被覆银导尿管体外杀菌效力试验分析
作者：张萍 姜培齐 张建 吴雪红
单位：张萍(宁夏医学院附属医院，宁夏 银川 750004)；姜培齐(宁夏医学院附属医院，宁夏 银川 750004)；张建(宁夏银川市铁路卫生防疫站，宁夏 银川 750011)；吴雪红(宁夏自治区妇幼保健院，宁夏 银川 750001)
关键词：尿道；导管；留置；银；细菌
宁夏医学杂志001002
【摘要】 目的 采用医用橡胶导尿管被覆银后观察对ATCC 25922大肠埃希氏菌、ATCC 25923金黄色葡萄球菌、ATCC 27853绿脓假单胞菌和ATCC 9372枯草杆菌黑色变种的体外杀菌作用。方法 将1×105/ml菌悬液与剪成2cm长的表面被覆有含1mg金属银的医用橡胶导尿管接触，在8个时间梯度分别吸取菌悬液做菌落计数，同时用5% 脱纤维羊血吸附残留银成份后，在摄氏35℃的温度下培养24小时，观察细菌生长结果。结果 被覆银导尿管对大肠埃希氏菌、绿脓假单胞菌和金黄色葡萄球菌具有很强的杀灭作用，且存在着一定的浓度、时间量效关系，对枯草杆菌黑色变种芽胞的杀灭效果不理想。结论 被覆银导尿管具有较高的临床应用价值，留置导尿管在3天以上的病人，可减少长期留置普通导尿管引起泌尿道感染所带来的痛苦。
, http://www.100md.com
【中图分类号】 R117 【文献标识码】 A
文章编号：1001-5949(2000)10-0580-02
Analysis of the experiment results of bactericidal power of silver-covered urinary catheter
ZHANG Ping，JIANG Pei-qi，ZHANG Jian，et al.
(The Affiliated Hosp.of Ningxia Med.Coll.， Yinchuan 750004，China)
【Abstract】 Objectives The aim of this experiment is to test the bactericidal power outside of the human body of silver-covered urinary catheter with killing ATC 25922 Escherichia coli，ACTT 25923 Staphylococcus aureus，ACTT 27853 Pseudomonas aeruginosa and ATCC 9372 Bacillus subtilis.Methods Put 2 centimeters silver-covered urinary catheter that contains with 1mg silver per square centimeters in bacterial suspensions of the four kinds bacteria mentioned above.The next step is to do a colony count at 8 time gradient.At the same time，incubate the four bacteria for 24 hours at the temperature of 35 centigrade after residual sliver was absorbed by 5 per cent defibrinated sheep blood.Results With the exception of ATCC 9372 Bacillus subtitles，the bactericidal power of silver-covered urinary catheter with killing ATCC 25922 Escherichia coli，ACTT 25923 Staphylococcus aureus，ACTT 27853 Pseudomonas aeruginosa is great，and there is a correlation existence between the concentration and time effect.Conclusions The silver-covered urinary catheter will be of great value to use in clinical work，especially for those patients who have to have an indwelling catheter for more than three days.Using silver-covered urinary catheter not only decreases the suffering of patients resulting from secondary urinary tract infections using common urinary catheters for more than three days，but alsosave the expenditure of hospitalization.
, 百拇医药
【Key words】 Urinary；Catheters，indwelling；Silver；Bacteria
医院内感染不仅给病人造成了痛苦，同时也造成卫生资源的巨大浪费。据报道，医院内发生的感染，约40%与泌尿系统有关[1]。留置导尿管3天以上，90%以上的病人会发生菌尿症[2]。近年来，许多实验室相继报道银可以灭活细菌繁殖体。我们将金属银被覆到普通医用橡胶导尿管的表面，并对被覆银导尿管进行体外杀菌效力的测定。现将实验结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验菌株：ATCC 25922大肠埃希氏菌；ATCC 25923金黄色葡萄球菌；ATCC 27853绿脓假单胞菌；ATCC 9372枯草杆菌黑色变种。
, 百拇医药
1.1.2 培养基：营养肉汤、营养琼脂、5%血琼脂平皿。配制方法严格按照《卫生部消毒技术规范(1991.12)》进行。
1.1.3 制备细菌悬液：严格按照《卫生部消毒技术规范(1991.12)》用ATCC 25922大肠埃希氏菌、ATCC 25923金黄色葡萄球菌、ATCC 27853绿脓假单胞菌和ATCC 9372枯草杆菌黑色变种四种标准菌株的24小时新分离物，用光电比浊法配制1×105/ml菌悬液。
1.1.4 制备兔血清细菌悬液：分别制备含1×105/ml ATCC 25922大肠埃希氏菌、ATCC 27853绿脓假单胞菌菌悬液的10%兔血清。将医用橡胶导尿管的表面被覆金属银，含银量为1mg/cm2。制备5%脱纤维羊血用以吸附被覆银橡胶导管上残留的银消毒成份。
1.2 方法
, 百拇医药
1.2.1 杀菌能力定量试验：分别将2cm长被覆银导尿管放入配制好的1×105/ml菌悬液中，在10、30、60分钟、2、3、4、5、16小时吸取菌悬液做菌落计数。用普通导尿管作为对照，同时做对照平皿活菌计数，计算不同时间杀菌率，每一时间平行试验3份。
1.2.2 杀菌能力定性试验：用配制好的1×105/ml菌悬液与2cm长被覆银橡胶导尿管与相应菌株接触，每一菌株做8个时间梯度(10分钟、30分钟、60分钟、2小时、3小时、4小时、5小时、16小时)，每一梯度平行3次试验 。用5%脱纤维羊血以吸附被覆银橡胶导管上残留的银消毒成份，在35℃的温度下培养24小时，观察细菌生长结果。同时，用普通导尿管作为对照组，进行对比试验。
1.2.3 有机物影响试验：分别将2cm长被覆银导尿放入配制好的含1×105/ ml菌悬液的10%兔血清中，在10、30、60、120分钟吸取菌悬液做菌落计数。
, 百拇医药
2 结果
2.1 被覆银导尿管杀菌能力定量试验结果：被覆银橡胶导尿管与1×105/ ml菌悬液接触30分钟后，对大肠埃希氏菌、绿脓假单胞菌的杀灭效果达到了100%；对金黄色葡萄球菌的杀灭率在接触60分钟后达到100%；对枯草杆菌黑色变种芽胞有一定的杀灭作用，但不完全。在接触被覆银橡胶导管16小时后，仍有30%的枯草杆菌黑色变种芽胞生存(见表1)。
表1 被覆银橡胶导管接触时间及杀菌率(%) 细菌名称
10min
30min
60min
2h
3h
, 百拇医药
4h
5h
16h
大肠埃希氏菌
66.7
100
100
100
100
100
100
100
绿脓假单胞菌
, 百拇医药
98.7
100
100
100
100
100
100
100
金黄色葡萄球菌
97.9
98.6
100
100
, http://www.100md.com
100
100
100
100
枯草杆菌黑色变种
0
48.9
50.6
52.2
56.7
61.7
66.7
100
, 百拇医药
注：对照组均为0
2.2 杀菌能力定性试验结果：被覆银橡胶导尿管与1×105/ ml菌悬液接触30分钟后，大肠埃希氏菌、绿脓假单胞菌无菌落生长；接触60分钟后，金黄色葡萄球菌无菌落生长；枯草杆菌黑色变种与被覆银导尿管接触16小时后仍呈中度生长趋势(见表2)。
表2 被覆银橡胶导尿管接触时间及菌落生长情况的比较 细菌名称
10min
30min
60min
2h
3h
4h
, http://www.100md.com
5h
16h
对照
大肠埃希氏菌
+++
-
-
-
-
-
-
-
+++
绿脓假单胞菌
, 百拇医药
+
-
-
-
-
-
-
-
+++
金黄色葡萄球菌
+
+
-
-
, 百拇医药
-
-
-
-
+++
枯草杆菌黑色变种
+++
+++
++
++
++
++
++
++
, 百拇医药
+++
注：+轻度生长；中度生长；重度生长；-未生长
2.3 有机物可影响试验结果：在试验中加入10%兔血清后，被覆银橡胶导管对大肠埃希氏菌、绿脓假单胞菌的杀灭效果明显下降(见表3)。表3 有机物对试验结果的影响情况 细菌名称
菌株浓度
(/ml)
含银量
(mg/cm2)
作用不同时间细菌杀灭率(%)
10min 30min 60min 120min
, 百拇医药
大肠埃希氏菌
2×104
1
30.2
60
63
70
绿脓假单胞菌
2×104
1
60
68
68
, 百拇医药
75
3 讨论
研究证实，银离子是一种极强的杀菌剂。一定浓度的银对细菌、病毒、真菌等均有杀灭作用[3]。银离子杀菌的过程为先吸附于细菌壁表面，作用于细胞膜，干扰细菌电子运输，此时细菌虽然有某些生理功能被破坏，但仍有一定的生命力(抑菌作用)，待银离子聚集量达到一定限度后，即穿透细胞壁进入细胞内，滞留在胞浆膜上，抑制细胞内酶的活性，凝固细胞内蛋白质，凝固及破坏DNA分子,从而导致细菌的死亡。有实验表明，含银消毒剂有良好的后效应及广谱杀菌能力，银离子在0.1mg / L浓度时，作用30分钟可将痢疾杆菌和伤寒杆菌完全杀灭；银离子在0.08mg/L浓度时，作用30分钟可杀灭霍乱弧菌[4]。本研究结果与有关文献报道[5]结果基本一致，被覆银导尿管对大肠埃希氏菌、绿脓假单胞菌和金黄色葡萄球菌具有很强的杀灭作用，且存在着一定的浓度、时间量效关系，对枯草杆菌黑色变种牙胞的杀灭效果不理想。
, 百拇医药
研究表明[4]，培养基中的氨基酸成份可以与银离子发生反应，从而终止银离子的杀菌作用。本实验加入10%的兔血清后，被覆银导尿管对大肠埃希氏菌和绿脓假单胞菌的杀灭效果明显下降，可能是银离子与兔血清中的某些氨基酸发生反应，形成了银鳌合物，从而影响了银离子的杀菌效果。
作者简介：张萍，女(1964年～)，山东籍，硕士学位，主治医师，从事临床神经电生理专业。
参考文献
[1]刘兵，王嘉.导尿引起尿路感染的预防对策及研究进展[J].中华医院感染学杂志，1999，9(3)：191～192
[2]朱士俊.新编实用医学感染学[M].太原：山西科学技术出版社，1994.262
[3]骆文静，等.铜离子加银离子、游离氯协同灭活水中病毒效果的试验观察[J].中国消毒学杂志，1998，15(1)：18～19
[4]邓红.银离子消毒饮用水的机制[J].国外医学卫生学分册，1999，26(1)：45～47
[5]薛广波.实用消毒学[M].北京：人民军医出版社，1993.474～7
收稿：2000-03-21
修回：2000-05-08, 百拇医药
单位：张萍(宁夏医学院附属医院，宁夏 银川 750004)；姜培齐(宁夏医学院附属医院，宁夏 银川 750004)；张建(宁夏银川市铁路卫生防疫站，宁夏 银川 750011)；吴雪红(宁夏自治区妇幼保健院，宁夏 银川 750001)
关键词：尿道；导管；留置；银；细菌
宁夏医学杂志001002
【摘要】 目的 采用医用橡胶导尿管被覆银后观察对ATCC 25922大肠埃希氏菌、ATCC 25923金黄色葡萄球菌、ATCC 27853绿脓假单胞菌和ATCC 9372枯草杆菌黑色变种的体外杀菌作用。方法 将1×105/ml菌悬液与剪成2cm长的表面被覆有含1mg金属银的医用橡胶导尿管接触，在8个时间梯度分别吸取菌悬液做菌落计数，同时用5% 脱纤维羊血吸附残留银成份后，在摄氏35℃的温度下培养24小时，观察细菌生长结果。结果 被覆银导尿管对大肠埃希氏菌、绿脓假单胞菌和金黄色葡萄球菌具有很强的杀灭作用，且存在着一定的浓度、时间量效关系，对枯草杆菌黑色变种芽胞的杀灭效果不理想。结论 被覆银导尿管具有较高的临床应用价值，留置导尿管在3天以上的病人，可减少长期留置普通导尿管引起泌尿道感染所带来的痛苦。
, http://www.100md.com
【中图分类号】 R117 【文献标识码】 A
文章编号：1001-5949(2000)10-0580-02
Analysis of the experiment results of bactericidal power of silver-covered urinary catheter
ZHANG Ping，JIANG Pei-qi，ZHANG Jian，et al.
(The Affiliated Hosp.of Ningxia Med.Coll.， Yinchuan 750004，China)
【Abstract】 Objectives The aim of this experiment is to test the bactericidal power outside of the human body of silver-covered urinary catheter with killing ATC 25922 Escherichia coli，ACTT 25923 Staphylococcus aureus，ACTT 27853 Pseudomonas aeruginosa and ATCC 9372 Bacillus subtilis.Methods Put 2 centimeters silver-covered urinary catheter that contains with 1mg silver per square centimeters in bacterial suspensions of the four kinds bacteria mentioned above.The next step is to do a colony count at 8 time gradient.At the same time，incubate the four bacteria for 24 hours at the temperature of 35 centigrade after residual sliver was absorbed by 5 per cent defibrinated sheep blood.Results With the exception of ATCC 9372 Bacillus subtitles，the bactericidal power of silver-covered urinary catheter with killing ATCC 25922 Escherichia coli，ACTT 25923 Staphylococcus aureus，ACTT 27853 Pseudomonas aeruginosa is great，and there is a correlation existence between the concentration and time effect.Conclusions The silver-covered urinary catheter will be of great value to use in clinical work，especially for those patients who have to have an indwelling catheter for more than three days.Using silver-covered urinary catheter not only decreases the suffering of patients resulting from secondary urinary tract infections using common urinary catheters for more than three days，but alsosave the expenditure of hospitalization.
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【Key words】 Urinary；Catheters，indwelling；Silver；Bacteria
医院内感染不仅给病人造成了痛苦，同时也造成卫生资源的巨大浪费。据报道，医院内发生的感染，约40%与泌尿系统有关[1]。留置导尿管3天以上，90%以上的病人会发生菌尿症[2]。近年来，许多实验室相继报道银可以灭活细菌繁殖体。我们将金属银被覆到普通医用橡胶导尿管的表面，并对被覆银导尿管进行体外杀菌效力的测定。现将实验结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验菌株：ATCC 25922大肠埃希氏菌；ATCC 25923金黄色葡萄球菌；ATCC 27853绿脓假单胞菌；ATCC 9372枯草杆菌黑色变种。
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1.1.2 培养基：营养肉汤、营养琼脂、5%血琼脂平皿。配制方法严格按照《卫生部消毒技术规范(1991.12)》进行。
1.1.3 制备细菌悬液：严格按照《卫生部消毒技术规范(1991.12)》用ATCC 25922大肠埃希氏菌、ATCC 25923金黄色葡萄球菌、ATCC 27853绿脓假单胞菌和ATCC 9372枯草杆菌黑色变种四种标准菌株的24小时新分离物，用光电比浊法配制1×105/ml菌悬液。
1.1.4 制备兔血清细菌悬液：分别制备含1×105/ml ATCC 25922大肠埃希氏菌、ATCC 27853绿脓假单胞菌菌悬液的10%兔血清。将医用橡胶导尿管的表面被覆金属银，含银量为1mg/cm2。制备5%脱纤维羊血用以吸附被覆银橡胶导管上残留的银消毒成份。
1.2 方法
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1.2.1 杀菌能力定量试验：分别将2cm长被覆银导尿管放入配制好的1×105/ml菌悬液中，在10、30、60分钟、2、3、4、5、16小时吸取菌悬液做菌落计数。用普通导尿管作为对照，同时做对照平皿活菌计数，计算不同时间杀菌率，每一时间平行试验3份。
1.2.2 杀菌能力定性试验：用配制好的1×105/ml菌悬液与2cm长被覆银橡胶导尿管与相应菌株接触，每一菌株做8个时间梯度(10分钟、30分钟、60分钟、2小时、3小时、4小时、5小时、16小时)，每一梯度平行3次试验 。用5%脱纤维羊血以吸附被覆银橡胶导管上残留的银消毒成份，在35℃的温度下培养24小时，观察细菌生长结果。同时，用普通导尿管作为对照组，进行对比试验。
1.2.3 有机物影响试验：分别将2cm长被覆银导尿放入配制好的含1×105/ ml菌悬液的10%兔血清中，在10、30、60、120分钟吸取菌悬液做菌落计数。
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2 结果
2.1 被覆银导尿管杀菌能力定量试验结果：被覆银橡胶导尿管与1×105/ ml菌悬液接触30分钟后，对大肠埃希氏菌、绿脓假单胞菌的杀灭效果达到了100%；对金黄色葡萄球菌的杀灭率在接触60分钟后达到100%；对枯草杆菌黑色变种芽胞有一定的杀灭作用，但不完全。在接触被覆银橡胶导管16小时后，仍有30%的枯草杆菌黑色变种芽胞生存(见表1)。
表1 被覆银橡胶导管接触时间及杀菌率(%) 细菌名称
10min
30min
60min
2h
3h
, 百拇医药
4h
5h
16h
大肠埃希氏菌
66.7
100
100
100
100
100
100
100
绿脓假单胞菌
, 百拇医药
98.7
100
100
100
100
100
100
100
金黄色葡萄球菌
97.9
98.6
100
100
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100
100
100
100
枯草杆菌黑色变种
0
48.9
50.6
52.2
56.7
61.7
66.7
100
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注：对照组均为0
2.2 杀菌能力定性试验结果：被覆银橡胶导尿管与1×105/ ml菌悬液接触30分钟后，大肠埃希氏菌、绿脓假单胞菌无菌落生长；接触60分钟后，金黄色葡萄球菌无菌落生长；枯草杆菌黑色变种与被覆银导尿管接触16小时后仍呈中度生长趋势(见表2)。
表2 被覆银橡胶导尿管接触时间及菌落生长情况的比较 细菌名称
10min
30min
60min
2h
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4h
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5h
16h
对照
大肠埃希氏菌
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绿脓假单胞菌
, 百拇医药
+
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金黄色葡萄球菌
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枯草杆菌黑色变种
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注：+轻度生长；中度生长；重度生长；-未生长
2.3 有机物可影响试验结果：在试验中加入10%兔血清后，被覆银橡胶导管对大肠埃希氏菌、绿脓假单胞菌的杀灭效果明显下降(见表3)。表3 有机物对试验结果的影响情况 细菌名称
菌株浓度
(/ml)
含银量
(mg/cm2)
作用不同时间细菌杀灭率(%)
10min 30min 60min 120min
, 百拇医药
大肠埃希氏菌
2×104
1
30.2
60
63
70
绿脓假单胞菌
2×104
1
60
68
68
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75
3 讨论
研究证实，银离子是一种极强的杀菌剂。一定浓度的银对细菌、病毒、真菌等均有杀灭作用[3]。银离子杀菌的过程为先吸附于细菌壁表面，作用于细胞膜，干扰细菌电子运输，此时细菌虽然有某些生理功能被破坏，但仍有一定的生命力(抑菌作用)，待银离子聚集量达到一定限度后，即穿透细胞壁进入细胞内，滞留在胞浆膜上，抑制细胞内酶的活性，凝固细胞内蛋白质，凝固及破坏DNA分子,从而导致细菌的死亡。有实验表明，含银消毒剂有良好的后效应及广谱杀菌能力，银离子在0.1mg / L浓度时，作用30分钟可将痢疾杆菌和伤寒杆菌完全杀灭；银离子在0.08mg/L浓度时，作用30分钟可杀灭霍乱弧菌[4]。本研究结果与有关文献报道[5]结果基本一致，被覆银导尿管对大肠埃希氏菌、绿脓假单胞菌和金黄色葡萄球菌具有很强的杀灭作用，且存在着一定的浓度、时间量效关系，对枯草杆菌黑色变种牙胞的杀灭效果不理想。
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研究表明[4]，培养基中的氨基酸成份可以与银离子发生反应，从而终止银离子的杀菌作用。本实验加入10%的兔血清后，被覆银导尿管对大肠埃希氏菌和绿脓假单胞菌的杀灭效果明显下降，可能是银离子与兔血清中的某些氨基酸发生反应，形成了银鳌合物，从而影响了银离子的杀菌效果。
作者简介：张萍，女(1964年～)，山东籍，硕士学位，主治医师，从事临床神经电生理专业。
参考文献
[1]刘兵，王嘉.导尿引起尿路感染的预防对策及研究进展[J].中华医院感染学杂志，1999，9(3)：191～192
[2]朱士俊.新编实用医学感染学[M].太原：山西科学技术出版社，1994.262
[3]骆文静，等.铜离子加银离子、游离氯协同灭活水中病毒效果的试验观察[J].中国消毒学杂志，1998，15(1)：18～19
[4]邓红.银离子消毒饮用水的机制[J].国外医学卫生学分册，1999，26(1)：45～47
[5]薛广波.实用消毒学[M].北京：人民军医出版社，1993.474～7
收稿：2000-03-21
修回：2000-05-08, 百拇医药