加。为研究αvβ5的功能及其对血源性细胞的作用，我们成功的构建了逆转录病毒载体系统和四环素控制下的诱导表达载体系统，并研究其对造血细胞整合素表达时细胞凋亡和增殖的影响；方法：用去除血清的方法，观察血源性细胞凋亡和分化时αvβ5和αvβ3的变化；用抗αvβ5单克隆抗体封闭血源性细胞上的αvβ5时，观察它们对凋亡和增殖的影响。结果和结论：用pGβ5CHT载体转导造血细胞，β5 cDNA未得到表达，用无血清培养诱导血源性细胞分化和凋亡时，αvβ5和αvβ3发生不平衡表达，αvβ5表达升高，αvβ3表达下降，与有血清培养相比，αvβ5和αvβ3比例是增加的，与K562相比，αvβ5对αvβ3的比例从有血清1.146升到无血清1.370，BV173细胞从0.147到0.464，U937从0.188到0.370，HL60从0.220到0.610，这些结果提示αvβ5的表达增加可促进无血清培养细胞的凋亡；用抗αvβ5单抗隆抗体封闭U937细胞，发现U937细胞的磷脂酰丝氨酸密度显著下降，这提示封闭细胞表面αvβ5可抑制细胞无血清引起的细胞凋亡；K562细胞β5表达水平的增加可抑制细胞的增殖。通过对β5反义转录单位的诱导表达研究发现，四环素可阻止tet/vp 16调控的反义β5基因的表达，从而导致外源性和内源性β5基因的表达，β5基因表达的提高可抑制细胞增殖，因而反义β5表达的缺乏与β5表达水平的增加及细胞生长抑制有关。, 百拇医药