氧化低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞凋亡的泡沫化
作者：袁中华 杨永宗 杨小毅 万载阳
单位：衡阳医学院心血管病研究所，湖南 衡阳 421001
关键词：
中国病理生理杂志001099
目的：动脉粥样硬化(atherosclerosis, As)发生的细胞学基础是内皮细胞的受损以及血液单核-巨噬细胞、血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMC)的迁移和增殖。增生的VSMC和巨噬细胞，表面受体的表达发生改变，清道夫受体吞噬化学修饰的低密度脂蛋白(例如，氧化低密度脂蛋白)，因其缺乏下行调节机制，致使胆固醇酯在细胞内大量积聚，从而转化为泡沫细胞，是As斑块的主要成分。细胞凋亡的异常是许多疾病的原因之一，As的发生直接与凋亡有关，Han等观查了35例直接取自冠状动脉的As斑块(采用TUNEL和PI核染色技术)，结果发现，有25例中存在大量的凋亡细胞，并用免疫组织化学方法，证明了凋亡的细胞大部分是平滑肌细胞和巨噬细胞。方法：本文在离体状态下，采用猪主动脉平滑肌细胞，与氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein, OLDL)或低密度脂蛋白(low density lipoprotein, LDL)共同培养，分析细胞内胆固醇酯(cholesteryl ester, CE)和总胆固醇(total cholesterol, TC)。结果：发现LDL仅使VSMC中CE/TC由26.2%增加到30.1%，而OLDL使VCMS细胞内胆固醇酯由26.2%增加到64.1%。动脉粥样硬化斑块中的泡沫细胞主要来源于巨噬细胞和血管平滑肌细胞，而泡沫细胞与它的来源细胞相比，其最显著的改变是细胞内胆固醇酯增加(≥50%总胆固醇)。显然，这种细胞已明显地泡沫化，成为由平滑肌细胞转变而成的泡沫细胞。同时使用Hoechst33342荧光染色技术及共聚焦激光扫描技术观察细胞核的改变，发现OLDL能诱发VSMC发生典型的凋亡改变特征。尤其是使用共聚焦显微镜对凋亡细胞进行光学“切片”，可以看到典型的凋亡过程，从染色质边缘化到染色质积聚成团块。流式细胞术测定核DNA降解，也发现OLDL能诱发VSMC出现明显的Ap峰。结论：从本文的结果看，细胞内如果负荷大量的胆固醇，就会引起细胞的凋亡，这与病理状态下As斑块的发展相吻合。但是 ，细胞内胆固醇的积聚与凋亡发生之间的关系还不清楚，推测可能由于胆固醇的聚集而激活某些与凋亡发生相关的酶，从而引起凋亡。, http://www.100md.com
单位：衡阳医学院心血管病研究所，湖南 衡阳 421001
关键词：
中国病理生理杂志001099
目的：动脉粥样硬化(atherosclerosis, As)发生的细胞学基础是内皮细胞的受损以及血液单核-巨噬细胞、血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMC)的迁移和增殖。增生的VSMC和巨噬细胞，表面受体的表达发生改变，清道夫受体吞噬化学修饰的低密度脂蛋白(例如，氧化低密度脂蛋白)，因其缺乏下行调节机制，致使胆固醇酯在细胞内大量积聚，从而转化为泡沫细胞，是As斑块的主要成分。细胞凋亡的异常是许多疾病的原因之一，As的发生直接与凋亡有关，Han等观查了35例直接取自冠状动脉的As斑块(采用TUNEL和PI核染色技术)，结果发现，有25例中存在大量的凋亡细胞，并用免疫组织化学方法，证明了凋亡的细胞大部分是平滑肌细胞和巨噬细胞。方法：本文在离体状态下，采用猪主动脉平滑肌细胞，与氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein, OLDL)或低密度脂蛋白(low density lipoprotein, LDL)共同培养，分析细胞内胆固醇酯(cholesteryl ester, CE)和总胆固醇(total cholesterol, TC)。结果：发现LDL仅使VSMC中CE/TC由26.2%增加到30.1%，而OLDL使VCMS细胞内胆固醇酯由26.2%增加到64.1%。动脉粥样硬化斑块中的泡沫细胞主要来源于巨噬细胞和血管平滑肌细胞，而泡沫细胞与它的来源细胞相比，其最显著的改变是细胞内胆固醇酯增加(≥50%总胆固醇)。显然，这种细胞已明显地泡沫化，成为由平滑肌细胞转变而成的泡沫细胞。同时使用Hoechst33342荧光染色技术及共聚焦激光扫描技术观察细胞核的改变，发现OLDL能诱发VSMC发生典型的凋亡改变特征。尤其是使用共聚焦显微镜对凋亡细胞进行光学“切片”，可以看到典型的凋亡过程，从染色质边缘化到染色质积聚成团块。流式细胞术测定核DNA降解，也发现OLDL能诱发VSMC出现明显的Ap峰。结论：从本文的结果看，细胞内如果负荷大量的胆固醇，就会引起细胞的凋亡，这与病理状态下As斑块的发展相吻合。但是 ，细胞内胆固醇的积聚与凋亡发生之间的关系还不清楚，推测可能由于胆固醇的聚集而激活某些与凋亡发生相关的酶，从而引起凋亡。, http://www.100md.com