扶正口服液在家兔体内的代谢动力学研究
作者：于敏 石晓滢 霍继明 杨景云
单位：佳木斯大学医学院
关键词：扶正口服液；齐墩果酸；药代动力学
黑龙江医药科学990203
提要 采用比色法测定了口服单剂量扶正口服液后，家兔体内齐墩果酸的血药曲线，并据此研究了扶正口服液中齐墩果酸在体内代谢动力学规律。结果表明，齐墩果酸在家兔体内的代谢符合一室药动学模型。并求出了该制剂的主要药动学参数。
Fuzheng oral liquid: A metabolism kinetic study in rabbit
Yu Min, et al
Abstract The drug-blood curve of oleanolic acid in rabbit body was determined by colorimetric method after the single dosage of Fuzheng oral liquid was qiven to rabbit. The metabolism kinetic rule of oleanolic acid in vivo was also studied by this method. It was showed that the metabolism of oleanolic acid in rabbit accorded with one-room pharmacokinetic model. And the main pharmacokinetic parameters were assayed.
, 百拇医药
Key words Fuzheng oral liquid; oleanolic acid; pharmacokinetic
我们已系列研究了扶正口服液的制备、质量标准、药理作用及药物稳定性等。经药效学研究证实，扶正口服液具有调整由于放疗、化疗后引起的菌群失调和免疫功能低下的作用。本文对口服单剂量扶正口服液后家兔血中齐墩果酸的血药浓度用比色法进行了监测，并据血药浓度曲线研究了齐墩果酸的药代动力学参数，为该药的开发及临床合理用药提供参考依据，现将研究结果报告如下。
1 材料和方法
1.1 仪器、试药
751G分光光度计，上海分析仪器厂；TGL-16G高速台式离心机，上海医用分析仪器厂；恒温水浴；上海器械五厂。齐墩果酸标准品(中国药品生物制品检定所提供709-8903)；扶正口服液(本试验组自制，批号950317)；氯仿(上海试剂一厂)；冰醋酸(沈阳化学试剂厂)；高氯酸(天津东方化工厂)；香草醛(远东化工试剂一厂)。以上试剂均为分析纯级。
, 百拇医药
1.2 实验动物
(2.5±0.5)kg健康家兔，雌雄兼用，由本院动物室提供。
1.3 标准曲线的制备[1]
精密称取干燥至恒重的齐墩果酸标准品10mg，置于10ml容量瓶中，加氯仿至刻度，得1mg/ml标准品溶液。用微量加样器，分别吸取20μl、40μl、60μl、80μl、140μl标准液于离心试管中，挥去溶剂，加1ml血清，加0.5ml醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.6)，加入25ml氯仿，充分振荡使混匀，呈乳化状态，离心(15000r/min)30min分离出上层水相，再次离心(15000r/min)20min，定量吸取分离出氯仿液2ml置于10ml容量瓶中，挥去溶剂，加5%香草醛-冰醋酸0.4ml，高氯酸1.6ml，70℃加热15min，冷却至室温，加冰醋酸8ml，以空白血清作对照，在547nm处测吸光度。以浓度-吸光度绘制标准曲线，求回归方程C=3.2292×102A+4.0688(r=0.9974、n=5)见图1。结果表明，齐墩果酸在20~140μg/ml符合比尔定律。由于截矩较小，实验中采用标准比较法定量。
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图1 齐墩果酸标准曲线
1.4 加样回收试验
分别取齐墩果酸标准液20μl、80μl、140μl于离心试管中，每样取6个，挥去溶剂，加1ml血清，加0.5ml醋酸-醋酸钠缓冲液(pH 3.6)再加入2.5ml氯仿萃取。以下按标准曲线项下处理。在547nm处测吸光度。用标准比较法计算测出量和回收率，结果见表1。
表1 方法回收率试验结果(n=6) 加入量(m g/ml)
测出量(m g/ml)
回收率(%)
平均回收率(%)
RSD(%)
, http://www.100md.com 20
20.43
102.15
80
79.89
99.86
100.25
1.73
140
138.25
98.25
1.5 动物实验方法
取健康家兔6只，体重(2.5±0.5)kg，雌雄不限，给药前禁食24h。灌胃给药，按体重给药200mg/kg(含齐墩果酸量)。在给药后0.25、0.5、1、1.5、2、3、4、5、6、8、10、12h自兔耳缘静脉分别取血样2.5ml，离心(15000r/min)10min，分离出1ml血清，待测。
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2 结果
2.1 齐墩果酸在动物体内的药时过程
将不同时刻的待测血清按标准曲线项下操作处理，在547nm处测吸光度，按标准比较法计算血药浓度。结果见表2和图2。
表2 齐墩果酸血药数据(n=6,
±s) t(h)
C(m g/ml)
t(h)
C(m g/ml)
t(h)
C(m g/ml)
, 百拇医药
0.25
64.204±0.13
2
99.406±0.15
6
38.064±0.16
0.5
114.056±0.25
3
90.936±0.09
8
26.900±0.37
, 百拇医药
1
105.664±0.07
4
66.210±0.14
10
22.460±0.29
1.5
104.218±0.32
5
51.062±0.06
12
17.178±0.18
, http://www.100md.com
图2 扶正口服液中齐墩果酸血药浓度-时间曲线
2.2 齐墩果酸在动物体内的药代动力学参数
将血药浓度-时间数据用MCPKP程序处理，分别按一室、二室和三室模型进行模拟。获得(Akaike's Information criterion AIC)值和相关系数r。据AIC值最小和r值最大原则，判定齐墩果酸在家兔体内的药时过程符合一级吸收的一室模型。并求得其药代动力学参数，见表3。
表3 齐墩果酸在家兔体内的药代动力学参数 参数
单位
数值
±S
Co
, 百拇医药
μg/ml
130.5387
3.11072
Ka
h-1
6.75527
3.28024
K
h-1
0.18975
0.01238
T1/2
h
, 百拇医药
3.65218
Tp
h
0.69218
Cmax
μg/ml
116.52858
AUC
μg.mg/ml
687.96
3 讨论
扶正口服液作为微生态调节剂，调整由于放疗和化疗引起的菌群失调的作用是行之有效的[3]。采用比色法测定口服单剂量扶正口服液的血药浓度，回收率为100.25%，RSD为1.73%，其回归方程为C=3.2292×102A+4.0688(r=0.9974)。本法具有简便灵敏，专属性强的特点，可以用来监测该药的血药浓度，实验结果提出的药动力学参数，为临床合理用药提供了科学依据。
参考文献
1.于敏,谌艳玲,霍继明,等.薄层比色法对953口服液中齐墩果酸的含量测定.中国微生态学杂志,1996(5):8
2.张志荣,胡晓颖,将大义.银黄冲剂中黄芩甙在家兔体内的代谢动力学研究.中成药,1996(6):18
3.杨景云,于敏,李丽秋,等.中药903口服液作为微生态调节剂系列研究进展.中国微生态学杂志,1995;7(5):51
(1998-08-26收稿 1998-12-08修回), 百拇医药
单位：佳木斯大学医学院
关键词：扶正口服液；齐墩果酸；药代动力学
黑龙江医药科学990203
提要 采用比色法测定了口服单剂量扶正口服液后，家兔体内齐墩果酸的血药曲线，并据此研究了扶正口服液中齐墩果酸在体内代谢动力学规律。结果表明，齐墩果酸在家兔体内的代谢符合一室药动学模型。并求出了该制剂的主要药动学参数。
Fuzheng oral liquid: A metabolism kinetic study in rabbit
Yu Min, et al
Abstract The drug-blood curve of oleanolic acid in rabbit body was determined by colorimetric method after the single dosage of Fuzheng oral liquid was qiven to rabbit. The metabolism kinetic rule of oleanolic acid in vivo was also studied by this method. It was showed that the metabolism of oleanolic acid in rabbit accorded with one-room pharmacokinetic model. And the main pharmacokinetic parameters were assayed.
, 百拇医药
Key words Fuzheng oral liquid; oleanolic acid; pharmacokinetic
我们已系列研究了扶正口服液的制备、质量标准、药理作用及药物稳定性等。经药效学研究证实，扶正口服液具有调整由于放疗、化疗后引起的菌群失调和免疫功能低下的作用。本文对口服单剂量扶正口服液后家兔血中齐墩果酸的血药浓度用比色法进行了监测，并据血药浓度曲线研究了齐墩果酸的药代动力学参数，为该药的开发及临床合理用药提供参考依据，现将研究结果报告如下。
1 材料和方法
1.1 仪器、试药
751G分光光度计，上海分析仪器厂；TGL-16G高速台式离心机，上海医用分析仪器厂；恒温水浴；上海器械五厂。齐墩果酸标准品(中国药品生物制品检定所提供709-8903)；扶正口服液(本试验组自制，批号950317)；氯仿(上海试剂一厂)；冰醋酸(沈阳化学试剂厂)；高氯酸(天津东方化工厂)；香草醛(远东化工试剂一厂)。以上试剂均为分析纯级。
, 百拇医药
1.2 实验动物
(2.5±0.5)kg健康家兔，雌雄兼用，由本院动物室提供。
1.3 标准曲线的制备[1]
精密称取干燥至恒重的齐墩果酸标准品10mg，置于10ml容量瓶中，加氯仿至刻度，得1mg/ml标准品溶液。用微量加样器，分别吸取20μl、40μl、60μl、80μl、140μl标准液于离心试管中，挥去溶剂，加1ml血清，加0.5ml醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.6)，加入25ml氯仿，充分振荡使混匀，呈乳化状态，离心(15000r/min)30min分离出上层水相，再次离心(15000r/min)20min，定量吸取分离出氯仿液2ml置于10ml容量瓶中，挥去溶剂，加5%香草醛-冰醋酸0.4ml，高氯酸1.6ml，70℃加热15min，冷却至室温，加冰醋酸8ml，以空白血清作对照，在547nm处测吸光度。以浓度-吸光度绘制标准曲线，求回归方程C=3.2292×102A+4.0688(r=0.9974、n=5)见图1。结果表明，齐墩果酸在20~140μg/ml符合比尔定律。由于截矩较小，实验中采用标准比较法定量。
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图1 齐墩果酸标准曲线
1.4 加样回收试验
分别取齐墩果酸标准液20μl、80μl、140μl于离心试管中，每样取6个，挥去溶剂，加1ml血清，加0.5ml醋酸-醋酸钠缓冲液(pH 3.6)再加入2.5ml氯仿萃取。以下按标准曲线项下处理。在547nm处测吸光度。用标准比较法计算测出量和回收率，结果见表1。
表1 方法回收率试验结果(n=6) 加入量(m g/ml)
测出量(m g/ml)
回收率(%)
平均回收率(%)
RSD(%)
, http://www.100md.com 20
20.43
102.15
80
79.89
99.86
100.25
1.73
140
138.25
98.25
1.5 动物实验方法
取健康家兔6只，体重(2.5±0.5)kg，雌雄不限，给药前禁食24h。灌胃给药，按体重给药200mg/kg(含齐墩果酸量)。在给药后0.25、0.5、1、1.5、2、3、4、5、6、8、10、12h自兔耳缘静脉分别取血样2.5ml，离心(15000r/min)10min，分离出1ml血清，待测。
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2 结果
2.1 齐墩果酸在动物体内的药时过程
将不同时刻的待测血清按标准曲线项下操作处理，在547nm处测吸光度，按标准比较法计算血药浓度。结果见表2和图2。
表2 齐墩果酸血药数据(n=6,
±s) t(h)C(m g/ml)
t(h)
C(m g/ml)
t(h)
C(m g/ml)
, 百拇医药
0.25
64.204±0.13
2
99.406±0.15
6
38.064±0.16
0.5
114.056±0.25
3
90.936±0.09
8
26.900±0.37
, 百拇医药
1
105.664±0.07
4
66.210±0.14
10
22.460±0.29
1.5
104.218±0.32
5
51.062±0.06
12
17.178±0.18
, http://www.100md.com
图2 扶正口服液中齐墩果酸血药浓度-时间曲线
2.2 齐墩果酸在动物体内的药代动力学参数
将血药浓度-时间数据用MCPKP程序处理，分别按一室、二室和三室模型进行模拟。获得(Akaike's Information criterion AIC)值和相关系数r。据AIC值最小和r值最大原则，判定齐墩果酸在家兔体内的药时过程符合一级吸收的一室模型。并求得其药代动力学参数，见表3。
表3 齐墩果酸在家兔体内的药代动力学参数 参数
单位
数值
±S
Co
, 百拇医药
μg/ml
130.5387
3.11072
Ka
h-1
6.75527
3.28024
K
h-1
0.18975
0.01238
T1/2
h
, 百拇医药
3.65218
Tp
h
0.69218
Cmax
μg/ml
116.52858
AUC
μg.mg/ml
687.96
3 讨论
扶正口服液作为微生态调节剂，调整由于放疗和化疗引起的菌群失调的作用是行之有效的[3]。采用比色法测定口服单剂量扶正口服液的血药浓度，回收率为100.25%，RSD为1.73%，其回归方程为C=3.2292×102A+4.0688(r=0.9974)。本法具有简便灵敏，专属性强的特点，可以用来监测该药的血药浓度，实验结果提出的药动力学参数，为临床合理用药提供了科学依据。
参考文献
1.于敏,谌艳玲,霍继明,等.薄层比色法对953口服液中齐墩果酸的含量测定.中国微生态学杂志,1996(5):8
2.张志荣,胡晓颖,将大义.银黄冲剂中黄芩甙在家兔体内的代谢动力学研究.中成药,1996(6):18
3.杨景云,于敏,李丽秋,等.中药903口服液作为微生态调节剂系列研究进展.中国微生态学杂志,1995;7(5):51
(1998-08-26收稿 1998-12-08修回), 百拇医药