奈替米星体内外杀菌活性与给药方案研究
作者：孙淑娟 张世玲 于振海 李宏建 苏乐群
单位：张世玲(山东医科大学,济南 250012)；孙淑娟 于振海 李宏建 苏乐群(山东省千佛山医院,济南 250014)
关键词：奈替米星；体外杀菌活性；体内杀菌活性；血药浓度；给药方案
中国新药杂志000312 摘要 目的：通过测定奈替米星(NTM)的体内、外杀菌活性及血药浓度,观察不同给药方案的疗效与不良反应,优选其最佳给药方案。方法：血药浓度用TDx(荧光偏振免疫法)测定。体内、外杀菌活性用微量稀释法测定。结果：NTM对常见致病菌有较强的体外抗菌活性。给予NTM，OD给药(qd),其谷浓度均低于2μg/ ml,较TD给药(bid)有显著性降低(P<0.05),而其峰浓度较TD给药有显著性增高(P<0.01)。除绿脓假单胞菌外，NTM qd给药对其他3种菌峰时体内杀菌活性(SBA)均≥1∶8，且较TD给药有显著性增强。qd给药组患者给药前后Cr,BUN 没有变化，而TD 给药组患者用药后较用药前Cr有显著性增高(P<0.05)。结论：奈替米星对常见致病菌具有较强的抗菌活性。NTM OD比TD给药能够获得较强的疗效,较少的不良反应。
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STUDY ON THE IN VITRO AND IN VIVO ANTIBACTERIAL ACTIVITY AND
REGIMENS OF NETILMICIN
Sun Shujuan Zhang Shiling Yu Zhenhai
(Qianfoshan Hospital,Sangdong Province,Jinan 250014)
ABSTRACT OBJECTIVE：The optimum regimen for netilmicin (NTM) was selected via study on its antibacterial activities and blood concentrations.METHODS:Its serum levels and antibacterial activities (SBA) of once daily (OD) and twice daily dose (TD) regimens were determined by TDx and microdilution method respectively.RESULTS:NTM was highly susceptable to general pathogens.All its trough concentrations for OD regimen were <2μg/ml that was significantly lower than those of TD regimen and its peak concentrations were significantly higher with TD regimen .The peak SBA for OD regimen against 3 pathogens was significantly stronger than that for TD regimen.No changes in Cr and BUN were observed in OD regimen while significant changes were observed in TD regimen.CONCLUSION:NTM is an antibiotic with potent antibacterial activity against general pathogens isolated from clinic and a greater therapeutic effect can be obtained with OD regimen in comparison with TD regimen and side-effects are seldom.
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KEY WORDS Netilmicin; In vitro antibacterial activity; Serum bactericidal activity; Serum concentration; Administration regimen
氨基糖苷类抗生素以其G-杆菌的广谱抗菌作用(包括绿脓杆菌)、对金葡菌有效、与多种抗生素有协同作用等特点，目前为临床上治疗各系统感染不可缺少的一类抗菌药物。但这类药物存在耳、肾毒性和细菌耐药的问题[1]。虽然已有报道此类药物可以OD给药(qd)，但新编药物学、药品说明书中仍写为分次给药。奈替米星(netilmicin,NTM)体内杀菌活性(SBA)作者尚未见国内报道，也没有以SBA等参数对其OD给药方案的有效性和安全性进行综合评价的研究报道。另外，随着此药的临床应用，其细菌耐药性又有何变异?
本实验对比研究了NTM与庆大霉素(gentamicin, GTM)和头孢哌酮(cefoperazone, CPZ)的体外抗菌活性；测定了NTM于健康人和手术患者不同给药方案的血药浓度和SBA；观察比较了NTM两种给药方案用于术后预防感染的疗效与不良反应。
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材料与方法
1 材料
1.1 抗菌药物 NTM(青岛第二制药厂,批号:980703)；GTM(济南永宁制药股分有限公司,批号:980810)；CPZ(丽珠集团丽珠制药厂,批号:980516)。
1.2 受试菌株 金葡菌、绿脓假单胞菌、大肠杆菌、肺炎克雷白菌各30株,且均为临床新近分离菌。质控菌株为标准菌株:金葡菌ATCC25923、绿脓假单胞菌ATCC27853、大肠杆菌ATCC25922。
1.3 主要仪器与试剂 血药浓度监测仪(TDx)、奈替米星试剂，美国雅培公司。96孔平板,Flow Laboratories, In A Flow General Company ,Mclean Virginia 22102 USA。细菌浊度标准：中国药品生物制品检定所。培养基:Mueller-Hinton(MH)肉汤培养基由中国腹泻病控制上海试剂供应中心提供。
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2 方法
2.1 NTM与GTM及CPZ的体外抗菌活性比较
2.1.1 实验方法 MIC，MBC采用微量稀释法[2]测定。
2.1.2 数据处理 分别统计MIC/MBC范围(MICr,MBCr)、几何均数(MICg,MBCg)、50%抑菌浓度(MIC50)、90%抑菌浓度(MIC90)；根据NCCLS标准[3],NTM，GTM，CPZ对绿脓假单胞菌及其他G-杆菌的临界浓度为8，4，16μg/ml,以此标准统计致病菌对各药的敏感率。
2.2 NTM于健康人体的药代动力学及SBA测定
2.2.1 实验方法 8位健康志愿者，均为男性，年龄18～20岁，平均(19.0±0.8)岁，体重55～69kg，平均(64.1±3.7)kg，经查体和实验室检查无任何疾病，肝、肾功能正常，无药物过敏史，实验前1周内未用其他药物；将NTM按5mg/kg加在100ml生理盐水中静脉滴注,0.5h给完。分别于给药前(0)、给药结束后0.1,0.5,1,2,4,8,12,16,24h静脉采血。测其血药浓度及峰时(0.1h)与谷时(24h)的SBA。
, 百拇医药
质控方法及空白血清杀菌活性观察方法： 阴性对照为MH+血样→观察每个含药血清样品在操作过程是否有污染。 阳性对照为菌液+MH→观察细菌是否生长良好。 空白血清观察为菌液+空白血清 → 观察血清对细菌生长的影响。
2.2.2 统计分析 根据所测浓度求出NTM于健康人体的药代动力学参数,统计出峰时与谷时SBA值的中位数。
2.3 NTM两种给药方案的血药浓度、SBA、临床疗效及不良反应比较
2.3.1 实验方法 16例外科手术患者男10例，女6例，年龄35～58岁，平均(46.0±10.7)岁,体重50～70kg，平均(64.5±5.5)kg,其中8例为肝硬变的门脉高压患者，肝功能分级为Ⅱ级和Ⅲ级，肾功能正常；8例为肝、肾功能均正常(肝功能分级为Ⅰ级)的血管疾病(包括动脉栓塞、下肢静脉曲张)手术患者，均具有抗生素预防性应用指征。16例手术患者随机分于OD与TD 给药组，OD组按NTM 5mg/(kg.d)加于100ml生理盐水中30min内1次给完；TD组按NTM 2.5mg/kg加于100ml生理盐水中30min给完,bid；两组患者均于术前1d开始用NTM，d3末次给完药后0.1h(峰)及下次给药前(谷)开始采血；记录患者自述症状、测体温、做B超检查、查血象(WBC)、观察有无感染迹象；观察听力变化，测血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)浓度。Cr以苦味酸法测定，BUN以酶法测定。
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2.3.2 统计分析 比较OD与TD方案峰时与谷时的血药浓度,并进行t检验；将OD与TD两种给药方案的SBS与SBA值分别求中位数,并作Wilcoxon秩和检验；比较8位健康人与8位手术患者OD给药后峰时与谷时浓度，并进行t检验；比较OD与TD两种给药方案的疗效与不良反应,对给药前后肾功能指标变化进行t检验。
结 果
1 体外抗菌活性
NTM,GTM,CPZ对4种常见致病菌的体外抗菌活性比较见表1,2。
表1 NTM,GTM,CPZ对4种常见致病菌的体外抑菌活性比较(μg/ml) 细 菌
抗生素
菌株数
, http://www.100md.com MICr
MICg
MIC50
MIC90
敏感率(%)
金 葡 菌
NTM
30
0.0625～16
0.5
0.5
2
90
, 百拇医药
GTM
30
0.125～32
4.287
4
32
60
CPZ
30
0.5～32
1.516
1
4
, 百拇医药
80
大肠杆菌
NTM
30
0.25～4
0.435
0.25
0.5
100
GTM
30
0.25～64
1.072
, 百拇医药
1
2
90
CPZ
30
0.125～2
0.354
0.25
1
100
肺炎克雷白菌
NTM
30
, http://www.100md.com
0.125～128
0.758
0.25
4
90
GTM
30
0.25～128
1.741
0.25
16
70
CPZ
, http://www.100md.com
30
0.0625～128
0.574
0.25
4
90
绿脓假单胞菌
NTM
30
0.5～128
1.741
1
8
, 百拇医药
80
GTM
30
0.5～128
2.828
1
32
60
CPZ
30
1～32
2.102
2
, 百拇医药
16
90
表2 NTM，GTM，CPZ对4种常见致病菌的体外杀菌活性比较(μg/ml) 细 菌
抗生素
菌株数
MBCr
MBCg
MBC50
MBC90
金 葡 菌
NTM
30
, http://www.100md.com
0.125～32
1.625
1
8
GTM
30
0.25～128
5.657
4
128
CPZ
30
1～64
, 百拇医药
2.297
2
32
大肠杆菌
NTM
30
0.25～4
0.574
0.5
2
GTM
30
0.5～64
, 百拇医药
1.625
1
4
CPZ
30
0.25～2
0.707
0.5
2
肺炎克雷白菌
NTM
30
0.125～128
, 百拇医药
1.00
0.25
4
GTM
30
0.25～128
2.828
0.5
64
CPZ
30
0.125～128
0.758
, http://www.100md.com
0.25
8
绿脓假单胞菌
NTM
30
1～128
4.287
2
32
GTM
30
0.5～128
5.278
, http://www.100md.com
4
64
CPZ
30
2～32
3.732
2
16
本实验测定的质控标准菌株的MIC值均在其标准范围内。2 8位健康志愿者OD给药后不同时间的血药浓度和峰谷时的SBA
2.1 血药浓度 见表3。
表3 8位健康志愿者OD给药后不同时间的血药浓度(μg/ml) 受试者
, 百拇医药
0.1h
0.5h
1h
2h
4h
8h
12h
24h
1
27.44
17.25
12.83
9.13
, 百拇医药
4.17
1.17
0.27
0.09
2
22.16
15.45
11.08
7.98
3.96
1.42
0.42
0.16
, 百拇医药
3
21.00
15.45
11.33
8.12
3.66
1.19
0.37
0.10
4
19.68
14.25
9.21
, 百拇医药
6.69
3.28
1.23
0.35
0.21
5
23.28
17.25
12.49
9.10
4.09
1.22
0.30
, 百拇医药
0.12
6
26.00
17.55
12.59
9.05
4.06
1.25
0.30
0.15
7
19.80
13.45
, 百拇医药
9.03
5.98
2.41
0.86
0.10
0.09
8
18.24
13.23
8.20
5.56
2.17
0.85
, 百拇医药
0.15
0.09
x
22.20
15.49
10.85
7.70
3.48
1.15
0.28
0.13
s
3.21
, 百拇医药
1.74
1.81
1.45
0.79
0.20
0.11
0.04
经3P87统计求得的NTM静脉给药的药代动力学参数：一房室模型;t1/2=(2.14±0.18)h,Vd=(0.36±0.06)L/kg,AUC=(44.38±6.59)mg.h/L，CL=(0.12±0.02)ml/min。本实验结果与文献报道[4,5]相近。2.2 体内杀菌活性 给予NTM后峰时与谷时SBS，SBA的中位数见表4。
, 百拇医药
表4 峰时与谷时血清杀菌活性比较 细菌
时间
SBS
SBA
金 葡 菌
峰时
1∶8～1∶16
1∶8
谷时
1∶1
1∶1
大肠埃希菌
峰时
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1∶32
1∶16～1∶32
谷时
1∶4
1∶2
肺炎克雷白菌
峰时
1∶16
1∶16
谷时
1∶2～1∶4
1∶2
绿脓假单胞菌
, 百拇医药
峰时
1∶8
1∶4～1∶8
谷时
1∶1
<1∶1
2.3 质控结果及空白血清的杀菌活性观察 质控结果显示,所有血样均未污染，所选用菌株均生长良好。8位健康志愿者的空白血清,虽不能完全抑制细菌生长，但从整体来看,加空白血清组比单纯加MH培养基组(阳性对照组),细菌生长弱一些。提示人体血清对细菌的生长有一定抑制作用。
3 16例手术患者两种给药方案峰时与谷时的浓度与SBA
3.1 血药浓度 见表5。 表5 两种给药方案峰时与谷时的浓度(μg/ml) 受试者
, 百拇医药
OD
TD
峰时
谷时
峰时
谷时
1
27.84
0.52
19.70
6.75
2
21.56
, 百拇医药
0.24
13.62
0.43
3
19.98
0.18
14.04
0.48
4
22.77
0.16
16.24
1.94
, http://www.100md.com
5
18.65
0.13
15.80
5.33
6
19.71
0.27
11.70
0.38
7
23.48
0.09
, http://www.100md.com
11.05
0.56
8
24.10
0.09
12.10
0.45
x
22.26
0.21
14.28
2.55
s
, http://www.100md.com
2.96
0.14
2.88
2.04
3.2 两种给药方案SBS和SBA的比较 见表6。表6 两种给药方案的SBS和SBA中位数比较 细 菌
OD
TD
SBS
SBA
SBS
SBA
金 葡 菌
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峰时
1∶8
1∶8
1∶4～1∶8
1∶4
谷时
1∶1
1∶1
1∶1
1∶1
大肠埃希菌
峰时
1∶32
, http://www.100md.com
1∶16
1∶16
1∶8
谷时
1∶4
1∶2
1∶2
1∶1
肺炎克雷白菌
峰时
1∶32～1∶64
1∶16
1∶16
, http://www.100md.com
1∶8
谷时
1∶2
1∶2
1∶4
1∶2
绿脓假单胞菌
峰时
1∶4～1∶8
1∶2
1∶4
1∶2
谷时
, 百拇医药
1∶1
<1∶1
1∶1
1∶1
3.3 健康人与患者OD给药峰时与谷时浓度比较 经t检验均无显著性差异(P>0.05)。 3.4 两种给药方案疗效与不良反应比较 ①OD 与TD 两组患者，术后体温、血象无异常,B超检查腹腔无积液,患者自述感觉良好,两组患者均无感染迹象,且无耳鸣等听力异常现象,用药期间也未发现有其他不良反应；②患者用药前后Cr和BUN值比较见表7。TD组用药后Cr较用药前有显著性提高(P<0.05)。而OD组用药前后无明显改变，提示TD给药较OD给药易发生肾毒性。
表7 两组患者给药前后Cr及BUN的比较 给药方案
Cr(μmol/L)
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BUN(mmol/L)
用药前
用药后
用药前
用药后
OD
50.17±14.98
49.26±10.12
4.85±1.36
4.52±1.47
TD
46.01±10.96
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59.78±14.51
4.35±1.32
4.31±1.53
讨 论
随着抗生素的临床应用，细菌会不断产生耐药性，这是一个非常令人关注的问题。本实验各种体外杀菌活性参数均显示NTM比同类药GTM的体外抗菌活性强，GTM对所选菌出现了严重的耐药现象，特别是对金葡菌和绿脓杆菌。NTM与CPZ相比，对所选的各种菌敏感率相近，只是金葡菌对NTM敏感率稍高，绿脓杆菌对CPZ敏感率高一些。
SBA是一个综合评价药物的药敏、药代动力学及药效动力学的参数[6]，其值代表的是体内原形药物、活性代谢产物及机体免疫功能的综合杀菌效力。本实验在国内首次应用了SBA对比研究了相同日剂量情况下，NTM不同给药方案的SBA。结果表明，NTM OD给药，对金葡菌、大肠杆菌、肺炎克雷白菌峰时SBA ≥1∶8,且与TD 给药有显著性差异(Wilcoxon秩和检验，P<0.05)。据文献报道[7]，对于严重感染患者，峰时SBA≥1∶8与临床治愈率密切相关，因此可以预计，对于上述3种菌的感染，OD给药将比TD给药疗效更高。本实验血药浓度采用了TDx测定。氨基糖苷类抗生素，由于其耳、肾毒性的存在，在国外临床应用时要求进行血药浓度监测，特别是老年患者、肾功能不全和长期用药患者[8,9]。由于发现此类药物不良反应与谷浓度有关，因此目前主要是监测其谷浓度，当谷浓度≥2μg/ml时应调整给药剂量或用药间隔。本实验TD给药中8例患者有2例谷浓度>2μg/ml，由此可见TDx监测的必要性。
, 百拇医药
当采用相同给药剂量和方案时，健康人与患者(肾功正常)的峰、谷浓度和SBA均无显著性差异，这可能是由于NTM 主要从肾脏排泄所致。本实验OD与TD两组患者，无1例有感染迹象发生，两组患者获得了同样的临床疗效，但肾功能指标给药前后变化不同。TD组给药后Cr较给药前有显著性增高(P<0.05),而OD组则无明显改变。因此从本实验结果看，OD给药不仅有效而且更安全，并且给药次数减少,能够减少护士的工作量,增加患者的依从性,从而提高药物的价值。
参考文献
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9，Konrad F， Wagner R， Neumeister B， et al. Studies on drug monitoring in thrice and once daily treatment with aminoglycosides. Intensive Care Med,1993，19(4)∶215
收稿：1999-09-14
修回：2000-01-04, http://www.100md.com
单位：张世玲(山东医科大学,济南 250012)；孙淑娟 于振海 李宏建 苏乐群(山东省千佛山医院,济南 250014)
关键词：奈替米星；体外杀菌活性；体内杀菌活性；血药浓度；给药方案
中国新药杂志000312 摘要 目的：通过测定奈替米星(NTM)的体内、外杀菌活性及血药浓度,观察不同给药方案的疗效与不良反应,优选其最佳给药方案。方法：血药浓度用TDx(荧光偏振免疫法)测定。体内、外杀菌活性用微量稀释法测定。结果：NTM对常见致病菌有较强的体外抗菌活性。给予NTM，OD给药(qd),其谷浓度均低于2μg/ ml,较TD给药(bid)有显著性降低(P<0.05),而其峰浓度较TD给药有显著性增高(P<0.01)。除绿脓假单胞菌外，NTM qd给药对其他3种菌峰时体内杀菌活性(SBA)均≥1∶8，且较TD给药有显著性增强。qd给药组患者给药前后Cr,BUN 没有变化，而TD 给药组患者用药后较用药前Cr有显著性增高(P<0.05)。结论：奈替米星对常见致病菌具有较强的抗菌活性。NTM OD比TD给药能够获得较强的疗效,较少的不良反应。
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STUDY ON THE IN VITRO AND IN VIVO ANTIBACTERIAL ACTIVITY AND
REGIMENS OF NETILMICIN
Sun Shujuan Zhang Shiling Yu Zhenhai
(Qianfoshan Hospital,Sangdong Province,Jinan 250014)
ABSTRACT OBJECTIVE：The optimum regimen for netilmicin (NTM) was selected via study on its antibacterial activities and blood concentrations.METHODS:Its serum levels and antibacterial activities (SBA) of once daily (OD) and twice daily dose (TD) regimens were determined by TDx and microdilution method respectively.RESULTS:NTM was highly susceptable to general pathogens.All its trough concentrations for OD regimen were <2μg/ml that was significantly lower than those of TD regimen and its peak concentrations were significantly higher with TD regimen .The peak SBA for OD regimen against 3 pathogens was significantly stronger than that for TD regimen.No changes in Cr and BUN were observed in OD regimen while significant changes were observed in TD regimen.CONCLUSION:NTM is an antibiotic with potent antibacterial activity against general pathogens isolated from clinic and a greater therapeutic effect can be obtained with OD regimen in comparison with TD regimen and side-effects are seldom.
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KEY WORDS Netilmicin; In vitro antibacterial activity; Serum bactericidal activity; Serum concentration; Administration regimen
氨基糖苷类抗生素以其G-杆菌的广谱抗菌作用(包括绿脓杆菌)、对金葡菌有效、与多种抗生素有协同作用等特点，目前为临床上治疗各系统感染不可缺少的一类抗菌药物。但这类药物存在耳、肾毒性和细菌耐药的问题[1]。虽然已有报道此类药物可以OD给药(qd)，但新编药物学、药品说明书中仍写为分次给药。奈替米星(netilmicin,NTM)体内杀菌活性(SBA)作者尚未见国内报道，也没有以SBA等参数对其OD给药方案的有效性和安全性进行综合评价的研究报道。另外，随着此药的临床应用，其细菌耐药性又有何变异?
本实验对比研究了NTM与庆大霉素(gentamicin, GTM)和头孢哌酮(cefoperazone, CPZ)的体外抗菌活性；测定了NTM于健康人和手术患者不同给药方案的血药浓度和SBA；观察比较了NTM两种给药方案用于术后预防感染的疗效与不良反应。
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材料与方法
1 材料
1.1 抗菌药物 NTM(青岛第二制药厂,批号:980703)；GTM(济南永宁制药股分有限公司,批号:980810)；CPZ(丽珠集团丽珠制药厂,批号:980516)。
1.2 受试菌株 金葡菌、绿脓假单胞菌、大肠杆菌、肺炎克雷白菌各30株,且均为临床新近分离菌。质控菌株为标准菌株:金葡菌ATCC25923、绿脓假单胞菌ATCC27853、大肠杆菌ATCC25922。
1.3 主要仪器与试剂 血药浓度监测仪(TDx)、奈替米星试剂，美国雅培公司。96孔平板,Flow Laboratories, In A Flow General Company ,Mclean Virginia 22102 USA。细菌浊度标准：中国药品生物制品检定所。培养基:Mueller-Hinton(MH)肉汤培养基由中国腹泻病控制上海试剂供应中心提供。
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2 方法
2.1 NTM与GTM及CPZ的体外抗菌活性比较
2.1.1 实验方法 MIC，MBC采用微量稀释法[2]测定。
2.1.2 数据处理 分别统计MIC/MBC范围(MICr,MBCr)、几何均数(MICg,MBCg)、50%抑菌浓度(MIC50)、90%抑菌浓度(MIC90)；根据NCCLS标准[3],NTM，GTM，CPZ对绿脓假单胞菌及其他G-杆菌的临界浓度为8，4，16μg/ml,以此标准统计致病菌对各药的敏感率。
2.2 NTM于健康人体的药代动力学及SBA测定
2.2.1 实验方法 8位健康志愿者，均为男性，年龄18～20岁，平均(19.0±0.8)岁，体重55～69kg，平均(64.1±3.7)kg，经查体和实验室检查无任何疾病，肝、肾功能正常，无药物过敏史，实验前1周内未用其他药物；将NTM按5mg/kg加在100ml生理盐水中静脉滴注,0.5h给完。分别于给药前(0)、给药结束后0.1,0.5,1,2,4,8,12,16,24h静脉采血。测其血药浓度及峰时(0.1h)与谷时(24h)的SBA。
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质控方法及空白血清杀菌活性观察方法： 阴性对照为MH+血样→观察每个含药血清样品在操作过程是否有污染。 阳性对照为菌液+MH→观察细菌是否生长良好。 空白血清观察为菌液+空白血清 → 观察血清对细菌生长的影响。
2.2.2 统计分析 根据所测浓度求出NTM于健康人体的药代动力学参数,统计出峰时与谷时SBA值的中位数。
2.3 NTM两种给药方案的血药浓度、SBA、临床疗效及不良反应比较
2.3.1 实验方法 16例外科手术患者男10例，女6例，年龄35～58岁，平均(46.0±10.7)岁,体重50～70kg，平均(64.5±5.5)kg,其中8例为肝硬变的门脉高压患者，肝功能分级为Ⅱ级和Ⅲ级，肾功能正常；8例为肝、肾功能均正常(肝功能分级为Ⅰ级)的血管疾病(包括动脉栓塞、下肢静脉曲张)手术患者，均具有抗生素预防性应用指征。16例手术患者随机分于OD与TD 给药组，OD组按NTM 5mg/(kg.d)加于100ml生理盐水中30min内1次给完；TD组按NTM 2.5mg/kg加于100ml生理盐水中30min给完,bid；两组患者均于术前1d开始用NTM，d3末次给完药后0.1h(峰)及下次给药前(谷)开始采血；记录患者自述症状、测体温、做B超检查、查血象(WBC)、观察有无感染迹象；观察听力变化，测血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)浓度。Cr以苦味酸法测定，BUN以酶法测定。
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2.3.2 统计分析 比较OD与TD方案峰时与谷时的血药浓度,并进行t检验；将OD与TD两种给药方案的SBS与SBA值分别求中位数,并作Wilcoxon秩和检验；比较8位健康人与8位手术患者OD给药后峰时与谷时浓度，并进行t检验；比较OD与TD两种给药方案的疗效与不良反应,对给药前后肾功能指标变化进行t检验。
结 果
1 体外抗菌活性
NTM,GTM,CPZ对4种常见致病菌的体外抗菌活性比较见表1,2。
表1 NTM,GTM,CPZ对4种常见致病菌的体外抑菌活性比较(μg/ml) 细 菌
抗生素
菌株数
, http://www.100md.com MICr
MICg
MIC50
MIC90
敏感率(%)
金 葡 菌
NTM
30
0.0625～16
0.5
0.5
2
90
, 百拇医药
GTM
30
0.125～32
4.287
4
32
60
CPZ
30
0.5～32
1.516
1
4
, 百拇医药
80
大肠杆菌
NTM
30
0.25～4
0.435
0.25
0.5
100
GTM
30
0.25～64
1.072
, 百拇医药
1
2
90
CPZ
30
0.125～2
0.354
0.25
1
100
肺炎克雷白菌
NTM
30
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0.125～128
0.758
0.25
4
90
GTM
30
0.25～128
1.741
0.25
16
70
CPZ
, http://www.100md.com
30
0.0625～128
0.574
0.25
4
90
绿脓假单胞菌
NTM
30
0.5～128
1.741
1
8
, 百拇医药
80
GTM
30
0.5～128
2.828
1
32
60
CPZ
30
1～32
2.102
2
, 百拇医药
16
90
表2 NTM，GTM，CPZ对4种常见致病菌的体外杀菌活性比较(μg/ml) 细 菌
抗生素
菌株数
MBCr
MBCg
MBC50
MBC90
金 葡 菌
NTM
30
, http://www.100md.com
0.125～32
1.625
1
8
GTM
30
0.25～128
5.657
4
128
CPZ
30
1～64
, 百拇医药
2.297
2
32
大肠杆菌
NTM
30
0.25～4
0.574
0.5
2
GTM
30
0.5～64
, 百拇医药
1.625
1
4
CPZ
30
0.25～2
0.707
0.5
2
肺炎克雷白菌
NTM
30
0.125～128
, 百拇医药
1.00
0.25
4
GTM
30
0.25～128
2.828
0.5
64
CPZ
30
0.125～128
0.758
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0.25
8
绿脓假单胞菌
NTM
30
1～128
4.287
2
32
GTM
30
0.5～128
5.278
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4
64
CPZ
30
2～32
3.732
2
16
本实验测定的质控标准菌株的MIC值均在其标准范围内。2 8位健康志愿者OD给药后不同时间的血药浓度和峰谷时的SBA
2.1 血药浓度 见表3。
表3 8位健康志愿者OD给药后不同时间的血药浓度(μg/ml) 受试者
, 百拇医药
0.1h
0.5h
1h
2h
4h
8h
12h
24h
1
27.44
17.25
12.83
9.13
, 百拇医药
4.17
1.17
0.27
0.09
2
22.16
15.45
11.08
7.98
3.96
1.42
0.42
0.16
, 百拇医药
3
21.00
15.45
11.33
8.12
3.66
1.19
0.37
0.10
4
19.68
14.25
9.21
, 百拇医药
6.69
3.28
1.23
0.35
0.21
5
23.28
17.25
12.49
9.10
4.09
1.22
0.30
, 百拇医药
0.12
6
26.00
17.55
12.59
9.05
4.06
1.25
0.30
0.15
7
19.80
13.45
, 百拇医药
9.03
5.98
2.41
0.86
0.10
0.09
8
18.24
13.23
8.20
5.56
2.17
0.85
, 百拇医药
0.15
0.09
x
22.20
15.49
10.85
7.70
3.48
1.15
0.28
0.13
s
3.21
, 百拇医药
1.74
1.81
1.45
0.79
0.20
0.11
0.04
经3P87统计求得的NTM静脉给药的药代动力学参数：一房室模型;t1/2=(2.14±0.18)h,Vd=(0.36±0.06)L/kg,AUC=(44.38±6.59)mg.h/L，CL=(0.12±0.02)ml/min。本实验结果与文献报道[4,5]相近。2.2 体内杀菌活性 给予NTM后峰时与谷时SBS，SBA的中位数见表4。
, 百拇医药
表4 峰时与谷时血清杀菌活性比较 细菌
时间
SBS
SBA
金 葡 菌
峰时
1∶8～1∶16
1∶8
谷时
1∶1
1∶1
大肠埃希菌
峰时
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1∶32
1∶16～1∶32
谷时
1∶4
1∶2
肺炎克雷白菌
峰时
1∶16
1∶16
谷时
1∶2～1∶4
1∶2
绿脓假单胞菌
, 百拇医药
峰时
1∶8
1∶4～1∶8
谷时
1∶1
<1∶1
2.3 质控结果及空白血清的杀菌活性观察 质控结果显示,所有血样均未污染，所选用菌株均生长良好。8位健康志愿者的空白血清,虽不能完全抑制细菌生长，但从整体来看,加空白血清组比单纯加MH培养基组(阳性对照组),细菌生长弱一些。提示人体血清对细菌的生长有一定抑制作用。
3 16例手术患者两种给药方案峰时与谷时的浓度与SBA
3.1 血药浓度 见表5。 表5 两种给药方案峰时与谷时的浓度(μg/ml) 受试者
, 百拇医药
OD
TD
峰时
谷时
峰时
谷时
1
27.84
0.52
19.70
6.75
2
21.56
, 百拇医药
0.24
13.62
0.43
3
19.98
0.18
14.04
0.48
4
22.77
0.16
16.24
1.94
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5
18.65
0.13
15.80
5.33
6
19.71
0.27
11.70
0.38
7
23.48
0.09
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11.05
0.56
8
24.10
0.09
12.10
0.45
x
22.26
0.21
14.28
2.55
s
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2.96
0.14
2.88
2.04
3.2 两种给药方案SBS和SBA的比较 见表6。表6 两种给药方案的SBS和SBA中位数比较 细 菌
OD
TD
SBS
SBA
SBS
SBA
金 葡 菌
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峰时
1∶8
1∶8
1∶4～1∶8
1∶4
谷时
1∶1
1∶1
1∶1
1∶1
大肠埃希菌
峰时
1∶32
, http://www.100md.com
1∶16
1∶16
1∶8
谷时
1∶4
1∶2
1∶2
1∶1
肺炎克雷白菌
峰时
1∶32～1∶64
1∶16
1∶16
, http://www.100md.com
1∶8
谷时
1∶2
1∶2
1∶4
1∶2
绿脓假单胞菌
峰时
1∶4～1∶8
1∶2
1∶4
1∶2
谷时
, 百拇医药
1∶1
<1∶1
1∶1
1∶1
3.3 健康人与患者OD给药峰时与谷时浓度比较 经t检验均无显著性差异(P>0.05)。 3.4 两种给药方案疗效与不良反应比较 ①OD 与TD 两组患者，术后体温、血象无异常,B超检查腹腔无积液,患者自述感觉良好,两组患者均无感染迹象,且无耳鸣等听力异常现象,用药期间也未发现有其他不良反应；②患者用药前后Cr和BUN值比较见表7。TD组用药后Cr较用药前有显著性提高(P<0.05)。而OD组用药前后无明显改变，提示TD给药较OD给药易发生肾毒性。
表7 两组患者给药前后Cr及BUN的比较 给药方案
Cr(μmol/L)
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BUN(mmol/L)
用药前
用药后
用药前
用药后
OD
50.17±14.98
49.26±10.12
4.85±1.36
4.52±1.47
TD
46.01±10.96
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59.78±14.51
4.35±1.32
4.31±1.53
讨 论
随着抗生素的临床应用，细菌会不断产生耐药性，这是一个非常令人关注的问题。本实验各种体外杀菌活性参数均显示NTM比同类药GTM的体外抗菌活性强，GTM对所选菌出现了严重的耐药现象，特别是对金葡菌和绿脓杆菌。NTM与CPZ相比，对所选的各种菌敏感率相近，只是金葡菌对NTM敏感率稍高，绿脓杆菌对CPZ敏感率高一些。
SBA是一个综合评价药物的药敏、药代动力学及药效动力学的参数[6]，其值代表的是体内原形药物、活性代谢产物及机体免疫功能的综合杀菌效力。本实验在国内首次应用了SBA对比研究了相同日剂量情况下，NTM不同给药方案的SBA。结果表明，NTM OD给药，对金葡菌、大肠杆菌、肺炎克雷白菌峰时SBA ≥1∶8,且与TD 给药有显著性差异(Wilcoxon秩和检验，P<0.05)。据文献报道[7]，对于严重感染患者，峰时SBA≥1∶8与临床治愈率密切相关，因此可以预计，对于上述3种菌的感染，OD给药将比TD给药疗效更高。本实验血药浓度采用了TDx测定。氨基糖苷类抗生素，由于其耳、肾毒性的存在，在国外临床应用时要求进行血药浓度监测，特别是老年患者、肾功能不全和长期用药患者[8,9]。由于发现此类药物不良反应与谷浓度有关，因此目前主要是监测其谷浓度，当谷浓度≥2μg/ml时应调整给药剂量或用药间隔。本实验TD给药中8例患者有2例谷浓度>2μg/ml，由此可见TDx监测的必要性。
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当采用相同给药剂量和方案时，健康人与患者(肾功正常)的峰、谷浓度和SBA均无显著性差异，这可能是由于NTM 主要从肾脏排泄所致。本实验OD与TD两组患者，无1例有感染迹象发生，两组患者获得了同样的临床疗效，但肾功能指标给药前后变化不同。TD组给药后Cr较给药前有显著性增高(P<0.05),而OD组则无明显改变。因此从本实验结果看，OD给药不仅有效而且更安全，并且给药次数减少,能够减少护士的工作量,增加患者的依从性,从而提高药物的价值。
参考文献
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2，Stratton CW，Reller LB. Serum Dilution Test for bactericidal activity. J Infect Dis, 1977,136(5)∶187
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3，娄永新,王金良主编.实验临床细菌学检验与进展.天津：天津科技出版公司,1992.247
4，戴自英主编. 临床抗菌药物学.北京：人民卫生出版,1985.234
5，陈新谦,金有豫主编,新编药物学.第14版.北京：人民卫生出版社,1997.71
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, 百拇医药
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9，Konrad F， Wagner R， Neumeister B， et al. Studies on drug monitoring in thrice and once daily treatment with aminoglycosides. Intensive Care Med,1993，19(4)∶215
收稿：1999-09-14
修回：2000-01-04, http://www.100md.com