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编号:10275410
驳骨煎剂促进骨折愈合的实验研究
http://www.100md.com 《中医正骨》 2000年第7期
     作者:陈希 乔荣勤 曹亚飞

    单位:广州中医药大学附属骨伤科医院510240

    关键词:骨折愈合;药物作用;驳骨煎剂;药效学;钙;实验研究;动物;小鼠

    中医正骨000702 提要 为探讨驳骨煎剂促进骨折愈合的作用机理。选用体重20~30g的NIH小 白鼠120只,雌雄各半,随机分为正常组、给药组、对照组。除正常组外,其它各组均采用 定点手法折骨术造成小鼠右下肢胫骨中段闭合性骨折。术后7、14、21、28天分批处死小鼠 ,处死前48小时,经腹腔注射同一批号0.2ml45Ca-CaCl2溶液,48小时后,断头取血,并解剖出左右胫骨,测定骨痂生长状况 及钙沉积量的变化。结果显示,给药组与对照组,胫骨骨折处骨痂生长情况对比7天、14天 时具有显著性意义(P<0.05),到28天时,骨痂重量反而有所下 降。表明驳骨煎剂具有促进骨折端的钙沉积,加速骨折愈合的作用。而认为这一作用是通过 改善血液循环,促进血肿的吸收、机化,增加胶原的合成来实现的。
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    中图分类号:R289.8;R683 文献标识码:A 文章编号:1001-6015(2000 )-07-0005-02

    THE STIMULATIVE EFFECT OF “BOGU JIANJI” ON FRACTURE HEALING: An Experimental Study

    Chen Xi,Qiao Rongqin,Cao Yafei

    (Orthopedic-Traumatological Hospital Affiliated to Guangzhou TCM University, Guangzhou 510240)

    In order to study the action mechanism of the stimulative effect of “BOGU JIANJI” (BGJ, a TCD decoction for fracture healing) on fracture healing, 120 NIH white mice (Males and Females 60 each; Body Weight: 20-30 grams) were randomly divided into three groups: the normal, the BGJ-treated and the control. Closed fractures of the right middle tibiae were made in the BGJ-treated and the control groups by located manipulative osteoclasty. All the animals were killed in batches on the 7th, 14th, 21rst and 28th days after the operation. Forty-eight hours before killing, each animal was given 0.2 ml of 45 Ca-Cacl2 solution of the same batch through transabdominal injection and killed 48 hours later. The blood was collected, the right and left tibiae were dissected, and the changes of the callus growth and calcium deposit were measured. The results showed that compared with the control group, the weight of the callus in the tibial fracture site of the BGJ-treated group was significantly increased (P < 0.05) on the 7th and 14th days postoperatively but decreased on the 28th day. It is concluded that BGJ functions to stimulate the calcium deposition of the fragments and to speed up the fracture healing. This function of BGJ is accomplished through improving the blood circulation, promoting the absorption and organization of the hematoma and increasing the collagen synthesis.
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    Key Words: fracture healing/drug action “BOGU JIANJI”/pharmacodynamics calcium experimental study animal mouse

    驳骨煎剂是我院多年来用于治疗骨折、骨质疏松症合并骨折的经验方,经临床观察,疗 效显著。骨折愈合是一个复杂的过程,而钙盐沉积是骨折愈合过程中必不可少的重要步骤。 为了进一步探讨驳骨煎剂促进骨折愈合的作用机理。本文用45Ca-CaCl2示踪剂作 为反映骨矿盐沉积量的指标进行了观察,现将结果报告如下。

    1 材料和方法

    1.1 动物 NIH小白鼠,体重20~30g,共120只,雌雄各半。由广东省卫生厅医用实验动物场提供。

    1.2 药物 ①驳骨煎剂:由淫羊藿、补骨脂、自然铜、续断、骨碎补、黄芪、当归、丹参等药物组成。 经鉴定后,按传统方法煎煮,制备成含生药2g.ml-1浓度的煎剂,放置于4℃冰箱中 保存备用。由广州中医药大学附属骨伤科医院制剂室提供。②45Ca-CaCl2:放射 性比活度为222MBq.ml-1,由中国科学院原子能研究所提供。
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    1.3 动物造模和分组 采用定点手法折骨术造成小鼠右下肢胫骨中段闭合性骨折,随机分成三组。①正常组:动物 不造模,灌胃给生理盐水,每天每只0.5ml。②给药组:灌胃给驳骨煎剂,每天每只0.5ml( 相当于临床用量20倍)。③对照组:灌胃给生理盐水,每天每只0.5ml。所有动物于骨折当天 开始给药,术后7、14、21、28天分批处死,每次各10只,处死当天不给药。处死前48小时 ,经腹腔注射同一批号0.2ml45Ca-CaCl2溶液(相当于1微居里)。

    1.4 样品的采集和测量 各组动物均断头取血,取全血于试管中,并解剖出左右胫骨,称其重量。所有血标本和骨标 本均加60%高氯酸0.15ml,30%过氧化氢0.15ml,摇匀后置入75℃恒温水浴箱内消化至清晰, 取上清液0.2ml置于闪烁杯中,加无水乙醇2.0ml,甲苯闪烁液5.0ml,摇匀后放置过夜。经制备好的样品一律用美国贝克曼公司LS-1801型液体闪烁计数器进行 测量,再经效率、衰变系数及体重纠正为dpm,其计算公式如下。其中E为测定效率,f为 45Ca衰变系数,25g为动物平均体重。
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    1.5 统计学处理 实验结果均采用POMS医用统计软件进行统计学处理,两组均数之间比较采用t 检验,三组之间比较采用方差分析。

    2 结 果

    2.1 骨折部位骨痂生长情况 各组动物于不同时间处死,将胫骨骨折部位进行解剖观察,结果发现给药组动物骨折处的皮 质及骨膜层均增厚,骨痂明显增多,且胶质弹性良好,其骨痂的重量(7、14天)比对照组明 显增加,到28天时,由于骨折已完全愈合,故骨痂重量比对照组减轻,见表1。

    表1 驳骨煎剂对胫骨骨折处骨痂生长的影响 mg ±s 组别

    例数

    7

    14
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    21

    28(天)

    对照组

    10

    42.11±21.36

    44.21±21.36

    44.00±16.82

    46.84±17.96

    给药组

    10

    50.26± 6.76

    57.36±12. 73
, 百拇医药
    38.89±12.31

    32.63±18.21

    注 P<0.05 P<0.001 下同

    2.2 骨折部位钙沉积量的变化 表2示正常组小鼠注射45Ca-CaCl2后7、14、21、28天,其左右侧胫骨的钙沉积量 经统计处理均无显著意义(P>0.05)。表3示给药组小鼠骨折侧胫骨的钙 沉积量比健侧升高,至14天时达到高峰。表4示给药组小鼠胫骨的钙沉积量也比健侧升高, 至21天时达最高峰,然后逐渐下降。表5示各组动物骨折侧胫骨不同时间的钙沉积量的比较 有显著差异。表2 正常组小鼠不同时间单位骨组织

    钙沉积量的变化 dpm.mg-1 ±s 部位
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    例数

    7

    14

    21

    28(天)

    左侧

    10

    937 ±211

    986±158

    1240±152

    949±160

    右侧

    10
, 百拇医药
    22±159

    958±168

    1274±156

    906±161

    表3 对照组小鼠不同时间单位骨组织

    钙沉积量的变化 dpm.mg-1 ±s 部位

    例数

    7

    14

    21

, http://www.100md.com     28(天)

    左侧

    10

    982 ±172

    1000±184

    1228±211

    958±194

    右侧

    10

    980±163

    587±338

    1375± 174
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    1129±177

    表4 驳骨煎剂对不同时间单位骨组织

    钙沉积量的影响 dpm.mg-1 ±s 部位

    例数

    7

    14

    21

    28(天)

    左侧

    10
, 百拇医药
    990±163

    993±184

    1291±227

    849±218

    右侧

    10

    883±136

    1564±246

    1855±174

    947±219

    表5 各组动物右胫骨不同时间单位骨组织

, 百拇医药     钙沉积量的比较 dpm.mg-1 ±s 组别

    例数

    7

    14

    21

    28(天)

    正常组

    10

    922±159

    958±168

    1274±156
, 百拇医药
    906±161

    对照组

    10

    980±163

    1587±338

    1375±174

    1129 ±177

    给药组

    10

    883±136

    1564±246

    1855±480
, 百拇医药
    947±219

    注 给药组与对照组比较:P<0.01 P<0.001

    3 讨 论

    骨是细胞、纤维和基质所组成的一个活的组织,它是经常不断地形成与吸收。假如机体骨骼 外的钙含量无明显变化,机体钙吸收和排泄之间的差别反映出骨形成和骨吸收之间的平衡状 态。在一般情况下,成年动物的骨组织,其形成和吸收维持在一个比较均衡与稳定的状态, 钙的代谢也处于平衡状态。经典的钙代谢平衡研究,虽可以得出骨形成和骨吸收之间的净差 别,但无法测出钙结合时骨骼的相对速度。而本实验是通过测定钙沉积量来观察骨形成的速 度。

    骨折愈合是指骨折断端间再连接的自然修复过程,可以重新形成与原骨外形、内部结构和功 能都一样的新骨。促进骨折愈合是应用某些方法和药物作用于全身和局部,根据骨折愈合的 基本原理、影响因素,使骨折后的骨组织修复能力增强,从而在实验或临床中达到:①新鲜 骨折的临床愈合时间比同等条件(年龄、部位、类型)的骨折正常愈合时间明显提前。②使延 迟愈合或不愈合的骨折重新获得较迅速的愈合〔1〕。本实验中给药组与对照组的动 物于不同时间处死,发现给药组小鼠骨折的骨痂生长的重量比对照组明显增多,胶质弹性良 好,且牢固,胶原数量增加,骨折愈合加速,骨痂质量提高。到28天时,骨痂的重量比对照 组减轻,表明骨折已愈合,骨痂已修复良好,故重量有所下降。上述情况的发生是驳骨煎剂 通过其活血化瘀、补肾健脾、接骨续筋的功效来实现的。现代研究证实活血化瘀类中草药具 有改善血液循环,促进血肿的吸收和机化,促进胶原形成的功效〔2,3〕。本实验进 一步验证了这一研究结论。
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    本实验的正常组小鼠经腹腔注射45Ca-CaCl2后,左右两则胫骨相应部位放射性活 性相接近,其钙沉积量也相似(P>0.05),说明正常小鼠相应部 位骨组织的形成与吸收在平衡的速度下进行。小鼠胫骨一旦骨折后,胫骨的放射性活性就发 生了变化,即骨折部位总放射性在整个实验过程中不断升高,到14天时达到高峰,以后逐渐 下降。其升高的幅度比健侧相应部位高1.7~3.6倍。这是由于骨折局部新骨不断形成,钙盐 大量沉积的哈氏系统内新生骨的沉积,要较不生长的成熟骨多5~10倍〔4〕。正常生 长情况下,尚且有这种现象,骨折愈合过程中的钙盐沉积增多就更易理解。右侧胫骨骨折后 ,无论是对照组或给药组,在7~14天时,其健侧胫骨的总放射性活性均比正常组健肢胫骨 升高,这也说明胫骨损伤后,健肢的负重有相应的代偿性增加,引起骨吸收(钙吸收)减少, 骨形成(钙沉积)增多,从而造成放射性活性增加。在实验中发现给药组由于使用驳骨煎剂治 疗,胫骨外骨折钙沉积量比对照组增多(P<0.001),而到28天时 ,其钙沉积量已恢复到接近 正常组水平,说明给药组小鼠骨折愈合的速度比对照组快。驳骨煎剂由淫羊藿、补骨脂、自 然铜、续断、骨碎补、黄芪、当归、丹参等药物组成,现代研究证实上述中草药或能从骨折 邻近的骨组织中调动钙离子,或能改善血液循环,改善血管壁的通透性,有利于离子交换及 骨小梁的改建和再吸收,把更多的钙动员出来,为骨折愈合提供较多的原料,或能激活某些 酶的活性,有助于钙盐的沉积〔5~7〕。复方驳骨煎剂正是通过这些药物的协同作用 ,再加上其整体的调节,促进胶原增加,加速钙的沉积,并缩短再造时间,为骨折愈合创造 了有利条件,从而使骨折愈合加速。
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    本实验仅探讨了驳骨煎剂加速骨痂生长,促进钙盐在骨折端沉积的作用机理,对于骨折端钙 沉积量与驳骨煎剂剂量之间的量效关系,有待进一步探讨。

    作者简介 陈希,男,1963年7月出生。于1985年7月毕业于广州中医学院医 疗系。现任广州中医药大学附属骨伤科医院骨伤科主治医师。

    参考文献

    1,王志鑫,陈浩宏。骨折愈合学。武汉:湖北科学技术出版社,1985;215

    2,贵阳中医学院骨折科研协作组。中药“接骨Ⅱ号”促进骨折愈合作的实验观 察。中华医学杂志 1978;58(11):670

    3,林润台,王忠,孙冀,等。丹参促进下颌骨骨折愈合的超微结构研究。中华 口腔医学杂志 1992;27(1):215
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    4,Amold JS. Observation and quantitative radio autographic studies of calcium 45 deposited in vive in forming haversian systems and old bone of rabbit.Am J of Anatomy 1956;99:291

    5,张菊英,刘季兰,柴本甫。丹参注射液对骨折愈合中钙沉积的影响。中西医 结合杂志 1984;4(9):536

    6,刘季兰,张菊英,柴本甫。丹参注射液对骨折愈合过程中钙吸收的影响。中 西医结合杂志 1985;5(7):418

    7,张克勤。七厘散对骨折愈合作用的初步探讨。中华外科杂志 1962;10(10) :305

    (1999-11-12收稿 2000-03-01修回), 百拇医药