免疫组化染色中洗涤方法的点滴体会
作者：朱振龙 张钰 张荣 陈永军 王玲巧
单位：朱振龙(河北医科大学病理解剖学教研室 石家庄 050031)；张钰 张荣(基础医学院)；陈永军 王玲巧(生化教研室)
关键词：免疫组织化学；方法；染剂和染色法；方法
河北医科大学学报000530
中图号 R392-33
免疫组化的实验操作过程相当复杂而费时,其中洗涤过程就是一个多次重复的繁杂程序,如按照文献中所介绍的免疫组化ABC法洗涤时间约需65 min左右,如果再加上胰酶消化后的洗涤时间,那么整个时间就更要延长。正因免疫组化染色如此费时,多年来人们一直在寻找一些既能缩短时间又不影响染色效果的洗涤方法。我们根据自己多年来的实际操作经验,摸索总结出了一套冲洗加浸洗的洗涤方法,该法既能缩短整个染色时间,同样也能获得满意的染色效果(图1、2)。具体方法如下。
图1 传统洗涤方法染色结果,横纹肌,MG(+)
图2 改良后洗涤方法染色结果,横纹肌,MG(+)
每次洗涤时,先用PBS缓冲液冲洗3遍,约20 s左右,再将切片浸泡于PBS缓冲液中,同时置于微量振荡器上1～1.5 min或间断缓慢而轻柔地将染色架在浸泡的同时提拉数次,约需1 min左右,这样整个洗涤过程便可在2 min内完成,如此共可节省时间约50 min左右。
此外,该方法既可以避免由于冲洗次数较多而易引起脱片的弊端,又能避免单纯浸洗时相互污染的问题。
收稿日期：1999-11-16, http://www.100md.com
单位：朱振龙(河北医科大学病理解剖学教研室 石家庄 050031)；张钰 张荣(基础医学院)；陈永军 王玲巧(生化教研室)
关键词：免疫组织化学；方法；染剂和染色法；方法
河北医科大学学报000530
中图号 R392-33
免疫组化的实验操作过程相当复杂而费时,其中洗涤过程就是一个多次重复的繁杂程序,如按照文献中所介绍的免疫组化ABC法洗涤时间约需65 min左右,如果再加上胰酶消化后的洗涤时间,那么整个时间就更要延长。正因免疫组化染色如此费时,多年来人们一直在寻找一些既能缩短时间又不影响染色效果的洗涤方法。我们根据自己多年来的实际操作经验,摸索总结出了一套冲洗加浸洗的洗涤方法,该法既能缩短整个染色时间,同样也能获得满意的染色效果(图1、2)。具体方法如下。
图1 传统洗涤方法染色结果,横纹肌,MG(+)
图2 改良后洗涤方法染色结果,横纹肌,MG(+)
每次洗涤时,先用PBS缓冲液冲洗3遍,约20 s左右,再将切片浸泡于PBS缓冲液中,同时置于微量振荡器上1～1.5 min或间断缓慢而轻柔地将染色架在浸泡的同时提拉数次,约需1 min左右,这样整个洗涤过程便可在2 min内完成,如此共可节省时间约50 min左右。
此外,该方法既可以避免由于冲洗次数较多而易引起脱片的弊端,又能避免单纯浸洗时相互污染的问题。
收稿日期：1999-11-16, http://www.100md.com