Cl-通道阻断剂DIDS抑制T淋巴细胞活化增殖机制的研究
作者：王冠蕾 关永源
单位：中山医科大学药理教研室， 广东 广州 510089
关键词：
中国病理生理杂志001035
目的：探讨Cl-通道开放在Ca2+依赖性T淋巴细胞活化增殖信号转导中的作用。方法：采用ConA诱导的成人外周血T细胞活化增殖模型，应用Fura-2/AM荧光探针，观察Cl-通道阻断剂DIDS以及Ca2+通道阻断剂SK&F 96365对活化T淋巴细胞Ca2+调控的影响，并加以比较；应用核酸酶保护分析法(RPA)测定以上药物对人白细胞介素2(hIL-2)mRNA表达的影响。结果：DIDS(0.5，1，2 μmol.L-1)浓度依赖性地抑制活化T细胞引起的持续性Ca2+内流，抑制率分别为18.4%±6.0%， 25.1%±10.6%， 37.1%±7.4%。在ConA触发的Ca2+内流被最大抑制浓度(20 μmol.L-1)的SK&F96365抑制后，不能被2 μmol.L-1 DIDS进一步抑制； 而ConA触发的Ca2+内流被2 μmol.L-1 DIDS部分抑制后，仍能被20 μmol.L-1 SK&F96365进一步抑制，抑制率为15.0%±4.3%。SK&F96365(1，3，10，20 μmol.L-1)浓度依赖地抑制活化T细胞hIL-2 mRNA的表达，抑制率分别为22%，45%，72%，82%。DIDS(100， 200， 400 μmol.L-1)浓度依赖性地抑制活化T细胞hIL-2 mRNA的表达，抑制率分别为69%，71%，84%。讨论：Ca2+释放激活的Ca2+通道(CRAC)的阻断剂SK&F96365呈浓度依赖性地抑制活化T细胞Ca2+内流、hIL-2 mRNA表达以及T细胞增殖，表明经CRAC的Ca2+内流介导了ConA诱导的hIL-2基因表达和T细胞增殖；最大有效浓度SK&F96365抑制ConA触发Ca2+内流后，DIDS不能进一步抑制，提示DIDS敏感的Cl-通道参与了经CRAC的Ca2+调控；DIDS也呈浓度依赖性地抑制活化T细胞hIL-2 mRNA的表达，本室先前研究表明：Cl-通道参与了ConA诱导的T细胞活化增殖。结论：Cl-通道开放通过影响经CRAC的Ca2+内流，调控IL-2 mRNA表达，从而参与T细胞活化增殖。, 百拇医药
单位：中山医科大学药理教研室， 广东 广州 510089
关键词：
中国病理生理杂志001035
目的：探讨Cl-通道开放在Ca2+依赖性T淋巴细胞活化增殖信号转导中的作用。方法：采用ConA诱导的成人外周血T细胞活化增殖模型，应用Fura-2/AM荧光探针，观察Cl-通道阻断剂DIDS以及Ca2+通道阻断剂SK&F 96365对活化T淋巴细胞Ca2+调控的影响，并加以比较；应用核酸酶保护分析法(RPA)测定以上药物对人白细胞介素2(hIL-2)mRNA表达的影响。结果：DIDS(0.5，1，2 μmol.L-1)浓度依赖性地抑制活化T细胞引起的持续性Ca2+内流，抑制率分别为18.4%±6.0%， 25.1%±10.6%， 37.1%±7.4%。在ConA触发的Ca2+内流被最大抑制浓度(20 μmol.L-1)的SK&F96365抑制后，不能被2 μmol.L-1 DIDS进一步抑制； 而ConA触发的Ca2+内流被2 μmol.L-1 DIDS部分抑制后，仍能被20 μmol.L-1 SK&F96365进一步抑制，抑制率为15.0%±4.3%。SK&F96365(1，3，10，20 μmol.L-1)浓度依赖地抑制活化T细胞hIL-2 mRNA的表达，抑制率分别为22%，45%，72%，82%。DIDS(100， 200， 400 μmol.L-1)浓度依赖性地抑制活化T细胞hIL-2 mRNA的表达，抑制率分别为69%，71%，84%。讨论：Ca2+释放激活的Ca2+通道(CRAC)的阻断剂SK&F96365呈浓度依赖性地抑制活化T细胞Ca2+内流、hIL-2 mRNA表达以及T细胞增殖，表明经CRAC的Ca2+内流介导了ConA诱导的hIL-2基因表达和T细胞增殖；最大有效浓度SK&F96365抑制ConA触发Ca2+内流后，DIDS不能进一步抑制，提示DIDS敏感的Cl-通道参与了经CRAC的Ca2+调控；DIDS也呈浓度依赖性地抑制活化T细胞hIL-2 mRNA的表达，本室先前研究表明：Cl-通道参与了ConA诱导的T细胞活化增殖。结论：Cl-通道开放通过影响经CRAC的Ca2+内流，调控IL-2 mRNA表达，从而参与T细胞活化增殖。, 百拇医药