风热清口服液的药理研究
作者：易明娟 谭亿民 谢子清 朱绍荣1 王 奎1
单位：(成都中医药大学附属医院，成都 610072)
关键词：
中国新药杂志980422 风热清口服液由熊胆、青黛、金银花、桔梗、瓜蒌皮等组成，其功效主要为清热解毒，宣肺透表，利咽化痰，用于治疗外感风热证(急性上呼吸道感染)。根据该方药的功能与主治，研究了风热清口服液的药理活性，现总结如下。
材料
1 受试药物
风热清口服液(简称风热清)，由成都中医药大学附属医院药剂科制备，批号911228，相当于生药2 g/ml(文中所列剂量均为生药量)。
, 百拇医药
2 实验动物
昆明种小鼠，NIH小鼠(体重18～22 g)，SD大鼠，由华西医科大学实验动物中心、四川省医科院实验动物中心提供，均符合健康一级标准。日本大耳白兔由农业部成都生物药品厂提供。
方法与结果
1 解热作用
1.1 对菌苗致家兔发热的影响 家兔，雌雄均有，体重2.5±0.2 kg，实验前禁水15 h。用温度指示仪间隔1h测量正常体温(肛温)2次，选取2次温差不超过0.3℃，平均体温在38.4～39.6℃的家兔，自耳缘静脉注入伤寒副伤寒甲乙三联菌苗0.5 ml/kg，1h后再测量体温，取升温0.8℃以上的发热家兔，按升温高低均匀分为4组，两给药组分别灌服200%与50%的风热清20 ml/kg(相当于生药40 g/kg与10 g/kg)，阳性对照组灌服0.75%阿司匹林20 ml/kg(0.15 g/kg)，空白对照灌服等容积生理盐水，给药后每隔1 h同法测量体温1次，共测5次，计算其体温变化，结果见表1。
, 百拇医药
表1 对家兔菌苗发热的影响(
±s) 组 别
剂量
(g/kg)
动物数
(只)
致热后
升温(℃)
给药后体温变化(℃)
1 h
2 h
3 h
, http://www.100md.com
4 h
5 h
空白对照
10
1.37±0.13
1.70±0.10
1.56±0.09
0.78±0.10
0.38±0.08
0.05±0.04
风热清
40
, 百拇医药 10
1.38±0.11
1.13±0.22a
0.91±0.16b
0.41±0.10a
0.10±0.07a
0.04±0.07
风热清
10
10
1.34±0.11
, 百拇医药
1.67±0.08
1.29±0.06a
0.88±0.09
0.36±0.08
0.21±0.15
阿司匹林
0.15
9
1.36±0.13
0.66±0.17c
0.51±0.15c
, 百拇医药
0.26±0.13b
0.16±0.12
0.01±0.11
与同期对照组比较：a：P<0.05； b：P<0.01； c：P<0.001(下表同)
表1结果表明，家兔注射菌苗后1h体温已明显升高，3h(给药后1h)达高峰。风热清40g/kg组在致热后各时间体温升高均显著低于对照组，10g/kg组的体温增高仅在给药后2h与对照组比较有显著性差异。
1.2 对角叉菜胶致大鼠发热的影响 雄性大鼠，体重164±20 g，实验前禁水15 h，用温度指示间隔1h测量正常体温(肛温)3次，选择平均体温38～39℃，温差不超过0.2℃的大鼠32只，按正常体温随机分为4组。于每鼠两后肢足跖部皮下分别注入1%角叉菜胶0.1ml致热，随后按表2所示剂量灌胃给药，于致热后4～8h，每隔1h同法测量各鼠体温1次，共测5次。表2 对大鼠角叉菜胶发热的影响(±s) 组 别
, 百拇医药
剂量
(g/kg)
动物数
(只)
正常体
温(℃)
致热后给药后体温变化(℃)
4 h
5 h
6 h
7 h
8 h
空白对照
, 百拇医药
8
38.7±0.21
0.56±0.48
0.91±0.43
0.95±0.47
0.82±0.46
0.80±0.36
风热清
20
8
38.8±0.46
0.30±0.32
, 百拇医药
0.51±0.39
0.51±0.43
0.50±0.47
0.41±0.50
风热清
10
8
38.8±0.40
0.34±0.37
0.73±0.37
0.78±0.33
0.39±0.37
, 百拇医药
0.41±0.36
阿司匹林
0.075
8
38.8±0.34
-0.02±0.38a
0.18±0.41b
0.31±0.31a
0.36±0.31a
0.54±0.38
表2结果表明，大鼠注射角叉菜胶后4h体温已升高，6h达高峰，风热清给药组在发热各时期体温升高均低于对照组，具有退热趋势。
, http://www.100md.com
2 抗炎作用
2.1 对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响 雄性大鼠60只，体重(178±20)g，按体重随机分为5组，于每鼠右后足踝关节上方划一线作为标志，用毛细管放大法测量该足爪体积(排水毫升数)，然后每鼠右后肢足跖部皮下注射1%角叉菜胶0.1 ml致炎，致炎后0.5 h与4 h按表3所示剂量各灌胃给药1次，同法测量给药后1，2，3，4，6，7，24h该足爪体积，以其体积的改变(给药前后排水量之差)表示炎症肿胀程度，结果见表3。表3 对角叉菜胶大鼠足肿胀的影响(±s) 组 别
剂量
(g/kg)
动物
(只)
, 百拇医药
肿胀程度(ml)
1
2
3
4
6
7
24
空白对照
12
0.63±0.12
1.00±0.13
1.12±0.17
, 百拇医药
1.12±0.18
1.12±0.17
1.01±0.81
0.57±0.28
风热清
40
12
0.39±0.13c
0.71±0.14c
0.84±0.14c
0.85±0.17b
, 百拇医药
0.79±0.19b
0.79±0.21a
0.36±0.13a
(38.4)
(29.1)
(25.2)
(23.7)
(22.2)
(22.0)
(35.8)
风热清
, 百拇医药 20
12
0.42±0.14c
0.76±0.21b
0.88±0.18b
0.90±0.19b
0.85±0.18a
0.84±0.16a
0.38±0.15
(33.2)
, 百拇医药 (21.6)
(21.3)
(19.9)
(16.3)
(17.3)
(33.3)
风热清
10
12
0.50±0.12b
0.79±0.19b
0.94±0.15a
, http://www.100md.com
0.94±0.18a
0.91±0.19
0.90±0.22
0.42±0.14
(21.6)
(20.8)
(16.3)
(16.0)
(10.7)
(11.4)
(26.5)
醋酸泼
, http://www.100md.com
0.03
12
0.38±0.11c
0.53±0.08c
0.50±0.04c
0.47±0.06c
0.39±0.11c
0.37±0.12c
0.19±0.11a
尼松
, 百拇医药
(39.5)
(40.9)
(54.0)
(54.8)
(61.4)
(63.6)
(66.7)
( )内为肿胀抑制百分率
表3结果表明，风热清40，20与10 g/kg对角叉菜胶引起的大鼠足炎性水肿均具有明显抑制作用，尤其是大剂量，在致炎后24h抑制作用仍然显著。
2.2 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 雄性小鼠75只，随机分为5组，连续灌胃给药3 d，按文献〔2〕方法以二甲苯为致炎剂测定各组小鼠耳肿胀度。结果对照组，风热清高(40 g/kg)、中(20 g/kg)、低(10 g/kg)剂量组，泼尼松20 mg/kg给药(阳性对照)耳肿胀度分别为(11.2±1.7)，(9.3±2.6)，(8.6±2.5)，(10.7±1.9)，(7.6±2.4)mg。风热清高、中剂量与20 mg/kg泼尼松具有显著抗炎作用，与对照组比较分别为P<0.05，P<0.01，P<0.001。
, 百拇医药
2.3 对小鼠皮肤毛细血管通透性增高的影响〔1〕 雄性小鼠75只，随机分为5组，连续灌胃给药3 d，末次给药后1 h，每鼠尾静脉注射1%伊文思兰0.1 ml/10g，立即于下腹部皮内注入0.1%磷酸组胺0.1 ml，上腹部脱毛区滴二甲苯20 μ l，20 min后处死小鼠，剪下二甲苯致炎部位兰斑皮肤，剪碎后浸入2.5 ml丙酮生理盐水中，室温放置24 h，离心，取上清液置721分光光度计610 nm比色，直接以OD值进行比较；剥离并翻转下腹部皮肤，分级法比较各鼠组胺皮丘周围兰染程度(兰染程度分为4级)。结果见表4。表4 对小鼠腹部皮肤毛细血管通透性增高的影响(±s) 组 别
剂量
(g/kg)
动物数
, 百拇医药 (只)
毛细血管通透性
二甲苯(提取液OD值)
组胺(皮肤兰染级别)
空白对照
15
0.130±0.064
3.2±0.8
风热清
40
15
0.043±0.017c
, http://www.100md.com
2.1±0.6a
风热清
20
15
0.062±0.028b
2.8±0.7
风热清
10
15
0.056±0.029b
2.9±0.7
醋酸泼尼松
, 百拇医药
0.02
15
0.054±0.024c
2.3±0.9a
由表4可知，对于二甲苯所引起的小鼠皮肤毛细血管通透性增高，风热清大、中、小剂量均具有显著抑制作用，对于组胺所致皮肤毛细血管通透性增高，仅大剂量有明显抑制效果。
3 抗菌作用
3.1 体外抗菌试验 采用“试管二倍稀释法”测定风热清对8种常见致病菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果表明，风热清对金葡菌、甲型与乙型链球菌、肺炎球菌、大肠杆菌、福氏痢疾杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌均具有一定抑菌作用，MIC分别为0.062，0.062，0.031，0.062，0.500，0.5000，0.125，0.25g/ml。
, 百拇医药
3.2 对小鼠金葡菌感染的保护作用 小鼠100只，雌雄各半，按性别、体重随机分为5组，连续灌胃给药3 d。金葡菌接种于肉汤培养基中，置37℃培养箱中培养15 h，用无菌肉汤作1∶4稀释(预试对小鼠的死亡率为90%)。于末次给药后1h，每鼠腹腔注射上述金葡菌悬液0.5 ml，染菌后2 h再给药1次(剂量减半)，观察24 h内各组小鼠死亡情况。结果对照组，风热清40，20，10 g/kg组，乙酰螺旋霉素1 g/kg组(阳性对照)动物死亡数分别为19/20，14/20，18/20，18/20，4/20，提示风热清可以降低小鼠感染金葡菌的死亡率，但保护作用不显著(与对照组比较P>0.05)。
3.3 小鼠肺炎球菌感染的保护作用 动物、分组及给药同“3.2”。肺炎球菌接种于含10%小牛血清的肉汤培养基中，置培养箱37℃培养18 h，用无菌肉汤作1∶7稀释(预试时对感染小鼠的死亡率为100%)，于末次给药后1 h，每鼠腹腔注射上述菌液0.5 ml，观察24 h内小鼠死亡情况。结果对照组，风热清40，20，10 g/kg组，乙酰螺旋霉素组动物死亡数分别为20/20，14/20，16/20，19/20，6/20，表明风热清能够提高小鼠对肺炎球菌的抵抗能力，以高剂量组为显著，感染小鼠死亡数与对照组比较P<0.05。
, 百拇医药
4 抗病毒作用
流感病毒甲1型、甲3型，腺病毒3型、7型均作10-1与10-2稀释，分别与不同浓度的药液等量混合，接种于人胚肾细胞中(各两管)吸附40 min，加入2%小牛血清乳白蛋白细胞维持液，置37℃培养1周，逐日观察细胞病变，流感病毒7 d后作豚鼠血球吸附试验，以吸附试验阴性(一)为灭活指标。腺病毒以细胞不出现腺病毒变(一)为灭活指标。结果见表5。表5 对腺病毒与流感病毒的灭活作用 病 毒
风 热 清
抗病毒口服液
病毒
对照
细胞
对照
, 百拇医药
1∶10
1∶20
1∶40
1∶80
1∶10
1∶20
1∶40
1∶80
腺病毒3型
10-1
-
-
, 百拇医药
-
10-2
-
-
-
±
-
, 百拇医药
腺病毒7型
10-1
-
-
, 百拇医药 -
10-2
-
-
-
-
, 百拇医药
流感病毒甲1型
10-1
-
-
+
+
-
+
+
+
+
-
10-2
, 百拇医药
-
-
+
+
-
±
+
+
+
-
流感病毒甲3型
10-1
-
, http://www.100md.com +
+
+
-
-
+
+
+
-
10-2
-
+
+
+
, http://www.100md.com
-
-
-
+
+
-
以上结果表明，风热清1∶10浓度对上述各型腺病毒及流感病毒均具有灭活作用，1∶20浓度对腺病毒3型、7型与流感病毒甲1型可灭活；1∶40浓度仅对较低浓度(10-2)腺病毒7型具有灭活作用。风热清对腺病毒与流感病毒甲1型的灭活作用强于抗病毒口服液，对流感病毒3型的灭活作用不如抗病毒口服液。
5 对免疫功能的影响
5.1 对小鼠单核巨噬细胞系统吞噬功能的影响 雄性小鼠40只，随机分为4组，连续灌胃给药7 d。末次给药后24 h，尾静脉注射墨汁(西德产，chroma)0.1 ml/10 g，于注射后30 s与5 min分别自眼眶血管丛取血25μl，加入0.1%Na2CO32ml中，置721分光光度计675 nm比色测定OD值，计算吞噬指数K。结果对照组，风热清40，20 g/kg组，左旋咪唑15 mg/kg组的吞噬指数分别为0.033±0.008,0.042±0.009,0.036±0.007，0.046±0.011，其中高剂量组吞噬指数较对照组明显增大(P<0.05)，表明该药物具有促进小鼠单核巨噬细胞非特异性吞噬功能的作用，与15 mg/kg左旋咪唑无显著性差异。
, 百拇医药
5.2 对小鼠迟发型皮肤超敏反应(DCH)的影响 雄性NIH小鼠50只，随机分为5组，连续灌胃给药10 d，用二硝基氯苯(DNCB)对小鼠进行致敏与攻击，测定各组小鼠的DCH反应程度〔3〕，以腹部兰染皮伊文思兰浸出液的OD值表示。结果对照组为0.073±0.017；风热清40 g/kg组与20 g/kg组分别为0.099±0.014(P<0.01)与0.100±0.015(P<0.01)；环磷酰胺20 mg/kg(ip)组为0.044±0.019(P<0.01)，环磷酰胺+风热清40 g/kg组0.086±0.016(与环磷酰胺组比较P<0.001)。表明风热清可以提高DNCB诱导的正常小鼠的DCH反应与免疫低下(被环磷酰胺所抑制)的小鼠的细胞免疫功能。
6 止咳作用
雄性小鼠60只，随机分为4组，采用氨水引咳法小鼠灌胃给药后1 h进行实验，接受氨水刺激1 min后取出，观察记录2 min内的咳嗽次数。结果对照组，风热清40，20 g/kg组和可待因30 mg/kg组小鼠的平均咳嗽次数分别为45.1±21.5，32.5±21.0，40.5±24.4和20.6±21.0(P<0.01)，表明风热清对氨水刺激引起的小鼠咳嗽无明显止咳作用。
, 百拇医药
7 祛痰作用
小鼠60只，雌雄均有，随机分为4组，灌胃给药后40 min，用酚红法〔2〕测定各组小鼠呼吸道灌洗液的酚红浓度(以OD值表示)。结果对照组为0.037±0.019；风热清40 g/kg组与20 g/kg组分别为0.064±0.019(P<0.01)与0.051±0.014(P<0.05)；氯化铵1 g/kg组为0.060±0.021(P<0.01)，表明风热清能使小鼠呼吸道粘膜的分泌量明显增加，具有祛痰作用，40 g/kg风热清的作用与1 g/kg氯化铵接近(P<0.05)。讨论
以上实验结果表明，风热清口服液对伤寒副伤寒菌苗所引起的家兔发热有显著退热作用，对角叉菜胶引起的大鼠发热具有一定退热作用，可以明显抑制角叉菜胶所致大鼠足肿胀，二甲苯所致小鼠耳肿胀，降低组胺或二甲苯引起的小鼠皮肤毛细血管通透性增高，即通过多种途径抑制以渗出水肿为主的急性炎症。另外，酚红试验显示本品可以增加呼吸道粘膜的分泌，发挥祛痰作用。这些作用是临床治疗外感发热症(急性上呼吸道感染)的药理学基础之一。它可显著增强单核巨噬细胞系统对血中惰性碳粒的廓清能力，刺激正常与免疫功能低下小鼠的细胞免疫功能；本品对肺炎双球菌及金葡菌感染小鼠引起的死亡具有一定保护作用，体外较高浓度能灭活流感病毒与腺病毒，抑制金葡菌、链球菌、肺炎双球菌等G+球菌及部分G-杆菌的生长，提示本品临床疗效与其提高机体免疫功能及直接杀抑病原微生物有关。
(收稿：1998—02—10 修回：1998—05—20), http://www.100md.com(易明娟 谭亿民 谢子清 朱绍荣1 王 奎1)
单位：(成都中医药大学附属医院，成都 610072)
关键词：
中国新药杂志980422 风热清口服液由熊胆、青黛、金银花、桔梗、瓜蒌皮等组成，其功效主要为清热解毒，宣肺透表，利咽化痰，用于治疗外感风热证(急性上呼吸道感染)。根据该方药的功能与主治，研究了风热清口服液的药理活性，现总结如下。
材料
1 受试药物
风热清口服液(简称风热清)，由成都中医药大学附属医院药剂科制备，批号911228，相当于生药2 g/ml(文中所列剂量均为生药量)。
, 百拇医药
2 实验动物
昆明种小鼠，NIH小鼠(体重18～22 g)，SD大鼠，由华西医科大学实验动物中心、四川省医科院实验动物中心提供，均符合健康一级标准。日本大耳白兔由农业部成都生物药品厂提供。
方法与结果
1 解热作用
1.1 对菌苗致家兔发热的影响 家兔，雌雄均有，体重2.5±0.2 kg，实验前禁水15 h。用温度指示仪间隔1h测量正常体温(肛温)2次，选取2次温差不超过0.3℃，平均体温在38.4～39.6℃的家兔，自耳缘静脉注入伤寒副伤寒甲乙三联菌苗0.5 ml/kg，1h后再测量体温，取升温0.8℃以上的发热家兔，按升温高低均匀分为4组，两给药组分别灌服200%与50%的风热清20 ml/kg(相当于生药40 g/kg与10 g/kg)，阳性对照组灌服0.75%阿司匹林20 ml/kg(0.15 g/kg)，空白对照灌服等容积生理盐水，给药后每隔1 h同法测量体温1次，共测5次，计算其体温变化，结果见表1。
, 百拇医药
表1 对家兔菌苗发热的影响(
±s) 组 别剂量
(g/kg)
动物数
(只)
致热后
升温(℃)
给药后体温变化(℃)
1 h
2 h
3 h
, http://www.100md.com
4 h
5 h
空白对照
10
1.37±0.13
1.70±0.10
1.56±0.09
0.78±0.10
0.38±0.08
0.05±0.04
风热清
40
, 百拇医药 10
1.38±0.11
1.13±0.22a
0.91±0.16b
0.41±0.10a
0.10±0.07a
0.04±0.07
风热清
10
10
1.34±0.11
, 百拇医药
1.67±0.08
1.29±0.06a
0.88±0.09
0.36±0.08
0.21±0.15
阿司匹林
0.15
9
1.36±0.13
0.66±0.17c
0.51±0.15c
, 百拇医药
0.26±0.13b
0.16±0.12
0.01±0.11
与同期对照组比较：a：P<0.05； b：P<0.01； c：P<0.001(下表同)
表1结果表明，家兔注射菌苗后1h体温已明显升高，3h(给药后1h)达高峰。风热清40g/kg组在致热后各时间体温升高均显著低于对照组，10g/kg组的体温增高仅在给药后2h与对照组比较有显著性差异。
1.2 对角叉菜胶致大鼠发热的影响 雄性大鼠，体重164±20 g，实验前禁水15 h，用温度指示间隔1h测量正常体温(肛温)3次，选择平均体温38～39℃，温差不超过0.2℃的大鼠32只，按正常体温随机分为4组。于每鼠两后肢足跖部皮下分别注入1%角叉菜胶0.1ml致热，随后按表2所示剂量灌胃给药，于致热后4～8h，每隔1h同法测量各鼠体温1次，共测5次。表2 对大鼠角叉菜胶发热的影响(
±s) 组 别, 百拇医药
剂量
(g/kg)
动物数
(只)
正常体
温(℃)
致热后给药后体温变化(℃)
4 h
5 h
6 h
7 h
8 h
空白对照
, 百拇医药
8
38.7±0.21
0.56±0.48
0.91±0.43
0.95±0.47
0.82±0.46
0.80±0.36
风热清
20
8
38.8±0.46
0.30±0.32
, 百拇医药
0.51±0.39
0.51±0.43
0.50±0.47
0.41±0.50
风热清
10
8
38.8±0.40
0.34±0.37
0.73±0.37
0.78±0.33
0.39±0.37
, 百拇医药
0.41±0.36
阿司匹林
0.075
8
38.8±0.34
-0.02±0.38a
0.18±0.41b
0.31±0.31a
0.36±0.31a
0.54±0.38
表2结果表明，大鼠注射角叉菜胶后4h体温已升高，6h达高峰，风热清给药组在发热各时期体温升高均低于对照组，具有退热趋势。
, http://www.100md.com
2 抗炎作用
2.1 对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响 雄性大鼠60只，体重(178±20)g，按体重随机分为5组，于每鼠右后足踝关节上方划一线作为标志，用毛细管放大法测量该足爪体积(排水毫升数)，然后每鼠右后肢足跖部皮下注射1%角叉菜胶0.1 ml致炎，致炎后0.5 h与4 h按表3所示剂量各灌胃给药1次，同法测量给药后1，2，3，4，6，7，24h该足爪体积，以其体积的改变(给药前后排水量之差)表示炎症肿胀程度，结果见表3。表3 对角叉菜胶大鼠足肿胀的影响(
±s) 组 别剂量
(g/kg)
动物
(只)
, 百拇医药
肿胀程度(ml)
1
2
3
4
6
7
24
空白对照
12
0.63±0.12
1.00±0.13
1.12±0.17
, 百拇医药
1.12±0.18
1.12±0.17
1.01±0.81
0.57±0.28
风热清
40
12
0.39±0.13c
0.71±0.14c
0.84±0.14c
0.85±0.17b
, 百拇医药
0.79±0.19b
0.79±0.21a
0.36±0.13a
(38.4)
(29.1)
(25.2)
(23.7)
(22.2)
(22.0)
(35.8)
风热清
, 百拇医药 20
12
0.42±0.14c
0.76±0.21b
0.88±0.18b
0.90±0.19b
0.85±0.18a
0.84±0.16a
0.38±0.15
(33.2)
, 百拇医药 (21.6)
(21.3)
(19.9)
(16.3)
(17.3)
(33.3)
风热清
10
12
0.50±0.12b
0.79±0.19b
0.94±0.15a
, http://www.100md.com
0.94±0.18a
0.91±0.19
0.90±0.22
0.42±0.14
(21.6)
(20.8)
(16.3)
(16.0)
(10.7)
(11.4)
(26.5)
醋酸泼
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0.03
12
0.38±0.11c
0.53±0.08c
0.50±0.04c
0.47±0.06c
0.39±0.11c
0.37±0.12c
0.19±0.11a
尼松
, 百拇医药
(39.5)
(40.9)
(54.0)
(54.8)
(61.4)
(63.6)
(66.7)
( )内为肿胀抑制百分率
表3结果表明，风热清40，20与10 g/kg对角叉菜胶引起的大鼠足炎性水肿均具有明显抑制作用，尤其是大剂量，在致炎后24h抑制作用仍然显著。
2.2 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响 雄性小鼠75只，随机分为5组，连续灌胃给药3 d，按文献〔2〕方法以二甲苯为致炎剂测定各组小鼠耳肿胀度。结果对照组，风热清高(40 g/kg)、中(20 g/kg)、低(10 g/kg)剂量组，泼尼松20 mg/kg给药(阳性对照)耳肿胀度分别为(11.2±1.7)，(9.3±2.6)，(8.6±2.5)，(10.7±1.9)，(7.6±2.4)mg。风热清高、中剂量与20 mg/kg泼尼松具有显著抗炎作用，与对照组比较分别为P<0.05，P<0.01，P<0.001。
, 百拇医药
2.3 对小鼠皮肤毛细血管通透性增高的影响〔1〕 雄性小鼠75只，随机分为5组，连续灌胃给药3 d，末次给药后1 h，每鼠尾静脉注射1%伊文思兰0.1 ml/10g，立即于下腹部皮内注入0.1%磷酸组胺0.1 ml，上腹部脱毛区滴二甲苯20 μ l，20 min后处死小鼠，剪下二甲苯致炎部位兰斑皮肤，剪碎后浸入2.5 ml丙酮生理盐水中，室温放置24 h，离心，取上清液置721分光光度计610 nm比色，直接以OD值进行比较；剥离并翻转下腹部皮肤，分级法比较各鼠组胺皮丘周围兰染程度(兰染程度分为4级)。结果见表4。表4 对小鼠腹部皮肤毛细血管通透性增高的影响(
±s) 组 别剂量
(g/kg)
动物数
, 百拇医药 (只)
毛细血管通透性
二甲苯(提取液OD值)
组胺(皮肤兰染级别)
空白对照
15
0.130±0.064
3.2±0.8
风热清
40
15
0.043±0.017c
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2.1±0.6a
风热清
20
15
0.062±0.028b
2.8±0.7
风热清
10
15
0.056±0.029b
2.9±0.7
醋酸泼尼松
, 百拇医药
0.02
15
0.054±0.024c
2.3±0.9a
由表4可知，对于二甲苯所引起的小鼠皮肤毛细血管通透性增高，风热清大、中、小剂量均具有显著抑制作用，对于组胺所致皮肤毛细血管通透性增高，仅大剂量有明显抑制效果。
3 抗菌作用
3.1 体外抗菌试验 采用“试管二倍稀释法”测定风热清对8种常见致病菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果表明，风热清对金葡菌、甲型与乙型链球菌、肺炎球菌、大肠杆菌、福氏痢疾杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌均具有一定抑菌作用，MIC分别为0.062，0.062，0.031，0.062，0.500，0.5000，0.125，0.25g/ml。
, 百拇医药
3.2 对小鼠金葡菌感染的保护作用 小鼠100只，雌雄各半，按性别、体重随机分为5组，连续灌胃给药3 d。金葡菌接种于肉汤培养基中，置37℃培养箱中培养15 h，用无菌肉汤作1∶4稀释(预试对小鼠的死亡率为90%)。于末次给药后1h，每鼠腹腔注射上述金葡菌悬液0.5 ml，染菌后2 h再给药1次(剂量减半)，观察24 h内各组小鼠死亡情况。结果对照组，风热清40，20，10 g/kg组，乙酰螺旋霉素1 g/kg组(阳性对照)动物死亡数分别为19/20，14/20，18/20，18/20，4/20，提示风热清可以降低小鼠感染金葡菌的死亡率，但保护作用不显著(与对照组比较P>0.05)。
3.3 小鼠肺炎球菌感染的保护作用 动物、分组及给药同“3.2”。肺炎球菌接种于含10%小牛血清的肉汤培养基中，置培养箱37℃培养18 h，用无菌肉汤作1∶7稀释(预试时对感染小鼠的死亡率为100%)，于末次给药后1 h，每鼠腹腔注射上述菌液0.5 ml，观察24 h内小鼠死亡情况。结果对照组，风热清40，20，10 g/kg组，乙酰螺旋霉素组动物死亡数分别为20/20，14/20，16/20，19/20，6/20，表明风热清能够提高小鼠对肺炎球菌的抵抗能力，以高剂量组为显著，感染小鼠死亡数与对照组比较P<0.05。
, 百拇医药
4 抗病毒作用
流感病毒甲1型、甲3型，腺病毒3型、7型均作10-1与10-2稀释，分别与不同浓度的药液等量混合，接种于人胚肾细胞中(各两管)吸附40 min，加入2%小牛血清乳白蛋白细胞维持液，置37℃培养1周，逐日观察细胞病变，流感病毒7 d后作豚鼠血球吸附试验，以吸附试验阴性(一)为灭活指标。腺病毒以细胞不出现腺病毒变(一)为灭活指标。结果见表5。表5 对腺病毒与流感病毒的灭活作用 病 毒
风 热 清
抗病毒口服液
病毒
对照
细胞
对照
, 百拇医药
1∶10
1∶20
1∶40
1∶80
1∶10
1∶20
1∶40
1∶80
腺病毒3型
10-1
-
-
, 百拇医药
-
10-2
-
-
-
±
-
, 百拇医药
腺病毒7型
10-1
-
-
, 百拇医药 -
10-2
-
-
-
-
, 百拇医药
流感病毒甲1型
10-1
-
-
+
+
-
+
+
+
+
-
10-2
, 百拇医药
-
-
+
+
-
±
+
+
+
-
流感病毒甲3型
10-1
-
, http://www.100md.com +
+
+
-
-
+
+
+
-
10-2
-
+
+
+
, http://www.100md.com
-
-
-
+
+
-
以上结果表明，风热清1∶10浓度对上述各型腺病毒及流感病毒均具有灭活作用，1∶20浓度对腺病毒3型、7型与流感病毒甲1型可灭活；1∶40浓度仅对较低浓度(10-2)腺病毒7型具有灭活作用。风热清对腺病毒与流感病毒甲1型的灭活作用强于抗病毒口服液，对流感病毒3型的灭活作用不如抗病毒口服液。
5 对免疫功能的影响
5.1 对小鼠单核巨噬细胞系统吞噬功能的影响 雄性小鼠40只，随机分为4组，连续灌胃给药7 d。末次给药后24 h，尾静脉注射墨汁(西德产，chroma)0.1 ml/10 g，于注射后30 s与5 min分别自眼眶血管丛取血25μl，加入0.1%Na2CO32ml中，置721分光光度计675 nm比色测定OD值，计算吞噬指数K。结果对照组，风热清40，20 g/kg组，左旋咪唑15 mg/kg组的吞噬指数分别为0.033±0.008,0.042±0.009,0.036±0.007，0.046±0.011，其中高剂量组吞噬指数较对照组明显增大(P<0.05)，表明该药物具有促进小鼠单核巨噬细胞非特异性吞噬功能的作用，与15 mg/kg左旋咪唑无显著性差异。
, 百拇医药
5.2 对小鼠迟发型皮肤超敏反应(DCH)的影响 雄性NIH小鼠50只，随机分为5组，连续灌胃给药10 d，用二硝基氯苯(DNCB)对小鼠进行致敏与攻击，测定各组小鼠的DCH反应程度〔3〕，以腹部兰染皮伊文思兰浸出液的OD值表示。结果对照组为0.073±0.017；风热清40 g/kg组与20 g/kg组分别为0.099±0.014(P<0.01)与0.100±0.015(P<0.01)；环磷酰胺20 mg/kg(ip)组为0.044±0.019(P<0.01)，环磷酰胺+风热清40 g/kg组0.086±0.016(与环磷酰胺组比较P<0.001)。表明风热清可以提高DNCB诱导的正常小鼠的DCH反应与免疫低下(被环磷酰胺所抑制)的小鼠的细胞免疫功能。
6 止咳作用
雄性小鼠60只，随机分为4组，采用氨水引咳法小鼠灌胃给药后1 h进行实验，接受氨水刺激1 min后取出，观察记录2 min内的咳嗽次数。结果对照组，风热清40，20 g/kg组和可待因30 mg/kg组小鼠的平均咳嗽次数分别为45.1±21.5，32.5±21.0，40.5±24.4和20.6±21.0(P<0.01)，表明风热清对氨水刺激引起的小鼠咳嗽无明显止咳作用。
, 百拇医药
7 祛痰作用
小鼠60只，雌雄均有，随机分为4组，灌胃给药后40 min，用酚红法〔2〕测定各组小鼠呼吸道灌洗液的酚红浓度(以OD值表示)。结果对照组为0.037±0.019；风热清40 g/kg组与20 g/kg组分别为0.064±0.019(P<0.01)与0.051±0.014(P<0.05)；氯化铵1 g/kg组为0.060±0.021(P<0.01)，表明风热清能使小鼠呼吸道粘膜的分泌量明显增加，具有祛痰作用，40 g/kg风热清的作用与1 g/kg氯化铵接近(P<0.05)。讨论
以上实验结果表明，风热清口服液对伤寒副伤寒菌苗所引起的家兔发热有显著退热作用，对角叉菜胶引起的大鼠发热具有一定退热作用，可以明显抑制角叉菜胶所致大鼠足肿胀，二甲苯所致小鼠耳肿胀，降低组胺或二甲苯引起的小鼠皮肤毛细血管通透性增高，即通过多种途径抑制以渗出水肿为主的急性炎症。另外，酚红试验显示本品可以增加呼吸道粘膜的分泌，发挥祛痰作用。这些作用是临床治疗外感发热症(急性上呼吸道感染)的药理学基础之一。它可显著增强单核巨噬细胞系统对血中惰性碳粒的廓清能力，刺激正常与免疫功能低下小鼠的细胞免疫功能；本品对肺炎双球菌及金葡菌感染小鼠引起的死亡具有一定保护作用，体外较高浓度能灭活流感病毒与腺病毒，抑制金葡菌、链球菌、肺炎双球菌等G+球菌及部分G-杆菌的生长，提示本品临床疗效与其提高机体免疫功能及直接杀抑病原微生物有关。
(收稿：1998—02—10 修回：1998—05—20), http://www.100md.com(易明娟 谭亿民 谢子清 朱绍荣1 王 奎1)