当归四逆加吴茱萸生姜汤和关木通肾毒性研究
作者：马红梅 张伯礼 徐宗佩 孙静美 李苓 史红 王同胜 王津生 戴品忠 杜文复
单位：300193 天津中医学院
关键词：
天津中医00140
中图分类号：R285.1 文献标识码：A 文章编号：1004-5392(2000)01-0056-01
为揭示当归四逆加吴茱萸生姜汤和关木通肾毒性本质，指导临床，安全用药，笔者进行了以下研究：
1 对比进行当归四逆加吴茱萸生姜汤(KM-38)新旧两方及其五味组成药物关木通、八月扎茎、桂枝、吴茱萸、细辛短期肾毒性实验，判断其是否有肾毒性，进而确定引起肾毒性的药物和剂量。
, 百拇医药 小鼠随机分为9组：1)当归四逆加吴茱萸生姜汤新方组，2)当归四逆加吴茱萸生姜汤旧方组，3)关木通组，4)桂枝组，5)细辛组，6)吴茱萸组，7)八月扎茎低剂量组，8)八月扎茎高剂量组，9)阴性对照组。每日灌胃1次，剂量依次为：1)30g/kg，2)30g/kg，3)9g/kg，4)9g/kg，5)6g/kg，6)6g/kg，7)9g/kg，8)18g/kg，9)等量蒸馏水。结果显示：连续灌胃7日后，关木通组体重明显减轻，(P<0.01)，并出现蛋白尿和尿糖；当归四逆加吴茱萸生姜汤旧方组体重增长缓慢(P<0.05)，也出现蛋白尿，但未见尿糖；关木通组和旧方组均可见肾小管上皮细胞变性、脱落，间质血管瘀血，肾小球基本正常或有轻度基膜皱缩，以关木通组病变最重。其余各组体重均呈正常上升变化，未出现蛋白尿、尿糖及肾组织病变。各组血红蛋白(HGB)、血肌酐(SCR)、尿素氮(BUN)、血尿酸(UA)、血尿β2-微球蛋白(β2-MG)、尿N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶(NAG)均在正常范围。提示：关木通可能具有肾毒性，含关木通的旧方也有相同的肾毒性趋势；八月扎茎及含八月扎茎的新方未见肾毒性反应。因此当归四逆加吴茱萸生姜汤中用八月扎茎可能比用关木通更安全。
, 百拇医药
2 建立体外培养牛肾成纤维细胞模型，分别观察关木通主要毒性成分马兜铃酸的溶液和马兜铃酸鼠血清对牛肾成纤维细胞的毒性影响；并进一步采用高效液相色谱法检测马兜铃酸鼠血清中马兜铃酸及其代谢产物的含量，旨在探明关木通真正的肾毒性成分及其确切作用位点，从而逐步揭示关木通肾毒性机制的本质。
依据国外报道培养并鉴定体外牛肾成纤维细胞，采用MTT法(四唑盐比色试验)连续3天测定AA溶液及AA鼠血清对牛肾成纤维细胞生长的影响。结果表明：马兜铃酸溶液在实验浓度范围内(10μg/ml以下)，对体外培养牛肾成纤维细胞的生长无显著影响(P>0.05)；而加入不同时相AA鼠血清后，第2天时，牛肾成纤维细胞的生长受到明显抑制(P<0.05)，且各血药组间无显著差别(P>0.05)。
采用高效液相色谱法(HPLC)检测马兜铃酸鼠血清中马兜铃酸及其代谢产物的含量，结果显示：样品中含有马兜铃酸I(AristolochicacidI,AAI)、马兜铃酸II(AristolochicacidII,AAII)和马兜铃内酰胺I(AristololactamI)。其中AAI含量最高，血药浓度呈递减趋势；AAII含量最低，且血药浓度波动；而马兜铃内酰胺I血药浓度在一定时间内相对稳定。提示：不同时相马兜铃酸鼠血清对肾成纤维细胞的持续抑制可能与血药浓度相对稳定的马兜铃酸代谢产物马兜铃内酰胺I有关。因此关木通真正的肾毒性成分可能是其固有的和马兜铃酸体内代谢生成的马兜铃内酰胺，而不是马兜铃酸本身。肾毒性的作用位点可能并非局限于肾小管上皮细胞，至少还有肾间质成纤维细胞。
, http://www.100md.com
3 通过临床监测经辨证在常规剂量下短期服用当归四逆加吴茱萸生姜汤颗粒剂(KM-38旧方)的病人，于服药前后体重、血压、血红蛋白及肾功能特别是尿中低分子量蛋白的变化，判断其是否发生肾毒性反应，以便指导临床安全用药。
结果显示：10例病人经辨证在常规剂量下短期服用当归四逆加吴茱萸生姜汤颗粒剂(KM-38旧方)后，体重、血压、血红蛋白及肾功能各项指标均未见异常(P>0.05)。提示：在药典规定的剂量下短期辨证服用关木通制剂KM-38旧方，未见肾毒性反应，因此，关木通的肾毒性可能与超量、长期、不辨证服用有关。
4 古今木通名实不一，品种混淆，也是造成关木通中毒的重要原因。进行历代木通名实的本草学考证和现时木通品种的生药学比较，结果发现：《伤寒论》当归四逆加吴茱萸汤中的通草应为木通科木通，而改用马兜铃科关木通为误。木通科木通利尿作用好且毒性最低，临床宜恢复做正品木通使用；而马兜铃科关木通毒性最大，临床应慎用。
综上所述，笔者认为：木通科木通比马兜铃科关木通服用更安全，中国药典宜收入本品，并推广全国及出口使用。强调临床服用中药，必须首先辨证并早期监测，避免肾毒性发生。
天津市科委自然科学基金项目(编号983609311)
(收稿日期：1999-12-10), 百拇医药
单位：300193 天津中医学院
关键词：
天津中医00140
中图分类号：R285.1 文献标识码：A 文章编号：1004-5392(2000)01-0056-01
为揭示当归四逆加吴茱萸生姜汤和关木通肾毒性本质，指导临床，安全用药，笔者进行了以下研究：
1 对比进行当归四逆加吴茱萸生姜汤(KM-38)新旧两方及其五味组成药物关木通、八月扎茎、桂枝、吴茱萸、细辛短期肾毒性实验，判断其是否有肾毒性，进而确定引起肾毒性的药物和剂量。
, 百拇医药 小鼠随机分为9组：1)当归四逆加吴茱萸生姜汤新方组，2)当归四逆加吴茱萸生姜汤旧方组，3)关木通组，4)桂枝组，5)细辛组，6)吴茱萸组，7)八月扎茎低剂量组，8)八月扎茎高剂量组，9)阴性对照组。每日灌胃1次，剂量依次为：1)30g/kg，2)30g/kg，3)9g/kg，4)9g/kg，5)6g/kg，6)6g/kg，7)9g/kg，8)18g/kg，9)等量蒸馏水。结果显示：连续灌胃7日后，关木通组体重明显减轻，(P<0.01)，并出现蛋白尿和尿糖；当归四逆加吴茱萸生姜汤旧方组体重增长缓慢(P<0.05)，也出现蛋白尿，但未见尿糖；关木通组和旧方组均可见肾小管上皮细胞变性、脱落，间质血管瘀血，肾小球基本正常或有轻度基膜皱缩，以关木通组病变最重。其余各组体重均呈正常上升变化，未出现蛋白尿、尿糖及肾组织病变。各组血红蛋白(HGB)、血肌酐(SCR)、尿素氮(BUN)、血尿酸(UA)、血尿β2-微球蛋白(β2-MG)、尿N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶(NAG)均在正常范围。提示：关木通可能具有肾毒性，含关木通的旧方也有相同的肾毒性趋势；八月扎茎及含八月扎茎的新方未见肾毒性反应。因此当归四逆加吴茱萸生姜汤中用八月扎茎可能比用关木通更安全。
, 百拇医药
2 建立体外培养牛肾成纤维细胞模型，分别观察关木通主要毒性成分马兜铃酸的溶液和马兜铃酸鼠血清对牛肾成纤维细胞的毒性影响；并进一步采用高效液相色谱法检测马兜铃酸鼠血清中马兜铃酸及其代谢产物的含量，旨在探明关木通真正的肾毒性成分及其确切作用位点，从而逐步揭示关木通肾毒性机制的本质。
依据国外报道培养并鉴定体外牛肾成纤维细胞，采用MTT法(四唑盐比色试验)连续3天测定AA溶液及AA鼠血清对牛肾成纤维细胞生长的影响。结果表明：马兜铃酸溶液在实验浓度范围内(10μg/ml以下)，对体外培养牛肾成纤维细胞的生长无显著影响(P>0.05)；而加入不同时相AA鼠血清后，第2天时，牛肾成纤维细胞的生长受到明显抑制(P<0.05)，且各血药组间无显著差别(P>0.05)。
采用高效液相色谱法(HPLC)检测马兜铃酸鼠血清中马兜铃酸及其代谢产物的含量，结果显示：样品中含有马兜铃酸I(AristolochicacidI,AAI)、马兜铃酸II(AristolochicacidII,AAII)和马兜铃内酰胺I(AristololactamI)。其中AAI含量最高，血药浓度呈递减趋势；AAII含量最低，且血药浓度波动；而马兜铃内酰胺I血药浓度在一定时间内相对稳定。提示：不同时相马兜铃酸鼠血清对肾成纤维细胞的持续抑制可能与血药浓度相对稳定的马兜铃酸代谢产物马兜铃内酰胺I有关。因此关木通真正的肾毒性成分可能是其固有的和马兜铃酸体内代谢生成的马兜铃内酰胺，而不是马兜铃酸本身。肾毒性的作用位点可能并非局限于肾小管上皮细胞，至少还有肾间质成纤维细胞。
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3 通过临床监测经辨证在常规剂量下短期服用当归四逆加吴茱萸生姜汤颗粒剂(KM-38旧方)的病人，于服药前后体重、血压、血红蛋白及肾功能特别是尿中低分子量蛋白的变化，判断其是否发生肾毒性反应，以便指导临床安全用药。
结果显示：10例病人经辨证在常规剂量下短期服用当归四逆加吴茱萸生姜汤颗粒剂(KM-38旧方)后，体重、血压、血红蛋白及肾功能各项指标均未见异常(P>0.05)。提示：在药典规定的剂量下短期辨证服用关木通制剂KM-38旧方，未见肾毒性反应，因此，关木通的肾毒性可能与超量、长期、不辨证服用有关。
4 古今木通名实不一，品种混淆，也是造成关木通中毒的重要原因。进行历代木通名实的本草学考证和现时木通品种的生药学比较，结果发现：《伤寒论》当归四逆加吴茱萸汤中的通草应为木通科木通，而改用马兜铃科关木通为误。木通科木通利尿作用好且毒性最低，临床宜恢复做正品木通使用；而马兜铃科关木通毒性最大，临床应慎用。
综上所述，笔者认为：木通科木通比马兜铃科关木通服用更安全，中国药典宜收入本品，并推广全国及出口使用。强调临床服用中药，必须首先辨证并早期监测，避免肾毒性发生。
天津市科委自然科学基金项目(编号983609311)
(收稿日期：1999-12-10), 百拇医药