漆大姑化学成分的初步研究1
作者：刘布鸣 陈荣光 蔡全玲
单位：刘布鸣(广西中医药研究所 530022 南宁市东葛路20—1号)；陈荣光(广西中医药研究所 530022 南宁市东葛路20—1号)；蔡全玲(广西中医药研究所 530022 南宁市东葛路20—1号)
关键词：漆大姑；没食子酸-3-甲基醚；没食子酸；分离鉴定▲
广西中医药000140 摘 要：目的：研究漆大姑植物Glochidion ericarpum Champ.的化学成分。方法：采用溶剂萃取和硅胶柱层析分离，光谱分析鉴定。结果：从该植物中分离出2个化合物，经MS，NMR，IR，UV，TLC等鉴定以及化学反应推断，确定为没食子酸-3-甲基醚(4，5-二羟基-3-甲氧基苯甲酸，4，5-dihydric-3-methoxy-benzoic acid)和没食子酸(gallic acid)。结论：二化合物均为主要成分之一，系从该植物中首次发现，为该植物的化学成分与质量标准研究提供了科学依据。
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漆大姑为大戟科植物毛果算盘子Glochidion eriocarpum Champ.的干燥地上部分，全年可采，具有驱风利湿、散瘀、止血、消肿的功效，主治急性胃肠炎、痢疾、风湿性关节痛、跌打损伤、创伤出血、湿疹、皮炎等〔1，2〕。该植物在广西资源丰富，分布广泛。《广西中药材标准》第二册1996年版首次将其作为地方习用中药材品种收载。漆大姑现代化学成分研究文献不多。已报道其含有酚类、鞣质类等成分〔1，3〕和三萜类化合物以及微量元素，在同属植物中，分离鉴定出算盘子酮醇、算盘子二醇和算盘子酮等三萜类化合物，为羽豆烷衍生物的三萜〔4～7〕以及一些三萜类化合物，可水解丹宁酸及其水解产物没食子酸和间苯三酚〔8～11〕。本文报道的没食子酸-3-甲基醚(4，5-二羟基-3-甲氧基苯甲酸，4，5-dihydric-3-methoxy-benzoic acid)和没食子酸(gallic acid)，均系在漆大姑植物中首次发现。据文献报道没食子酸及其衍生物均具有抗菌、抗肿瘤、抗氧化和抗乙肝病毒作用等活性〔12～16〕。
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1 仪器与试药
日本岛津IR-470型红外分光光度计；美 国PELambda 12型紫外分光光度计，美国Varian EM-360型核磁共振波谱仪；美国Varian INOVA-500 NB超导型核磁共振波谱仪；日本岛津QP-5000质谱仪。
实验用药材采自广西桂平县中和乡，经鉴定为漆大姑Glochidion eriocarpum Champ.；没食子酸对照品购自中国药品生物制品检定所。
2 提取与分离
取漆大姑(干燥)12kg，水煮2次，每次2h；过滤，合并滤液，浓缩至相对密度为1.20～1.28，加乙醇至含醇量为75%，放置沉淀；取溶液回收乙醇，用乙酸乙酯萃取数次，合并萃取液，回收乙酸乙酯，得乙酸乙酯萃取物120g；用石油醚回流洗涤，弃石油醚部分，用氯仿回流萃取；经氯仿回流后残余物56g，用硅胶柱层析分离，以氯仿-甲醇(甲醇以0%～20%递增)梯度洗脱，分部收集；用薄层色谱检查，相同部分合并，收集第26～31流份，第60～87流份，回收溶剂，得粗结晶；用氯仿-甲醇重结晶，得结晶1，2。
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3 鉴定
3.1 结晶1 白色针状结晶，m.p.219～223℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮，三氯化铁反应和溴酚蓝反应均阳性；UV(EtOH)nm:215，265，提示含有不饱和共轭体系；IR(KBr)cm-1：3420(s，-OH)，3290(s，-OH)，3055(m，Ar-H)，2930、2585(m，C-H)，1660(s，C=0)，1610(s)，1517(s)，1467(m，苯环)，1413，1349，1312(s，C-0)，1251(s，C-0)，1214，1109，1089，965，931，878(m，苯环1，3，4，5-四取代)，762，725，提示为芳香酚酸类：1HNMR〔(CD3)2CO〕δ ppm:3.86(s，3H，-OCH3)，7.19(s，1H，J=2，间位芳氢)，7.26(s，1H，J=2，间位芳氢)，7.99(br，1H，D2O交换消失，-OH)，8.18(br，1H，D2O交换消失，-OH)，8.48(br，1H，D2O交换消失，-COOH)；13CNMR〔(CD3)2CO〕，DEPT试验示有1个CH3，2个CH，5个季碳，用经验公式〔17〕计算化学位移值，计算值与实测值比较接近，13 CNMR数据及其归属见表1；MS(EI)m/z:184(M+，100)，169(M-CH3)，167(M-OH)，141，139(M-COOH)，123，113，95，79，67，51，44，39。以上数据证明结晶1为没食子酸-3-甲基醚(4，5-二羟基-3-甲氧基苯甲酸，4，5-dihydric-3-methoxy-benzoic acid)，此化合物在天然界非常少见，在漆大姑中尚属首次发现。
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表1 13CNMR数据及其归属(化学位移δ ppm) 实测值
计算值
归属
碳原子类型
56.4
C8
-OCH3
105.9
109.5
C2
=CH-
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111.8
110.7
C6
=CH-
121.8
125.9
C1
季碳
139.5
132.8
C4
季碳
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145.7
143.5
C5
季碳
148.4
147.3
C3
季碳
167.6
C7
-COOH
3.2 结晶2 白色针状结晶，m.p.248～252℃，溶于水、甲醇、乙醇、丙酮，三氯化铁反应和溴酚蓝反应均阳性。UV(EtOH)nm:215，266；IR(KBr)cm-1:3495(s，-OH)，3280(s，-OH)，3060、2655(w，羧酸缔合羟基)，1649(s，C＝O)，1614(s)，1545(m)，1452(m，苯环)，1325(s，C-O)，1220(s，C-O)，866(m，苯环1，3，4，5-四取代)；1HNMR〔(CD3)2CO〕δ ppm:4.33(br，4H，-OH×4)，7.18(s，2H，Ar-2H)；MS(EI)m/e:170(M+，100)，153(M-OH)，135，125(M-COOH)，113，107，96，79，51，45，39。与没食子酸对照品进行薄层对照，Rf值一致，各光谱数据与没食子酸对照品和文献值相符〔18〕。以上数据证明结晶2为没食子酸(Gallic acid)，在漆大姑中亦属首次发现。
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4 小结
本研究试验证明，没食子酸-3-甲基醚和没食子酸为漆大姑中主要成分之一，在《广西中药材标准》第二册1996年版中，对于漆大姑的鉴别除了显微鉴别外，仅有一理化鉴别，系酚性化合物的一般反应，专属性不强，因此可将没食子酸-3-甲基醚或没食子酸，做为该药材中的指标性成分进行薄层鉴别，使药材的鉴别方法能具有更高的选择性与专属性〔19〕。
广西中医药研究所仪器分析室代测IR，UV和1 HNMR，中山大学测试中心代测1 HNMR和13 HNMR，广西商检科研所田继军高级工程师代测MS，特此致谢。
①广西医药卫生科研课题(No.9521)
参考文献：
[1]江苏新医学院.中药大词典.下册.上海：上海人民出版社，1977.2574～2575.
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[2]冉先德.中华药海.哈尔滨：哈尔滨出版社，1993.2106～2107.
[3]广州市药品检验所.农村中草药制剂技术.北京：人民卫生出版社，1971.233.
[4]Hui W H,Li M M.Lupene triterpenoids from glochidion eriocarpum.Phytochemisty,1976,15(4):561.
[5]Koyama,M.Trace elements in land plants:concentration ranges and accumulators of race earths, farium, radium, manganese, iron, cofalt and heavy halogens. J.Radioanal Nucl.Chem, 1987,112(2):489.
, 百拇医药
[6]Hui W H,Fung M L. Isolation and structure of glochidonol:a new triterpene ketol from glochidionwrightii Benth.J.Chem,Soc,(C),1969.1710.
[7]Ganguly A K, Govindachari T R, Mohamed P.A, et al. Chemical constituents of glochidon hohenackeri. Tetrahedron, 1966,22:1513.
[8]Hui W H, Lee W K. Ng K K, et al. The occurrence of triterpenoids and sterpids in three glochidion species.Phytochemisty,1970,9:1009.
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[9]Hui W H, Lee W.K. Lup20(29)-ene-3a,23-diol:a new triterpen from glochidion macrophyllum benth. J. Chem, Soc.(C),1971.1004.
[10]Talapatra S.K, Bhattacharya S, Maiti BC, et al.Structure of glochidion:a new triterpenoid fromg lochidion multilocular:Natural occurrence of dimedone.Chemistry and Industry, 1973,3:1033.
[11]L.O.Chen, L.L.Yang,K.Y.Yen,et al. New hydrolyzable tannins having phloroglucinol residue from glochidion rubrum blume. Chem. Pharm. Bull,1995,43(12):2088.
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[12]国家医药管理局中草药情报中心站.植物药有效成分手册.北京：人民卫生出版社，1986.479.
[13]坂口菜朋子，贺玉琢译.没食子酸对体内细胞致死活性研究.国外医学.中医中药分册，1995，17(6)：39.
[14]胡素坤，李晓林，王少君，等.赤芍801抗肿瘤作用的实验研究.中医药学报，1990,5(3)：22.
[15]马 耀，张健中，丛建波，等.没食子酸及其衍生物抗氧化机制的研究.科学通报，1993，38(15)：1410.
[16]郑民实，孔庚星，张 鑫，等.没食子酸抗HBsAgHBeAg的实验研究.实用中医药杂志，1998，14(1)：5.
[17]于德泉，扬骏山，谢晶曦. 分析化学手册.第五分册.核磁共振波谱分析.北京：化学工业出版社，1989.466.
[18]袁阿兴，覃 凌.细叶野牡丹化学成分研究.中草药，1982，13(5)：12.
[19]刘布鸣，陈荣光.漆大姑中没食子酸的分离鉴定与薄层色谱鉴别.广西科学，1999，6(3)：203.
收稿日期：1999-08-02, 百拇医药
单位：刘布鸣(广西中医药研究所 530022 南宁市东葛路20—1号)；陈荣光(广西中医药研究所 530022 南宁市东葛路20—1号)；蔡全玲(广西中医药研究所 530022 南宁市东葛路20—1号)
关键词：漆大姑；没食子酸-3-甲基醚；没食子酸；分离鉴定▲
广西中医药000140 摘 要：目的：研究漆大姑植物Glochidion ericarpum Champ.的化学成分。方法：采用溶剂萃取和硅胶柱层析分离，光谱分析鉴定。结果：从该植物中分离出2个化合物，经MS，NMR，IR，UV，TLC等鉴定以及化学反应推断，确定为没食子酸-3-甲基醚(4，5-二羟基-3-甲氧基苯甲酸，4，5-dihydric-3-methoxy-benzoic acid)和没食子酸(gallic acid)。结论：二化合物均为主要成分之一，系从该植物中首次发现，为该植物的化学成分与质量标准研究提供了科学依据。
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漆大姑为大戟科植物毛果算盘子Glochidion eriocarpum Champ.的干燥地上部分，全年可采，具有驱风利湿、散瘀、止血、消肿的功效，主治急性胃肠炎、痢疾、风湿性关节痛、跌打损伤、创伤出血、湿疹、皮炎等〔1，2〕。该植物在广西资源丰富，分布广泛。《广西中药材标准》第二册1996年版首次将其作为地方习用中药材品种收载。漆大姑现代化学成分研究文献不多。已报道其含有酚类、鞣质类等成分〔1，3〕和三萜类化合物以及微量元素，在同属植物中，分离鉴定出算盘子酮醇、算盘子二醇和算盘子酮等三萜类化合物，为羽豆烷衍生物的三萜〔4～7〕以及一些三萜类化合物，可水解丹宁酸及其水解产物没食子酸和间苯三酚〔8～11〕。本文报道的没食子酸-3-甲基醚(4，5-二羟基-3-甲氧基苯甲酸，4，5-dihydric-3-methoxy-benzoic acid)和没食子酸(gallic acid)，均系在漆大姑植物中首次发现。据文献报道没食子酸及其衍生物均具有抗菌、抗肿瘤、抗氧化和抗乙肝病毒作用等活性〔12～16〕。
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1 仪器与试药
日本岛津IR-470型红外分光光度计；美 国PELambda 12型紫外分光光度计，美国Varian EM-360型核磁共振波谱仪；美国Varian INOVA-500 NB超导型核磁共振波谱仪；日本岛津QP-5000质谱仪。
实验用药材采自广西桂平县中和乡，经鉴定为漆大姑Glochidion eriocarpum Champ.；没食子酸对照品购自中国药品生物制品检定所。
2 提取与分离
取漆大姑(干燥)12kg，水煮2次，每次2h；过滤，合并滤液，浓缩至相对密度为1.20～1.28，加乙醇至含醇量为75%，放置沉淀；取溶液回收乙醇，用乙酸乙酯萃取数次，合并萃取液，回收乙酸乙酯，得乙酸乙酯萃取物120g；用石油醚回流洗涤，弃石油醚部分，用氯仿回流萃取；经氯仿回流后残余物56g，用硅胶柱层析分离，以氯仿-甲醇(甲醇以0%～20%递增)梯度洗脱，分部收集；用薄层色谱检查，相同部分合并，收集第26～31流份，第60～87流份，回收溶剂，得粗结晶；用氯仿-甲醇重结晶，得结晶1，2。
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3 鉴定
3.1 结晶1 白色针状结晶，m.p.219～223℃，溶于甲醇、乙醇、丙酮，三氯化铁反应和溴酚蓝反应均阳性；UV(EtOH)nm:215，265，提示含有不饱和共轭体系；IR(KBr)cm-1：3420(s，-OH)，3290(s，-OH)，3055(m，Ar-H)，2930、2585(m，C-H)，1660(s，C=0)，1610(s)，1517(s)，1467(m，苯环)，1413，1349，1312(s，C-0)，1251(s，C-0)，1214，1109，1089，965，931，878(m，苯环1，3，4，5-四取代)，762，725，提示为芳香酚酸类：1HNMR〔(CD3)2CO〕δ ppm:3.86(s，3H，-OCH3)，7.19(s，1H，J=2，间位芳氢)，7.26(s，1H，J=2，间位芳氢)，7.99(br，1H，D2O交换消失，-OH)，8.18(br，1H，D2O交换消失，-OH)，8.48(br，1H，D2O交换消失，-COOH)；13CNMR〔(CD3)2CO〕，DEPT试验示有1个CH3，2个CH，5个季碳，用经验公式〔17〕计算化学位移值，计算值与实测值比较接近，13 CNMR数据及其归属见表1；MS(EI)m/z:184(M+，100)，169(M-CH3)，167(M-OH)，141，139(M-COOH)，123，113，95，79，67，51，44，39。以上数据证明结晶1为没食子酸-3-甲基醚(4，5-二羟基-3-甲氧基苯甲酸，4，5-dihydric-3-methoxy-benzoic acid)，此化合物在天然界非常少见，在漆大姑中尚属首次发现。
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表1 13CNMR数据及其归属(化学位移δ ppm) 实测值
计算值
归属
碳原子类型
56.4
C8
-OCH3
105.9
109.5
C2
=CH-
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110.7
C6
=CH-
121.8
125.9
C1
季碳
139.5
132.8
C4
季碳
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145.7
143.5
C5
季碳
148.4
147.3
C3
季碳
167.6
C7
-COOH
3.2 结晶2 白色针状结晶，m.p.248～252℃，溶于水、甲醇、乙醇、丙酮，三氯化铁反应和溴酚蓝反应均阳性。UV(EtOH)nm:215，266；IR(KBr)cm-1:3495(s，-OH)，3280(s，-OH)，3060、2655(w，羧酸缔合羟基)，1649(s，C＝O)，1614(s)，1545(m)，1452(m，苯环)，1325(s，C-O)，1220(s，C-O)，866(m，苯环1，3，4，5-四取代)；1HNMR〔(CD3)2CO〕δ ppm:4.33(br，4H，-OH×4)，7.18(s，2H，Ar-2H)；MS(EI)m/e:170(M+，100)，153(M-OH)，135，125(M-COOH)，113，107，96，79，51，45，39。与没食子酸对照品进行薄层对照，Rf值一致，各光谱数据与没食子酸对照品和文献值相符〔18〕。以上数据证明结晶2为没食子酸(Gallic acid)，在漆大姑中亦属首次发现。
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本研究试验证明，没食子酸-3-甲基醚和没食子酸为漆大姑中主要成分之一，在《广西中药材标准》第二册1996年版中，对于漆大姑的鉴别除了显微鉴别外，仅有一理化鉴别，系酚性化合物的一般反应，专属性不强，因此可将没食子酸-3-甲基醚或没食子酸，做为该药材中的指标性成分进行薄层鉴别，使药材的鉴别方法能具有更高的选择性与专属性〔19〕。
广西中医药研究所仪器分析室代测IR，UV和1 HNMR，中山大学测试中心代测1 HNMR和13 HNMR，广西商检科研所田继军高级工程师代测MS，特此致谢。
①广西医药卫生科研课题(No.9521)
参考文献：
[1]江苏新医学院.中药大词典.下册.上海：上海人民出版社，1977.2574～2575.
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[2]冉先德.中华药海.哈尔滨：哈尔滨出版社，1993.2106～2107.
[3]广州市药品检验所.农村中草药制剂技术.北京：人民卫生出版社，1971.233.
[4]Hui W H,Li M M.Lupene triterpenoids from glochidion eriocarpum.Phytochemisty,1976,15(4):561.
[5]Koyama,M.Trace elements in land plants:concentration ranges and accumulators of race earths, farium, radium, manganese, iron, cofalt and heavy halogens. J.Radioanal Nucl.Chem, 1987,112(2):489.
, 百拇医药
[6]Hui W H,Fung M L. Isolation and structure of glochidonol:a new triterpene ketol from glochidionwrightii Benth.J.Chem,Soc,(C),1969.1710.
[7]Ganguly A K, Govindachari T R, Mohamed P.A, et al. Chemical constituents of glochidon hohenackeri. Tetrahedron, 1966,22:1513.
[8]Hui W H, Lee W K. Ng K K, et al. The occurrence of triterpenoids and sterpids in three glochidion species.Phytochemisty,1970,9:1009.
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[9]Hui W H, Lee W.K. Lup20(29)-ene-3a,23-diol:a new triterpen from glochidion macrophyllum benth. J. Chem, Soc.(C),1971.1004.
[10]Talapatra S.K, Bhattacharya S, Maiti BC, et al.Structure of glochidion:a new triterpenoid fromg lochidion multilocular:Natural occurrence of dimedone.Chemistry and Industry, 1973,3:1033.
[11]L.O.Chen, L.L.Yang,K.Y.Yen,et al. New hydrolyzable tannins having phloroglucinol residue from glochidion rubrum blume. Chem. Pharm. Bull,1995,43(12):2088.
, http://www.100md.com
[12]国家医药管理局中草药情报中心站.植物药有效成分手册.北京：人民卫生出版社，1986.479.
[13]坂口菜朋子，贺玉琢译.没食子酸对体内细胞致死活性研究.国外医学.中医中药分册，1995，17(6)：39.
[14]胡素坤，李晓林，王少君，等.赤芍801抗肿瘤作用的实验研究.中医药学报，1990,5(3)：22.
[15]马 耀，张健中，丛建波，等.没食子酸及其衍生物抗氧化机制的研究.科学通报，1993，38(15)：1410.
[16]郑民实，孔庚星，张 鑫，等.没食子酸抗HBsAgHBeAg的实验研究.实用中医药杂志，1998，14(1)：5.
[17]于德泉，扬骏山，谢晶曦. 分析化学手册.第五分册.核磁共振波谱分析.北京：化学工业出版社，1989.466.
[18]袁阿兴，覃 凌.细叶野牡丹化学成分研究.中草药，1982，13(5)：12.
[19]刘布鸣，陈荣光.漆大姑中没食子酸的分离鉴定与薄层色谱鉴别.广西科学，1999，6(3)：203.
收稿日期：1999-08-02, 百拇医药