人参黄芪片含量测定的实验研究
作者：谭日健
单位：广西防城港市防城区中医院 防城港 538021
关键词：人参黄芪片；黄芪甲甙；人参皂甙Rg1；TLCS法
广西中医学院学报000229 中图分类号 R284
人参黄芪片，为中药制剂，由人参、黄芪膏粉组成，吸载于全国医药产品大全之中[1]，具有扶正固本，补气升阳，强心固脱、补虚生津之功效。用于体虚欲脱、肢体倦怠、神疲乏力，多梦健忘等症。本文采用双波长飞点扫描法对方中两味中药有效成分人参的人参皂甙Rg\-1和黄芪的黄芪甲甙，进行含量测定，效果良好，报道如下。
1 仪器与实验材料
1.1 仪器 CS-9000薄层扫描仪(日本岛津)
, http://www.100md.com
1.2 实验材料 人参黄芪片(市售品)，人参皂甙Rg\-1、黄芪甲甙对照品、对照药材人参、黄芪(均由中国药品生物检定所提供)。硅胶G(青岛海洋化工厂产品)。实验所用试剂均为分析纯。
2 实验方法
2.1 人参皂甙Rg1含量测定
2.1.1 薄层层析条件 硅胶G板按常法制备；展开剂：正丁醇-乙酸乙酯-水(4∶1∶5)上层；显色剂：10%硫酸溶液。
2.1.2 扫描条件 测定波长(λS)=530nm；参比波长(λR)=670nm；反射法锯齿型扫描。
2.1.3 标准曲线制备 精密称取人参皂甙Rg\-1对照品，用甲醇制成2.5mg/ml的对照液，分别以1.0μl、2.0μl、3.0μl、4.0μl、5.0μl准确点样于硅胶G薄层板上，以上述展开剂展开，展距12cm，晾干后用上述显色剂显色，105℃烘5min，扫描测定，得回归方程Y=24288+11408X γ=0.9992
, http://www.100md.com
2.1.4 样品制备 取本品20片，求出平均片重后，研成细粉，精密称定约5g，置索氏提取器中，用甲醇回流6h，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml溶解，滤过，滤液置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取5次，每次30ml，合并滤液，置水浴上蒸干，残渣加水60ml溶解，滤过，滤液加于已处理好的大孔树脂柱上，控制流量5ml/min，用0.5mol/L NaOH溶液600ml洗去杂质，再用水洗至无色，中性，用乙醇洗脱，弃去初滤液20ml，收集续滤液250ml，回收乙醇，残渣蒸干，残渣加甲醇溶解，定量转移至10ml容量瓶内，并稀释至刻度，即得样品供试液。
2.1.5 阳性对照液制备 称取人参对照药材2g，研成粉末，按上法制备阳性对照液。
2.1.6 阴性对照液制备 制备除人参的模拟片，研成粉未，称取约5g，按上法制备。
2.1.7 操作方法 用定量毛细管精密吸取人参皂甙Rg1对照液2μl、4μl，样品液、阳性、阴性对照液各2μl，按上述方法点样展开、显色、扫描测定，用外标两点法计算即得。
, http://www.100md.com
在薄层定性时，阳性对照、化学对照品对照、样品供试液Rf值相同的斑点一致，而阴性对照在此处无干扰。
样品含量测定结果见表1。
表1 样品中人参皂甙Rg1测定结果(n=5) 批号
测得值(mg/片)
RSD(%)
980302
4.58
1.82
980308
4.37
1.97
, http://www.100md.com
980311
4.69
2.01
2.1.8 重现性试验 以同一浓度、相同体积的人参皂甙Rg\-1标准液点样，同板、异板的峰面积积分值的RSD分别为1.12%、2.58%(n=5)。
2.1.9 稳定性试验 精密量取对照液2μl，点于同一块薄层板上，依法展开、显色，从显色后10min起测定，每隔30min测定一次，结果表明4h内斑点峰面积基本稳定。
2.1.10 回收率测定 在样品中精密加入一定量人参皂甙Rg\-1对照品，依上述方法提取、点样展开显色、扫描测定，结果平均回收率98.3%，RSD=1.65%(n=5)。
2.2 黄芪甲甙含量测定
, 百拇医药
2.2.1 层析条件 硅胶G板按常法制备。展开剂氯仿-甲醇-水(65∶35∶10)，10℃以下放置过夜的下层液。显色剂10%硫酸乙醇液。
2.2.2 供试液制备 取2.1项下的样品粉未，精密称定约5g，再用甲醇约40ml，回流提取至溶液无色。提取液回收溶剂至干，残渣加饱和氯化钠溶液10ml，以水饱和正丁醇萃取5次(10ml，10ml，5ml，5ml，5ml)，合并萃取液于蒸发皿中，加氧化镁7g，搅拌水浴蒸干，加入少量甲醇将粉末湿润后装入滤纸筒，置索氏提取器中，加甲醇回流至无色，回收溶剂，蒸干。加入无水甲醇使残渣溶解，移入2ml量瓶中，加无水甲醇至刻度，静置，取上清液作供试品溶液。
2.2.3 阳性对照液制备 称取黄芪对照药材2g，研成粉末，按上法制备阳性对照液。
2.2.4 阴性对照液制备 制备除黄芪的模拟片，研成粉末，称取约5g，按上法制备。
, http://www.100md.com
2.2.5 扫描条件 λ\-S=530， λ\-R=650nm，双波长反射法锯齿扫描。
2.2.6 标准曲线 精密称取黄芪甲甙对照品，用甲醇制成0.50mg/ml的对照液。用定量毛细管分别精密吸取上述对照液2μl、4μl、6μl、8μl、10μl、12μl，点样，按上述条件展开，显色，扫描测定其峰面积，得回归方程：
Y=11002X+1695,r=0.9995
2.2.7 样品测定 用定量毛细管分别精密吸取样品液4μl，对照液2μl、4μl，阳、阴对照液4μl，按上述方法点样、展开、显色扫描测定，按外标两点法计算即得，见表2。
在薄层定性时，阳性对照、化学对照品对照，样品对照液在Rf值相同的斑点一致，而阴性对照在此处无干扰。表2 样品中黄芪甲甙测定结果(n=4) 批号
, http://www.100md.com
测得值(mg/片)
RSD(%)
980302
0.22
2.05
980308
0.25
2.38
980311
0.23
2.75
2.2.8 重现性试验 以同一浓度、相同体积的黄芪甲甙点样，同板、异板的峰面积积分值的RSD分别为1.32%，2.96%(n=5)
, 百拇医药
2.2.9 稳定性试验 精密量对照液2μl，点于同一块薄层板上，依法展开，显色，从显色后10min起测定，每隔30min测定一次，结果表明在2.5h内斑点的峰面积基本稳定。
2.2.10 回收率测定 在样品中，精密加入一定量黄芪甲甙对照品，依上述方法提取、点样、展开、显色、扫描测定，结果平均回收率97.8%，RSD=1.78%(n=5)。3 小结
上述结果表明，采用TLCS法测定人参黄芪片中人参皂甙Rg1、黄芪甲甙方法可行，建议本法用于该制剂的质量控制。
参考文献
[1] 上海医药工业研究院.全国医药产品大全.北京：中国医药科技出版社，1988.3901
收稿日期：2000-03-11, 百拇医药
单位：广西防城港市防城区中医院 防城港 538021
关键词：人参黄芪片；黄芪甲甙；人参皂甙Rg1；TLCS法
广西中医学院学报000229 中图分类号 R284
人参黄芪片，为中药制剂，由人参、黄芪膏粉组成，吸载于全国医药产品大全之中[1]，具有扶正固本，补气升阳，强心固脱、补虚生津之功效。用于体虚欲脱、肢体倦怠、神疲乏力，多梦健忘等症。本文采用双波长飞点扫描法对方中两味中药有效成分人参的人参皂甙Rg\-1和黄芪的黄芪甲甙，进行含量测定，效果良好，报道如下。
1 仪器与实验材料
1.1 仪器 CS-9000薄层扫描仪(日本岛津)
, http://www.100md.com
1.2 实验材料 人参黄芪片(市售品)，人参皂甙Rg\-1、黄芪甲甙对照品、对照药材人参、黄芪(均由中国药品生物检定所提供)。硅胶G(青岛海洋化工厂产品)。实验所用试剂均为分析纯。
2 实验方法
2.1 人参皂甙Rg1含量测定
2.1.1 薄层层析条件 硅胶G板按常法制备；展开剂：正丁醇-乙酸乙酯-水(4∶1∶5)上层；显色剂：10%硫酸溶液。
2.1.2 扫描条件 测定波长(λS)=530nm；参比波长(λR)=670nm；反射法锯齿型扫描。
2.1.3 标准曲线制备 精密称取人参皂甙Rg\-1对照品，用甲醇制成2.5mg/ml的对照液，分别以1.0μl、2.0μl、3.0μl、4.0μl、5.0μl准确点样于硅胶G薄层板上，以上述展开剂展开，展距12cm，晾干后用上述显色剂显色，105℃烘5min，扫描测定，得回归方程Y=24288+11408X γ=0.9992
, http://www.100md.com
2.1.4 样品制备 取本品20片，求出平均片重后，研成细粉，精密称定约5g，置索氏提取器中，用甲醇回流6h，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml溶解，滤过，滤液置分液漏斗中，用水饱和的正丁醇萃取5次，每次30ml，合并滤液，置水浴上蒸干，残渣加水60ml溶解，滤过，滤液加于已处理好的大孔树脂柱上，控制流量5ml/min，用0.5mol/L NaOH溶液600ml洗去杂质，再用水洗至无色，中性，用乙醇洗脱，弃去初滤液20ml，收集续滤液250ml，回收乙醇，残渣蒸干，残渣加甲醇溶解，定量转移至10ml容量瓶内，并稀释至刻度，即得样品供试液。
2.1.5 阳性对照液制备 称取人参对照药材2g，研成粉末，按上法制备阳性对照液。
2.1.6 阴性对照液制备 制备除人参的模拟片，研成粉未，称取约5g，按上法制备。
2.1.7 操作方法 用定量毛细管精密吸取人参皂甙Rg1对照液2μl、4μl，样品液、阳性、阴性对照液各2μl，按上述方法点样展开、显色、扫描测定，用外标两点法计算即得。
, http://www.100md.com
在薄层定性时，阳性对照、化学对照品对照、样品供试液Rf值相同的斑点一致，而阴性对照在此处无干扰。
样品含量测定结果见表1。
表1 样品中人参皂甙Rg1测定结果(n=5) 批号
测得值(mg/片)
RSD(%)
980302
4.58
1.82
980308
4.37
1.97
, http://www.100md.com
980311
4.69
2.01
2.1.8 重现性试验 以同一浓度、相同体积的人参皂甙Rg\-1标准液点样，同板、异板的峰面积积分值的RSD分别为1.12%、2.58%(n=5)。
2.1.9 稳定性试验 精密量取对照液2μl，点于同一块薄层板上，依法展开、显色，从显色后10min起测定，每隔30min测定一次，结果表明4h内斑点峰面积基本稳定。
2.1.10 回收率测定 在样品中精密加入一定量人参皂甙Rg\-1对照品，依上述方法提取、点样展开显色、扫描测定，结果平均回收率98.3%，RSD=1.65%(n=5)。
2.2 黄芪甲甙含量测定
, 百拇医药
2.2.1 层析条件 硅胶G板按常法制备。展开剂氯仿-甲醇-水(65∶35∶10)，10℃以下放置过夜的下层液。显色剂10%硫酸乙醇液。
2.2.2 供试液制备 取2.1项下的样品粉未，精密称定约5g，再用甲醇约40ml，回流提取至溶液无色。提取液回收溶剂至干，残渣加饱和氯化钠溶液10ml，以水饱和正丁醇萃取5次(10ml，10ml，5ml，5ml，5ml)，合并萃取液于蒸发皿中，加氧化镁7g，搅拌水浴蒸干，加入少量甲醇将粉末湿润后装入滤纸筒，置索氏提取器中，加甲醇回流至无色，回收溶剂，蒸干。加入无水甲醇使残渣溶解，移入2ml量瓶中，加无水甲醇至刻度，静置，取上清液作供试品溶液。
2.2.3 阳性对照液制备 称取黄芪对照药材2g，研成粉末，按上法制备阳性对照液。
2.2.4 阴性对照液制备 制备除黄芪的模拟片，研成粉末，称取约5g，按上法制备。
, http://www.100md.com
2.2.5 扫描条件 λ\-S=530， λ\-R=650nm，双波长反射法锯齿扫描。
2.2.6 标准曲线 精密称取黄芪甲甙对照品，用甲醇制成0.50mg/ml的对照液。用定量毛细管分别精密吸取上述对照液2μl、4μl、6μl、8μl、10μl、12μl，点样，按上述条件展开，显色，扫描测定其峰面积，得回归方程：
Y=11002X+1695,r=0.9995
2.2.7 样品测定 用定量毛细管分别精密吸取样品液4μl，对照液2μl、4μl，阳、阴对照液4μl，按上述方法点样、展开、显色扫描测定，按外标两点法计算即得，见表2。
在薄层定性时，阳性对照、化学对照品对照，样品对照液在Rf值相同的斑点一致，而阴性对照在此处无干扰。表2 样品中黄芪甲甙测定结果(n=4) 批号
, http://www.100md.com
测得值(mg/片)
RSD(%)
980302
0.22
2.05
980308
0.25
2.38
980311
0.23
2.75
2.2.8 重现性试验 以同一浓度、相同体积的黄芪甲甙点样，同板、异板的峰面积积分值的RSD分别为1.32%，2.96%(n=5)
, 百拇医药
2.2.9 稳定性试验 精密量对照液2μl，点于同一块薄层板上，依法展开，显色，从显色后10min起测定，每隔30min测定一次，结果表明在2.5h内斑点的峰面积基本稳定。
2.2.10 回收率测定 在样品中，精密加入一定量黄芪甲甙对照品，依上述方法提取、点样、展开、显色、扫描测定，结果平均回收率97.8%，RSD=1.78%(n=5)。3 小结
上述结果表明，采用TLCS法测定人参黄芪片中人参皂甙Rg1、黄芪甲甙方法可行，建议本法用于该制剂的质量控制。
参考文献
[1] 上海医药工业研究院.全国医药产品大全.北京：中国医药科技出版社，1988.3901
收稿日期：2000-03-11, 百拇医药