复方田七胃痛胶囊质量控制方法的研究
作者：陈勇
单位：陈勇(广西中医学院 530001 南宁市明秀东路21号)
关键词：复方田七胃痛胶囊；延胡索乙素；三七；薄层扫描法▲
广西中医药000141 复方田七胃痛胶囊由三七、 延胡索、甘草等9味中药组成， 功能理气化瘀、温中健脾、 收敛止血。用于胃酸过多、 胃痛、 胃溃疡、 十二指肠球部溃疡及慢性胃炎等。该药原标准(卫生部颁标准)仅收载显微鉴别及枯矾等的化学鉴别。为完善该药的质量控制方法，采用薄层层析法对该药中三七、延胡索进行定性鉴别，并用薄层扫描法测定其中延胡索乙素的含量，报道如下：
1 实验材料
C S-9000双波长薄层扫描仪(日本岛津)；PBQ-I型薄层自动铺板器(重庆)；定容点样毛细管(USA.Drummand Scientific Co.)。
, http://www.100md.com
延胡索、三七等对照药材均购自南宁市医药总公司，并经本院药学系何报作教授鉴定均为中国药典1995年版一部收载品种，延胡索乙素由中国药品生物制品检定所提供；复方田七胃痛胶囊购自南宁市医药总公司，桂林三金药业集团公司生产；薄层用硅胶G由青岛海洋化工厂生产；所用试剂均为分析纯。
2 薄层鉴别
2.1 三七的鉴别
2.1.1 对照药材溶液制备 取三七对照药材粗粉1g，参照文献〔1〕制备即得。
2.1.2 供试品溶液制备 取复方田七胃痛胶囊10粒，将内容物加水约1ml，搅匀，再加水饱和的正丁醇20ml，按“2.1.1”对照药材溶液制备方法处理即得。
2.1.3 阴性对照液制备 按处方标示比例取除去三七以外的其余各药，按“2.1.1”对照药材溶液制备方法处理即得。
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2.1.4 薄层层析〔1〕 取上述3种溶液各10μl，点样于同一块硅胶G CMC-Na层析板上，按文献〔1〕方法进行展开、显色，结果见图1。
图1三七TLC色谱图
1.供试品
2.三七对照药材
3.阴性对照
2.2 延胡索的鉴别
2.2.1 对照药材溶液制备 取延胡索对照药材粗粉1g，加氨水2ml湿润15min后，加乙醚30ml浸泡过夜，滤过，滤液水浴挥干溶剂，残渣加甲醇2ml使溶解，即得。
, http://www.100md.com 2.2.2 对照品溶液制备 取延胡索乙素对照品适量制成0.2mg/ml甲醇溶液，即得。
2.2.3 供试品溶液制备 取复方田七胃痛胶囊10粒，将内容 物加3ml浓氨水湿润15min后，加乙醚30ml浸 泡过夜，余按“2.1.1”对照药材溶液制备方法处理即得。
2.2.4 阴性对照溶液制备 按处方比例取除去延胡索以外的其余各药材，按“2.1.1”对照药材溶液制备方法处理即得。
2.2.5 薄层层析〔2〕 取上述4种溶液各5～10μl，分别点样于同一块硅胶G CMC-Na层析板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(2∶1.7)为展开剂，展距10cm，取出晾干，喷以改良碘化铋钾试液，供试品色谱在与对照药材及对照品色谱相应位置上显相同颜色的斑点，结果见图2。
, 百拇医药
图2 延胡索T LC
色谱图
1.供试品
2.延胡索对照药材
3.延胡索乙素
4.阴性对照
3 含量测定
3.1 对照品溶液制备 精密称取延胡索乙素对照品2.1mg，置10ml量瓶中，加甲醇适量使溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀即得。
3.2 供试品溶液制备 取复方田七胃痛胶囊20粒，将内容物置索氏提取器中，加氨水2ml湿润15min后，加氯仿回流提取4h，提取液回收溶剂，水浴挥干溶剂，残渣加无水乙醇适量使溶解，并定容于2ml量瓶中，摇匀即得。
, 百拇医药
3.3 层析与扫描条件 分别吸取上述2种溶液适量点于同一块硅胶G CMC-Na层析板上，按“2.2.5”项下层析条件展开，显色后在上面覆盖一块同样大小的玻璃板，四周用胶布密封，对延胡索乙素斑点进行光谱扫描测定，选取测定波长λS＝510nm，参比波长λR＝650nm，反射式锯齿形扫描，SX＝3。
3.4 线性关系考察 用定容点样毛细管分别吸取延胡索乙素对照品溶液2.0，3.0，4.0，5.0和6.0μl，点样于同一块硅胶G CMC-Na层析板上，按上述层析条件展开，显色定位后，在上面覆盖一块同样大小的玻璃板，四周用胶布密封，按上述扫描条件进行测定，以点样量(μg)为横坐标，斑点峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。结果表明点样量在0.42～1.26μg间与斑点峰面积呈良好线性关系，回归方程为Y＝95 111.3X+20 990.6，r＝0.9986。
3.5 稳定性考察 经测定同一块薄层板上斑点峰面积，每隔30min扫描测定1次，表明在4h内斑点峰面积值基本保持稳定，RSD=1.25%(n=3)。
, 百拇医药
3.6 精密度试验 仪器精密度RSD=0.49%(n=6)；同板精密度RSD=1.07%(n=6)，异板精密度RSD=1.64%(n=5)。
3.7 样品测定 精密吸取供试液10μl，延胡索乙素对照品溶液2μl和3μl，分别点样于同一块硅胶G CMC-Na层析板上，按“3.4”项下方法进行测定，用外标二点法计算样品中延胡索乙素的含量，结果见表1。
表1 样品含量测定结果 (n=5) 批号
延胡索乙素平均含量
(mg/g，
)
RSD%
970603
, 百拇医药
0.056
1.45
970606
0.079
1.07
970802
0.044
1.86
970825
0.062
1.27
970907
0.074
, 百拇医药
1.16
3.8 加样回收试验 精密称取已知含量的样品5份，精密加入延胡索乙素对照品溶液适量，按“3.2”项下方法制成加样回收溶液，再按上述样品测定项下方法测定，测得平均回收率
=97.68%，RSD=0.44% (n=5)。
4 讨论
4.1 本品由多味中药组成，成分复杂，经实验摸索，以本文所用展开系统层析效果较为理想，能使被测成分斑点分离效果好，共存成分干扰少，测定结果也较稳定。
4.2 延胡索乙素为异喹啉类生物碱，长时间受热，光照，可被氧化为巴马汀，故采用氨水湿润碱化后，用氯仿回流提取，提取时水浴温度宜控制在80℃以下，防止受热而氧化破坏，回流提取4h即可提取完全。
(编辑：王健华)■
我系98届实习生韩 斌同学参加部分研究工作，谨致谢忱。
参考文献：
[1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典.1995年版一部.广州：广东科学技术出版社，1995.8～9.
[2]康廷国.中成药薄层色谱鉴别.北京：人民卫生出版社，1995.57.
收稿日期：1999-07-19, 百拇医药
单位：陈勇(广西中医学院 530001 南宁市明秀东路21号)
关键词：复方田七胃痛胶囊；延胡索乙素；三七；薄层扫描法▲
广西中医药000141 复方田七胃痛胶囊由三七、 延胡索、甘草等9味中药组成， 功能理气化瘀、温中健脾、 收敛止血。用于胃酸过多、 胃痛、 胃溃疡、 十二指肠球部溃疡及慢性胃炎等。该药原标准(卫生部颁标准)仅收载显微鉴别及枯矾等的化学鉴别。为完善该药的质量控制方法，采用薄层层析法对该药中三七、延胡索进行定性鉴别，并用薄层扫描法测定其中延胡索乙素的含量，报道如下：
1 实验材料
C S-9000双波长薄层扫描仪(日本岛津)；PBQ-I型薄层自动铺板器(重庆)；定容点样毛细管(USA.Drummand Scientific Co.)。
, http://www.100md.com
延胡索、三七等对照药材均购自南宁市医药总公司，并经本院药学系何报作教授鉴定均为中国药典1995年版一部收载品种，延胡索乙素由中国药品生物制品检定所提供；复方田七胃痛胶囊购自南宁市医药总公司，桂林三金药业集团公司生产；薄层用硅胶G由青岛海洋化工厂生产；所用试剂均为分析纯。
2 薄层鉴别
2.1 三七的鉴别
2.1.1 对照药材溶液制备 取三七对照药材粗粉1g，参照文献〔1〕制备即得。
2.1.2 供试品溶液制备 取复方田七胃痛胶囊10粒，将内容物加水约1ml，搅匀，再加水饱和的正丁醇20ml，按“2.1.1”对照药材溶液制备方法处理即得。
2.1.3 阴性对照液制备 按处方标示比例取除去三七以外的其余各药，按“2.1.1”对照药材溶液制备方法处理即得。
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2.1.4 薄层层析〔1〕 取上述3种溶液各10μl，点样于同一块硅胶G CMC-Na层析板上，按文献〔1〕方法进行展开、显色，结果见图1。
图1三七TLC色谱图
1.供试品
2.三七对照药材
3.阴性对照
2.2 延胡索的鉴别
2.2.1 对照药材溶液制备 取延胡索对照药材粗粉1g，加氨水2ml湿润15min后，加乙醚30ml浸泡过夜，滤过，滤液水浴挥干溶剂，残渣加甲醇2ml使溶解，即得。
, http://www.100md.com 2.2.2 对照品溶液制备 取延胡索乙素对照品适量制成0.2mg/ml甲醇溶液，即得。
2.2.3 供试品溶液制备 取复方田七胃痛胶囊10粒，将内容 物加3ml浓氨水湿润15min后，加乙醚30ml浸 泡过夜，余按“2.1.1”对照药材溶液制备方法处理即得。
2.2.4 阴性对照溶液制备 按处方比例取除去延胡索以外的其余各药材，按“2.1.1”对照药材溶液制备方法处理即得。
2.2.5 薄层层析〔2〕 取上述4种溶液各5～10μl，分别点样于同一块硅胶G CMC-Na层析板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(2∶1.7)为展开剂，展距10cm，取出晾干，喷以改良碘化铋钾试液，供试品色谱在与对照药材及对照品色谱相应位置上显相同颜色的斑点，结果见图2。
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图2 延胡索T LC
色谱图
1.供试品
2.延胡索对照药材
3.延胡索乙素
4.阴性对照
3 含量测定
3.1 对照品溶液制备 精密称取延胡索乙素对照品2.1mg，置10ml量瓶中，加甲醇适量使溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀即得。
3.2 供试品溶液制备 取复方田七胃痛胶囊20粒，将内容物置索氏提取器中，加氨水2ml湿润15min后，加氯仿回流提取4h，提取液回收溶剂，水浴挥干溶剂，残渣加无水乙醇适量使溶解，并定容于2ml量瓶中，摇匀即得。
, 百拇医药
3.3 层析与扫描条件 分别吸取上述2种溶液适量点于同一块硅胶G CMC-Na层析板上，按“2.2.5”项下层析条件展开，显色后在上面覆盖一块同样大小的玻璃板，四周用胶布密封，对延胡索乙素斑点进行光谱扫描测定，选取测定波长λS＝510nm，参比波长λR＝650nm，反射式锯齿形扫描，SX＝3。
3.4 线性关系考察 用定容点样毛细管分别吸取延胡索乙素对照品溶液2.0，3.0，4.0，5.0和6.0μl，点样于同一块硅胶G CMC-Na层析板上，按上述层析条件展开，显色定位后，在上面覆盖一块同样大小的玻璃板，四周用胶布密封，按上述扫描条件进行测定，以点样量(μg)为横坐标，斑点峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。结果表明点样量在0.42～1.26μg间与斑点峰面积呈良好线性关系，回归方程为Y＝95 111.3X+20 990.6，r＝0.9986。
3.5 稳定性考察 经测定同一块薄层板上斑点峰面积，每隔30min扫描测定1次，表明在4h内斑点峰面积值基本保持稳定，RSD=1.25%(n=3)。
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3.6 精密度试验 仪器精密度RSD=0.49%(n=6)；同板精密度RSD=1.07%(n=6)，异板精密度RSD=1.64%(n=5)。
3.7 样品测定 精密吸取供试液10μl，延胡索乙素对照品溶液2μl和3μl，分别点样于同一块硅胶G CMC-Na层析板上，按“3.4”项下方法进行测定，用外标二点法计算样品中延胡索乙素的含量，结果见表1。
表1 样品含量测定结果 (n=5) 批号
延胡索乙素平均含量
(mg/g，
)RSD%
970603
, 百拇医药
0.056
1.45
970606
0.079
1.07
970802
0.044
1.86
970825
0.062
1.27
970907
0.074
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1.16
3.8 加样回收试验 精密称取已知含量的样品5份，精密加入延胡索乙素对照品溶液适量，按“3.2”项下方法制成加样回收溶液，再按上述样品测定项下方法测定，测得平均回收率
=97.68%，RSD=0.44% (n=5)。4 讨论
4.1 本品由多味中药组成，成分复杂，经实验摸索，以本文所用展开系统层析效果较为理想，能使被测成分斑点分离效果好，共存成分干扰少，测定结果也较稳定。
4.2 延胡索乙素为异喹啉类生物碱，长时间受热，光照，可被氧化为巴马汀，故采用氨水湿润碱化后，用氯仿回流提取，提取时水浴温度宜控制在80℃以下，防止受热而氧化破坏，回流提取4h即可提取完全。
(编辑：王健华)■
我系98届实习生韩 斌同学参加部分研究工作，谨致谢忱。
参考文献：
[1]中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典.1995年版一部.广州：广东科学技术出版社，1995.8～9.
[2]康廷国.中成药薄层色谱鉴别.北京：人民卫生出版社，1995.57.
收稿日期：1999-07-19, 百拇医药