医用生物玻璃和磷灰石材料对小鼠骨髓细胞微核率的影响
作者：李新生 马明福 李练兵 张其清
单位：李新生 马明福 李练兵 重庆市计划生育科学研究所(重庆 400020)；张其清 中国医学科学院生物医学工程所(天津 300192)
关键词：生物玻璃；磷灰石；小鼠骨髓细胞；微核试验
北京生物医学工程990412 摘 要 采用啮齿类动物微核试验对医用生物玻璃材料和磷灰石材料的浸提液进行诱变性检测。结果显示，每一材料浸提液的浸提原液、1/5和1/10倍浸提液3个剂量组诱导的多染红细胞微核率与溶剂对照组比较，无显著性差异，P>0.05。表明各剂量组的浸提液无诱发小鼠骨髓细胞微核增加作用。
The Effect of Medical Bioglass and Phosphatic Rock on
Micronucleus in Bone Marrow of Mice
, 百拇医药
Li Xinsheng, Ma Mingfu, Li Lianbing
(Chongqing Family Planning Scientific Research Institute,Chongqing 400020)
Zhang Qiqing
(Institute of Biomedical Engineering,Chinese Academy of
Medical Sciences,Tianjin 300192)
Abstract
The mutagenicity of medical materials of bioglass and phosphatic rock was studied by doing mouse marrow micromuleus test.The results showed that all extracts from medical materials (bioglass and phosphatic rock) of three groups (original extract,extracts of 1/5 and 1/10 of the original one) did not produce significant statistical differences between each tested and contrast group (P>0.05).In this experiment, it was proved that medical materials (bioglass and phosphatic rock) would not induce increase of micronucleus.
, 百拇医药
Key words:Bioglass; Phosphatic rock; Mouse bone marrow; Micronuclei test
0 前 言
胶原生物玻璃复合材料(生物玻璃)和胶原羟基磷灰石复合材料(磷灰石)是一种以天然牛筋胶原分别与生物玻璃和羟基磷灰石为主要成分加工制成，作为人工骨缺损或病损修补材料。为了确保使用的安全性，进一步了解该药潜在的危险性，对生物玻璃和磷灰石两种医用材料进行了小鼠骨髓细胞微核试验研究。
1 材料与方法
1.1 实验材料
生物玻璃，批号9701017；磷灰石，批号970(01)，由中国医学科学院生物医学工程研究所提供。以材料生理盐水浸提液作试验。
, 百拇医药
阳性对照诱变剂环磷酰胺(CP)作对照，CP由上海第十二制药厂生产，批号940121，剂量为50mg/kg b.w,腹腔注射。
1.2 实验材料及处理
样品材料按文献[1]要求进行，经蒸馏水和生理盐水各冲洗3次，将生物玻璃和磷灰石按每4g加20ml生理盐水，37℃静置72小时处理备用。
1.3 动 物
健康性成熟NIH小鼠，体重21±3g，随机分组，每组10只，雌雄各半。动物由重庆医科大学实验动物中心提供，合格证号为24301042。
1.4 实验方法
分别以生物玻璃和磷灰石材料浸提液为最高浓度，依5倍稀释为1/5和1/10倍原液浓度3个剂量组，腹腔注射给药(0.5mg/l0 g)，诱导两次间隔24h给药。于第一次给药后48h颈椎脱臼处死动物，取骨髓、制片、固定、Giemsa染色。每只小鼠镜下观察1000个胞浆完整嗜多染红细胞(PCE)，计数微核出现频率(‰)。同时分析PCE与NCE(正染红细胞)比率(%)。
, 百拇医药
1.5 结果判定
各剂量组出现的微核细胞率与溶剂对照组比较，若有统计学意义增加，且有剂量-效应关系，或同一剂量微核率增加可重复，并有统计学意义，判为阳性，反之则为阴性。
2 结 果
小鼠骨髓微核试验结果见表1，生物玻璃和磷灰石浸提液各剂量组的小鼠骨髓PCE微核细胞率与溶剂对照组比较，无显著差异，P>0.05，表明两种医用材料浸提液的各剂量组对小鼠骨髓PCE微核率无诱变作用。
表1 医用材料浸提液对微核细胞发生率的影响 组 别
浓 度
PCE(个)
MN(个)
, 百拇医药
MNF(‰)
PCE
PCE+NCE(%)
生物玻璃
浸提液
10000
15
1.5±0.29
69.66
1/5原液
10000
16
1.6±0.31
, 百拇医药
67.28
1/10原液
10000
17
1.7±0.26
69.98
磷灰石
浸提液
10000
18
1.8±0.34
70.49
1/5原液
, http://www.100md.com
10000
13
1.3±0.29
69.41
1/10原液
10000
20
2.0±0.26
71.73
空白对照
0
10000
19
, 百拇医药
1.9±0.28
66.58
溶剂对照
50①
10000
21
2.1±0.31
65.46
阳性对照
50②
10000
246③
, http://www.100md.com
24.6±2.55
61.24
①ml/kg ②ml/kg ③P<0.01
3 讨 论
微核试验是检测染色体损伤的一种快速、简便、经济、有效的方法。为了确保使用的安全性，除了对材料的各剂量组进行了诱变性检测外，还设了空白、溶剂和阳性对照作平行试验，使之结果的可比性和可靠性更准确。在本试验内，生物玻璃和磷灰石各剂量组诱导的微核细胞率均在正常范围，而阳性对照组微核细胞率高达24.6‰。本试验结果表明上述两种医用材料在本条件下无诱发小鼠骨髓PCE微核增加作用。
作者简介：李新生(1951—)，男，助理研究员
参考文献
1 卫生部药政管理局.生物材料和医疗器材.生物学评价技术要求，1997年11月4日
2 Schmid W.The micronucleus test.Mutat Res,1975,31(1):9
3 中华人民共和国卫生部药政局.临床研究指导原则汇编.1993，p215
(1998-10-05收稿，1998-11-09修回), http://www.100md.com
单位：李新生 马明福 李练兵 重庆市计划生育科学研究所(重庆 400020)；张其清 中国医学科学院生物医学工程所(天津 300192)
关键词：生物玻璃；磷灰石；小鼠骨髓细胞；微核试验
北京生物医学工程990412 摘 要 采用啮齿类动物微核试验对医用生物玻璃材料和磷灰石材料的浸提液进行诱变性检测。结果显示，每一材料浸提液的浸提原液、1/5和1/10倍浸提液3个剂量组诱导的多染红细胞微核率与溶剂对照组比较，无显著性差异，P>0.05。表明各剂量组的浸提液无诱发小鼠骨髓细胞微核增加作用。
The Effect of Medical Bioglass and Phosphatic Rock on
Micronucleus in Bone Marrow of Mice
, 百拇医药
Li Xinsheng, Ma Mingfu, Li Lianbing
(Chongqing Family Planning Scientific Research Institute,Chongqing 400020)
Zhang Qiqing
(Institute of Biomedical Engineering,Chinese Academy of
Medical Sciences,Tianjin 300192)
Abstract
The mutagenicity of medical materials of bioglass and phosphatic rock was studied by doing mouse marrow micromuleus test.The results showed that all extracts from medical materials (bioglass and phosphatic rock) of three groups (original extract,extracts of 1/5 and 1/10 of the original one) did not produce significant statistical differences between each tested and contrast group (P>0.05).In this experiment, it was proved that medical materials (bioglass and phosphatic rock) would not induce increase of micronucleus.
, 百拇医药
Key words:Bioglass; Phosphatic rock; Mouse bone marrow; Micronuclei test
0 前 言
胶原生物玻璃复合材料(生物玻璃)和胶原羟基磷灰石复合材料(磷灰石)是一种以天然牛筋胶原分别与生物玻璃和羟基磷灰石为主要成分加工制成，作为人工骨缺损或病损修补材料。为了确保使用的安全性，进一步了解该药潜在的危险性，对生物玻璃和磷灰石两种医用材料进行了小鼠骨髓细胞微核试验研究。
1 材料与方法
1.1 实验材料
生物玻璃，批号9701017；磷灰石，批号970(01)，由中国医学科学院生物医学工程研究所提供。以材料生理盐水浸提液作试验。
, 百拇医药
阳性对照诱变剂环磷酰胺(CP)作对照，CP由上海第十二制药厂生产，批号940121，剂量为50mg/kg b.w,腹腔注射。
1.2 实验材料及处理
样品材料按文献[1]要求进行，经蒸馏水和生理盐水各冲洗3次，将生物玻璃和磷灰石按每4g加20ml生理盐水，37℃静置72小时处理备用。
1.3 动 物
健康性成熟NIH小鼠，体重21±3g，随机分组，每组10只，雌雄各半。动物由重庆医科大学实验动物中心提供，合格证号为24301042。
1.4 实验方法
分别以生物玻璃和磷灰石材料浸提液为最高浓度，依5倍稀释为1/5和1/10倍原液浓度3个剂量组，腹腔注射给药(0.5mg/l0 g)，诱导两次间隔24h给药。于第一次给药后48h颈椎脱臼处死动物，取骨髓、制片、固定、Giemsa染色。每只小鼠镜下观察1000个胞浆完整嗜多染红细胞(PCE)，计数微核出现频率(‰)。同时分析PCE与NCE(正染红细胞)比率(%)。
, 百拇医药
1.5 结果判定
各剂量组出现的微核细胞率与溶剂对照组比较，若有统计学意义增加，且有剂量-效应关系，或同一剂量微核率增加可重复，并有统计学意义，判为阳性，反之则为阴性。
2 结 果
小鼠骨髓微核试验结果见表1，生物玻璃和磷灰石浸提液各剂量组的小鼠骨髓PCE微核细胞率与溶剂对照组比较，无显著差异，P>0.05，表明两种医用材料浸提液的各剂量组对小鼠骨髓PCE微核率无诱变作用。
表1 医用材料浸提液对微核细胞发生率的影响 组 别
浓 度
PCE(个)
MN(个)
, 百拇医药
MNF(‰)
PCE
PCE+NCE(%)
生物玻璃
浸提液
10000
15
1.5±0.29
69.66
1/5原液
10000
16
1.6±0.31
, 百拇医药
67.28
1/10原液
10000
17
1.7±0.26
69.98
磷灰石
浸提液
10000
18
1.8±0.34
70.49
1/5原液
, http://www.100md.com
10000
13
1.3±0.29
69.41
1/10原液
10000
20
2.0±0.26
71.73
空白对照
0
10000
19
, 百拇医药
1.9±0.28
66.58
溶剂对照
50①
10000
21
2.1±0.31
65.46
阳性对照
50②
10000
246③
, http://www.100md.com
24.6±2.55
61.24
①ml/kg ②ml/kg ③P<0.01
3 讨 论
微核试验是检测染色体损伤的一种快速、简便、经济、有效的方法。为了确保使用的安全性，除了对材料的各剂量组进行了诱变性检测外，还设了空白、溶剂和阳性对照作平行试验，使之结果的可比性和可靠性更准确。在本试验内，生物玻璃和磷灰石各剂量组诱导的微核细胞率均在正常范围，而阳性对照组微核细胞率高达24.6‰。本试验结果表明上述两种医用材料在本条件下无诱发小鼠骨髓PCE微核增加作用。
作者简介：李新生(1951—)，男，助理研究员
参考文献
1 卫生部药政管理局.生物材料和医疗器材.生物学评价技术要求，1997年11月4日
2 Schmid W.The micronucleus test.Mutat Res,1975,31(1):9
3 中华人民共和国卫生部药政局.临床研究指导原则汇编.1993，p215
(1998-10-05收稿，1998-11-09修回), http://www.100md.com