LPS作用下的乳鼠心肌细胞HO-1的表达与作用
作者：李玉明 张敏 刘俊昌 郑新程 吴立玲 时安云 伍贻经
单位：李玉明 时安云(承德医学院低温生理研究室， 河北 承德 067000)；张敏 刘俊昌 郑新程 吴立玲 伍贻经(北京医科大学病理生理学教研室，北京 100083)
关键词：
中国病理生理杂志0010145
改善心功能是脓毒血症治疗上的关键措施之一。我们此前在应用盲肠结扎穿孔法复制的大鼠腹膜炎脓毒血症模型上观察到，脓毒血症时心肌可诱导型血红素加氧酶(HO-1)表达增加，且可能参与心功能的代偿。但因脓毒血症是由内毒素(LPS)诱发的、由众多炎性细胞因子参与的复杂病理过程，心脏HO-1表达增多是由LPS直接所致还是由其它继发因素所为尚不清楚。目的：通过观察LPS对体外培养的乳鼠心肌细胞(NRCM)HO-1 mRNA表达的影响，进一步探讨HO/CO通路在内毒素性心功能变化中的作用机制。方法：用10 μg/mL、30 μg/mL及50 μg/mL的LPS以及10 μg/mL LPS+10 μmol/mL锌原卟啉Ⅸ(ZnPPⅨ)及单纯10 μmol/mL ZnPPⅨ与培养的NRCM共同孵育6 h，10 μg/mL LPS与NRCM共同孵育9 h和18 h。分别观察细胞MDA含量、LDH释放量及台盼蓝摄取率的变化；Northem杂交测HO-1 mRNA表达。结果：NRCM HO-1mRNA表达随LPS浓度的增大而增加，LPS 10 μg/mL时HO-1 mRNA表达比对照增加81.2%；LPS 30 μg/mL时HO-1 mRNA表达比对照增加126.3%；但至50 μg/mL时HO-1 mRNA表达量却下降至10 μg/mL组的水平。低剂量LPS(10 μg/mL)诱导NRCM HO-1 mRNA的表达量随诱导时间的延长而增加，18 h组HO-1 mRNA的表达比对照增加105.8%。LPS浓度增加至30 μg/mL后及10 μg/mL孵育18 h时，细胞台盼蓝摄取率、MDA含量与LDH释放量明显增加(P<0.05)、细胞出现损伤。单纯低剂量组与单纯抑制剂组细胞台盼蓝摄取率、MDA含量与LDH释放量均无明显升高，而低剂量LPS加抑制剂组却出现明显升高(P<0.01)。结论：LPS对NRCM具有双重作用。一方面，LPS可造成细胞损伤，其程度与LPS浓度和作用时间有关。另一方面，LPS作为一种应激因素又可诱导NRCM HO-1 mRNA表达，其表达量在一定的LPS浓度和作用时间内随诱导剂量的增大、诱导时间的延长而增多，即LPS诱导心肌细胞HO-1表达在一定限度内具有浓度依赖性和时间依赖性。LPS介导的NRCM HO-1表达可能为LPS作用下的心肌细胞产生的一种自身保护性反应。LPS对心肌细胞的这种作用特征可能介导了脓毒血症时心肌内源性保护机制的形成。
国家自然科学基金资助(No.39670308), 百拇医药
单位：李玉明 时安云(承德医学院低温生理研究室， 河北 承德 067000)；张敏 刘俊昌 郑新程 吴立玲 伍贻经(北京医科大学病理生理学教研室，北京 100083)
关键词：
中国病理生理杂志0010145
改善心功能是脓毒血症治疗上的关键措施之一。我们此前在应用盲肠结扎穿孔法复制的大鼠腹膜炎脓毒血症模型上观察到，脓毒血症时心肌可诱导型血红素加氧酶(HO-1)表达增加，且可能参与心功能的代偿。但因脓毒血症是由内毒素(LPS)诱发的、由众多炎性细胞因子参与的复杂病理过程，心脏HO-1表达增多是由LPS直接所致还是由其它继发因素所为尚不清楚。目的：通过观察LPS对体外培养的乳鼠心肌细胞(NRCM)HO-1 mRNA表达的影响，进一步探讨HO/CO通路在内毒素性心功能变化中的作用机制。方法：用10 μg/mL、30 μg/mL及50 μg/mL的LPS以及10 μg/mL LPS+10 μmol/mL锌原卟啉Ⅸ(ZnPPⅨ)及单纯10 μmol/mL ZnPPⅨ与培养的NRCM共同孵育6 h，10 μg/mL LPS与NRCM共同孵育9 h和18 h。分别观察细胞MDA含量、LDH释放量及台盼蓝摄取率的变化；Northem杂交测HO-1 mRNA表达。结果：NRCM HO-1mRNA表达随LPS浓度的增大而增加，LPS 10 μg/mL时HO-1 mRNA表达比对照增加81.2%；LPS 30 μg/mL时HO-1 mRNA表达比对照增加126.3%；但至50 μg/mL时HO-1 mRNA表达量却下降至10 μg/mL组的水平。低剂量LPS(10 μg/mL)诱导NRCM HO-1 mRNA的表达量随诱导时间的延长而增加，18 h组HO-1 mRNA的表达比对照增加105.8%。LPS浓度增加至30 μg/mL后及10 μg/mL孵育18 h时，细胞台盼蓝摄取率、MDA含量与LDH释放量明显增加(P<0.05)、细胞出现损伤。单纯低剂量组与单纯抑制剂组细胞台盼蓝摄取率、MDA含量与LDH释放量均无明显升高，而低剂量LPS加抑制剂组却出现明显升高(P<0.01)。结论：LPS对NRCM具有双重作用。一方面，LPS可造成细胞损伤，其程度与LPS浓度和作用时间有关。另一方面，LPS作为一种应激因素又可诱导NRCM HO-1 mRNA表达，其表达量在一定的LPS浓度和作用时间内随诱导剂量的增大、诱导时间的延长而增多，即LPS诱导心肌细胞HO-1表达在一定限度内具有浓度依赖性和时间依赖性。LPS介导的NRCM HO-1表达可能为LPS作用下的心肌细胞产生的一种自身保护性反应。LPS对心肌细胞的这种作用特征可能介导了脓毒血症时心肌内源性保护机制的形成。
国家自然科学基金资助(No.39670308), 百拇医药