Bcl-2与p53蛋白在肺癌组织中的表达
作者：李翠萍 马秀华 许仁和 曲福英
单位：100071 北京市丰台区医院(李翠萍)；山东医科大学附属医院(马秀华、许仁和)；山东荣城人民医院(曲福英)
关键词：
中华内科杂志990817 目前认为，肿瘤的发生发展是由细胞增殖和凋亡失调所引起。细胞凋亡能除去发生基因突变的细胞，因此是阻止恶性转录的一个有效方法。近年发现Bcl-2基因和p53基因与细胞凋亡有关，在许多实体瘤中均有表达。为了探讨Bcl-2与p53基因表达在肺癌发生发展中的作用，我们采用ABC免疫组化方法，就肺癌组织中Bcl-2和p53的表达与肺癌的临床病理特征之间的关系进行了观察和探讨。
材料与方法：
1.临床资料：本组61例肺癌患者中，男56例，女5例，年龄39～73岁。肺癌组织标本分别取自山东医科大学医附属医院和山东省胸科医院1996年10月至1997年5月期间胸外科的住院病例。诊断标准均符合1981年WHO制定的肺癌分类法；其中27例患者取自身对照标本，包括癌旁组织13例，相对正常的肺组织14例，均经病理证实为非癌变组织。详细情况见表1。
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表1 61例肺癌患者肿瘤分期和分型分布情况
小细胞
未分化癌
腺癌
鳞癌
细支气管
肺泡癌
Ⅰ期
0
1
6
0
Ⅱ期
, 百拇医药
0
4
8
3
Ⅲ期
0
2
18
5
Ⅳ期
0
2
0
0
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局限期
7
0
0
0
广泛期
5
0
0
0
2.操作方法：采用ABC免疫组化方法测定p53蛋白与Bcl-2蛋白的表达。每组染色均设有阳性对照及空白对照，阳性对照为已知染色阳性的肺癌组织切片，空白对照以PBS
代替一抗。p53单抗、Bcl-2多抗、ABC试剂、DAB等均购自北京中山公司。一抗、二抗、ABC复合物、DAB溶液均按产品说明书配制。
, 百拇医药
3.统计学方法：相关性比较采用χ2检验。
结果：
1.Bcl-2在正常肺组织、癌旁组织及癌组织中的阳性表达率分别为14.0%、70.0%和52.5%；在肿瘤组织中Bcl-2阳性表达率随分化程度的降低而降低，在高、中、低、未分化组中分别为82.4%、47.4%、46.2%和25.0%，未分化组与其他各组比较差异有显著性(P<0.05)。Bcl-2表达与患者的性别、年龄、有无淋巴结转移以及肿瘤的TNM分期、NSCLC的组织学类型均无关。
2.p53蛋白在正常肺组织、癌旁组织、癌组织中的阳性表达率分别为0%、23.0%和50.8%，p53表达阳性率在不吸烟组、吸烟量小于800只/年组，吸烟量大于和(或)等于800只/年组分别为26.7%、36.4%和65.7%，p53阳性率不吸烟患者显著低于吸烟患者(P=0.0244)；但不吸烟组与吸烟少于800只/年组差异无显著性(P=0.24)。说明p53突变与吸烟数量有关。p53阳性率在小于50岁年龄组中 (75%)显著高于大于和(或)等于50岁年龄组(42.2%，P=0.019)，但是p53表达与患者的性别、有无淋巴结转移、肿瘤的组织类型、组织学分级及TNM分期均无关。
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3.p53与Bcl-2负表达率为70.5%，通过χ2分析表明，二者之间存在负相关关系，P=0.0012；但此相关性在肺癌各组织类型、组织分级及临床分期之间差异均无显著性(P<0.05)。
讨论 本研究发现，p53蛋白阳性率在年轻患者(小于50岁)显著高于老年患者。众所周知，肺癌的发病年龄越小，其恶性程度越高，而且预后不良，这间接提示p53蛋白阳性患者预后不良。p53阳性细胞全部为肿瘤细胞，邻近的肿瘤间质及相应的正常肺组织内均未见表达，提示其在鉴别良恶性病变时具有价值。癌旁组织中p53蛋白阳性表达率为23%，提示p53异常表达在肺癌发生中可能为一早期现象，可作为肺癌早期诊断的肿瘤标志物。另外，本研究从蛋白质分子水平进一步证实了p53突变频率与吸烟的数量之间有剂量依赖性关系。
本研究表明，癌旁组织的Bcl-2阳性表达率显著高于肺癌组织与相对正常的肺组织，提示Bcl-2高表达亦是肺癌形成的早期现象，也可作为肺癌早期诊断的肿瘤标志物，用于高危人群的普查和筛选，但肿瘤形成后Bcl-2表达反而下降的机制有待于进一步探讨。本组Bcl-2阳性表达率随分化程度的降低而降低，而且未分化组与其他各组间差异有显著性，表明Bcl-2异常表达与肺癌分化程度及恶性度有关。另外，还发现Bcl-2表达与淋巴结转移及肺癌的临床分期之间均无显著相关性，提示Bcl-2的表达与肺癌的进展和预后无关。另外，许多研究表明，在非何杰金淋巴瘤、前列腺癌、乳腺癌、甲状腺癌及结肠癌中，p53与Bcl-2的表达呈相反关系[1]，本研究结果与之类似。这表明，Bcl-2过表达或突变型p53的表达在包括肺癌在内的许多肿瘤的病理形成中可能起关键作用。野生型p53能够在各种条件下引导或促进细胞凋亡，而突变型p53则对细胞凋亡有抑制作用，其作用方式与Bcl-2抑制由myc介导的凋亡作用方式相似，因此推测Bcl-2与p53异常表达对细胞凋亡的抑制作用在肺癌的发生与发展中具有协同作用。
参考文献
1 刘斌. 原癌基因Bcl-2在肿瘤中表达的研究进展. 重庆医科大学学报,1997; 22:80-81.
(收稿：1998-11-24 修回：1999-05-15), http://www.100md.com
单位：100071 北京市丰台区医院(李翠萍)；山东医科大学附属医院(马秀华、许仁和)；山东荣城人民医院(曲福英)
关键词：
中华内科杂志990817 目前认为，肿瘤的发生发展是由细胞增殖和凋亡失调所引起。细胞凋亡能除去发生基因突变的细胞，因此是阻止恶性转录的一个有效方法。近年发现Bcl-2基因和p53基因与细胞凋亡有关，在许多实体瘤中均有表达。为了探讨Bcl-2与p53基因表达在肺癌发生发展中的作用，我们采用ABC免疫组化方法，就肺癌组织中Bcl-2和p53的表达与肺癌的临床病理特征之间的关系进行了观察和探讨。
材料与方法：
1.临床资料：本组61例肺癌患者中，男56例，女5例，年龄39～73岁。肺癌组织标本分别取自山东医科大学医附属医院和山东省胸科医院1996年10月至1997年5月期间胸外科的住院病例。诊断标准均符合1981年WHO制定的肺癌分类法；其中27例患者取自身对照标本，包括癌旁组织13例，相对正常的肺组织14例，均经病理证实为非癌变组织。详细情况见表1。
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表1 61例肺癌患者肿瘤分期和分型分布情况
小细胞
未分化癌
腺癌
鳞癌
细支气管
肺泡癌
Ⅰ期
0
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6
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Ⅱ期
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局限期
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2.操作方法：采用ABC免疫组化方法测定p53蛋白与Bcl-2蛋白的表达。每组染色均设有阳性对照及空白对照，阳性对照为已知染色阳性的肺癌组织切片，空白对照以PBS
代替一抗。p53单抗、Bcl-2多抗、ABC试剂、DAB等均购自北京中山公司。一抗、二抗、ABC复合物、DAB溶液均按产品说明书配制。
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3.统计学方法：相关性比较采用χ2检验。
结果：
1.Bcl-2在正常肺组织、癌旁组织及癌组织中的阳性表达率分别为14.0%、70.0%和52.5%；在肿瘤组织中Bcl-2阳性表达率随分化程度的降低而降低，在高、中、低、未分化组中分别为82.4%、47.4%、46.2%和25.0%，未分化组与其他各组比较差异有显著性(P<0.05)。Bcl-2表达与患者的性别、年龄、有无淋巴结转移以及肿瘤的TNM分期、NSCLC的组织学类型均无关。
2.p53蛋白在正常肺组织、癌旁组织、癌组织中的阳性表达率分别为0%、23.0%和50.8%，p53表达阳性率在不吸烟组、吸烟量小于800只/年组，吸烟量大于和(或)等于800只/年组分别为26.7%、36.4%和65.7%，p53阳性率不吸烟患者显著低于吸烟患者(P=0.0244)；但不吸烟组与吸烟少于800只/年组差异无显著性(P=0.24)。说明p53突变与吸烟数量有关。p53阳性率在小于50岁年龄组中 (75%)显著高于大于和(或)等于50岁年龄组(42.2%，P=0.019)，但是p53表达与患者的性别、有无淋巴结转移、肿瘤的组织类型、组织学分级及TNM分期均无关。
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3.p53与Bcl-2负表达率为70.5%，通过χ2分析表明，二者之间存在负相关关系，P=0.0012；但此相关性在肺癌各组织类型、组织分级及临床分期之间差异均无显著性(P<0.05)。
讨论 本研究发现，p53蛋白阳性率在年轻患者(小于50岁)显著高于老年患者。众所周知，肺癌的发病年龄越小，其恶性程度越高，而且预后不良，这间接提示p53蛋白阳性患者预后不良。p53阳性细胞全部为肿瘤细胞，邻近的肿瘤间质及相应的正常肺组织内均未见表达，提示其在鉴别良恶性病变时具有价值。癌旁组织中p53蛋白阳性表达率为23%，提示p53异常表达在肺癌发生中可能为一早期现象，可作为肺癌早期诊断的肿瘤标志物。另外，本研究从蛋白质分子水平进一步证实了p53突变频率与吸烟的数量之间有剂量依赖性关系。
本研究表明，癌旁组织的Bcl-2阳性表达率显著高于肺癌组织与相对正常的肺组织，提示Bcl-2高表达亦是肺癌形成的早期现象，也可作为肺癌早期诊断的肿瘤标志物，用于高危人群的普查和筛选，但肿瘤形成后Bcl-2表达反而下降的机制有待于进一步探讨。本组Bcl-2阳性表达率随分化程度的降低而降低，而且未分化组与其他各组间差异有显著性，表明Bcl-2异常表达与肺癌分化程度及恶性度有关。另外，还发现Bcl-2表达与淋巴结转移及肺癌的临床分期之间均无显著相关性，提示Bcl-2的表达与肺癌的进展和预后无关。另外，许多研究表明，在非何杰金淋巴瘤、前列腺癌、乳腺癌、甲状腺癌及结肠癌中，p53与Bcl-2的表达呈相反关系[1]，本研究结果与之类似。这表明，Bcl-2过表达或突变型p53的表达在包括肺癌在内的许多肿瘤的病理形成中可能起关键作用。野生型p53能够在各种条件下引导或促进细胞凋亡，而突变型p53则对细胞凋亡有抑制作用，其作用方式与Bcl-2抑制由myc介导的凋亡作用方式相似，因此推测Bcl-2与p53异常表达对细胞凋亡的抑制作用在肺癌的发生与发展中具有协同作用。
参考文献
1 刘斌. 原癌基因Bcl-2在肿瘤中表达的研究进展. 重庆医科大学学报,1997; 22:80-81.
(收稿：1998-11-24 修回：1999-05-15), http://www.100md.com